The Iampbrush-like chromosome" on pachytene bivalents of rice-field eels (Monopterus albus Zuiew)

IN our previous studies, we have used in situ nick translation techniques for analysis of DNaseⅠ sensitivity and restriction enzymes in situ cleavage on pachytene bivalents of rice-field eels(Monopterus albus Zuiew). A characteristic construction of bivalents--"the lampbrush-likechromosome", which has not been reported yet, was detected in some pachytene bivalents.

健康与上草黄鳝菌群组成差异分析

【目的】旨在揭示健康与上草黄鳝菌群组成差异,为判别黄鳝病害提供参考依据。【方法】收集健康黄鳝养殖水体(HW)、体表粘液(HN)、肠道粘膜(HC)和上草黄鳝养殖水体(BW)、体表粘液(BN)和肠道粘膜(BC)为试验材料,通过Illumina高通量测序分析菌群结构。【结果】(1)上草黄鳝降低了菌群的Alpha多样性,其中,HN组Alpha多样性最高,极显著高于BN(P<0.01)。PCoA分析发现健康和上草黄鳝的体表粘液和肠道粘膜菌群分别显著分离。(2)在门水平上,上草黄鳝变形菌门(Proteobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)丰度上升,拟杆菌门(Bacteroidetes)、梭杆菌门(Fusobacteria)丰度降低;属水平上,气单胞菌属(Aeromonas)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、黄杆菌属(Flavobacterium)、乳球菌属(Lactococcus)、水小杆菌属(Undibacterium)、无色杆菌属(Achromobacter)等丰度升高,鲸杆菌属、Pedobacter、Emticicia、多核杆菌属(Polynucleobacter)等丰度降低。(3)LefSe分析发现HN与HC组优势差异物种均为鲸杆菌属、邻单胞菌属(Plesiomonas);BN组优势差异物种主要为黄杆菌属、金黄杆菌属、气单胞菌属、水小杆菌属等。BC组优势差异物种主要为假单胞菌属(Pseudomonas)、无色杆菌属、噬酸菌属(Acidovorax)、乳球菌属等。其中,气单胞菌属的相对丰度在健康黄鳝和上草黄鳝中均表现出从水体-体表粘液-肠道黏膜逐渐降低的趋势,而鲸杆菌属则主要在健康黄鳝的体表粘液和肠道粘膜中富集。(4)功能预测结果显示,上草黄鳝的致病性、胁迫耐受表型菌群丰度均高于健康黄鳝,且主要涉及的是变形菌门中菌群。【结论】首次从微生态的角度分析水体-体表粘液-肠道粘膜菌群与黄鳝上草行为的相互关系。研究结果显示,健康与上草黄鳝的养殖水体、体表粘液及肠道粘膜菌群结构存在显著差异。健康黄鳝微生物多样性较高,有益菌(如鲸杆菌属等)丰度较高;而上草黄鳝微生物多样性较低,潜在致病性细菌(如变形菌门的气单胞菌属等)丰度显著上升,提示气单胞菌属和鲸杆菌属可考虑作为黄鳝发生上草行为的候选微生物标志物。

稻虾田黄鳝的食物组成及其对克氏原螯虾捕食强度研究

文章研究了稻田黄鳝(Monopterus albus)天然饵料生物资源、稻田黄鳝对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)捕食选择及不同投喂策略下黄鳝对克氏原螯虾的捕食强度,旨在为构建与优化稻-虾-鳝综合种养模式提供依据。结果表明,稻田中黄鳝天然饵料生物种类丰富,达16种(属);克氏原螯虾是黄鳝最喜猎物,其次为米虾,再次为蚯蚓和水生寡毛类;稻田黄鳝自然生长期间,其胃和肠前端食物团中,克氏原螯虾重量百分比均显著高于其他猎物,其中8月份占比最大,达93.90%,4月份占比最小,为76.85%;当克氏原螯虾为唯一食物时,每尾大规格成鳝(≥200 g)日均捕食量为(1.63±0.065)g;当克氏原螯虾、米虾和蚯蚓作为食物时,黄鳝主要捕食克氏原螯虾且不捕食蚯蚓,对三者的选择指数分别为0.066、–0.266和–1;若以克氏原螯虾、鱼糜-饲料为食物时,黄鳝主要摄食鱼糜-饲料,极少捕食克氏原螯虾,对两者的选择指数分别为–0.846和0.591。

稻虾养殖田放养黄鳝对水质及经济效益的影响

为探究黄鳝的放养密度对稻虾养殖田环沟水质及综合经济效益的影响,设置了1个对照组(DX)和2个试验组(DXS1和DXS2)开展养殖试验,3组每667 m2黄鳝放养量分别为0,800,1600尾。结果显示,在稻田水质方面,试验组稻田水体中pH值、可溶性磷与对照组无显著性差异(P>0.05),氨氮、亚硝酸盐氮、总氮显著高于对照组(P<0.05)。在黄鳝和克氏原螯虾的生长方面,5—9月份,DXS1和DXS2黄鳝特定生长率分别为(0.583±0.249)和(0.479±0.202)%/d,其中6月份黄鳝生长最快,特定生长率分别为0.895和0.868%/d;DXS1与DXS2组稻田克氏原螯虾体质量增加率分别为(494.60±34.93)和(527.01±41.28)%,组间无显著差异(P>0.05),但均显著高于对照组(437.37±44.17)%(P<0.05)。在养殖效益方面,DX、DXS1和DXS2每667 m2平均利润分别为2165.8,2778.2和3172.3元。指出,在稻虾田中放养黄鳝虽然会减少水稻和克氏原螯虾的产量,但黄鳝的额外收入可显著提高经济效益。

维生素C对黄鳝非特异性免疫机能的影响

以体重16.8～24.3g的黄鳝(Monopterus albus Zuiew)为研究对象,在其基础饲料中分别添加不同比例的维生素C磷酸酯(其中VC添加量分别为0.0、50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0mg/kg),在23～25℃水温下饲喂14d,以了解VC对黄鳝非特异性免疫功能的影响。结果显示,吞噬细胞活性在饲料中VC添加量为400.0～600.0mg/kg时达到最高,而溶菌酶活性在VC添加量为200.0mg/kg时达到最高。在不同组织中SOD的活性有显著差异,与对照组相比,当饲料中VC添加量为50.0mg/kg时,SOD活性显著降低。这表明当饲料中VC添加量在400.0～800.0mg/kg时,黄鳝能获得最好的非特异性免疫。

两种性激素对黄鳝性腺发育的影响

以黄鳝(Monopterus albus Zuiew)为对象,研究了不同剂量的雌三醇和甲基睾酮对其性腺发育的影响。结果显示,雌三醇可延缓黄鳝的性逆转,其延缓性逆转的适宜药物浓度约为10μg/g;甲基睾酮可促使黄鳝卵巢的败育速度加快,其促使黄鳝提前性逆转的适宜药物浓度约为90μg/g。

黄鳝对饲料中胆碱的需要量

用添加胆碱含量为0、0 1%、0 3%、0 5%、0 8%、1 0%、1 2%、1 5%和2 0%(均为质量分数)的配合饲料,在水泥池中(2m×6m×0 8m)饲养黄鳝,试验时间为90d。结果表明,随着饲料中胆碱含量的增加,黄鳝的生长加快,饲料系数降低,肝体指数减小;当饲料中胆碱添加量为0 8%～1 2%时,黄鳝的生长率最高,饲料系数最低,肝体指数、肝脏脂肪含量较小,与用动物饵料养殖的效果基本接近。这表明黄鳝饲料中胆碱的添加量不应少于0 8%,以0 8%～1 2%为宜。

黄鳝性腺自然逆转过程中vasa基因的表达分析

本研究采用RNA反义探针原位杂交技术,对vasa基因在黄鳝(Monopterusalbus)性腺发育过程中的表达情况进行了分析。结果表明:vasamRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期卵母细胞的胞质中均匀分布,在Ⅳ、Ⅴ期卵母细胞中vasamRNA有向胞质外周皮层迁移集中的趋势,但不明显;退化的卵粒也呈现vasamRNA阳性反应;在Ⅲ、Ⅳ期卵巢的被膜中检测到带有vasa阳性信号的细胞,这些细胞可能是待向精原细胞分化、迁移到卵巢被膜上的原始生殖细胞(Primordialgermcell,PGC),在性逆转过程中这些PGC可能由卵巢被膜迁移到精小叶中并发育成精子;在成熟精巢中,vasa在精原细胞和初级精母细胞中表达。进一步采用碱性磷酸酶染色法分析黄鳝卵巢及精巢后发现:在卵巢中,除了卵母细胞外,卵巢被膜中也检测到了带有碱性磷酸酶阳性信号的细胞;在成熟精巢中,只在生殖腺囊内的雄性生殖细胞中检测到碱性磷酸酶,而精巢被膜中没有检测到带有碱性磷酸酶阳性信号的细胞。本研究结果初步表明:黄鳝的雄性生殖细胞可能起源于雌性阶段卵巢被膜中的原始生殖细胞[动物学报51(3):469-475,2005]。

膨化豆粕替代不同比例鱼粉对黄鳝生长性能、体成分、肠道消化酶活力及血清生化指标的影响

以初始体重(19.55±0.15)g的黄鳝(Monopterus albus)为研究对象,用膨化豆粕分别替代基础饲料(含55%鱼粉)中0、12%、24%、36%和48%的鱼粉,配制膨化豆粕含量分别为0(对照)、9.3%、18.6%、28.0%和37.2%的5种等氮等脂的试验饲料,研究其对黄鳝生长性能、体成分、肠道消化酶活力及血清生化指标的影响,养殖试验持续90 d。每种饲料设3个重复,每个重复饲养黄鳝100尾。结果表明:与对照组相比,当膨化豆粕含量大于18.6%时,黄鳝的增重率,机体粗脂肪含量,血清葡萄糖含量,肠道脂肪酶、淀粉酶活力及肌肉中必需氨基酸含量、必需氨基酸/总氨基酸显著下降(P<0.05),饲料系数显著升高(P<0.05);当膨化豆粕含量达到37.2%时,血清尿素氮含量显著升高(P<0.05)。随着饲料中膨化豆粕含量的升高,肠道胰蛋白酶活力呈先上升后下降的趋势,血清谷草转氨酶活力呈下降趋势,而血清谷丙转氨酶活力呈上升趋势。综上所述,以膨化豆粕替代鱼粉,黄鳝配合饲料中膨化豆粕的含量以不超过18.6%为宜。

黄鳝性转变与体重、年龄的关系

研究了黄鳝(Monopterus albus Zuiew)性转变与体重、年龄的关系。结果表明,黄鳝性别与体重关系密切,体重在50.0g以下的黄鳝,均为雌性个体;体重在50.1～75.0g的黄鳝,开始出现性转变;体重在100.1～125.0g,雄性比例开始超过雌性的比例;体重在125.1～300.0g之间,随着体重的增加,雄性比例逐步增加,而雌性的比例逐步减少;体重超过300.0g的个体,则全部为雄性个体。1龄、2龄黄鳝均为雌性个体,3龄黄鳝开始出现性转变,4龄黄鳝的雄性比例超过雌性比例;5～8龄的个体,随着年龄的增长,雌性比例逐渐减少,雄性比例逐渐增加;9～11龄的个体,仍然有雌性个体。

黄鳝单条染色体的显微分离及特异性检测

建立了显微分离黄鳝单条染色体及检测其特异性的方法。在Olympus倒置显微镜下用毛细玻璃微针手工分离黄鳝减数分裂Ⅰ终变期 3号染色体 ,将其DNA作模板进行DOP PCR扩增后 ,分别以α-3 2 P dCTP和Biotin 11 dUTP标记的单条染色体DNAPCR扩增产物及Biotin 11 dUTP标记的大豆 18SrRNA基因作探针进行Southern杂交、FISH和Dot杂交来检测其特异性。结果表明 :(1)减数分裂Ⅰ终变期染色体标本是进行染色体显微操作的理想材料 ;(2 )DOP PCR扩增产物片段在 2 0 0～ 10 0 0bp之间 ,平均 6 0 0bp左右 ;(3)杂交结果显示 ,本研究所获得的单条染色体是黄鳝 3号染色体 ;(4 )与显微操作仪和微激光分离相比较 ,该方法不需要昂贵仪器 ,在常规实验室即可操作 。

两种不同体色黄鳝的染色体组型

采用PHA和秋水仙素活体注射法,首次对洞庭湖区两种不同体色黄鳝进行肾细胞染色体标本制备,并对其染色体数目及组型进行比较分析.结果表明,两种不同体色黄鳝的染色体数目相同,2N =24,且全部为端部着丝粒染色体;但两种不同体色黄鳝的染色体相对长度存在一定差异：黄鳝A的染色体相对长度为11.45±0.06～6.15±0.03,黄鳝B的染色体相对长度为11.53±0.01～5.23±0.09.试验结果为进一步研究洞庭湖区黄鳝种质资源的遗传多样性提供了基础性资料.

免疫多糖(酵母细胞壁)对黄鳝免疫保护力的增强作用

在饲料中添加不同剂量的免疫多糖(酵母细胞壁),连续投喂经注射接种嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)的黄鳝(Monopterus albus)28 d后,通过测定供试黄鳝的增重量、血清中凝集抗体效价、溶菌酶活性、谷丙转氨酶活性(SGPT)、血清总蛋白含量、白细胞吞噬活性以及活菌攻毒后的免疫保护率(RPS),探讨了将LPS作为免疫原、免疫多糖作为免疫刺激剂结合使用对受免黄鳝免疫保护力的增强作用。结果表明,用添加100.0 mg/kg免疫多糖的饲料投喂受免黄鳝,不仅可以提高受免黄鳝对A.hydrophila LPS的免疫应答水平,也可以增强黄鳝的非特异性免疫力和抵抗A.hydrophila人工感染的能力,同时也证明了在饲料中添加免疫多糖对黄鳝的生长速度和肝脏功能均无不良影响。

黄鳝超氧化物歧化酶的纯化和部分性质研究

黄鳝超氧化物歧化酶粗酶液, 经过正丁醇脱脂, 丙酮分级沉淀, DEAE 琼脂糖离子交换层析和Sephacry1 S 200凝胶过滤, 从黄鳝中分离纯化获得铁超氧化物歧化酶(Fe SOD), 并对其性质进行研究, 最终该酶的比活力为 1500 U/mg, 提纯倍数为368. 5, 回收率为24 .7%. 该酶对KCN不敏感, 而对H2O2敏感, 对热较稳定, 对酸碱有较强的耐受性, 抗胃蛋白酶的破坏. 聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦电泳结果表明: 纯化酶蛋白呈一条带, 酶分子量约为 85 kD, 亚基分子量约为16 .5 kD, 等电点为 7. 15.

黄鳝P-450芳香化酶基因的克隆及序列分析

P-450芳香化酶(P450arom)是催化雄激素生物合成雌激素的关键酶。本文采用RT-PCR和RACE(Rapid amplifi- cation of cDNA ends)法,首次分离和克隆了雌雄同体鱼黄鳝卵巢中P450 arom基因。该基因cDNA全长1802bp(不包 括poly(A)),5'端非翻译区有49bp,3'端202bp(不包含poly(A)),阅读框(Open reading frame,ORF)1551bp,翻译成517 个氨基酸,计算的蛋白质分子量58．2kDa。同源性分析显示,黄鳝卵巢P450arom的氨基酸序列与其他鱼卵巢 P450arom具有63％-80％同源性,与其他鱼脑P450arom为58％-60％同源,与人胚盘和鸡卵巢P450arom则为 50％-52％同源;但在芳香化酶高保守区(包括1-螺旋区,芳香化酶特异保守区和血红素结合区)的同源性高达 76％-92％。系统发育分析表明芳香化酶基因是单起源,黄鳝卵巢芳香化酶基因与鳉鱼卵巢的关系最近,与鱼类卵 巢P450arom属于同一分支的,与鱼类脑及鸡和人的属于不同分支。

光照时间对黄鳝生长及性腺发育的影响

以体重(25.5±0.7)g的雌性幼鳝(Monopterus albus)为对象,研究了不同光照周期对其生长和性腺发育的影响。结果表明,黑暗组在63 d和42 d时,黄鳝的增重率和体重特定增长率均显著大于其他处理组(P<0.05);63 d时,长光照组黄鳝的体重增长受到明显抑制,但其性腺指数却显著高于其他各处理组;24 h的持续光照同时抑制黄鳝的生长和性腺发育,与短光照或自然光照相比,黄鳝在黑暗状态下其生长和性腺发育均得到改善。

安徽淮河流域黄鳝繁殖生物学特性的初步研究

对2004年3～5月选购的210尾野生黄鳝进行了体长、体重、年龄与性别及其雌鳝怀卵量进行测定分析.结果表明,Ⅰ龄组亲鳝全部为雌性,Ⅱ～Ⅲ龄组为雌雄间体阶段,Ⅳ龄组多为雄性个体,Ⅴ龄基本上都已逆转为雄性;雌雄个体体长分布的交界点为47.0 cm,交界点以下范围雌性占优势,以上范围雄性占优势;雌雄个体体重分布的交界点为95 g,交界点以下范围雌性占优势,以上范围雄性占优势.性腺发育随水温变化显著,雌性个体绝对怀卵量与体长呈幂函数关系:Y=1 192ln(x)-3 579.由此认为,利用黄鳝体长与体重的重合交界点性状指标作为参考,是较准确地选择雌雄亲鳝进行配组培育或直接催产比较适用的方法.

ZFX基因同源序列在黄鳝基因组中的检出及其染色体定位(英文)

以大熊猫锌指蛋白基因Zfx为探针 ,在黄鳝基因组DNA中检测到一条长约 9 5kb的杂交带。依据哺乳类和爬行类动物锌指蛋白基因 (ZFX/Zfc)编码第 7～ 13个锌指结构的DNA序列保守性设计引物 ,在黄鳝基因组DNA中仅扩增到一条 5 12bp的DNA片段。将此片段克隆至载体 pBS中 ,从雌性、雄性个体中分别挑选 4个含有插入片段的白色克隆进行测序。测序结果表明 ,这些克隆中插入片段的核苷酸序列一致。该DNA片段在核苷酸水平上与人类ZFX和ZFY分别具有 88%和 87%同源性 ,但其与美洲鳄鱼Zfc的同源性可达 90 % ,而在氨基酸水平上则分别存在 95 9%、95 9%和 93 5 %的同源性 (170个氨基酸 )。该基因命名为黄鳝锌指蛋白基因Zfa ,并运用FISH将其定位于黄鳝 1号染色体 ,距离着丝粒的相对位置为 6 0 1± 0 38。通过进一步研究证明 ,黄鳝 1号染色体上存在有真兽类哺乳动物X染色质同源的保守片段 ,该保守片段有可能就是哺乳动物X染色体起源和进化的原始物质基础之一。应用哺乳动物X染色体连锁的其他基因在鱼类开展染色体比较定位研究 。

肉骨粉、豆粕替代鱼粉水平对黄鳝生长的影响

分别用肉骨粉和豆粕为蛋白源等氮替代0%、7.5%、15.0%、22.5%、30.0%、37.5%的鱼粉,对平均体重8.05g的黄鳝(Monopterus albus),进行生长试验,结果表明:随着肉骨粉和豆粕在饲料中含量的增加,黄鳝增重率下降,饵料系数增加,蛋白质利用率下降;在肉骨粉替代试验中,增重率在对照组和试验组中存在显著差异,在豆粕替代试验中,对照组与7.5%的替代组之间增重率无显著差异。考虑到增重率、饵料系数和蛋白质的利用率及经济因素,在黄鳝配合饲料中肉骨粉替代在22.5%以内,豆粕替代在15.0%以内对黄鳝的生长不会造成明显的影响,且黄鳝配合饲料中鱼粉含量不应低于30%。