FOXM1上调ELK1介导铁死亡促进宫颈癌细胞顺铂耐药性

目的探讨FOXM1通过ELK1对宫颈癌细胞顺铂(DDP)耐药性的影响及其潜在机制。方法生物信息学分析FOXM1和ELK1在宫颈癌组织中的表达;qPCR检测FOXM1和ELK1在宫颈癌细胞中的表达;双荧光素酶报告基因实验、ChIP实验验证二者结合情况。GSEA分析ELK1富集通路;Pearson相关性分析ELK1和抑制铁死亡关键基因的相关性。CCK-8检测细胞活力;PI染色及流式细胞术检测细胞凋亡情况。透射电镜观察线粒体形态变化;Lipid Peroxidation(MDA)Assay试剂盒检测丙二醛(MDA)含量;Werstern blot检测GPX4、SLC7A11、ACSL4蛋白表达。结果ELK1与FOXM1在宫颈癌组织和细胞中显著高表达,且二者存在结合位点。与oe-NC组相比,oe-ELK1组细胞存活率和IC50值显著提高;而与si-NC组相比,si-ELK1组细胞存活率和IC50值显著降低。与oe-NC+DMSO组相比,oe-ELK1+DMSO组线粒体没有出现萎缩、线粒体脊减少情况;而与oe-ELK1+DMSO组相比,oe-ELK1+erastin组线粒体出现了明显的萎缩、线粒体脊减少甚至消失现象。与oe-NC+DMSO组相比,oe-ELK1+DMSO组细胞内MDA含量显著降低,GPX4、SLC7A11蛋白表达增加,ACSL4蛋白表达降低,进一步用erastin处理则逆转了这一现象。与oe-NC+DMSO组相比,oe-ELK1+DMSO组CaSki/DDP细胞的IC50值显著提高,而erastin处理能够减弱这一促进作用。此外,与si-NC+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-NC组线粒体出现了明显的萎缩、线粒体脊减少甚至消失现象;而与si-FOXM1+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-ELK1组线粒体形态得到恢复。与si-NC+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-NC组细胞内MDA含量显著提高,GPX4、SLC7A11蛋白表达显著降低,ACSL4蛋白表达显著提高;而与si-FOXM1+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-ELK1组细胞内MDA含量显著降低,GPX4、SLC7A11蛋白表达显著提高,ACSL4蛋白表达显著降低。与si-NC+oe-NC组相比,si-FOXM1+oe-NC转染抑制了不同浓度DDP处理CaSki/DDP细胞的IC50值,而同时oe-ELK1转染能够逆转这一抑制作用。结论FOXM1通过上调ELK1的表达介导铁死亡,进而促进宫颈癌细胞DDP耐药。

子宫内膜癌组织中GPX4、ELK1表达变化及其与上皮—间充质转化和预后的关系

目的 观察子宫内膜癌(EC)组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、含ETS域转录因子Elk1(ELK1)表达变化,分析二者与上皮—间充质转化(EMT)及预后的关系。方法 EC患者90例,留取肿瘤组织与癌旁正常组织,采用免疫组化法检测GPX4、ELK1蛋白,采用实时荧光定量PCR法检测GPX4 mRNA、ELK1 mRNA及EMT相关基因[E-钙黏素(E-cad)、N-钙黏素(N-cad)、碱性螺旋—环—螺旋转录因子(TWIST)mRNA]。采用Pearson相关分析法分析EC组织中GPX4 mRNA、ELK1 mRNA与E-cad mRNA、N-cad mRNA、TWIST mRNA表达的相关性。采用R软件分析癌症基因组图谱数据库中EC的RNA-seq数据,绘制Kaplan-Meier曲线,比较不同GPX4、ELK1 mRNA表达情况EC患者的预后。结果 EC组织中GPX4、ELK1蛋白阳性表达率高于癌旁组织(P均<0.05)。EC组织中GPX4、ELK1、N-cad、TWIST mRNA表达高于癌旁组织,E-cad mRNA表达低于癌旁组织(P均<0.05)。EC组织中GPX4 mRNA与ELK1 mRNA表达呈正相关;GPX4 mRNA、ELK1 mRNA表达与E-cad mRNA表达呈负相关,与N-cad mRNA、TWIST mRNA表达呈正相关(P均<0.05)。EC组织中GPX4、ELK1 mRNA表达与FIGO分期、组织学分级和淋巴结转移有关,FIGO分期越高、组织学分级越高、有淋巴结转移者肿瘤组织中GPX4、ELK1 mRNA表达更高(P均<0.05)。GPX4 mRNA高表达组、ELK1 mRNA高表达组5年总生存率分别低于低表达组(P均<0.05)。结论 EC组织中GPX4、ELK1呈高表达,二者表达与EMT、患者预后有关,有望成为EC患者预后评估的标志物。

ELK1在恶性肿瘤中的作用及调控机制的研究进展

ETS蛋白质家族由28个转录因子组成,ELK1是ETS转录因子家族和三元复合因子(ternary complex factor, TCF)亚家族成员。越来越多的研究显示,ELK1参与多种分子生物学进程,并且与人类恶性肿瘤的发生、发展、侵袭、转移等密切相关。本文通过总结ELK1在多种恶性肿瘤中的生物学过程,重点探讨其在人类恶性肿瘤中的主要功能和牵涉到的相关信号通路,探讨其潜在的临床意义及应用前景,为癌症的诊断、治疗及筛选预后生物标志物提供理论基础及参考依据。

基于ELK组件的日志系统在地震行业中的应用

网络设备、网络安全设备以及业务应用系统的日志在网络运维中是排除设备系统故障的一个重要数据资源。然而大量日志数据分散存储在不同的设备中,不便于查看和使用,难以满足网络运维中快速发现问题、定位问题和解决问题的要求。因此,为了提高业务人员的网络运维能力,建设一个统一的日志收集、存储、处理系统很有必要。本文介绍了一套以ELK开源组件搭建的日志系统,并在地震行业网中进行了实际应用,实现了地震行业网内业务系统、安全设备、网络设备等日志的实时收集、存储、处理和展示功能。对实现细节进行了详细阐述,为该架构的推广应用提供了典型示范。

SLP-2和ELK1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的:探讨SLP-2和ELK1在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及临床意义。方法:选取60例PTC组织作为实验组,60例癌旁组织作为对照组,应用免疫组织化学方法检测两组SLP-2和ELK1的表达率,并结合临床病理特征进行相关性分析。结果:SLP-2和ELK1在癌组织中阳性表达率均高于癌旁组织;Spearman相关性检验显示二者蛋白表达在PTC癌组织中呈正相关;二者表达均与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及浸润程度等临床病理特征相关。结论:SLP-2和ELK1可能与甲状腺乳头状癌的发生、发展相关,可为甲状腺乳头状癌的诊断及治疗提供新依据及方向。

东北马鹿ELK1基因CDS序列克隆及其生物信息学分析

为探究东北马鹿ELK1基因CDS序列信息,试验进行了mRNA反转录、CDS序列扩增,测定ELK1基因CDS序列,克隆并构建蛋白表达载体,利用生物信息学方法对该基因编码的蛋白质结构及理化性质等进行了预测与分析。结果表明:东北马鹿ELK1基因转录产物CDS序列全长为1323 bp(GenBank登录号为ON212657),编码440个氨基酸,分子量为46200.42 u。核酸序列具有进化保守性,与牛ELK1基因同源性最高,为97.99%。ELK1多肽链具有亲水性,没有分泌信号肽结构,等电点为5.81,蛋白质为不稳定蛋白。ELK1蛋白的二级结构由无规则卷曲、α-螺旋、延伸链、β-折叠组成,存在ETS DNA结合域,亚细胞定位于细胞核。

小檗碱通过调控ELK-3抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化

[目的]研究小檗碱与ELK-3和人肝癌细胞的上皮-间质转化的关系及其作用机制。[方法]将HuH7细胞分为空转组、pcDNA3.1-ELK-3组、小檗碱组和小檗碱+pcDNA3.1-ELK-3组。荧光倒置显微镜观察慢病毒转染后的细胞荧光状态;蛋白免疫印迹法(Western Blot)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ELK-3和ELK-3靶基因重组人早期生长反应蛋白-1(EGR-1)蛋白和基因表达量,上皮-间质转化相关分子钙黏附素E和波形蛋白的基因和蛋白表达量,以及乙型转化生长因子-1(TGF-β1)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中TGFβ1、细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)、p38、磷酸化p38(p-p38)蛋白表达量;细胞划痕实验和体外Transwell小室实验观察HuH7细胞迁移和侵袭能力。[结果]与空转组比较,小檗碱组的ELK-3、EGR-1和波形蛋白的基因和蛋白表达量显著降低(P<0.05),钙黏附素E基因和蛋白表达量显著增加(P<0.05),TGF-β1蛋白和p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38/p38蛋白比值显著降低(P<0.05),细胞迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05),而pcDNA3.1-ELK-3组的结果与之相反。与pcDNA3.1-ELK-3组比较,小檗碱+pcDNA3.1-ELK-3组的ELK-3、EGR-1和波形蛋白的基因和蛋白表达量显著降低(P<0.05),钙黏附素E蛋白和基因表达量显著增加(P<0.05),TGF-β1蛋白和p-ERK1/2/ERK1/2和p-p38/p38蛋白比值显著降低(P<0.05),并且细胞迁移和侵袭能力显著降低(P<0.05)。[结论]小檗碱可通过减少ELK-3的表达量,从而抑制人肝癌细胞的上皮-间质转化。

EU 2021/646《紧急车道保持系统(ELKS)》法规解读

随着社会经济的发展,乘用车、轻型商用车在社会生产生活中扮演着重要的角色,装有紧急车道保持系统(ELKS)的车辆能有效避免驾驶员无意识的车道偏离,减少事故的发生。文章从标准制定的必要性以及主要技术内容作为切入点,对ELKS法规进行详细解读,并提出标准实施的相关建议。

榄香烯乳对人宫颈癌Hela细胞转录因子ELK1及其靶基因的影响

目的观察中药榄香烯乳对人宫颈癌Hela细胞转录因子ELK1及其靶基因的影响,以深入了解榄香烯乳的抗癌机制。方法用MTT法检测药物对细胞的抑制作用,双荧光素酶报告系统检测药物对转录因子ELK1的影响,Western Blot检测磷酸化ELK1及其靶基因c-fos表达。结果榄香烯乳能明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长,其半数生长抑制剂量为80.6μg/mL;榄香烯乳处理组荧光素酶活性下降,磷酸化的ELK1及其靶基因c-fos的表达均下调。结论榄香烯乳可能通过下调转录因子ELK1的磷酸化水平,抑制c-fos的表达,从而抑制人宫颈癌Hela细胞的生长。

ELK-3蛋白在肝癌组织中的表达及其对肝癌HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响

目的:探讨转录因子ELK-3与肝癌患者临床病理特征的关系及ELK-3对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响,并阐明其作用机制。方法:选取80例肝癌患者癌组织及49例癌旁正常组织石蜡标本、18例肝癌患者癌组织及癌旁正常组织新鲜术后标本,采用免疫组织化学法和Western blotting法检测ELK-3蛋白在肝癌及癌旁正常组织中的表达,探讨ELK-3与肝癌患者临床病理特征的关系。选取处于对数生长期的人肝癌HepG2细胞,设立对照组(control-siRNA)和ELK-3干扰组(ELK-3-siRNA),将ELK-3siRNA转染至HepG2细胞,通过细胞划痕实验及体外Transwell小室实验观察肝癌HepG2细胞的迁移和侵袭能力。结果:石蜡组织标本免疫组织化学染色,与癌旁正常组织比较,肝癌组织中ELK-3蛋白阳性表达率明显升高(P<0.05),且ELK-3蛋白阳性表达率与肝癌患者肿瘤数、TNM分期、Edmondson分级和门静脉浸润有关联(P<0.05)。新鲜术后标本Western blotting法检测,与癌旁正常组织比较,18例肝癌患者肝癌组织中ELK-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,ELK-3-siRNA组细胞的迁移距离明显变短(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05)。结论:ELK-3在肝癌组织中的表达水平明显升高。干扰ELK-3会抑制肝癌细胞的迁移和侵袭,表明ELK-3蛋白可以通过抑制肝癌细胞的迁移和侵袭对其产生影响,从而在肝癌发生发展过程中起重要作用。

干扰ELK-3抑制人肝癌细胞的上皮-间质转换

目的研究转录因子ELK-3与人肝癌细胞系Hep G2和Hu H7上皮-间质转换(EMT)的关系及其作用机制。方法将Hep G2和Hu H7细胞分为小干扰RNA转染组和Ras-ELK-3信号通路抑制剂(XRP44X)处理组。用Western blot检测ELK-3、ELK-3靶基因EGR-1以及EMT相关分子钙黏附素E(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达和MAPK信号通路蛋白p38的表达。结果 ELK-3干扰或Ras-ELK-3信号通路抑制剂(XRP44X)处理肝癌细胞后其ELK-3和ELK-3的靶基因EGR-1的蛋白表达均显著降低(P<0.01),E-cadherin表达水平升高(P<0.01),vimentin的表达及p38磷酸化水平均降低(P<0.01)。结论通过干扰ELK-3下调p38抑制EMT。

创伤性脑损伤大鼠半暗带脑组织中Elk1的表达及作用

目的探讨创伤性脑损伤(TBI)大鼠半暗带脑组织中ETS结构域包含蛋白Elk1的表达及作用。方法将80只Sprague Dawley大鼠随机分为假手术组、TBI组、TBI-siRNA组和TBI-空病毒载体组,每组20只。TBI组、TBIsiRNA组和TBI-空病毒载体组大鼠建立中度液压脑损伤模型,假手术组大鼠手术步骤与TBI组、TBI-siRNA组和TBI-空病毒载体组相同,但未实施液压冲击。TBI-siRNA组及TBI-空病毒载体组大鼠于造模前24 h分别经侧脑室注射10μL Elk1-siRNA慢病毒表达载体和空病毒载体,假手术组和TBI组大鼠经侧脑室注射10μL磷酸盐缓冲液。各组大鼠分别于脑损伤后12、24、72 h采用Shapira和Wahl脑损伤神经功能评分法评估神经功能,神经功能评估后快速断头处死大鼠(每个时间点每组选取5只大鼠),取脑组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测脑组织中Elk1 mRNA表达,Western blot法检测脑组织中Elk1蛋白表达,比色法检测脑组织中Caspase-3活性;各组大鼠脑损伤后24 h选取5只大鼠断头取脑组织,采用Fluoro-Jade染色法计数坏死神经元。结果大鼠脑损伤后12、24、72 h,TBI-空病毒载体组、TBI组大鼠神经功能评分显著低于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠神经功能评分高于TBI-空病毒载体组和TBI组(P<0.05),TBI-空病毒载体组与TBI组大鼠神经功能评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。大鼠脑损伤后12、24、72 h,TBI组和TBI-空病毒载体组大鼠损伤半暗带脑组织中Elk1 mRNA及蛋白相对表达量显著高于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠损伤半暗带脑组织中Elk1 mRNA及蛋白相对表达量显著低于TBI组和TBI-空病毒载体组(P<0.05),TBI-空病毒载体组与TBI组大鼠损伤半暗带脑组织中Elk1 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。脑损伤后24 h,假手术组、TBI组、TBI-空病毒载体组和TBI-siRNA组大鼠大脑皮层坏死神经元数目分别为4.0±1.0、32.0±4.0、33.0±3.0、16.0±2.0,TBI组、TBI-空病毒载体组大鼠大脑皮层半暗带坏死神经元数目显著多于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠大脑皮层坏死神经元数目显著少于TBI组和TBI-空病毒载体组(P<0.01),TBI组与TBI-空病毒载体组大鼠大脑皮层半暗带坏死神经元数目比较差异无统计学意义(P>0.05)。脑损伤后12、24、72 h,TBI-空病毒载体组、TBI组大鼠大脑皮层半暗带脑组织中Caspase-3活性显著高于假手术组(P<0.05),TBI-siRNA组大鼠损伤半暗带脑组织中Caspase-3活性显著低于TBI组和TBI-空病毒载体组(P<0.05),TBI-空病毒载体组与TBI组大鼠损伤半暗带脑组织中Caspase-3活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Elk1在TBI大鼠损伤半暗带脑组织中表达上调,抑制Elk1表达可减轻损伤半暗带神经元坏死,改善神经功能。

慢性房颤对风湿性心脏病心房肌细胞ELK-1、p-ELK-1表达的影响

目的研究风湿性心脏病慢性房颤患者心房肌细胞ELK-1、p-ELK-1的表达,探讨房颤发生与ELK-1、p-ELK-1表达之间的关系。方法12例风心病换瓣患者分为2组:①慢性房颤组(6例)房颤持续时间均>6个月,②窦性心律组(6例)为正常心律。手术中切取少许右心房游离壁组织采用免疫组化和间接免疫荧光技术检测心房肌ELK-1、p-ELK-1的表达与分布。结果①免疫组化显示ELK-1主要表达在心房肌细胞质和细胞核,慢性房颤心房肌较窦性心律心房肌表达明显减弱;②间接免疫荧光技术显示ELK-1在窦性心律心房肌细胞核表达相对较高,在房颤心房肌细胞核中表达明显受到抑制;p-ELK-1在房颤心房肌、窦性心律心房肌均表达受抑。结论转录激活因子ELK-1的表达改变可能在慢性房颤心房肌的分子重构中起着重要的作用。

沙利度胺联合顺铂对宫颈癌Hela细胞Elk1信号转导分子活性的影响

目的沙利度胺联合顺铂对宫颈癌Hela细胞的抑制激励及对Elk1信号转导分子活性的影响。方法本实验采用免疫组织化学(IHC)分析、荧光素酶活性检测、RT-PCR和Western Blot对沙利度胺联合顺铂处理后宫颈癌细胞的凋亡和Elk1转录因子的活性,以及Elk1、c-fos和caspase-8基因和蛋白的表达进行了检测和分析。结果沙利度胺联合顺铂处理后能显著的抑制Elk1转录因子的活性,显著下调Elk1和c-fos基因和蛋白的表达并显著上调caspase-8基因和蛋白的表达(P<0.05)。且沙利度胺联合顺铂的治疗效果要比它们单独使用更加显著(P<0.05)。结论沙利度联合顺铂具有抑制宫颈癌细胞的增殖和促进细胞凋亡的作用。

应用ELK构建图书馆日志统一管理分析平台

[目的/意义]建设统一高效的日志管理平台提升图书馆信息系统运维效率,同时为海量日志的数据挖掘提供强大的基础设施。[方法/过程]厦门大学图书馆采用ELK构建日志统一管理平台,并制定了日志管理整体规范。以该规范为基础,结合实际需求和应用,介绍日志统一管理平台在日志生成、收集、分析、展示等步骤的构建过程。[结果/结论]该平台在提升运维效率、减轻技术人员负担、缓解图书馆技术力量相对薄弱与在线服务日益增长的矛盾等方面效果显著。

基于Docker和Kubernetes的ELK日志分析系统的研究与实现

分析Web日志对溯源用户访问情况、监控Web服务运行状态十分重要。大数据环境下,日志处理的效率更加值得关注和研究。探讨ELK架构及工作原理,并基于Docker和Kubernetes环境部署ELK系统,建立相应的针对Nginx服务器日志收集、存储、处理以及可视化展示平台,实现对日志的实时采集与显示。实验结果验证了该方案的可行性,在提高日志分析系统的简便性、可扩展性、实时性、可读性等方面具有一定优势,能有效改善运维效率,减轻运维压力。

基于ELK的视频会议设备日志管理分析系统

现代企业组织结构越来越大,众多设备分散,且每天会生成海量日志文件,为了实时高效监控企业多地区多台视频会议设备的使用情况与运行状态,将分散储存的syslog日志集中管理分析,实时查询分析,克服传统日志分析管理效率低、不及时等问题。有别于传统日志本地保存、检索分析的模式,基于ELK开源项目,使用该数据处理工具链,通过研究其三个负责日志采集、实时检索、直观展现的组件,完成日志管理分析系统的部署。平台配置简单,免费开源。设计根据需求二次开发,能为企业日志实现日志集中收集、快速检索与直观分析,最终提升日志管理分析效率与质量。

基于ELK Stack网络安全日志可视化研究

网络安全可视化作为新兴研究领域利用视觉对图像的获取能力,将抽象的网络日志以图形的方式展现出来,以识别网络异常和入侵,预测网络安全事件的发展趋势,提升网络安全应急响应的针对性和实时性。ELK Stack作为一种开源的安全信息和事件管理实现框架,用于网络安全日志可视化具有较为明显的优势。首先介绍ELK Stack框架的核心组件,分析安全日志标准化解析及检索方法;再重点阐述日志监控与异常检测、特征分析、关联分析和态势感知等四个方面可视化分析技术;最后介绍ELK Stack框架在WAF安全日志可视化分析中的开发应用。

基于ELK的电力信息监控日志审计系统实现

为电力信息系统实现日志审计和日志分析,已经成为电力信息化管理部门首先需要解决的问题。本文设计并实现了一个基于ELK的电力信息监控日志审计系统。系统通过logstash、redis、elasticsearch实现对操作行为日志、设备运行日志、上网行为日志、维护记录日志的分布式采集存储,经过数据格式化、用户识别、会话识别、路径补充等于处理后,利用并行化的K-Means聚类算法对日志进行审计分析,发现和捕获海量日志中的异常行为和违规行为。实验表明,系统可以实现电力企业信息系统的安全审计功能。

基于ELK的Windows系统安全风险分析的研究探索

操作系统安全尤其是Windows操作系统安全广受重视,如何分析Windows系统运行情况、评估Windows系统安全风险,实现Windows系统安全威胁感知是网络安全研究的重要方向。本文以ELK为基础,从日志分析角度入手,建立海量实时日志分析平台,高效利用Windows系统事件日志,挖掘Windows事件日志价值,实现Windows系统日志审计与分析,完成系统安全风险评估与威胁感知。