期刊文献+
共找到408篇文章
< 1 2 21 >
每页显示 20 50 100
多光谱图像融合的IC器件表面缺陷检测
1
作者 邓耀华 黄志海 《光学精密工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期740-751,共12页
针对单可见光或单红外条件下的IC器件表面缺陷对比度不足,缺陷检测精度低的问题,提出多光谱图像融合的IC器件表面缺陷检测方法。针对IC器件可见光与红外图像配准中存在尺度不一致和对比度反转问题,引入拉普拉斯金字塔和特征描述符重组... 针对单可见光或单红外条件下的IC器件表面缺陷对比度不足,缺陷检测精度低的问题,提出多光谱图像融合的IC器件表面缺陷检测方法。针对IC器件可见光与红外图像配准中存在尺度不一致和对比度反转问题,引入拉普拉斯金字塔和特征描述符重组策略改进ORB(Oriented FAST and Rotated BRIEF)图像配准算法。在图像配准的基础上,提出NSST_VP图像融合方法,以非下采样剪切波变换(Non-Subsample Shearlet Transform, NSST)得到红外图像和已配准可见光图像的低频和高频子带,对低频子带采用视觉显著图(Visual Significance Map, VSM)加权融合规则,高频子带则采用自适应脉冲耦合神经网络(PA-Pulse Coupled Neural Network, PA-PCNN)决策融合规则,进而通过NSST逆变换得到高质量多光谱融合图像。最后,将融合图像输入YOLOv8s模型进行检测。实验结果表明,改进ORB的图像配准平均精度为87.8%,比ORB图像配准精度提高了62%,NSST_VP图像融合算法在主观视觉效果和客观评价指标上均有所提高。在缺陷检测实验中,NSST_VP融合方法的均值平均精度(mean Average Precision, mAP)达到83.15%,比单可见光、单红外缺陷图像检测的mAP分别提高了22.97%,28.31%,比双树复小波变换融合、曲线变换融合、非下采样轮廓波变换融合方法的mAP分别提高了13.14%,15.01%,20.35%。 展开更多
关键词 缺陷检测 ic器件 多光谱图像融合 图像配准 非下采样剪切波变换 YOLOv8s
下载PDF
RRCNN: Request Response-Based Convolutional Neural Network for ICS Network Traffic Anomaly Detection
2
作者 Yan Du Shibin Zhang +6 位作者 Guogen Wan Daohua Zhou Jiazhong Lu Yuanyuan Huang Xiaoman Cheng Yi Zhang Peilin He 《Computers, Materials & Continua》 SCIE EI 2023年第6期5743-5759,共17页
Nowadays,industrial control system(ICS)has begun to integrate with the Internet.While the Internet has brought convenience to ICS,it has also brought severe security concerns.Traditional ICS network traffic anomaly de... Nowadays,industrial control system(ICS)has begun to integrate with the Internet.While the Internet has brought convenience to ICS,it has also brought severe security concerns.Traditional ICS network traffic anomaly detection methods rely on statistical features manually extracted using the experience of network security experts.They are not aimed at the original network data,nor can they capture the potential characteristics of network packets.Therefore,the following improvements were made in this study:(1)A dataset that can be used to evaluate anomaly detection algorithms is produced,which provides raw network data.(2)A request response-based convolutional neural network named RRCNN is proposed,which can be used for anomaly detection of ICS network traffic.Instead of using statistical features manually extracted by security experts,this method uses the byte sequences of the original network packets directly,which can extract potential features of the network packets in greater depth.It regards the request packet and response packet in a session as a Request-Response Pair(RRP).The feature of RRP is extracted using a one-dimensional convolutional neural network,and then the RRP is judged to be normal or abnormal based on the extracted feature.Experimental results demonstrate that this model is better than several other machine learning and neural network models,with F1,accuracy,precision,and recall above 99%. 展开更多
关键词 Industrial control system(icS) DATASET network traffic anomaly detection
下载PDF
基于归一化模板匹配算法的动作电位检测IC
3
作者 庞勋 姚镭 《现代电子技术》 北大核心 2024年第2期1-6,共6页
针对多通道神经元动作电位(AP)信号采集硬件系统中,前端采集IC因电极阻抗、应用环境、系统功耗以及系统面积等因素而导致原始信号信噪比较低的问题,设计一种基于归一化模板匹配算法的AP信号检测IC。该检测IC基于模板匹配算法,并引入信... 针对多通道神经元动作电位(AP)信号采集硬件系统中,前端采集IC因电极阻抗、应用环境、系统功耗以及系统面积等因素而导致原始信号信噪比较低的问题,设计一种基于归一化模板匹配算法的AP信号检测IC。该检测IC基于模板匹配算法,并引入信号归一化以去除冗余信息。为确保芯片的实时性并降低功耗,芯片整体采用三级流水线结构,各个模块间插入门控时钟,同时可通过SPI总线配置更新其工作状态。在SMIC 180 nm数字工艺下,裸片面积为0.98 mm^(2),配置模板信息时功耗为701μW,完全工作时功耗为8.07 mW,且采用QFN48封装形式。测试结果表明,所设计的AP信号检测IC具有较好的抗噪性能,可用于信噪比较低的环境来降低信号传输带宽,即使在-10 dB信噪比环境下,评价模型综合性能的F1-Score仍可达到94.65%。 展开更多
关键词 动作电位检测 ic设计 模板匹配算法 信号归一化 抗噪性能 检测芯片测试
下载PDF
Ice Detecting and Measuring Technologies on Power Lines
4
作者 LiuHeyun HeHuiyong 《Electricity》 2005年第1期31-33,共3页
Ice detecting and measuring technologies used and developed for high voltage transmission lines are introduced in this paper. The Icing Rate Meter developed by Hydro-Quebec, working with the magnetostriction principle... Ice detecting and measuring technologies used and developed for high voltage transmission lines are introduced in this paper. The Icing Rate Meter developed by Hydro-Quebec, working with the magnetostriction principle and regulated by an electronic control system is analyzed and the resonant piezoelectric transducers operated by a microprocessor-controlled electronic circuitry is also analyzed in great detail. It shows that the Icing Rate Meter (IRM) developed by Hydro-Quebec can record the occur- rence and duration of icing events, but has two limitations: information on changes in the rate of icing within each hour is lost and the amount of time consumed during heating cycles is not taken into account. A resonant piezoelectric ice detector can automatically and distinctly sense ice and water films up to 0.5 mm thick. It is a smart ice detection system, which might be used widely. 展开更多
关键词 电力线 IRM 压电谐振 检测技术
下载PDF
Determination of toluene diisocyanate in synthetic-rubber track by ion chromatography with ultraviolet detection after alkaline suppressor 被引量:1
5
作者 Mei Lan Chen Yun Chang Fan +2 位作者 Chang An Li Dong Fei Yan Zhu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2009年第2期207-209,共3页
In the present work, a novel analytical method was proposed for the determination of toluene diisocyanate (TDI) in syntheticrubber track by ion chromatography (IC) coupled with an ultraviolet detector setting at 2... In the present work, a novel analytical method was proposed for the determination of toluene diisocyanate (TDI) in syntheticrubber track by ion chromatography (IC) coupled with an ultraviolet detector setting at 212 nm. TDI can be hydrolyzed to toluene diamine (TDA) which can be separated by cation-exchange IC easily. The optimum IC separation was performed on an IonPac CS12A column (150 mm ×4.0 mm) using 20 mmol L^-1 sodium sulfate, 10 mmol L^-1 sulfuric acid and 10% acetonitrile as eluent. It was found that a higher signal response of TDA could be obtained under alkaline condition. A suppressor was used to change the acidic eluent into alkaline one. 0.8 mol L^-1 potassium hydroxide was chosen as the optimum regeneration eluent. With the added suppressor and regenerant, signal response was magnified by about 16 times and lower limit of detection (LOD, 0.13 μg L^-1) was obtained. Within-day relative standard deviation (R.S.D.) was less than 3.6%. The recoveries of TDI spiked in synthetic-rubber track samoles were 96.4-110.6%. 展开更多
关键词 Ion chromatography ic Ultraviolet detection Toluene diisocyanate (TDI)
下载PDF
System Verification of Hardware Optimization Based on Edge Detection 被引量:1
6
作者 Xinwei Niu Jeffrey Fan 《Circuits and Systems》 2013年第3期293-298,共6页
Nowadays, digital camera based remote controllers are widely used in people’s daily lives. It is known that the edge detection process plays an essential role in remote controlled applications. In this paper, a syste... Nowadays, digital camera based remote controllers are widely used in people’s daily lives. It is known that the edge detection process plays an essential role in remote controlled applications. In this paper, a system verification platform of hardware optimization based on the edge detection is proposed. The Field-Programmable Gate Array (FPGA) validation is an important step in the Integrated Circuit (IC) design workflow. The Sobel edge detection algorithm is chosen and optimized through the FPGA verification platform. Hardware optimization techniques are used to create a high performance, low cost design. The Sobel edge detection operator is designed and mounted through the system Advanced High-performance Bus (AHB). Different FPGA boards are used for evaluation purposes. It is proved that with the proposed hardware optimization method, the hardware design of the Sobel edge detection operator can save 6% of on-chip resources for the Sobel core calculation and 42% for the whole frame calculation. 展开更多
关键词 ic AHB FPGA HARDWARE Optimization SOBEL EDGE detection
下载PDF
Support Vector Machines for Cloud Detection over Ice-Snow Areas 被引量:7
7
作者 CHEN Gang E Dongchen 《Geo-Spatial Information Science》 2007年第2期117-120,共4页
In polar regions, cloud and underlying ice-snow areas are difficult to distinguish in satellite images because of their high albedo in the visible band and low surface temperature of ice-snow areas in the infrared ban... In polar regions, cloud and underlying ice-snow areas are difficult to distinguish in satellite images because of their high albedo in the visible band and low surface temperature of ice-snow areas in the infrared band. A cloud detection method over ice-snow covered areas in Antarctica is presented. On account of different texture features of cloud and ice-snow areas, five texture features are extracted based on GLCM. Nonlinear SVM is then used to obtain the optimal classification hyperplane from training data. The experiment results indicate that this algorithm performs well in cloud detection in Antarctica, especially for thin cirrus detection. Furthermore, when images are resampled to a quarter or 1/16 of the full size, cloud percentages are still at the same level, while the processing time decreases exponentially. 展开更多
关键词 冰雪覆盖地区 两极地区 云层探测 支持向量机
下载PDF
基于LabVIEW视觉的IC插座插孔缺陷检测平台设计
8
作者 李汉雄 孙明革 《吉林化工学院学报》 CAS 2023年第5期46-50,共5页
由于传统人工检测方法对集成电路(IC)插座插孔进行缺陷检测,容易产生误差率高和检测效率慢的问题,因此设计了基于LabVIEW视觉的IC插座插孔缺陷检测平台。该平台的工作流程为LabVIEW软件调用CCD相机采集IC插座图像,进行图像处理,并通过... 由于传统人工检测方法对集成电路(IC)插座插孔进行缺陷检测,容易产生误差率高和检测效率慢的问题,因此设计了基于LabVIEW视觉的IC插座插孔缺陷检测平台。该平台的工作流程为LabVIEW软件调用CCD相机采集IC插座图像,进行图像处理,并通过颗粒分析进行缺陷检测设计,同时利用LabVIEW软件进行程序设计和可视化页面设计。实验结果表明,该平台检测正确率高达96%以上,每秒平均能检测36个IC插座,能够满足实际工业生产的需求。 展开更多
关键词 LABVIEW LabVIEW视觉 ic插座插孔 缺陷检测平台
下载PDF
基于改进PP-YOLOv2的IC引脚焊接缺陷检测算法研究 被引量:1
9
作者 李娜 王学影 +2 位作者 胡晓峰 郭斌 罗哉 《计量学报》 CSCD 北大核心 2023年第10期1574-1581,共8页
针对IC引脚焊接缺陷因目标尺寸小、引脚密集导致检测精度低等问题,提出一种基于改进PP-YOLOv2的IC引脚焊接缺陷检测算法。通过在骨干网络后引入SE注意力机制,区分特征图中不同通道的重要性,强化目标区域的关键特征,提升网络的特征提取... 针对IC引脚焊接缺陷因目标尺寸小、引脚密集导致检测精度低等问题,提出一种基于改进PP-YOLOv2的IC引脚焊接缺陷检测算法。通过在骨干网络后引入SE注意力机制,区分特征图中不同通道的重要性,强化目标区域的关键特征,提升网络的特征提取能力。使用k-means++聚类算法产生9个聚类中心,以降低因初始聚类中心随机选择不当对检测结果所造成的误差影响。实验结果表明:改进算法对IC引脚焊接短路、缺脚、翘脚、少锡缺陷检测的平均精度分别为97.9%, 96.1%, 96.7%, 95.8%;在阈值为0.5的情况下,平均精度均值达到了96.6%,与YOLOv3、PP-YOLOv2相比,分别提高了14.9%, 5.1%。改进算法对单幅图片的检测时间为0.151 s,满足IC质检的速度要求,为IC引脚焊接缺陷检测提供了参考价值。 展开更多
关键词 计量学 焊接缺陷检测 ic引脚 改进PP-YOLOv2算法 SE注意力机制 k-means++ 机器视觉
下载PDF
基于计算机视觉的嵌入式数字IC芯片引脚缺陷检测方法 被引量:1
10
作者 邓承洋 《技术与市场》 2023年第8期56-59,64,共5页
针对芯片引脚缺陷故障难以精准检测的现状,提出基于计算机视觉的嵌入式数字IC芯片引脚缺陷检测方法。采用计算机视觉技术计算相机水平方向的像素,采集嵌入式数字IC芯片引脚图像;对引脚图像进行图像预处理、引脚缺陷特征提取及缺陷定位处... 针对芯片引脚缺陷故障难以精准检测的现状,提出基于计算机视觉的嵌入式数字IC芯片引脚缺陷检测方法。采用计算机视觉技术计算相机水平方向的像素,采集嵌入式数字IC芯片引脚图像;对引脚图像进行图像预处理、引脚缺陷特征提取及缺陷定位处理;计算芯片引脚长度均值,以引脚长度均值为依据进行缺陷检测。试验结果表明:该检测方法在芯片引脚缺失、歪脚、不合格等方面检测结果的准确率得到了显著提高。 展开更多
关键词 计算机视觉 嵌入式数字ic芯片 引脚缺陷检测 缺陷特征提取
下载PDF
月面原位水资源获取技术与发展趋势
11
作者 张鹏 刘光辉 +7 位作者 刘欣 张光 郑海菠 代巍 王之 牛冉 薄正 高铭 《空间科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期309-317,共9页
随着深空探测活动的持续推进,月球探测已成为开展行星际探测的重要部分.月球原位资源利用是保障载人月球探测及月面长期驻留的关键技术途径,中国已将月面原位水获取方法列为月球探测的关键技术之一.月面原位水获取方法主要分为极区水冰... 随着深空探测活动的持续推进,月球探测已成为开展行星际探测的重要部分.月球原位资源利用是保障载人月球探测及月面长期驻留的关键技术途径,中国已将月面原位水获取方法列为月球探测的关键技术之一.月面原位水获取方法主要分为极区水冰勘探开采和月壤氢还原制水两种技术途径.现有勘探到的水冰资源主要位于月球极区,分布不均匀,开采难度大.目前研究提出了多种不同类型的极区水冰勘探开采方法,但实际效果有待月面原位试验验证.月壤加氢还原制水技术方法工作条件不受区域限制,应用范围较广,但仍存在反应条件要求高、能耗大等技术限制,未来需在节能和有效矿物成分富集等方面有所突破. 展开更多
关键词 月球探测 原位水获取 水冰提取 月壤氢还原
下载PDF
面向高密度柔性集成电路封装基板的精密视觉检测算法
12
作者 胡跃明 黄丹 +1 位作者 于永兴 罗家祥 《控制理论与应用》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1255-1263,共9页
高密度柔性集成电路(IC)封装基板是电子组件的核心载体,其制造过程中的刻蚀、显影等工艺需要严格的品质控制.本文开发了一种融合金相显微镜与工业相机的成像视觉检测系统,用于柔性IC封装基板的图像采集与品质控制.针对显微成像视野小、... 高密度柔性集成电路(IC)封装基板是电子组件的核心载体,其制造过程中的刻蚀、显影等工艺需要严格的品质控制.本文开发了一种融合金相显微镜与工业相机的成像视觉检测系统,用于柔性IC封装基板的图像采集与品质控制.针对显微成像视野小、易离焦等问题,提出了一种基于中值的三元模式局部纹理快速自动对焦算法.此外,针对高倍镜下柔性IC封装氧化缺陷分布不均匀问题,引入微分几何工具,利用曲率等几何特征提出了一种基于动态曲线演化的高精度表面氧化分布特征检测模型.通过定性与定量的实验研究,验证了两种算法在快速性和高精度方面的优越性能. 展开更多
关键词 柔性ic封装基板 品质控制 外观视觉检测 自动对焦检测算法 微分几何
下载PDF
应用卷积神经网络VGG16的星载GNSS-R海冰检测
13
作者 胡媛 华曦帆 +1 位作者 刘卫 江志豪 《遥感信息》 CSCD 北大核心 2024年第2期28-35,共8页
针对全球卫星导航系统反射计(global navigation satellite system-reflection,GNSS-R)海冰检测中延迟-多普勒图(delay-Doppler map,DDM)数据噪声大、消融期精度低等问题,提出将VGG16卷积神经网络模型应用于海冰检测。通过深层的网络结... 针对全球卫星导航系统反射计(global navigation satellite system-reflection,GNSS-R)海冰检测中延迟-多普勒图(delay-Doppler map,DDM)数据噪声大、消融期精度低等问题,提出将VGG16卷积神经网络模型应用于海冰检测。通过深层的网络结构提取DDM多层次特征进行海冰海水分类,以提高海冰检测的精度和稳定性。实验结果表明,与美国国家海洋和大气管理局地表类型数据对比,所提出的基于VGG16海冰检测方法检测准确率为98.02%,有效提升了海冰检测的准确率和稳定性。 展开更多
关键词 海冰遥感 海冰检测 星载GNSS-R 卷积神经网络 延迟-多普勒图 NOAA
下载PDF
基于特征提取和最优加权集成策略的风机叶片结冰故障检测
14
作者 孙坚 杨宇兵 《科学技术与工程》 北大核心 2024年第11期4501-4509,共9页
针对风机叶片结冰检测中现有集成方法不能充分发挥不同个体分类器优势的问题,提出了一种基于特征提取和最优加权集成学习的叶片结冰检测模型。首先,用堆叠降噪自动编码器提取结冰关联特征后,考虑不同单一分类器在二分类应用中的表现及... 针对风机叶片结冰检测中现有集成方法不能充分发挥不同个体分类器优势的问题,提出了一种基于特征提取和最优加权集成学习的叶片结冰检测模型。首先,用堆叠降噪自动编码器提取结冰关联特征后,考虑不同单一分类器在二分类应用中的表现及其差异,选择随机森林、极限梯度提升树、轻量梯度提升机、K-近邻算法作为个体学习器,并用贝叶斯算法对其进行超参数优化。然后提出基于序列二次规划的最优加权集成策略对叶片状态进行判别。最后利用金风科技提供的15号和21号风机的历史数据进行了仿真实验,结果表明:所提出的检测模型与个体学习器及其他集成模型相比多项指标均有所提升,准确度达到了99.2%,在结冰检测方面具有一定的有效性。 展开更多
关键词 结冰检测 堆叠降噪自动编码器 贝叶斯优化 序列二次规划 最优加权集成
下载PDF
基于压电阵列的结冰三维成像方法研究
15
作者 张亚博 毛俊伟 +1 位作者 葛俊锋 桂康 《传感器与微系统》 CSCD 北大核心 2024年第6期51-54,58,共5页
针对传统的单点结冰传感器无法获取飞机翼面多维度结冰信息的问题,利用压电换能器阵列采集铝板振动频谱信息,通过提取振动频谱的衰减和信号差异特征,实现了结冰位置、区域信息、结冰厚度的测量以及多点覆冰的三维重构。首先,分析冰厚和... 针对传统的单点结冰传感器无法获取飞机翼面多维度结冰信息的问题,利用压电换能器阵列采集铝板振动频谱信息,通过提取振动频谱的衰减和信号差异特征,实现了结冰位置、区域信息、结冰厚度的测量以及多点覆冰的三维重构。首先,分析冰厚和面积对结冰定位精度的影响;其次,通过定义准确率和偏差率2个评价指标,来确定最优区域识别效果的参数值;最后,通过冰厚试验标定了信号差异系数与冰厚之间的关系曲线,并据此反演出结冰三维成像结果。实验结果表明:基于平行线布局的压电阵列结冰探测系统能够完成多点结冰三维重构,为实现飞机结冰三维成像提供了新的思路。 展开更多
关键词 结冰探测 压电阵列 结冰区域定位 结冰三维成像
下载PDF
DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究 被引量:16
16
作者 陈建军 2刘崇怀 +2 位作者 古勤生 潘兴 曹孜义 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-177,共5页
在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA... 在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA的检出率明显低于RT-PCR和IC-RT-PCR方法。RT-PCR可以检测出RNA提取液为1:10-4的GLRaV-3病毒,但它受到了提取RNA难以及其它物质(如蛋白质、DNA等)干扰的影响,检测难度增加。从检测的灵敏度来看,RT-PCR和IC-RT-PCR比DAS-ELISA灵敏;并且,IC-RT-PCR比其它两种方法较快,整个过程仅需8h。 展开更多
关键词 DAS-ELISA RT-PCR ic-RT-PCR 葡萄 卷叶病毒Ⅲ 比较研究 检测 检出率
下载PDF
IC芯片的高速高精度视觉检测定位算法及实现 被引量:6
17
作者 胡跃明 黄恢乐 +1 位作者 袁鹏 刘海明 《半导体技术》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期31-34,共4页
多引脚小间距IC器件是电子产品生产过程中视觉检测与定位的难点。针对高速高精度贴片机生产中IC芯片的图像识别对中问题,介绍了IC的视觉检测任务,提出一种自主研发的识别与定位算法及其实现技术。现场实际运行结果表明,该算法的速度和... 多引脚小间距IC器件是电子产品生产过程中视觉检测与定位的难点。针对高速高精度贴片机生产中IC芯片的图像识别对中问题,介绍了IC的视觉检测任务,提出一种自主研发的识别与定位算法及其实现技术。现场实际运行结果表明,该算法的速度和精度能满足实际生产的需要,并具有较强的鲁棒性。 展开更多
关键词 集成电路 视觉检测 定位算法
下载PDF
冰下非高斯噪声下的范数约束波束形成方法
18
作者 吕玉娇 黄海宁 +1 位作者 张扬帆 迟骋 《声学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第2期286-297,共12页
为解决冰下环境中噪声模型失配导致方位估计误差较大的问题,提出了一种基于范数约束的波束形成方法。该方法通过对接收信号进行范数约束来优化数据协方差矩阵,克服非高斯噪声带来的模型失配问题,提升方位估计的准确率。信号范数约束的... 为解决冰下环境中噪声模型失配导致方位估计误差较大的问题,提出了一种基于范数约束的波束形成方法。该方法通过对接收信号进行范数约束来优化数据协方差矩阵,克服非高斯噪声带来的模型失配问题,提升方位估计的准确率。信号范数约束的性能分析表明,范数约束可有效抑制非高斯噪声。仿真及试验结果表明,在冰下环境中对接收信号进行范数约束后再实施波束形成可有效提高方位估计结果的准确度和稳定性。 展开更多
关键词 冰下探测 方位估计 范数约束 对称α稳定分布 冲激噪声
下载PDF
蓝莓休克病毒IC-RT-nested PCR检测技术 被引量:4
19
作者 谢丽雪 郑姗 +2 位作者 张立杰 张小艳 李韬 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期4366-4374,共9页
【目的】蓝莓休克病毒(Blueberry shock virus,BlShV)是蓝莓上主要病毒之一,侵染蓝莓后能够对其产量造成严重影响。研究旨在建立用于BlShV快速检测的IC-RT-nested PCR技术,为该病毒的检测鉴定提供可靠的技术手段。【方法】根据GenBank... 【目的】蓝莓休克病毒(Blueberry shock virus,BlShV)是蓝莓上主要病毒之一,侵染蓝莓后能够对其产量造成严重影响。研究旨在建立用于BlShV快速检测的IC-RT-nested PCR技术,为该病毒的检测鉴定提供可靠的技术手段。【方法】根据GenBank已报道的BlShV基因序列,设计一对外侧引物(BlShV-F/BlShV-R)和一对内侧引物(BlShV-1/BlShV-2),以感染BlShV的蓝莓病叶为材料,利用免疫IC-RT-PCR(免疫捕获RT-PCR)和nested PCR(巢式PCR)建立BlShV的IC-RT-nested PCR检测技术;分别以BlShV、蓝莓焦枯病毒(Blueberry scorch virus,BlScV)、蓝莓带化病毒(Blueberry shoestring virus,BSSV)、蓝莓叶斑驳病毒(Blueberry leaf mottle virus,BLMoV)、烟草环斑病毒(Tobacco ringspot virus,TRSV)、番茄环斑病毒(Tomato ringspot virus,ToRSV)和健康蓝莓叶片为对象,测定该检测技术的特异性;将BlShV第1轮、第2轮PCR产物分别回收纯化后连接到pMD18-T载体,连接产物转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,进行测序和序列比对验证该检测技术的准确性;将感染BlShV的蓝莓病叶提取液用健康蓝莓叶片提取液进行10倍梯度稀释,测定该检测技术的灵敏度,并与DAS-ELISA方法相比较;利用建立的IC-RT-nested PCR对收集的中国福建、吉林、辽宁地区蓝莓叶片样品(53份)和进境美国蓝莓叶片(15份)进行实际检测,并对上述样品采用普通RT-PCR方法进行验证。【结果】建立的IC-RT-nested PCR方法成功从感染BlShV病叶提取液第1轮PCR扩增出约746 bp大小的目的片段,第2轮PCR扩增出约486 bp大小的目的片段,未从健康蓝莓叶片提取液和空白对照扩增出目的片段;特异性测定结果表明,IC-RT-nested PCR具有良好的特异性,仅从感染BlShV蓝莓病叶提取液第1轮、第2轮PCR分别扩增到目的片段,而从BlScV、BSSV、BLMoV、TRSV、ToRSV和健康蓝莓叶片提取液第1轮、第2轮均未扩增到相应的目的片段;序列分析结果显示,感染BlShV蓝莓病叶提取液第1轮、第2轮PCR产物的序列同预期大小完全一致,分别为746、486 bp,将获得的两轮PCR产物序列与GenBank数据库中的BlShV基因序列进行比对,结果显示第1轮、第2轮PCR产物的序列与已报道的BlShV核苷酸序列一致性均达99%,证实两轮PCR产物均为BlShV特异性产物,进一步验证了扩增结果的准确性;灵敏度测定结果表明,IC-RT-nested PCR的第1轮PCR能够检测到稀释102倍的BlShV病叶提取液,灵敏度与DAS-ELISA相当,经过第2轮PCR,灵敏度提高100倍,能够检测到稀释104倍的BlShV病叶提取液;蓝莓样品IC-RT-nested PCR测定结果显示,2份来自于美国的蓝莓叶片样品扩增出大小约486 bp的目的片段,BlShV检出率为13.3%,而中国福建、吉林、辽宁地区蓝莓叶片样品上均未扩增出相应的目的片段,未检测到BlShV,该检测结果与普通RT-PCR验证结果完全相符,表明建立的IC-RT-nested PCR能够用于蓝莓样品的实际检测。【结论】建立的IC-RT-nested PCR具有快速、特异、准确和灵敏的优点,适合于田间和进出境口岸蓝莓样品上BlShV的检测鉴定。 展开更多
关键词 蓝莓休克病毒 ic-RT-nested PCR 检测
下载PDF
IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的研究 被引量:3
20
作者 陈建军 曹香林 +2 位作者 古勤生 张亚冰 刘崇怀 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2006年第8期109-112,共4页
结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。... 结合ELISA和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的特点,引入了另外一种方法,即免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)对葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了检测。从免疫捕捉病毒、释放RNA到反转录成cDNA,最后扩增出了约300bp的预期目的片段。为了进一步明确PCR扩增的特异性,将PCR产物连接到pGEM-T载体上,转化大肠杆菌E.coliJM109菌株,通过蓝白斑筛选,获得重组质粒,提取质粒DNA,经酶切对重组质粒进行鉴定,结果得到了含有目的片段的重组质粒。由此证明,IC-RT-PCR检测GLRaV-3结果准确可靠。最重要的是它弥补了ELISA易出现假阴性、假阳性以及RT-PCR提取RNA难等的缺点,不失为病毒检测的新型方法。 展开更多
关键词 葡萄 卷叶病毒Ⅲ 检测 ic-RT-PCR
下载PDF
上一页 1 2 21 下一页 到第
使用帮助 返回顶部