2013―2022年某医院肺泡灌洗液病原菌分布及耐药性分析

目的分析华中科技大学同济医学院附属同济医院2013―2022年肺泡灌洗液标本中病原菌分布及常见病原菌的耐药性情况。方法采用回顾性调查研究方法,收集华中科技大学同济医学院附属同济医院2013年1月至2022年12月共送检的36233例肺泡灌洗液标本,从中分离出非重复病原菌11801株。使用WHONET5.6版软件对培养及体外药敏试的结果进行分析研究。结果11801株病原菌中革兰阴性菌占69.75%(8231/11801),革兰阳性菌占11.68%(1378/11801),真菌占18.57%(2192/11801)。肺炎克雷伯菌(KPN)对阿米卡星、亚胺培南、美罗培南和替加环素敏感性超过70.00%,铜绿假单胞菌(PAE)对除复方新诺明和米诺环素外大多数抗生素敏感性超过40.00%,鲍曼不动杆菌(ABA)对除米诺环素外大多数抗生素耐药性超过75.00%。在最主要致病菌KPN中耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKPN)占比增高的同时耐药性增强;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占比较高,且耐药率高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA);肺炎链球菌(SPN)中绝大部分为青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)。结论2013―2022年华中科技大学同济医学院附属同济医院肺泡灌洗液标本分离病原菌主要包括KPN、PAE、ABA和金黄色葡萄球菌(SAU)等,且CRKPN耐药率呈上升趋势,临床需合理用药以降低其耐药性。

姜黄素对耐顺铂人肺腺癌细胞Survivin表达及其化疗敏感性的影响

目的:探讨姜黄素(Cur)对耐顺铂(DDP)人肺腺癌细胞A549/DDP Survivin表达及其化疗敏感性的影响。方法:以非毒性剂量(10μmol/L)的姜黄素作用于A549/DDP细胞,采用RT-PCR和免疫组化SABC法分别检测Survivin mRNA和蛋白的表达,MTT法检测A549/DDP细胞对DDP的半效抑制浓度IC50、耐药指数和细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:Cur能使A549/DDP细胞Survivin mRNA相对表达水平由(79.17±5.96)%下调至(57.8±9.8)%,P=0.014;而蛋白表达强度也由1.174±0.059降至1.009±0.072,P=0.023。A549/DDP细胞对DDP IC50及耐药指数分别由(206.77±9.19)μmol/L和10.90降低至(160.80±3.91)μmol/L和7.42,P值分别为0.041和0.035;细胞凋亡率由7.1%增至17.7%,Cur和DDP联合应用后凋亡率达40.61%,P=0.012。结论:Cur下调A549/DDP细胞Survivin表达,可能与部分解除Survivin导致的细胞凋亡抑制有关。

肝癌体外药物敏感性试验

目的 通过测定肝癌对阿霉素 (ADM)、顺铂(DDP)、氟尿嘧啶 (FU)、长春新碱 (VCR)、丝裂霉素 C(MMC)及噻替哌 (TSPA)的体外药物敏感性 ,为肝癌化疗用药提供参考依据。方法 采用滤纸支持组织块培养 - MTT终点 -计算机图像分析体外药物敏感性试验法。结果 在 1倍血浆峰浓度 (1PPC)时作用最强的药物为 MMC,其抑制率中位数 (MIR)为 2 6 .5 % ,其次是 ADM为 13.0 % ,DDP、TSPA、5 - FU和 VCR为 4.0～ 8.5 %。在 5倍血浆峰浓度 (5PPC)时作用最强的药物亦为 MMC,其 MIR为 92 .0 % ,次为 ADM、DDP和 TSPA为 41～ 5 0 % ,5 - FU和 VCR为 16 .0～ 17.0 % ,DDP和 TSPA在 5 PPC的 MIR比在 1PPC时大5 .0和 5 .8倍以上 ,MMC、ADM和 VCR则大 2～ 3.5倍 ,5 -FU只增大 1倍左右。结论 结果提示 MMC对肝癌抑制作用较强 ,DDP和 TSPA剂量增加与疗效提高可能有较大的关系。天然来源的药物 ADM、MMC和 VCR之间 ,无论在 1PPC或 5 PPC水平 ,其相关系数均较大 (r=0 .5 5 39～0 .72 0 8) 。

广东城乡病人中分离的幽门螺杆菌对常用3种抗菌药物耐药的调查

目的:比较广东城乡幽门螺杆菌(Hp)对常用3种抗菌药物的耐药情况。方法:分别用琼脂稀释法和E-test法检测广东城乡164株Hp对甲硝唑、克拉霉素及阿莫西林的耐药情况。结果:广东地区Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率分别为51.8%和6.1%,城乡两地Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率均无统计学差异(P>0.05),性别、年龄及病种对甲硝唑的耐药率无影响(P>0.05);在所有的Hp菌株中,仅发现1株对阿莫西林耐药。结论:广东无论城乡Hp对甲硝唑耐药均已相当普遍,对克拉霉素耐药也有增加的趋势,且已发现了对阿莫西林的耐药株,故应尽快建立完善的监测系统。

人参皂甙单体Rb1对多药耐药细胞系K562/HHT的耐药逆转作用

目的：探讨中药钙离子通道拮抗剂人参皂甙单体Ｒｂ１，对白血病多药耐药细胞系（Ｋ－５６２／ＨＨＴ）的耐药逆转作用。方法：药物敏感试验采用四唑氮盐（ＭＴＴ）比色试验法。结果：Ｒｂ１在０～８０ μｍ ｏｌ／Ｌ浓度范围内对Ｋ５６２／ＨＨＴ未见明显毒性作用；２０ μｍ ｏｌ／Ｌ、４０ μｍ ｏｌ／ＬＲｂ１ 耐药逆转倍数分别为４．４、７．９ 倍。结论：Ｒｂ１ 可以逆转Ｋ５６２／ＨＨＴ的多药耐药性。

大肠埃希菌所致尿路感染药敏试验分析

目的研究尿路感染中大肠埃希菌的耐药性变迁,为临床用药提供参考。方法对2004年和2005年检出的89份尿液标本中的大肠埃希菌,采用K-B法药敏试验,并进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测。结果2004年和2005年大肠埃希菌的检出率分别为29.9%和32.3%,产酶率分别为39.5%和51.0%,呈增高趋势。大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、丁胺卡那霉素、头孢他啶、呋喃妥因和复方新诺明耐药率较低,分别为2.2%、3.3%、14.6%、23.6%、32.6%和38.2%,而其他常用抗生素的耐药率均大于50%,另外ESBLs(+)细菌的检出率有上升趋势,ES-BLs(+)细菌对头孢菌素的耐药率普遍高于ESBLs(-)细菌(P(0.01)。结论尿路感染中的大肠埃希菌检出率和产酶率不断升高,临床医生应当根据药敏试验来选择抗生素。

莫西沙星干预对于多重耐药肺结核患者血清结核相关miRNA水平的影响

目的观察莫西沙星干预对多重耐药肺结核(MDR-TB)患者血清结核相关miRNA水平的影响。方法选择2014年1月—2016年2月于陕西省榆林市第一医院呼吸内科住院治疗的MDR-TB患者126例作为研究对象。采用随机数字表法分为莫西沙星组(n=63)和对照组(n=63)。于入组前(T_0),治疗后3个月(T_1)和9个月(T_2)3个时间点检测3种结核相关miRNA(miR-21、miR-29和miR-142-3p)水平变化。结果与T_0比较,莫西沙星组患者在T_1和T_2时miR-29均明显下降(P<0.05)、miR-142-3p均明显上升(P<0.05),miR-21在T_2时明显下降(P<0.05)。在T_1和T_2时莫西沙星组患者miR-142-3p水平明显高于对照组(P<0.05),在T_2时miR-21和miR-29明显低于对照组(P<0.05)。莫西沙星与miR-21△3(治疗后9个月-治疗前)和miR-29△3均呈负相关(r=-0.588、-0.561,P<0.05),与miR-142-3p△3呈正相关(r=0.549,P<0.05)。结论莫西沙星有助于提高MDR-TB患者化疗疗效,可能与调节miR-21、miR-29和miR-142-3p等3种结核相关miRNA有关。

1019例需氧阳性血培养结果的细菌分布和耐药情况分析

目的：了解血培养中阳性标本的病原菌分布及药敏情况,为临床抗感染治疗提供依据。方法：对我院2001年5月～2007年6月送检的血培养标本所分离的细菌及药敏情况进行回顾性分析。结果：我院自2001年5月～2007年6月共检出需氧阳性血培养标本1019例,其中革兰阳性菌509例,阴性杆菌390例,真菌120例,各占总数的49.95%、38.27%和11.78%。结论：血培养中葡萄球菌是极为重要的致病菌,但革兰阴性菌所引起的感染也不容忽视。抗生素耐药率高,且具有高耐药与多重耐药的特点,治疗需以药物监测为依据。

山东省肉鸡屠宰生产链中沙门菌耐药性分析及毒力基因检测

通过调查山东省不同市肉鸡屠宰生产链中沙门菌分离株血清型、耐药性及毒力相关基因,为肉鸡的健康安全生产提供数据支撑。对前期获得的233株沙门菌通过血清型快速分型试剂盒鉴定其血清型,采用最小抑菌浓度(MIC)进行13种抗菌药物的药敏试验;应用PCR技术检测位于菌株毒力岛(SPI)和毒力质粒(spv)上共15种毒力基因的携带情况。结果显示,233株沙门菌共分属25种不同的血清型,其中肠炎沙门菌、印第安纳沙门菌、汤普逊沙门菌和德尔卑沙门菌为优势血清型。233株肉鸡屠宰生产链中沙门茵对庆大霉素的耐药率最高(100%);对多西环素、氨苄西林、大观霉素、四环素、氟苯尼考和磺胺异恶唑耐药率分别为84.94%、75.73%、67.78%、56%、52%和50%。72%的菌株表现为多重耐药(≥3),产生了57种耐药谱型。沙门菌的毒力岛基因sptP、sseL、mgtC、siiE、sopB的携带率是100%,毒力基因spvA、spvB、spvC、spvD、spvR、iacP、avrA、prgK、fima和stn的检出率分别是60%、34%、49%、51%、63%、99%、38%、99%、99%和99%。结果表明,在4种优势血清型中并非均出现高耐药性,出现高耐药性的血清型主要以汤普逊沙门菌为主,汤普逊沙门菌相对于其他血清型毒力基因的携带率较高,沙门菌耐药性和毒力基因的携带间并没有明显的关联性。

Ad-p53逆转乳腺癌细胞株多药耐药性及其对P-gp、TOPOⅡ和GST-π表达的影响

背景与目的:肿瘤细胞对抗癌药物产生耐受性是化疗失败的主要原因,突变型p53基因与肿瘤多药耐药密切相关。本研究旨在探讨腺病毒介导的p53基因(Ad-p53)对人乳腺癌多柔比星(阿霉素)耐药细胞株MCF-7/Adr多药耐药的逆转作用及其对耐药相关蛋白P-gp、TOPOⅡ和GST-π表达的影响。方法:以人乳腺癌MCF-7细胞及其多柔比星耐药株MCF-7/Adr为实验对象,cck-8法观察Ad-p53对多药耐药的逆转作用,Western blot检测P-gp、TOPOⅡ和GST-π蛋白表达的变化。结果:50MOI Ad-p53能使多柔比星对MCF-7/Adr细胞IC50由(4.54±0.91)μg/ml降到(0.26±0.11)μg/ml,逆转耐药倍数为18.1倍(P<0.001);P-gp、GST-π蛋白表达量下降,TOPOⅡ未见明显变化。结论:Ad-p53能够逆转MCF-7/Adr多药耐药,下调P-gp和GST-π表达。

金黄色葡萄球菌氟喹诺酮的耐药性与gyrA、gyrB突变的关系研究

为了探讨金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮耐药性与gyrA、gyrB突变的关系,本研究对氟喹诺酮敏感金黄色葡萄球菌进行耐药诱导,获得一系列不同氟喹诺酮耐药水平的人工诱导耐药菌,应用PCR扩增野生菌和人工诱导菌的gyrA、gyrB基因并测序,经核苷酸和氨基酸序列分析表明:氟喹诺酮耐药菌的gyrB基因无突变,氟喹诺酮耐药菌的gyrA有Ser85→Leu和Ser84→Pro的突变。实验结果表明:gyrA突变是金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药水平增高的主要原因。

体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药性的比较

目的通过体外诱导铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南产生耐药,比较两者产生耐药的时间,分析哪种药更易诱导铜绿假单胞菌产生耐药。方法收集20株对所有抗生素均敏感的铜绿假单胞菌和20株质控菌株,先用肉汤培养,连续传代7次,再用肉汤稀释法测出其平均抑制浓度(MIC),然后按MIC/2配制亚胺培南和美罗培南浓度。肉汤中分别加入配制的亚胺培南和美罗培南,培养观察其耐药性,如耐药性增加,测出其MIC值,取MIC/2值浓度,继续培养至完全耐药。结果质控铜绿假单胞菌在用亚胺培南平均4d后就产生耐药,用美罗培南平均16d后产生耐药;患者铜绿假单胞菌在用亚胺培南平均3d后就产生耐药,用美罗培南平均15d后才产生耐药。结论质控铜绿假单胞菌和患者铜绿假单胞菌对亚胺培南产生耐药的平均时间远小于对美罗培南产生耐药的平均时间,亚胺培南比美罗培南更容易诱导铜绿假单胞菌产生耐药。

LoVo/Adr细胞中sorcin基因的表达与细胞Ca^(2+)浓度的关系

目的:探讨在人结肠癌耐药株LoVo/Adr细胞中可溶性耐药相关钙结合蛋白(solubleresistancerelatedcalciumbindingprotein,sorcin)与Ca2+浓度的关系。方法:以Fluo3/AM标记细胞内Ca2+,用共聚焦显微镜观察其浓度变化;采用RTPCR和免疫组化的方法检测细胞中sorcin基因的mRNA水平和蛋白水平。结果:与亲本LoVo细胞相比,耐药LoVo/Adr细胞中Ca2+浓度显著增高(P<0.01);sorcin基因在LoVo细胞中几乎不表达,而在耐药LoVo/Adr细胞中,无论mRNA水平还是蛋白水平均显著高表达(P<0.01)。结论:耐药LoVo/Adr细胞中sorcin高表达没有引起细胞内Ca2+浓度的降低。

我院凝固酶阴性葡萄球菌感染临床分析

目的了解某院凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)菌种分布及其药敏情况,指导临床合理使用抗菌药。方法回顾性分析2003年5月-2005年3月间自临床标本分离的CNS的菌种鉴定和药敏试验结果。结果162株CNS中检出耐甲氧西林CNS(MRCNS)144株(88.89%),CNS以表皮葡萄球菌(44.45%)和溶血葡萄球菌(28.40%)为主。CNS和MRCNS对万古霉素、呋喃妥因100%敏感,对利福平敏感率高,分别为83.33%和81.25%;对红霉素、β-内酰胺类抗生素100%耐药,对多种抗菌药耐药率高。结论该院检出的CNS以MRCNS为主,耐药率高,临床应重视对其耐药性的监测。

金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药性与NorA基因mRNA表达水平的关系

提取金黄色葡萄球菌的总RNA，应用荧光定量RT-PCR对多药耐药转运蛋白NorA基因mRNA表达水平进行定量检测的结果表明：中度耐药（CIP）的菌株（4mg／L≤MIC≤64mg／L）NorA基因mRNA表达水平为敏感菌株的5～17倍．强耐药菌株（MIC≥128mg／L）为敏感菌的1～2倍。

感染性角膜炎病原菌分布特征及耐药性分析

目的了解我中心感染性角膜炎细菌及真菌分布、变迁及耐药情况，为临床合理治疗提供依据。方法收集中山眼科中心2004年至2010年2046例角膜感染患者微生物实验室检查资料，对细菌和真菌培养的阳性率、菌属的分布及耐药性进行回顾性分析。结果2046份标本中，培养阳性的标本1022份，阳性率为49．9％，其中只有细菌的标本463份（包括11份培养出2种细菌的标本），只有真菌的标本500份，同时有细菌及真菌的标本59份。细菌以革兰阳性球菌为主，336株（占63．0％），其次为革兰阴性杆菌，163株（占30．6％），其中表皮葡萄球菌最多，257株（占48．2％），其次为铜绿假单胞菌，84株（占15．8％）；真菌以镰刀菌属最多，180株（占32．2％），其次为曲霉菌属和蠕孢菌属，分别为139株（占24．9％）和110株（占19．7％）。细菌分布近7年变化不明显，真菌中蠕孢菌属近7年有明显上升趋势，而曲霉菌属总体呈下降趋势。主要致病细菌表皮葡萄球菌对氨基糖苷类抗菌药的敏感性相对较好，而铜绿假单胞菌则对喹诺酮类相对较敏感。结论广东地区角膜感染主要致病细菌为表皮葡萄球菌，对新霉素较敏感，主要致病真菌为镰刀菌属，蠕孢菌属检出的升高及曲霉菌属的下降趋势应引起临床的关注。

医院非发酵菌感染及耐药性分析

目的了解非发酵菌在医院内的分布及其耐药情况,为临床治疗提供可靠的依据。方法用法国生物梅里埃公司的API系统及VITEK2系统进行鉴定,用K-B纸片法及VITEK2进行药敏试验,用WHONET5.3软件进行分析。结果1381株非发酵菌中铜绿假单胞菌占48.6%、鲍氏不动杆菌占14.9%、洋葱伯克霍尔德菌占13.4%、嗜麦芽寡养单胞菌占8.2%、脑膜脓毒性金黄杆菌占4.3%、木糖氧化产碱杆菌占2.6%,多数非发酵菌出现多重耐药趋势。结论喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类药物以及含酶抑制剂复方型抗菌药物可为治疗非发酵菌感染的首选药物。

五年来烧伤感染创面菌群分布及其药物敏感性分析

目的 分析烧伤感染创面菌群分布及细菌耐药性变迁。方法 对 1998-2 0 0 2年间我院烧伤病人创面分泌物作细菌培养与鉴定 ,同时进行体外药物敏感试验。结果 创面细菌培养共检出 2 1种细菌 5 72株 ,金黄色葡萄球菌占 3 3 .74%(其中MRSA占 94.7%) ,铜绿假单孢菌 18.7%,金黄色葡萄球菌对万古霉素的敏感率为 94.4%;铜绿假单孢菌对亚胺培南、头孢他啶及特治星的敏感率分别为 81.6%、67.2 %及 79.5 %。结论 ( 1)本病区烧伤创面分离菌中G+ 球菌所占比例上升 ,金黄色葡萄球菌比例逐年增加 ,铜绿假单孢菌相对减少 ;( 2 )创面真菌感染增加 ;( 3 )由于产ES BLs菌株的出现 ,烧伤感染病原菌对第三代头孢敏感性下降 ,这种情况可选用碳青霉烯类及含酶抑制剂的联合制剂。( 4 )万古霉素仍然是治疗严重MRSA感染的首选药物。

喹诺酮类药物耐药性现状与分析

喹诺酮类药物是一类合成广谱抗菌药,尤其是近年来合成的氟喹诺酮类药物,因其使用剂量低、抗菌谱广、疗效好而被广泛应用于临床。然而,随着临床用量的增加和使用范围的不断扩大,细菌耐药性问题也随之出现,并且发展迅速。国际社会也已意识到这一问题的严重性。本文介绍了喹诺酮类药物耐药性的发展现状及由此产生的严重后果。对其耐药性产生的机制,即基因突变、细菌的主动排药系统及细菌的获得耐药性进行了分析,并提出一些相关对策。

乳腺癌组织多药耐药类蛋白表达与化疗耐药关系

目的 了解多药耐药相关类蛋白P 糖蛋白 (P gp)、谷胱甘肽 S 转移酶 π(GST π)、DNA拓扑异构酶 Ⅱα(Topo Ⅱα)在乳腺癌化疗耐药机制中的作用及相互间关系。方法 用免疫组化S P法对 91例未经抗肿瘤治疗的原发性乳腺癌和 18例术后经化疗复治乳腺癌组织检测P gp、GST π、Topo Ⅱα蛋白表达。结果 (1)P gp在原发性乳腺癌中阳性表达率为 40 %,术后经化疗复治乳腺癌中阳性表达率为 6 1%。两组P gp表达率差异有显著性 (P <0 0 5 )。 (2 )GST π和P gp在乳腺癌组织表达正相关 (P <0 0 5 )。 (3)原发性乳腺癌Topo Ⅱα表达水平与一些提示预后差的临床病理特征明显相关 (P <0 0 5 )。术后经化疗复治乳腺癌中阳性表达率为 17%,与原发癌相比显著降低 (P <0 0 5 )。结论 乳腺癌耐药是多因素参与的复杂过程 ,P gp、GST π、TopoⅡα均参与其化疗耐药性形成。化疗后的复治乳腺癌比初治原发癌具有更普遍的耐药性。TopoⅡα水平可作为评价乳腺癌恶性度的指标。