氩激光对培养的牛视网膜色素上皮细胞损伤的扫描电镜观察

目的采用扫描电镜观察氩激光对体外培养的牛视网膜色素上皮(RPE)细胞表面的损伤情况。方法培养牛视网膜色素上皮细胞,将第4代细胞传代成融合状态后,用氩激光对RPE细胞进行照射,激光能量为0.8W,曝光时间为0.2s,光斑直径为200μm,激光照射后用扫描电镜观察色素上皮细胞表面超微结构变化。结果激光照射后,可见光斑中央区的细胞脱失,光斑周边损伤细胞主要表现为表面微绒毛的减少或消失,微绒毛卷曲,有些细胞边缘卷曲及细胞膜破裂出现不规则小孔。结论激光对体外培养的RPE细胞照射可造成色素上皮细胞脱失,细胞膜损伤及微绒毛损伤。

糖基化终产物对内皮细胞过氧化物酶体增生物活化受体表达的影响

目的 探讨糖基化终产物 (AGEs)对内皮细胞过氧化物酶体增生物活化受体 (PPAR)表达的影响。 方法 以体外培养的人内皮细胞系 (ECV) 30 4为研究对象 ,应用RT PCR、Western印迹方法观察不同浓度AGEs对内皮细胞PPARα、PPARγ表达的影响。 结果 ECV 30 4有PPARγ、PPARα的基础表达 ,AGEs可使PPARγ的mRNA及蛋白表达上调。 结论 AGEs对PPAR表达具有上调作用 ,可能参与糖尿病致动脉粥样硬化的病理过程。

尿中性肽链内切酶:一种新的肾小管损伤指标

目的:建立尿中性肽链内切酶(NEP)检测方法,并应用于肾小管损伤的判断。方法:应用三明治ELISA法和荧光法检测尿NEP,对两种方法的检测效果予以评价,并比较两种方法在帮助诊断肾小管疾病中的符合率及差异性。对各种肾脏疾病患者与正常对照组尿NEP进行比较,并在各组内对尿NEP与其他代表肾小管损伤的指标进行比较。结果:两者符合率大致相等,在各组中两种方法检测结果的差异无显著性。在急性肾小管损伤组中,尿NEP明显高于正常对照组;在慢性肾小管损伤组、马兜铃酸肾病组、慢性肾功能衰竭组,尿NEP均明显低于正常对照组,且尿NEP与尿微量蛋白呈不同程度的负相关;在单纯肾小球疾病组,尿NEP与正常对照组差异无显著性,与尿微量蛋白不相关。结论:尿NEP在肾脏疾病的不同病程中出现双向的变化,当结合其他尿微量蛋白检测时,可以帮助判断肾小管损伤处于急性期还是慢性期,从而有助于选择治疗方案和评估预后。

肝再生增强因子在缺血再灌注肾损伤中的表达及其对p38信号通路的影响

目的:观察缺氧及缺氧复氧状态下大鼠肾小管上皮细胞中肝再生增强因子(Augmenter of liver regeneration,ALR)的表达变化,以及对细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kincses,MAPK)信号通路的影响,探讨ALR对肾脏保护的作用机理。方法:将体外培养的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分组,在三气培养箱中缺氧不同的时间(2、4、8、12、18、24 h),复氧(12、24 h),Western blot法检测细胞ALR的蛋白表达,RT-PCR法检测细胞ALR mRNA的表达。缺氧不同的时间(0、15、30、60 min),并在缺氧15 min的细胞中设立对照组r,ALR干预组(20、100μg的rALR)及抑制剂干预组,Western blot检测细胞p38MAPK蛋白的表达。结果:(1)正常培养NRK52E细胞中有ALR mRNA表达,缺氧4 h后,ALR mRNA表达较正常对照显著增加(n=7,P<0.01)。(2)缺氧培养细胞12 h,细胞中ALR蛋白表达量显著高于正常对照组,于18 h达高峰(n=7,P<0.01)。(3)缺氧4 h,复氧12、24 h,ALR mRNA及蛋白表达较正常对照组明显增加。(4)缺氧15 min时p38MAPK蛋白表达最强,低剂量rALR(20μg)能够显著抑制p38MAPK通路的激活,而高剂量rALR(100μg)的抑制作用减弱。结论:缺氧及缺氧复氧均能诱导大鼠肾小管上皮细胞表达ALR增加,其中缺氧复氧能较早激活ALR表达,低浓度的外源性rALR减弱p38MAPK通路的表达,提示ALR对缺氧再灌注损伤大鼠肾小管上皮细胞有保护作用。

VEGF及受体在颌面部血管瘤和血管畸形中表达及意义

目的 检测细胞因子血管内皮生长因子(VEGF),血管内皮生长因子受体(VEGFR/KDR)及VEGF mRNA在颌面部血管瘤和血管畸形中的表达,探讨VEGF及其受体与血管瘤发病机制的关系。方法 采用二步EnVision免疫组织化学方法,分别检测27例血管瘤和15例血管畸形组织中VEGF和VEGF/KDR表达;同时采用原位杂交Gene Point法检测VEGF mRNA的表达。结果 VEGF和VEGFR/KDR在血管瘤中高表达,而在血管畸形组中低表达,两者有显著差异(P<0.01);VEGF和VEGF mRNA在血管瘤细胞及周围间质细胞明显表达,VEGFR/KDR主要表达于血管瘤中内皮细胞膜上。结论 VEGF可通过自分泌和旁分泌的形式影响血管瘤内皮细胞的增殖,可能与血管瘤发生、发展和退化有密切相关。