宫颈鳞癌组织中ELF5、Ki-67、p53表达及与临床病理关系

目的:分析宫颈鳞癌病变组织中Ki-67、p53及ELF5表达情况及与宫颈鳞癌临床病理特征的关联性。方法:选择2019年9月-2022年12月在医院接受手术且手术后病理诊断为宫颈鳞状细胞癌患者50例的肿瘤组织样本,良性疾病手术后病理确诊为慢性子宫颈炎患者30例组织样本为对照组。免疫组织化学(IHC)技术检测样本组织中Ki-67、p53、ELF5的表达水平,统计阳性表达与临床病理参数。结果:宫颈鳞状组Ki-67、p53、ELF5的阳性表达率(92.0%、72.0%、60.0%)、高于对照组(3.3%、10.0%、13.3%)(均P<0.05)。宫颈鳞癌组Ki-67的表达与淋巴血管间隙侵犯(LVSI)有关,p53表达与病理分级、浸润深度有关,ELF5表达与宫颈鳞癌的国际妇产科联盟(FIGO)分期、浸润深度、肿瘤径线有关,Ki-67表达与宫颈鳞癌的病理分级、LVSI正相关,p53表达与病理分级和浸润深度正相关,ELF5表达与宫颈鳞状细胞癌的FIGO分期、病理分级、浸润深度和肿瘤径线正相关,Ki-67与p53、ELF5的表达呈正相关(均P<0.05),而p53与ELF5之间无明显相关性。结论:ELF5蛋白、p53蛋白与Ki-67蛋白在宫颈鳞癌发生发展中表达存在相关性,有助于宫颈癌诊断,为早期治疗提供有益帮助。

ELF5通过抑制上皮间质转化抑制结直肠癌的发生发展

目的探讨ELF5在结直肠癌发生发展中的作用。方法 Real-time PCR及Western blot法检测结直肠癌组织及细胞株中ELF5表达变化,细胞转染技术过表达结肠癌细胞中ELF5,CCK-8试验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,transwell小室实验检测细胞侵袭能力,细胞免疫荧光及Western blot法检测E-cadherin、Vimentin、N-cadherin和Snail蛋白表达变化,评估EMT发生情况。结果结肠癌组织及细胞株中ELF5表达较对照组明显下降(P<0.001)。过表达结肠癌细胞中ELF5可抑制细胞的增殖、迁移及侵袭(P<0.05),且可抑制EMT的发生(P<0.05)。结论 ELF5可能通过抑制EMT发生进而抑制结直肠癌的发生发展。

人Elf5基因真核表达质粒的构建及其亚细胞定位

目的:构建人Elf5真核细胞表达质粒,并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人Elf5基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFPhElf5。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定Elf5真核表达质粒及Elf5蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认Elf5基因成功导入真核表达载体pEGFP-C1。瞬时转染MCF7细胞,Elf5蛋白表达在细胞核中。结论:pEGFP-Elf5真核表达质粒构建成功,Elf5定位在细胞核中。

宫颈鳞癌患者组织中ELF5、Ki67、P53表达特征及与疾病分期、预后的关联性研究

目的探讨宫颈鳞癌患者组织中ELF5、Ki67、P53表达特征及与疾病分期、预后的关联性。方法回顾性选取2019年5月—2021年9月新疆生产建设兵团医院宫颈鳞癌患者30例设为宫颈鳞癌组、低级别CIN患者20例设为低级别CIN组、高级别CIN患者20例设为高级别CIN组、慢性宫颈炎患者20例设为慢性宫颈炎组。采取免疫组织化学法测定各个组织内P53、Ki67、ELF5表达情况,统计以上4组宫颈组织中P53、Ki67、ELF5阳性表达情况,分析上述指标与宫颈鳞癌临床病理指标的关系,并比较不同预后的宫颈鳞癌患者P53、Ki67、ELF5阳性率。结果(1)宫颈鳞癌患者ELF5阳性表达率(33.33%)低于低级别CIN组(85.00%)、高级别CIN组(75.00%)、慢性宫颈炎组(90.00%),P53、Ki67阳性表达率(76.67%、83.33%)高于低级别CIN组(20.00%、25.00%)、高级别CIN组(45.00%、55.00%)、慢性宫颈炎组(5.00%、5.00%)(P<0.05);(2)不同FIGO分期宫颈鳞癌者P53、Ki67、ELF5阳性表达情况比较(P<0.05),且随着FIGO分期增高,ELF5阳性表达率持续降低,P53、Ki67阳性表达率持续增高(P<0.05);(3)P53、Ki67阳性表达率与宫颈鳞癌FIGO分期间存在显著正相关关系,ELF5阳性表达率与宫颈鳞癌FIGO分期间存在显著负相关关系(P<0.05);(4)预后不良者ELF5阳性表达率(10.53%)低于预后良好者(72.73%),P53、Ki67阳性表达率(94.74%、100.00%)高于预后良好者(45.45%、45.45%)(P<0.05)。结论宫颈鳞癌组织中P53、Ki67、ELF5表达情况异常增高,其增高幅度与疾病分期具有密切关联性,且不同预后情况者上述指标表达间存在显著差异,其可用于疾病预后的预测。

ELF5在正常乳腺发育和乳腺肿瘤发生中的作用

ELF5(E74-like factor 5)也被称为ESE2,属于ETS(E-twenty-six)转录因子家族成员之一,它在调控胚胎发育以及乳腺组织发育中起到重要作用。在桑椹胚时期,ELF5在调控胚胎内细胞团向胚胎形成过程中或是在胎盘发育的细胞命运决定中起到关键作用。在哺乳动物正常乳腺发育中,ELF5可通过诱导细胞定向分化而获得孕期乳腺分泌细胞类型,从而调控乳腺干/祖细胞的命运。在人类乳腺癌中,ELF5是诱导乳腺肿瘤细胞由表达雌激素受体阳性(ER+)的luminal亚型向表达雌激素受体阴性(ER-)的basal亚型转化的一个关键调控因子,并抑制细胞获得雌激素敏感表型。现主要综述了ELF5的结构特点、功能以及其在哺乳动物乳腺发育中的调控作用。

转染Elf5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力及凋亡变化

目的观察转染Elf5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力及凋亡变化。方法将目的基因Elf5+EGFP克隆到载体pc DNA3.1中,构建重组质粒pc DNA3.1-Elf5+EGFP,转入感受态细胞,挑选阳性克隆菌落,大量抽提质粒。培养人卵巢癌干细胞并分为重组质粒组、空质粒组、空白对照组。重组质粒组转染pc DNA3.1-Elf5+EGFP真核表达载体,空质粒组转染pc DNA3.1-EGFP空载质粒,空白对照组不进行转染。采用Western blotting法检测Elf5蛋白。分别于转染后1、2、3、4、5、6 d采用MTT法检测细胞增殖能力;转染24 h后采用侵袭小室检测细胞侵袭能力并计算穿膜细胞数;转染24 h后流式细胞术检测不同周期细胞及凋亡细胞。结果成功构建了pc DNA3.1-Elf5+EGFP真核细胞表达载体,重组质粒组细胞中Elf5蛋白稳定表达。转染后1、2、3、4、5、6 d重组质粒组细胞增殖能力低于空白对照组和空质粒组(P均<0.05)。重组质粒组穿膜细胞数少于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组G_0/G_1期细胞百分比高于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组细胞凋亡率高于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。结论转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力受到抑制,细胞凋亡增多。

上皮性卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、上皮间质转化标志分子的表达观察

目的观察上皮性卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、上皮间质转化(EMT)标志分子的表达变化,并探讨其意义。方法收集300例上皮性卵巢癌患者的卵巢癌组织及其癌组织相对应的癌旁组织,免疫组化法分别检测上述组织中的WWOX蛋白、Elf5、Snail1及EMT标志分子E-cadherin、N-Cadherin、Vimentin。对卵巢癌组织及癌旁组织中上述指标的表达作比较,分析卵巢癌组织中上述指标的表达与卵巢癌FIGO分期、组织学类型、病理学分级和淋巴结转移等临床病理参数的关系,分析卵巢癌组织中上述各指标的表达关系,分析卵巢癌组织中WWOX蛋白、Elf5表达与卵巢癌患者预后的关系。结果 WWOX蛋白、Elf5和E-cadherin在卵巢癌组织中阳性表达率低、癌旁组织阳性表达率高,Snail1、N-cadherin、Vimentin在卵巢癌组织中阳性表达率高、癌旁组织中阳性表达率低;卵巢癌组织及癌旁组织中WWOX蛋白、Elf5、Snail1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达相比,P均<0.05。卵巢癌组织中上述指标的表达水平与上皮性卵巢癌病理分期、病理学分级及淋巴结转移有关(P均<0.05)。卵巢癌组织WWOX蛋白与Elf5的表达呈正相关(r=0.291,P<0.05),WWOX蛋白与Snail1、N-cadherin、Vimentin的表达呈负相关(r分别为-0.785、-0.482、-0.706,P均<0.05),WWOX蛋白与E-cadherin表达呈正相关(r=0.759,P<0.05),Elf5与Snail1、N-cadherin、Vimentin的表达呈负相关(r分别为-0.816、-0.465、-0.738,P均<0.05),Elf5与E-cadherin表达呈正相关(r=0.726,P<0.05)。卵巢癌组织中WWOX蛋白与Elf5阳性表达的患者生存率高于阴性者(P<0.05);卵巢癌组织中WWOX蛋白和Elf5的表达均为影响卵巢癌患者预后的独立因素(P均<0.05)。结论上皮性卵巢癌患者卵巢癌组织中WWOX蛋白、转录因子Elf5和Snail1、EMT标志分子的表达发生变化,而且其表达存在相关性,WWOX蛋白及Elf5的表达与上皮性卵巢癌患者的生存及预后相关。

转染ELF5mRNA对子宫内膜癌细胞凋亡及周期的影响

目的:检测人子宫内膜癌Ishikawa细胞转染pc DNA3.1-ELF5+EGFP后ELF5基因的表达,并观察其对Ishikawa细胞凋亡情况及周期变化的影响。方法:通过脂质体介导的方法将pc DNA3.1-ELF5+EGFP真核细胞表达载体体外转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞,设立实验组(转染pc DNA3.1-ELF5+EGFP真核载体)、空质粒组(转染pc DNA3.1-EGFP空载体)、空白对照组(未经转染的Ishikawa细胞)。体外实验:用qRT-PCR法检测子宫内膜癌Ishikawa细胞中ELF5mRNA的表达情况,MTT法检测ELF5mRNA对Ishikawa细胞增殖的影响,流式细胞仪检测三组细胞周期及凋亡情况,Western blot法检测三组肿瘤组织的细胞周期调控蛋白P21及凋亡调控因子Caspase-3表达情况的变化。体内实验:将三组细胞分别接种于NOD/SCID雌性裸鼠,观察肿瘤生长情况及测定成瘤能力,应用TUNEL法检测三组肿瘤组织细胞凋亡的情况,采用蛋白印迹法检测三组肿瘤组织的细胞周期调控蛋白P21及凋亡调控因子Caspase-3表达情况的变化。结果:重组质粒pc DNA3.1-ELF5+EGFP成功转染至子宫内膜癌Ishikawa细胞;重组质粒组细胞ELF5mRNA的表达明显高于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重组质粒组各时间点的细胞增殖能力较较其他两组明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);重组质粒组G_0/G_1期的细胞比例均高于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重组质粒组细胞凋亡率分别与空质粒组及空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);重组质粒组细胞中P21及Caspase-3的表达明显高于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。重组质粒组裸鼠体内的成瘤能力(瘤组织最大直径、重量)明显低于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);重组质粒组裸鼠体内瘤组织细胞凋亡率分别与空质粒组及空白对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);(9)重组质粒组裸鼠体内瘤组织P21及Caspase-3的表达明显高于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ELF5基因可抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖,将细胞周期阻滞于G_0/G_1期,并诱导其凋亡,其机制可能与P21及Caspase-3有关。

ELF5基因对人卵巢癌细胞侵袭转移和大鼠移植瘤生长的抑制作用及其机制

目的探讨ELF5基因对人卵巢癌细胞侵袭转移和大鼠移植瘤生长的抑制作用以及可能的机制。方法体外实验:人卵巢癌细胞随机分为重组质粒组、空质粒组、未经转染组,重组质粒组、空质粒组分别转染构建好的pcDNA3.1-ELF5+EGFP真核表达载体、空载质粒pcDNA3.1-EGFP,未经转染组未经任何转染。Q-PCR法检测各组ELF5 mRNA的相对表达量,Western blotting法检测基质金属蛋白酶MMP-2及MMP-9蛋白的相对表达量;Traswell试验评价ELF5对卵巢癌细胞侵袭转移的影响。体内试验:建立人卵巢癌NOD/SCID鼠左前肢腋下移植瘤模型,应用随机数字表法将大鼠分为3组,即重组质粒大鼠组(转染pcDNA3.1-ELF5+EGFP的人卵巢癌细胞)、空质粒大鼠组(转染空载质粒的人卵巢癌细胞)、未经转染大鼠组(未经转染的人卵巢癌细胞),将处于对数生长期的3组细胞2×104/m L接种于NOD/SCID小鼠左前肢腋下。对比3组小鼠的移植瘤质量和体积,计算各组小鼠肿瘤抑制率(首先对转移瘤行HE染色进行病理组织学检查以确定其致瘤性)。Western blotting法检测3组NOD/SCID小鼠移植瘤组织中MMP-2及MMP-9蛋白的相对表达量。结果人卵巢癌细胞转染pcDNA3.1-ELF5+EGFP真核表达载体后,可稳定表达,且于72 h后转染率较高;与空质粒组和未经转染组比较,重组质粒组MMP-2及MMP-9蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。Transell试验中,重组质粒组穿膜细胞数少于空质粒组及未经转染组(P均<0.05)。重组质粒大鼠组抑瘤率达64.4%。重组质粒大鼠组与其余两组比较,其瘤组织中MMP-2及MMP-9蛋白相对表达量降低(P<0.05),而空质粒大鼠组和未经转染大鼠组比较,P均>0.05。结论 ELF5基因可能通过抑制MMP-2及MMP-9的表达而降低卵巢癌细胞的侵袭转移能力。

子宫内膜癌组织中Elf5的表达变化及意义

目的探讨Elf5在子宫内膜癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选取子宫内膜癌组织84例份、子宫内膜不典型增生组织30例份和正常子宫内膜组织30例份,用免疫组化法检测Elf5在不同内膜组织中的表达情况,分析其与子宫内膜癌患者各临床病理指标的相关性;对所有子宫内膜癌患者进行术后随访,采用KaplanMeier进行生存分析,Cox比例风险回归模型进行子宫内膜癌多因素分析。结果 (1)子宫内膜癌组织Elf5阳性表达率低于正常子宫内膜组织及不典型增生子宫内膜组织(χ2分别为5.787、1.614,P均<0.05);(2)Elf5的表达与FIGO分期、病理分级、病理类型、淋巴结转移和肌层浸润深度有关(P均<0.05);(3)Kaplan-Meier生存分析显示,Elf5阴性表达患者的平均生存时间短于阳性表达患者(P<0.05);(4)Cox回归分析显示FIGO分期、病理分级、肌层浸润深度、淋巴结转移及Elf5与子宫内膜癌患者预后有关(P均<0.05),其中Elf5是子宫内膜癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中Elf5表达降低,其水平降低与子宫内膜癌发生发展及预后相关。

转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化

目的观察转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、周期、凋亡及成瘤能力变化。方法将人卵巢癌干细胞(具有CD133+、CD117+特征的人卵巢癌细胞株HO8910)分为重组质粒组、空质粒组和空白对照组,重组质粒组转染真核细胞表达载体pc DNA3.1-ELF5+EGFP,空质粒组转染空载质粒pc DNA3.1-EGFP,空白对照组不做转染;分别于培养24、48、72、96 h后采用CCK-8法观察细胞增殖能力,于培养48 h后采用流式细胞仪观察细胞周期分布情况、测算细胞凋亡率,于培养48 h后采用Western blotting法检测各组细胞中的p21、Caspase-3蛋白。将重组质粒组、空质粒组和空白对照组细胞分别接种于雌性裸鼠右腋窝皮下制作卵巢癌移植瘤,每组接种5只;待移植瘤形成后取肿瘤组织,测量肿瘤最大直径及质量,测算细胞凋亡率,检测细胞中的p21、Caspase-3蛋白。结果重组质粒组培养24、48、72、96 h后细胞增殖能力较空质粒组和空白对照组明显下降(P均<0.05)。重组质粒组中阻滞于G0/G1期的细胞比例、细胞凋亡率及细胞中p21、Caspase-3蛋白相对表达量均高于空质粒组和空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组移植瘤最大直径和肿瘤质量小于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组移植瘤组织中细胞凋亡率及p21、Caspase-3蛋白相对表达量高于空质粒组和空白对照组(P均<0.05)。结论转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖受抑制、细胞周期阻滞、细胞凋亡增多、成瘤能力减弱,机制可能与p21、Caspase-3蛋白表达上调有关。

Elf5mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Elf5mRNA在卵巢上皮性癌组织中的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR技术检测49例卵巢上皮性癌、19例卵巢交界性上皮性肿瘤、31例卵巢良性上皮性肿瘤及40例正常卵巢组织中Elf5mRNA的表达,并分析Elf5mRNA与卵巢上皮性癌组各临床病理指标的相关性。结果Elf5mRNA在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为18.4%、36.8%)及表达水平(分别为0.28±0.04、0.52±0.08)均显著低于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为67.7%、72.5%和0.85±0.07、0.86±0.06,P<0.05);且Elf5mRNA在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平与病理分期和淋巴结转移有明显的相关性(P<0.05)。结论 Elf5mRNA在卵巢上皮性癌组织中呈低表达,其不同程度的表达缺失与卵巢上皮性癌的发生、发展有关。

ELF5在乳腺癌的表达及意义

目的研究E74-like factor 5 (ELF5)在乳腺癌的表达,探讨ELF5的表达与不同分型乳腺癌预后的关系。方法利用Oncomine数据库挖掘ELF5在乳腺癌组织中的表达;利用Kaplan-Meier Plotter分析ELF5表达水平与雌激素受体阳性/阴性表达乳腺癌生存的关系。结果 Oncomine数据库分析ELF5在乳腺癌中表达降低(P=8.29e^(-10));KM plotter数据库分析结果显示ELF5表达量与雌激素受体阳性表达的乳腺癌无复发生存(RFS)呈正相关,即高表达ELF5的患者无复发生存较高(P=0.008)。结论 ELF5在乳腺癌组织中表达低于癌旁正常组织,其表达水平越高预后越好。

谷子eIF5A基因家族鉴定与分析

【目的】本文系统分析了谷子e IF5A基因家族在谷子中如何发挥作用。【方法】利用谷子基因组数据库,运用生物信息学方法,鉴定谷子e IF5A基因家族的基因结构、染色体定位、编码蛋白和磷酸化位点预测,通过序列比对进行进化和分类分析。【结果】谷子含有4个e IF5A基因,均含有4个内显子,分布于谷子的3条染色体上。MEME保守基序分析显示,谷子e IF5A蛋白均含有1个保守的DNA结合寡核苷酸结合结构域(PF01287)。磷酸化位点预测分析表明谷子e IF5A蛋白均含有大量潜在磷酸化位点。【结论】以上结果将为今后揭示谷子e IF5A蛋白功能提供重要的线索。

牛eIF5基因原核表达与蛋白纯化

研究应用PCR方法扩增牛e IF5基因编码序列,通过Eco RⅠ和SalⅠ酶切位点将其定向插入p GEX-4T-1载体,构建原核表达重组质粒p GEX-4T-1-e IF5,并转化大肠埃希菌BL21。酶切和测序鉴定正确后,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,利用GST-Sepharose 4B亲和珠纯化,SDS-PAGE和Western Blot鉴定。结果表明,原核表达载体p GEX-4T-1-e IF5构建成功,Western Blot证实融合蛋白大量表达,纯化后获得GSTe IF5融合蛋白,为深入研究牛e IF5蛋白功能奠定基础。

C1orf106, an innate immunity activator, is amplified in breast cancer and is required for basal-like/luminal progenitor fate decision

Basal-like breast cancer with a luminal progenitor gene expression profile is an aggressive subtype of breast cancer with a poorer prognosis compared with other subtypes.However,genes that specifically promote basal-like breast cancer development remain largely unknown.Here,we report that a novel gene C1orf106 plays an important role in maintaining the feature of basal-like/luminal progenitors.C1orf106 is frequently amplified and overexpressed in basal-like breast cancer and is associated with a poor outcome in patients.In human TCGA database,C1orf106 expression was correlated with upregulation of ELF5 and downregulation of GATA3,two transcription factors that regulate mammary gland stem cell fate.Enhanced expression of C1orf106 promotes tumor progression and expression of basal-like/luminal progenitor marker ELF5;depletion of C1orf106 suppresses tumorigenesis and expression of basal-like/luminal progenitor marker GATA3.These findings suggest that C1orf106 maintains the basal-like/luminal progenitor character through balancing the expression of ELF5 and GATA3.Taken together,we demonstrated that C1orf106 is an important regulator for basal-like/luminal progenitors and targeting C1orf106 is of therapeutic value for breast cancer.