期刊文献+
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
PCR-g-MMA胶粘剂的制备及粘接性能 被引量:8
1
作者 温翠珠 王炼石 张安强 《特种橡胶制品》 2006年第2期26-30,共5页
用乳液接枝聚合法合成了氯丁橡胶(OR)/甲基丙烯酸甲酯(MMA)接枝共聚物OR-g-MMA乳液;用凝聚法制备了粉末状PCR-g-MMA干胶,将其溶于甲苯中制备了胶粘剂。研究了CR/MMA接枝聚合反应条件对单体转化率的影响和PCR-g-MMA粒子在溶剂中... 用乳液接枝聚合法合成了氯丁橡胶(OR)/甲基丙烯酸甲酯(MMA)接枝共聚物OR-g-MMA乳液;用凝聚法制备了粉末状PCR-g-MMA干胶,将其溶于甲苯中制备了胶粘剂。研究了CR/MMA接枝聚合反应条件对单体转化率的影响和PCR-g-MMA粒子在溶剂中的溶解速率及其胶粘剂的粘接性能。结果表明,在适宜的反应条件下,接枝体系的单体转化率接近100%。SEM分析表明.PCR-g-MMA粒子表面及内部存在许多宏观及微观孔洞,使产物易于洗涤、脱水和干燥.在溶剂中有极高的溶解速率.完全溶解时间为0.5~1h。仅为片状CR248完全溶解所需时间的1/10。PCR—g—MMA胶粘剂的粘接性能与CR/MMA乳液接枝聚合反应条件有关。用其粘合PVC人造革.其初粘力为20.4N/2.5cm,剥离强度为55N/2.5cm,与片状CR248/MMA溶液接枝制备所得的胶粘剂处于相同水平。 展开更多
关键词 氯丁胶乳 甲基丙烯酸甲酯 乳液接枝聚合 pcr—g—MMA SEM 胶粘剂 粘接性能
下载PDF
乳液PCR扩增复杂基因序列的方法建立及普通PCR的比较 被引量:1
2
作者 章爱娣 徐敏轩 +1 位作者 韦婷 周东蕊 《南京晓庄学院学报》 2012年第6期69-72,共4页
该研究分析普通PCR的不足,通过较多实验研究初步建立乳液PCR方法,改善PCR实验技术.采用人工合成的乳酸杆菌质粒为模板,不同成分配比条件下的乳液PCR和普通PCR对质粒序列进行扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后对凝胶进行Gel... 该研究分析普通PCR的不足,通过较多实验研究初步建立乳液PCR方法,改善PCR实验技术.采用人工合成的乳酸杆菌质粒为模板,不同成分配比条件下的乳液PCR和普通PCR对质粒序列进行扩增,对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后对凝胶进行Gelred染色并用GS-800灰度扫描仪成像.进一步分析乳液PCR和普通PCR扩增产物的特异性以及不同成分配比条件下乳液PCR的扩增质量.通过比较两种PCR方法的扩增结果可得,在相同条件下,乳液PCR扩增特异性高于普通PCR扩增,并确定当水相中加入100 g/L BSA,水油体积比在1∶2.5时,破乳水饱和乙醚体积比为1∶1时,水油相在1700 rpm条件下连续混合5 min时扩增效果最好. 展开更多
关键词 乳液pcr 普通pcr BSA 破乳
下载PDF
乳液单引物PCR构建随机ssDNA文库方法的建立及优化
3
作者 邵可可 史新惠 +2 位作者 崔蕾蕾 马达 邵启祥 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第11期823-826,共4页
目的建立并优化乳液单引物PCR扩增法,高效构建高质量随机ss DNA文库,以提高从随机文库中筛选适配子的几率。方法构建长90 bp(含52 bp随机序列)寡核苷酸文库,用乳液PCR转换成ds DNA文库,再以ds DNA文库为模板,分别用乳液单引物PCR和常... 目的建立并优化乳液单引物PCR扩增法,高效构建高质量随机ss DNA文库,以提高从随机文库中筛选适配子的几率。方法构建长90 bp(含52 bp随机序列)寡核苷酸文库,用乳液PCR转换成ds DNA文库,再以ds DNA文库为模板,分别用乳液单引物PCR和常规单引物PCR扩增制备ss DNA文库,并对二者进行比较。通过改变模板、聚合酶、d NTP和引物浓度优化乳液单引物PCR反应条件。结果乳液PCR能高效扩增出ds DNA文库且无副产物;常规单引物PCR构建ss DNA文库时,15个循环时即有大量副产物产生,且与产物条带混合一起无法分离;而乳液单引物PCR从15~35个循环均无副产物生成,且产物量多于常规单引物PCR。在优化乳液单引物PCR时,模板浓度对产物量影响最大,引物浓度对副产物的量影响最大。结论乳液单引物PCR能显著提高产物量并控制副产物的量,可提高指数富集配体进化(SELEX)技术筛选效率。 展开更多
关键词 乳液pcr 乳液单引物pcr 适配子 指数富集配体进化技术 随机ss DNA文库
下载PDF
一种基于反相微乳液的数字PCR微滴的制备方法
4
作者 童石渊 冯继宏 白桦娟 《北京生物医学工程》 2017年第5期517-519,523,共4页
目的提出一种新型的微滴生成方式——油包水(W/O)包裹技术,为数字PCR实验过程中微滴的制备提供一种更便捷的方式。方法通过配制一定比例的特定油相以及包含模板DNA等反应物的特定水相,在不同条件下形成W/O微滴,并进行PCR反应。结果所形... 目的提出一种新型的微滴生成方式——油包水(W/O)包裹技术,为数字PCR实验过程中微滴的制备提供一种更便捷的方式。方法通过配制一定比例的特定油相以及包含模板DNA等反应物的特定水相,在不同条件下形成W/O微滴,并进行PCR反应。结果所形成的微滴粒径大小均匀,并且在进行PCR反应过程中热力学性能保持不变,微滴不会因温度升降而破裂,适合于数字PCR中微滴的制备。结论生成的微滴可以有效地使模板DNA进行扩增反应。 展开更多
关键词 数字pcr 微滴式dpcr 油包水 微滴生成 电泳 脱氧核糖核酸
下载PDF
鸡毒支原体油乳剂灭活苗对降低鸡毒支原体垂直传播作用的研究 被引量:6
5
作者 宋勤叶 张中直 +1 位作者 张冰 陈德威 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期285-290,共6页
本试验将 30只MG阴性的 2 0周龄的蛋种鸡随机分为 4组 ,Ⅰ组于 2 1和 2 5周龄、Ⅱ组仅于 2 5周龄时分别颈部皮下接种MG油乳剂灭活苗 0 5ml/只 ,Ⅲ组于攻毒后 1周接种 1ml/只 ,另设一组对照 ,不接种疫苗。各组均在 2 9周龄时用通过SPF... 本试验将 30只MG阴性的 2 0周龄的蛋种鸡随机分为 4组 ,Ⅰ组于 2 1和 2 5周龄、Ⅱ组仅于 2 5周龄时分别颈部皮下接种MG油乳剂灭活苗 0 5ml/只 ,Ⅲ组于攻毒后 1周接种 1ml/只 ,另设一组对照 ,不接种疫苗。各组均在 2 9周龄时用通过SPF鸡两次复壮的MG BG4 4T株经左胸气囊和鼻腔攻毒。收集攻毒后 1~ 7周内所产的蛋 ,用PCR方法检测鸡蛋卵黄膜中的MG。结果在攻毒后 7周内各免疫组 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )的垂直传播率显著低于对照组 (P<0 .0 1) ,分别比对照组低 2 6 37%、12 8%、13 6 4 %。攻毒后各免疫组和对照组经 4次采样均可从喉头拭子中分离到MG但免疫组的分离率较低。攻毒后第 7周从对照组鸡的气管、肺、气囊中均可分离到MG ,而试验Ⅰ组仅在气管和肺中分离到了MG。试验Ⅰ组和对照组鸡的输卵管、心、肝、脾和肾中均未分离到MG。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 油乳剂灭活苗 垂直传播
下载PDF
用于高通量测序的基因组靶序列捕获方法的建立 被引量:2
6
作者 陈丹 张雯 +6 位作者 朱智东 黄银 王平 周贝贝 杨晓楠 肖华胜 张庆华 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1296-1303,共8页
文章旨在建立一种基因组目标靶序列捕捉文库的方法,并结合第二代测序技术,以实现候选基因区段的深度测序。利用Agilent公司的eArray在线平台,对1250个基因的11824个外显子共2414977bp的基因组序列进行120个碱基长度的捕捉探针(钓饵)设计... 文章旨在建立一种基因组目标靶序列捕捉文库的方法,并结合第二代测序技术,以实现候选基因区段的深度测序。利用Agilent公司的eArray在线平台,对1250个基因的11824个外显子共2414977bp的基因组序列进行120个碱基长度的捕捉探针(钓饵)设计,并制备成SureSelect液相靶序列捕获试剂。选用2例人基因组DNA,超声打断后末端补平并磷酸化,连接SOLiD接头,回收150bp~200bp的DNA片段,与靶序列探针杂交捕获目标序列,油包水微乳滴PCR扩增后,磁珠分离富集,上SOLiD测序系统通过工作流程分析(WFA)进行文库质量的评价,或正式测序反应。结果显示对所包含的11147个基因外显子片段设计出并合成了46509个捕捉探针,制备成SureSelect试剂盒。探针可有效地捕捉并富集基因组DNA的目标靶片段,定量PCR显示富集效率可达29倍。WFA分析表明文库可以在SOLiD仪器进行正式测序。测序结果显示靶序列区域的测序数占有效总测序数的比例达到70%,覆盖率均在200×以上。结果表明本研究所建立的SureSelect基因组靶序列捕捉、富集建立测序文库的技术路线可行,可直接用于SOLiD测序仪的测序。 展开更多
关键词 靶序列捕获 第二代测序 液相杂交 油包水pcr
下载PDF
Next-generation sequencing in clinical virology: Discovery of new viruses 被引量:6
7
作者 Sibnarayan Datta Raghvendra Budhauliya +3 位作者 Bidisha Das Soumya Chatterjee Vanlalhmuaka Vijay Veer 《World Journal of Virology》 2015年第3期265-276,共12页
Viruses are a cause of significant health problem world-wide, especially in the developing nations. Due to different anthropological activities, human populations are exposed to different viral pathogens, many of whic... Viruses are a cause of significant health problem world-wide, especially in the developing nations. Due to different anthropological activities, human populations are exposed to different viral pathogens, many of which emerge as outbreaks. In such situations, discovery of novel viruses is utmost important for deciding prevention and treatment strategies. Since last century, a number of different virus discovery methods, based on cell culture inoculation, sequence-independent PCR have been used for identification of a variety of viruses. However, the recent emergence and commercial availability of nextgeneration sequencers(NGS) has entirely changed the field of virus discovery. These massively parallel sequencing platforms can sequence a mixture of genetic materials from a very heterogeneous mix, with high sensitivity. Moreover, these platforms work in a sequenceindependent manner, making them ideal tools for virus discovery. However, for their application in clinics, sample preparation or enrichment is necessary to detect low abundance virus populations. A number of techniques have also been developed for enrichment or viral nucleic acids. In this manuscript, we review the evolution of sequencing; NGS technologies available today as well as widely used virus enrichment technologies. We also discuss the challenges associated with their applications in the clinical virus discovery. 展开更多
关键词 pcr Next-generation sequencers VIRUS DISCOVERY Sequence-independent single-primer AMPLIFICATION VIRUS DISCOVERY based on CDNA-AFLP Rolling circle AMPLIFICATION METAGENOMICS
下载PDF
大规模并行焦磷酸测序技术简介
8
作者 范少轻 栗彦宁 齐锦生 《医学综述》 2008年第20期3055-3057,共3页
在后基因组时代,基因研究的焦点已经转移到每个人的基因组,因此迫切需要高通量的测序方法。近几年,出现了基于焦磷酸的新测序方法——大规模并行焦磷酸测序技术。在这项技术中,双链DNA首先被片段化,每单个寡核苷酸链分子结合到磁珠支持... 在后基因组时代,基因研究的焦点已经转移到每个人的基因组,因此迫切需要高通量的测序方法。近几年,出现了基于焦磷酸的新测序方法——大规模并行焦磷酸测序技术。在这项技术中,双链DNA首先被片段化,每单个寡核苷酸链分子结合到磁珠支持物上,用乳液PCR对结合的片段进行扩增。扩增后的片段-磁珠复合物被分别置于光纤芯片上的皮升级反应容器中。然后将DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶、三磷酸腺苷二磷酸酶等反应试剂加入到反应容器,经过聚合、硫酸化、氧化即可产生强度与结合的核苷酸数目线性相关的光信号,每个反应容器发出的光就能被探测到。利用这项技术在4.5h内可测序2000万~3000万碱基对,准确度达到99%或更高,并且无需在细菌体内进行亚克隆。大规模并行焦磷酸测序开启了个体化基因组学的新时代。 展开更多
关键词 大规模并行焦磷酸测序 平行乳液聚合酶链反应 光纤芯片
下载PDF
在光纤芯片上进行高速个体化全基因组测序
9
作者 封红青 朱平 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2007年第3期176-180,共5页
新近发展的在光纤芯片上做高通量测序的技术,可以将人类全基因组序列的测定时间由目前所用的10年时间缩短到100d。光纤芯片上的基因组测序结合了磁珠、乳液PCR和焦磷酸测序法等技术,利用光纤优良的表面性质和有效的加工工艺,将光纤... 新近发展的在光纤芯片上做高通量测序的技术,可以将人类全基因组序列的测定时间由目前所用的10年时间缩短到100d。光纤芯片上的基因组测序结合了磁珠、乳液PCR和焦磷酸测序法等技术,利用光纤优良的表面性质和有效的加工工艺,将光纤制作成一种基因芯片。在芯片上用磁珠来耦联DNA、RNA等微量反应物。乳液PCR可以获得大量的不同的基因组DNA片段。乳液PCR和光纤芯片都是由于有了磁珠作为微量反应物的载体,从而可以将反应一再小型化。而这些技术的结合,工作效率是目前常规的测序方法的100多倍。成功实现了基因组测序反应小型化、高通量化的思想,大大降低了成本,减少了完成全基因组测序的时间。 展开更多
关键词 基因组测序 微磁珠 乳液pcr 焦磷酸测序 光纤芯片
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部