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DSN结合CHA用于miRNA的可视化检测 被引量:1
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作者 王奎宇 卜胜君 +4 位作者 王月 常洪标 孙秀伟 张红梅 万家余 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第10期13-16,20,285,共6页
为了研究灵敏特异、方便快捷的新型microRNA(miRNA)检测技术,试验采用双链特异性核酸酶(DSN)结合CHA(catalyzed hairpin assembly)恒温核酸扩增技术产生的双重信号放大方法,以试纸条作为信号输出方式用于miRNA的检测,将含有miRNA识别部... 为了研究灵敏特异、方便快捷的新型microRNA(miRNA)检测技术,试验采用双链特异性核酸酶(DSN)结合CHA(catalyzed hairpin assembly)恒温核酸扩增技术产生的双重信号放大方法,以试纸条作为信号输出方式用于miRNA的检测,将含有miRNA识别部分和CHA启动序列的复合探针与靶标miRNA结合后,DSN循环反应酶切释放CHA的启动序列T-trigger并引发CHA反应,最终产物可在试纸条检测线上留下红线。结果表明:本体系最低检测限可达到7.66 pmol/L,灵敏性好,且除靶标miRNA-21外,其余非特异性靶标均不能使试纸条留下红线,即使单碱基也能够被很好地区分,特异性强。说明本研究成功建立了等温、灵敏、特异的miRNA检测新方法,可用于miRNA的便携分析。 展开更多
关键词 microRNA(miRNA) 双链特异性核酸酶(dsn) CHA 试纸条 可视化检测
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半番鸭羽色相关基因均一化差减文库的构建和鉴定 被引量:4
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作者 郑嫩珠 陈晓燕 +5 位作者 卢立志 朱志明 缪中纬 辛清武 陈晖 肖天放 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期4688-4696,共9页
【目的】分离半番鸭羽色相关基因,探索半番鸭羽色基因表达调控的分子机制。【方法】以半番鸭白羽皮肤和黑羽皮肤分别作为试验组(tester)和驱动组(driver),利用双链特异性核酸酶(duplexspecificnuclease,DSN)介导的均一化消减杂交方法,... 【目的】分离半番鸭羽色相关基因,探索半番鸭羽色基因表达调控的分子机制。【方法】以半番鸭白羽皮肤和黑羽皮肤分别作为试验组(tester)和驱动组(driver),利用双链特异性核酸酶(duplexspecificnuclease,DSN)介导的均一化消减杂交方法,构建半番鸭羽色相关基因消减cDNA文库,同时采用实时荧光定量PCR方法对文库质量进行验证。【结果】①从文库中随机选取144个阳性克隆进行测序分析,最终共获得64条有效序列,平均长度为1 031 bp;经BLAST比对发现,21条具有同源序列,且同源性平均为92.8%;43条未找到匹配序列,推测可能为羽色相关新基因;②Geneontology功能分析表明,已知基因参与信号转导、细胞结构、物质转运、细胞凋亡、细胞与机体防御、转录与表达调控等诸多生物学过程,并且与色素形成和转运存在不同程度的相关性。【结论】经实时荧光定量PCR鉴定后,所建文库质量良好,能够有效地富集白羽皮肤特异表达基因。 展开更多
关键词 半番鸭 羽色基因 双链特异性核酸酶(dsn) 消减杂交 荧光定量PCR
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抑制性消减杂交技术的应用 被引量:8
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作者 李小庆 景志忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期46-50,共5页
基因的差异表达是调控各种生命活动的核心分子机制,而分离、克隆并进一步研究差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点,也是功能基因组学研究的重要内容。在研究差异表达基因的诸多项技术中,抑制性消减杂交(SSH)技术具有特异性强、... 基因的差异表达是调控各种生命活动的核心分子机制,而分离、克隆并进一步研究差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点,也是功能基因组学研究的重要内容。在研究差异表达基因的诸多项技术中,抑制性消减杂交(SSH)技术具有特异性强、假阳性率低、灵敏度高和快速简便等优点,被广泛地应用于生命科学和医学领域的基因差异表达的研究中。近年来,抑制性消减杂交(SSH)技术得到了相应的改进和完善,而在许多研究领域,该技术在广度和深度上都有了一些新进展。主要就抑制性消减杂交技术的产生背景、原理、技术流程、特点及其最新应用研究进展等方面作简要综述。 展开更多
关键词 抑制性消减杂交 差异表达 功能基因dsn均一化技术 CDNA微阵列
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The exploration of quantum dot-molecular beacon based MoS_(2) fluorescence probing for myeloma-related Mirnas detection
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作者 Jing Jing Wang Ying Liu +9 位作者 Zhou Ding Le Zhang Caiqin Han Changchun Yan Eric Amador Liqin Yuan Ying Wu Chunyuan Song Ying Liu Wei Chen 《Bioactive Materials》 SCIE 2022年第11期360-368,共9页
Highly sensitive and reliable detection of multiple myeloma remains a major challenge in liquid biopsy. Herein, for the first time, quantum dot-molecular beacon (QD-MB) functionalized MoS_(2) (QD-MB @MoS_(2)) fluoresc... Highly sensitive and reliable detection of multiple myeloma remains a major challenge in liquid biopsy. Herein, for the first time, quantum dot-molecular beacon (QD-MB) functionalized MoS_(2) (QD-MB @MoS_(2)) fluorescent probes were designed for the dual detection of multiple myeloma (MM)-related miRNA-155 and miRNA-150. The results indicate that the two probes can effectively detect miRNA-155 and miRNA-150 simultaneously with satisfactory recovery rates, and the limit of detections (LODs) of miRNA-155 and miRNA-150 in human serum are low to 7.19 fM and 5.84 fM, respectively. These results indicate that our method is the most sensitive detection so far reported and that the designed fluorescent probes with signal amplification strategies can achieve highly sensitive detection of MM-related miRNAs for MM diagnosis. 展开更多
关键词 Multiple myeloma miRNA-155 miRNA-150 duplex-specific nuclease(dsn) Quantum dot MoS_(2) Molecular beacon
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