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The complete genomic sequence of egg drop syndrome virus strain AAV-2
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作者 金奇 曾力宇 +2 位作者 杨帆 李茂祥 侯云德 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1999年第6期607-613,共7页
In the search for the genome of egg drop syndrome virus (EDSV-76) Chinese strain AAV-2, part of restriction endonuclease physical map is analyzed, the complete genomic library is organized. On basis of this, the compl... In the search for the genome of egg drop syndrome virus (EDSV-76) Chinese strain AAV-2, part of restriction endonuclease physical map is analyzed, the complete genomic library is organized. On basis of this, the complete genome nucleotide sequences (32 838 bp in length, including terminal structures) are determined. The data analysis shows: compared with the other Adenovirases, strain AAV-2 has more disparity on genomic structure and the distribution of open reading frame (ORF). There are no clear El, E3 and E4 regions in AAV-2 genome. Two segments located at both ends of genome (l .1 kb and 8.3 kb in length respectively) have no homology with the other adenovirus genomes. In addition, strain AAV-2 genome lacks ORFs encoding El A, pV and pIX, which are common ORFs encoding early, lately proteins in Adenovirus. This reveals differences between EDSA-76, the sole standard strain of group Ⅲ Avian Adenovirases, and the other Avian Adenovirases for the first time. It will help the search for Avian Adenovirus and will also help the search of all Adenovirases. 展开更多
关键词 ADENOvirus egg drop syndrome virus physical map ANALYSIS NUCLEOTIDE sequence analysis.
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减蛋综合征病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制及初步应用
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作者 宋亚鹏 孙亚宁 +4 位作者 刘琳 杨继飞 李新生 魏蔷 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第1期125-132,共8页
为建立快速检测减蛋综合征病毒(EDSV)抗体的方法,基于EDSV的Fiber蛋白,制备快速检测EDSV抗体的免疫层析试纸条,为养禽业提供针对病原微生物的感染预警及免疫评估。利用胶体金标记EDSV Fiber蛋白抗原为探针,将羊抗鸡IgG和抗Fiber蛋白的... 为建立快速检测减蛋综合征病毒(EDSV)抗体的方法,基于EDSV的Fiber蛋白,制备快速检测EDSV抗体的免疫层析试纸条,为养禽业提供针对病原微生物的感染预警及免疫评估。利用胶体金标记EDSV Fiber蛋白抗原为探针,将羊抗鸡IgG和抗Fiber蛋白的抗体包被到硝酸纤维膜上,分别作为质控线和检测线,对家禽EDSV抗体水平进行监测。结果表明,制备的EDSV免疫层析试纸条具有高度特异性,与其他家禽病毒抗体无交叉反应,仅与EDSV抗体反应,在试纸条上产生可见的检测线;并且制备的试纸条具有高度稳定性,在室温条件下可至少保存6个月。应用制备的检测EDSV抗体的免疫层析试纸条对从河南、安徽、山东等地养鸡场采集的576份鸡血清样本检测,与血凝抑制试验(HI)结果进行平行比较,二者的Kappa值为0.878,具有良好一致性。综上,制备的检测ESDV抗体的免疫层析试纸条具有高度的特异性、敏感性、稳定性和易操作性,对EDSV抗体的临床检测具有实际应用价值。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 Fiber蛋白 免疫层析试纸 血凝抑制试验
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鸡减蛋综合征病毒(EDSV-76)末端前体蛋白的基因结构分析 被引量:5
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作者 曾力宇 金奇 +4 位作者 章金钢 李茂祥 姚二梅 殷震 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期351-356,共6页
从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒弱毒株AA-2,经常规方法提取其病毒核酸后,组建了完整的限制性内切酶PstⅠ及HindⅢ水解片段的基因文库,并对其中HindⅢ(21.0m.u.)-SacⅠ(33.2u.)进行了... 从中国发病鸡群中分离的鸡减蛋综合征病毒弱毒株AA-2,经常规方法提取其病毒核酸后,组建了完整的限制性内切酶PstⅠ及HindⅢ水解片段的基因文库,并对其中HindⅢ(21.0m.u.)-SacⅠ(33.2u.)进行了序列测定。同源比较分析证明:其L链含编码病毒末端前体蛋白,容量为580个氨基酸残基(aa)的开放读码框架(Openreadingframe,ORF)。由此推导的多肽氨基酸序列及结构特点,如保守序列、核定位信号(Nuclearlocalizationsignal)。等与其他腺病毒的相应多肽存在较大差异。本文为阐明腺病毒末端前体蛋白参与DNA复制起始的机制提供了新的依据。 展开更多
关键词 鸡减蛋综合征 病毒 末端前体蛋白 基因结构
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鸡减蛋综合征病毒中和性单克隆抗体的制备、鉴定及在双抗体夹心ELISA中的应用
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作者 魏蔷 李青梅 +3 位作者 金前跃 宋亚鹏 白怡霖 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2024年第2期128-135,共8页
为了制备针对鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iE... 为了制备针对鸡减蛋综合征病毒(EDSV)的中和性单克隆抗体,首先纯化得到重组EDSV纤维蛋白,经血凝试验(HA)鉴定纤维蛋白的血凝活性,HA效价为1∶2~7。之后将纤维蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,免疫4次后,小鼠血清的间接酶联免疫吸附试验(iELISA)效价最高达到1∶409 600,间接免疫荧光试验(IFA)效价最高达到1∶12 800。取效价最高免疫小鼠脾细胞进行细胞融合制备杂交瘤细胞,结合iELISA和IFA检测,经过多轮亚克隆,最终成功获得了2株稳定分泌中和性单克隆抗体的杂交瘤细胞株9G12和10E11。iELISA结果显示,单克隆抗体9G12和10E11的腹水效价分别为1∶128 000和1∶1 020 000;IFA效价分别为1∶2 000和1∶8 000。Western blot检测结果显示,单克隆抗体9G12和10E11均不能识别变性的EDSV纤维蛋白,表明二者识别纤维蛋白的构象型表位。病毒中和试验结果表明,单克隆抗体9G12和10E11均具有中和活性,中和效价分别为1∶2~7和1∶2~4。亚型鉴定表明,这2种单克隆抗体的轻链均为Kappa型,重链均为IgG1亚型。将基于单克隆抗体9G12和10E11建立的双抗体夹心ELISA方法应用于临床检测EDSV抗原,与荧光定量PCR检测结果的符合率为91.7%。综上,成功筛选出9G12和10E11杂交瘤细胞株,二者分泌抗EDSV特异性抗体,且这2种抗体具有中和EDSV感染活性,可应用于EDSV的临床检测。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 纤维蛋白 中和性单克隆抗体 抗体中和效价 双抗体夹心ELISA
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鸡减蛋综合征病毒(EDSV)主要蛋白的结构分析 被引量:3
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作者 曾力宇 金奇 +5 位作者 章金钢 李茂祥 李虹 朱雷 殷震 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期45-54,共10页
鸡减蛋综合征病毒(EDSV)中国株AA-2基因组全长为32838bp,其编码病毒主要结构蛋白(52/55K、Ⅲa、五邻体、pVⅡ、pVⅠ、六邻体、100k、pVⅢ以及纤维蛋白等)的基因依次排列在基因组的中部,E2区编... 鸡减蛋综合征病毒(EDSV)中国株AA-2基因组全长为32838bp,其编码病毒主要结构蛋白(52/55K、Ⅲa、五邻体、pVⅡ、pVⅠ、六邻体、100k、pVⅢ以及纤维蛋白等)的基因依次排列在基因组的中部,E2区编码DNA结合蛋白、DNA多聚酶、末端前体蛋白及IVaⅡ的基因也分别排列在EDSV基因组的负链上。对这些蛋白的氨基酸序列进行同源性比较后发现,EDSV的主要蛋白与羊腺病毒(OAV)同类物存在不同寻常的高同源性。 展开更多
关键词 鸡减蛋综合征 序列分析 edsv蛋白 结构分析
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减蛋综合征病毒(EDSV)的分离与鉴定 被引量:5
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作者 王雪敏 《中国家禽》 北大核心 2002年第20期12-14,共3页
从河北邯郸某鸡场190d未经EDS疫苗免疫的、突然产蛋下降并出现大量软壳蛋、无壳蛋的鸡群中分离到一株病毒,经理化特性鉴定、单抗Dot-ELISA检测、DNA探针斑点杂交,确定分离到的病毒为EDSV。经限制性核酸内切酶酶切分析,表明分离株与EDSV... 从河北邯郸某鸡场190d未经EDS疫苗免疫的、突然产蛋下降并出现大量软壳蛋、无壳蛋的鸡群中分离到一株病毒,经理化特性鉴定、单抗Dot-ELISA检测、DNA探针斑点杂交,确定分离到的病毒为EDSV。经限制性核酸内切酶酶切分析,表明分离株与EDSV标准株AV127属于同一个基因型。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 edsv 分离 鉴定
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EDSV HN03株纤维蛋白基因的克隆与序列分析
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作者 陈红英 李新生 +4 位作者 崔保安 夏平安 张红英 廖仲磊 邵攀峰 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第9期1-4,10,共5页
【目的】研究减蛋综合征病毒(EDSV)河南HN03株纤维蛋白基因全序列,为进一步分析EDSV纤维蛋白基因的结构、功能以及EDSV基因工程疫苗的研究奠定基础。【方法】根据GenBank中收录的EDSV纤维蛋白基因序列(Z86065),设计并合成了1对引物,PCR... 【目的】研究减蛋综合征病毒(EDSV)河南HN03株纤维蛋白基因全序列,为进一步分析EDSV纤维蛋白基因的结构、功能以及EDSV基因工程疫苗的研究奠定基础。【方法】根据GenBank中收录的EDSV纤维蛋白基因序列(Z86065),设计并合成了1对引物,PCR扩增EDSV河南HN03株纤维蛋白基因。将扩增产物克隆入pTG19-T载体并测序。【结果】测序结果表明,HN03株纤维蛋白基因为1935 bp,包含一个完整的开放阅读框,编码644个氨基酸,推导的氨基酸序列有5个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,EDSV HN03株与EDSV国际标准株AV-127纤维蛋白基因核苷酸同源性为99.3%,氨基酸同源性为99.2%;与鹌鹑腺病毒QU株纤维蛋白基因核苷酸同源性为98.9%,氨基酸同源性为98.4%。【结论】腺病毒纤维蛋白基因相当保守。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 纤维蛋白基因 基因克隆 序列分析
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EDSV分离株NE_4、GC_2 DNA的限制性酶切分析
8
作者 王雪敏 郑明球 +1 位作者 陈溥言 蔡宝祥 《上海农业学报》 CSCD 1998年第1期43-44,共2页
用限制性内切酶BalⅠ、BalⅡ、BamHⅠ、CtaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、HpaⅠ、KpnⅠ、PstⅠ、PvuⅠ、SalⅠ、SmalⅠ、XbaⅠ及EcoR28Ⅰ+BamHⅠ双酶消化对EDSV分离株NE4、GC2r的DNA进行了酶切分析。结果表明,二个分离株与标准株AV127DNA各酶... 用限制性内切酶BalⅠ、BalⅡ、BamHⅠ、CtaⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、HpaⅠ、KpnⅠ、PstⅠ、PvuⅠ、SalⅠ、SmalⅠ、XbaⅠ及EcoR28Ⅰ+BamHⅠ双酶消化对EDSV分离株NE4、GC2r的DNA进行了酶切分析。结果表明,二个分离株与标准株AV127DNA各酶切片段数及各片段的分子量(kb)未见差异,说明二者与AV127株属于同一基因型。 展开更多
关键词 edsv 限制性内切酶 酶切分析 减蛋综合症 鸡病
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含PHYA基因的EDSV转移载体构建及表达研究
9
作者 杜华茂 黄伟 +2 位作者 谢和芳 王洪波 范守成 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第1期132-135,共4页
将原核表达载体pET 30中的黑曲霉源植酸酶基因(phyA)亚克隆到真核表达载体pCDNA 3的kpnI-EcoRI位 点。根据pCDNA 3的序列在增强子的上游(209位)和BGH polyA下游(2 049位)设计1对引物HM 1,HM 2扩增出 含phyA基因的表达盒。将此表达盒以... 将原核表达载体pET 30中的黑曲霉源植酸酶基因(phyA)亚克隆到真核表达载体pCDNA 3的kpnI-EcoRI位 点。根据pCDNA 3的序列在增强子的上游(209位)和BGH polyA下游(2 049位)设计1对引物HM 1,HM 2扩增出 含phyA基因的表达盒。将此表达盒以平末端连接的方式克隆到减蛋综合征病毒(EDSV)基因组右末端的转移载体 pUHBC的SalI位点,酶切分析鉴定表达盒的方向,得到反向插入重组质粒pEDS-phyA。用Lipofectamine 2000将8 μg pEDS-phyA转染90%满度的鸭胚成纤维细胞,6 h后换生长液,24 h后收获细胞,以pUHBC转染作对照。钼酸胺 法测定试验样品植酸酶酶活为977 U/mL。实验结果表达我们已成功地构建了含植酸酶基因的转移载体,为进一步构 建重组减蛋综合征病毒载体表达植酸酶打下基础。 展开更多
关键词 植酸酶 减蛋综合征病毒 转移载体 瞬时表达
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银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征病毒的研究 被引量:32
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作者 程安春 汪铭书 +2 位作者 廖德惠 陈孝跃 钟妮娜 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1997年第7期9-11,共3页
本研究首次报道应用银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征(EDS76)病毒获得成功。经初步提纯后的EDS76病毒免疫兔制备高免血清,按常规方法提取兔抗EDS76病毒的IgG,成功地建立了检测EDS76病毒抗原的银加强胶体金... 本研究首次报道应用银加强胶体金探针检测鸡减蛋综合征(EDS76)病毒获得成功。经初步提纯后的EDS76病毒免疫兔制备高免血清,按常规方法提取兔抗EDS76病毒的IgG,成功地建立了检测EDS76病毒抗原的银加强胶体金探针法(SECGPA),并确定了操作程序的最佳试验条件为:兔抗EDSVIgG工作浓度为1400,金标记羊抗兔IgG的工作浓度为120,银染色的时间为15min。用该法对提纯的EDS76病毒(EDSV)抗原的最低检出量为0.11719μg/ml。以此法检测了人工感染的50只鸡采集的样本,对卵巢、输卵管峡部、咽喉部、软壳蛋的阳性率均为100%,粪便阳性率为92%,而检测鸡新城疫病毒、鸡传染性法氏囊病病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒、大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌等鸡源病毒和细菌样品时全部呈阴性反应。研究结果表明,该法具有快速、准确、操作简便、敏感性高、易于判读、特异性强、重复性好等优点。 展开更多
关键词 检测 减蛋综合征 病毒 鸡病 SECGPA
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减蛋综合征病毒pVⅢ基因和E3区序列测定及结构分析 被引量:17
11
作者 李茂祥 金奇 +3 位作者 章金钢 曾力宇 殷震 侯云德 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期27-31,共5页
克隆了减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株基因组HindⅢ-E片段,并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央58.7~68.9物理图谱单位(mu),片段全长共3194bp。其中含有1个完整的和2个不完整的开放性读码... 克隆了减蛋综合征病毒(EDSV)中国分离株基因组HindⅢ-E片段,并分析了其核苷酸序列。该片段位于基因组中央58.7~68.9物理图谱单位(mu),片段全长共3194bp。其中含有1个完整的和2个不完整的开放性读码框架(ORF),分别编码pVⅢ蛋白、100K蛋白基因C端和纤维蛋白N末端部分。pVⅢ蛋白基因由753个碱基(nt)组成,编码250个氨基酸(aa),编码产物的分子量为28500。氨基酸水平的同源性比较表明,EDSV的pVⅢ蛋白与禽腺病毒1型(FAV1)及人和其他动物腺病毒pVⅢ蛋白的同源性为28%~36%,而与羊腺病毒(OAV)的同源性高达52%,提示EDSV与OAV间的亲缘关系更近。按照人腺病毒基因组结构的特征,在pVⅢ和纤维蛋白基因之间,应为E3区,但该序列只有245个nt组成,序列中保留了TATABox和polyA信号。但除了2个仅编码49aa和32aa多肽的ORFs外,不编码任何产物,且核苷酸序列与其他腺病毒的E3区无同源性,证实此区无明显E3区样结构。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 PVⅢ 蛋白基因 序列分析
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鸭产蛋下降-死亡综合征的临床诊断与病原的初步鉴定 被引量:13
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作者 赵圆圆 李传峰 +6 位作者 朱良强 詹松鹤 王汉清 魏建忠 秦爱建 刘光清 王桂军 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期11-14,共4页
2010年3~11月间,安徽省部分规模养鸭场流行以产蛋下降和死亡为特征的急性、热性鸭传染病,主要感染成年种鸭或蛋鸭,病理变化则以心肌出血、卵巢肿大、出血和坏死为特征。通过鸡胚接种、传代培养和RT-PCR鉴定,从发病鸭体内分离1株黄病毒... 2010年3~11月间,安徽省部分规模养鸭场流行以产蛋下降和死亡为特征的急性、热性鸭传染病,主要感染成年种鸭或蛋鸭,病理变化则以心肌出血、卵巢肿大、出血和坏死为特征。通过鸡胚接种、传代培养和RT-PCR鉴定,从发病鸭体内分离1株黄病毒。对其NS1基因扩增并测序,发现其与坦布苏病毒亲缘关系非常近,核苷酸同源性达94.2%。动物回归试验结果表明:该病毒能引起蛋鸭产蛋下降和卵巢病变。证明鸭黄病毒在我国对鸭的高度致病性,并开始在规模鸭场蔓延和流行,应当引起有关部门和兽医工作者的高度重视。 展开更多
关键词 产蛋下降-死亡综合征 坦布苏病毒 黄病毒 病原鉴定
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鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联油佐剂灭活疫苗的研究 被引量:11
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作者 姜北宇 刘月焕 +3 位作者 郑世兰 景小冬 姚颖 白丽萍 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期106-113,共8页
用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76 V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒,分别接种鸡胚或鸭胚,制备各种病毒抗原液,经福尔马林灭活后,采用FILTRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩,然后按一定比例混合,以司本80及吐温80为乳化剂,1... 用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76 V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒,分别接种鸡胚或鸭胚,制备各种病毒抗原液,经福尔马林灭活后,采用FILTRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩,然后按一定比例混合,以司本80及吐温80为乳化剂,10号白油为佐剂,制成ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗。对四联苗各项技术指标进行了测定,证明本疫苗安全、无任何副作用;免疫10-14 d后产生免疫力;ND部分效检,攻毒100%保护,每羽份含ND效价达50-123 PD50;IB部分效检,免疫21-28 d后攻毒保护率达80%-100%,IB HI效价≥1:64;EDS76效检,免疫后21 d HI效价≥1:128;AE效检,保护率达80%-100%。 展开更多
关键词 新城疫 传染性支气管炎 减蛋综合征 传染性脑脊髓炎 四联油佐剂灭活疫苗
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减蛋综合征病毒基因组Hind Ⅲ酶切片段的克隆及酶谱分析 被引量:9
14
作者 胡敬东 章金钢 +3 位作者 李红卫 金扩世 涂长春 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期7-10,共4页
以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法克隆减蛋综合征病毒(EDSV)基因组的HindⅢ酶切片段,用Digoxigenin-dUTP标记的EDSVHindⅢ片段探针打点杂交,证实13个克隆插入了EDSVDNA的HindⅢ片... 以pUC19质粒为载体,采用鸟枪法克隆减蛋综合征病毒(EDSV)基因组的HindⅢ酶切片段,用Digoxigenin-dUTP标记的EDSVHindⅢ片段探针打点杂交,证实13个克隆插入了EDSVDNA的HindⅢ片段。酶切分析结果表明,克隆到了A、B、F、G、H、I、J7个不同大小的片段,选取含有上述插入片段的、具有代表性的7个相应质粒pUHA、pUHB、pUHF、pUHG、pUHH、pUHI、pUHJ,在分别以BamHI、BglⅡ、ClaⅠ、EcoRI、EcoRV、PstⅠ、SmaⅠ、XbaⅠ、XhoⅠ单酶切的基础上,经适当组合的双酶切,得出各片段存在的单一酶切位点为A:BglⅡ、EcoRV、SmaⅠ、XhoⅠ位点;B:BglⅡ、SmaⅠ位点;F:BglⅡ、EcoRV位点;G:PstⅠ位点;H:0;I:PstⅠ位点;J:EcoRV、XhoⅠ位点。为进一步筛选病毒复制非必需区,构建腺病毒表达载体,以及研究禽类腺病毒的分子生物学特性打下了基础。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 克隆 限制酶图谱分析
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减蛋综合征病毒五邻体重组蛋白的原核表达及抗原性鉴定 被引量:10
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作者 肖妙 于志丹 +1 位作者 马波 王君伟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期83-87,共5页
根据减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127株的全基因序列(GenBank序列号AC000004)设计了1对引物,采用PCR扩增出五邻体(Penton)完整基因,将其连接到克隆载体pMD18-T,经过鉴定后测序。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列和GenBank中AV-l27株... 根据减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127株的全基因序列(GenBank序列号AC000004)设计了1对引物,采用PCR扩增出五邻体(Penton)完整基因,将其连接到克隆载体pMD18-T,经过鉴定后测序。序列分析表明,所获得的DNA片段核苷酸序列和GenBank中AV-l27株的五邻体比较有9个碱基突变,但利用DNAstar分析,两者的氨基酸完全一致。然后酶切胶回收后将目的片段连接到质粒表达载体pET-30a(+),获得的阳性克隆命名为pET-30a-Penton。将pET-30a-Penton转化E.coli Rosetta,经37℃、1.0 mmol·L-1 IPTG诱导表达5 h,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,结果显示目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为54.0 ku。Western Blot试验结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 五邻体 原核表达 抗原性
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减蛋综合征病毒33K蛋白基因克隆及结构分析 被引量:5
16
作者 李茂祥 李红卫 +5 位作者 金奇 章金刚 余兴龙 吕宗吉 侯云德 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期221-225,共5页
纯化的减蛋综合征病毒(EDSV)DNA经HindⅢ水解、0.8%琼脂糖电泳后,回收各DNA条带并克隆至pBluescriptKS载体,建立了EDSV基因文库,对33K蛋白基因进行了分析。本研究证实,EDSV33K蛋白... 纯化的减蛋综合征病毒(EDSV)DNA经HindⅢ水解、0.8%琼脂糖电泳后,回收各DNA条带并克隆至pBluescriptKS载体,建立了EDSV基因文库,对33K蛋白基因进行了分析。本研究证实,EDSV33K蛋白基因含有2个外显子,与羊腺病毒(OAV)33K蛋白比较,N端编码产物的同源性为30.8%,C端的为60%。用RT-PCR扩增33KmRNA和cDNA克隆及序列分析证实,EDSV33K蛋白含有82碱基(nt)的内含子,去掉内含子33K蛋白基因能形成完整的ORF,其编码产物由177氨基酸(aa)组成,推测分子质量为2.06×104,与人5型腺病毒和OAV的同源性分别为28.1%和44.7%。 展开更多
关键词 减蛋综合征病毒 33K蛋白 禽腺病毒 克隆 内含子
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产蛋下降综合征(EDS-76)病毒DNA探针的制备及应用研究 被引量:9
17
作者 段玉友 崔治中 +1 位作者 高菘 葛天同 《中国兽医学报》 CAS CSCD 1995年第3期219-223,共5页
用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将... 用纯化的产蛋下降综合征(EDS-76)病毒(H91毒株)悬液提取的核酸,经琼脂糖凝胶电泳只出现1条分子量较大、背景清晰的核酸带。用BamHI酶消化产生4个片段,大小分别为17kb、10kb、4.0kb和2.0kb。将其中的2.0kb片段克隆进pUC18DNA载体中,重组质粒DNA用digoxigenin标记作为DNA探针,在dotblot中该探针不与鹅胚尿囊液核酸抽提物、马立克氏病病毒(MDV)DNA、鸡传染性贫血病毒(CAV)DNA、SPF鸡基因组DNA等核酸反应,只与3株EDS病毒(EDS标准毒株AV-127、EDSH91毒株和从健康鹅体中分离的EDSY81毒株)DNA呈阳性反应。人工感染产蛋母鸡和雏鸡后24h即可用该探针从泄殖腔棉拭子样品中检测出EDS病毒DNA,在感染后35h仍能从部分感染鸡样品中检出。对部分探针检测阳性鸡的泄殖腔棉拭子样品用SPF鸡胚分离病毒,并用HA和HI试验检测分离病毒的特异性;在感染过程中,同时检测了血清中HI抗体的消长情况。结果表明,人工感染鸡排毒至少可以维持2个月左右,而且血清中HI抗体即使很高,也不能阻止感染鸡的排毒。 展开更多
关键词 家禽 DNA探针 泄殖腔分泌物 减蛋综合症 病毒
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上海地区近几年鸭新发病毒性传染病的血清学调查 被引量:8
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作者 周锦萍 孙泉云 +6 位作者 刘佩红 陈备娟 杨文 沈悦 鞠龚讷 卢军 薛霞 《中国家禽》 北大核心 2005年第3期9-11,共3页
于2003年从上海市5个区17个养鸭场(户)的鸭群中采集276份血清样品,采用进口ELISA试剂盒对冠状病毒、传染性法氏囊病毒、新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒的感染状况进行了血清学调查。结果表明,受检鸭群存有不同程度的阳性率,原来只感染... 于2003年从上海市5个区17个养鸭场(户)的鸭群中采集276份血清样品,采用进口ELISA试剂盒对冠状病毒、传染性法氏囊病毒、新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒的感染状况进行了血清学调查。结果表明,受检鸭群存有不同程度的阳性率,原来只感染鸡的疫病逐步向鸭群延伸。 展开更多
关键词 鸭群 血清学调查 上海地区 传染性法氏囊病毒 产蛋下降综合征 血清样品 养鸭 新发 发病 病毒性传染病
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鸡4种病毒抗原液的浓缩及其四联油佐剂灭活苗的研制 被引量:6
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作者 吴清民 陈福勇 +5 位作者 张中直 庄文忠 钱凤芹 任红梅 李爱芹 王长法 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期9-11,共3页
本研究通过超滤浓缩技术对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒的尿囊液进行了 10倍或 10倍以上的浓缩处理 ,并按一定的比例配比研制成四联油乳剂灭活疫苗 ,对鸡的最小免疫剂量是 0 .2 5ml,免疫... 本研究通过超滤浓缩技术对鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒的尿囊液进行了 10倍或 10倍以上的浓缩处理 ,并按一定的比例配比研制成四联油乳剂灭活疫苗 ,对鸡的最小免疫剂量是 0 .2 5ml,免疫接种二周后 ,鸡新城疫和产蛋下降综合征病毒的 HI抗体效价分别达到 8log2 和 7log2 以上 ,传染性支气管炎和传染性法氏囊病病毒抗体 S/ P值均在 0 .2以上 ,抗体效价呈现明显的递增 ,抗体水平至少可维持 4个月以上。这一结果证明该试验采用的禽类病毒性抗原的浓缩方法 ,适合鸡新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、产蛋下降综合征病毒和传染性法氏囊病病毒等不同抗原液的浓缩 。 展开更多
关键词 新城疫病毒 传染性支气管炎病毒 减蛋综合征病毒 传染性法氏囊炎病毒 抗原 浓缩 四联疫苗
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胶体金快速诊断方法对鸡减蛋综合征病毒的检测 被引量:10
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作者 王爱华 王玉珠 +1 位作者 孙继国 陈龙宾 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第11期856-858,共3页
选择15 nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35μg/mL的纯化EDSV,用该试纸条检测135份临床样本,并与HA方法相比较,结果显示,二者的阳性符合率为89.8%。特异性试验结果显示,... 选择15 nm的胶体金颗粒作为标记物,制备了鸡减蛋综合征病毒(EDSV)胶体金试纸条。该试纸条能检出浓度约为1.35μg/mL的纯化EDSV,用该试纸条检测135份临床样本,并与HA方法相比较,结果显示,二者的阳性符合率为89.8%。特异性试验结果显示,与鸡新城疫病毒(NDV)、鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)、鸡传染性支气管炎病毒(IBV)无交叉反应。表明,该试纸条用于检测EDSV具有快速、操作简便、特异性强等优点,可用于大批量抗原样本的检测。 展开更多
关键词 鸡减蛋综合征病毒 胶体金 检测
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