糖尿病小鼠胸主动脉环对血管收缩剂和内皮依赖性舒张剂反应的变化

目的:探讨糖尿病(DM)小鼠在不同时期离体胸主动脉环对血管收缩剂和内皮依赖性舒张剂反应的变化。方法:用腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 4 0mg/kg诱导C5 7BL/6J小鼠产生糖尿病,在17、2 2和2 8周分批处死糖尿病和同年龄对照(control)组小鼠,测定其离体胸主动脉环对血管收缩剂:苯肾上腺素(PE)、6 0mmol/LKCl的反应及对内皮依赖性舒张剂乙酰胆碱(ACh)的反应。结果:DM组小鼠2周后空腹血糖≥11 1mol/L并在整个实验过程中维持这一水平,显著高于control组,而体重显著低于control组;17、2 2和2 8周DM组胸主动脉环对PE的反应性分别高于、接近、高于control组,各时期对6 0mmol/LKCl都表现高于control组;17、2 2和2 8周DM组胸主动脉环对ACh的反应性分别高于、接近、低于control组。结论:DM组小鼠胸主动脉环对血管收缩剂的反应增强,而内皮功能先代偿性增强,然后降低,表现为内皮损伤。

重度阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与高血压患者血管内皮功能和主动脉顺应性的相关性研究

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)与高血压患者血管内皮功能和主动脉顺应性的相关性。方法选取经多导睡眠图监测确诊为重度OSAHS的患者103例,其中55例为单纯OSAHS组,48例为OSAHS合并高血压组,同时选取20例原发性高血压患者为单纯高血压组,20例健康查体人员为对照组,利用彩色多普勒超声检测肱动脉血流介导的血管舒张功能(flowmediated diameter,FMD)以评价血管内皮功能状态,利用超声心动图检测患者主动脉顺应性的改变。结果 OSAHS合并高血压组的FMD、主动脉张力和主动脉膨胀性指数水平明显低于正常对照组、单纯高血压组和单纯OSAHS组(P<0.05);OSAHS合并高血压组的主动脉僵硬指数水平明显高于正常对照组、单纯高血压组和单纯OSAHS组(P<0.05);Spearman相关系数分析OSAHS合并高血压患者FMD与主动脉僵硬指数呈正相关,与主动脉张力及主动脉膨胀指数呈负相关;OSAHS合并高血压组的FMD、主动脉张力、主动脉膨胀指数和主动脉僵硬指数与AHI呈正相关(P<0.05),与LSa O2呈负相关(P<0.05)。结论 OSAHS与血管内皮功能失调和主动脉顺应性下降相关。合并高血压时,会显著影响血管内皮功能和主动脉顺应性。OSAHS严重程度与血管内皮功能减低和主动脉顺应性改变关系密切。

急性脑梗死患者血清(浆)脂联素、诱生型一氧化氮合酶、内皮素的关系及临床意义

目的观察急性脑梗死(ACI)患者血清(浆)脂联素(ADP)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和内皮素(ET)水平的动态变化,探讨3者在ACI中的作用、相互关系及临床意义。方法选择ACI患者29例为脑梗死(CI)组,健康体检者27例为对照组。采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血清ADP水平,化学比色法检测血清iNOS水平,放射免疫法检测血浆ET水平,观察发病48 h内及入院后10 d前述指标的变化。第1次结果记为"1",第2次结果记为"2"。计算责任梗死灶体积。结果 CI组ADP1水平显著低于对照组(P<0.05),iNOS1、ET2水平显著高于对照组(P<0.01,P<0.05),ADP2较ADP1水平显著升高(P<0.05),iNOS2较iNOS1水平显著降低(P<0.01)。iNOS1水平与梗死体积呈显著正相关(r=0.371,P<0.05)。ADP1与iNOS1水平呈显著正相关(r=0.418,P<0.05)。结论 ACI患者血清(浆)ADP水平显著降低,iNOS及ET水平显著升高,前两者动态变化明显且显著正相关。血清iNOS水平可以反映CI的严重程度。

缺氧促进猪肺动脉内皮细胞sis／PDGF－B链基因的表达

应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和Ｓｌｏｔ一ｂｌｏｔ杂交技术研究了缺氧对猪肺动脉内皮细胞血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ）基因表达的影响。结果表明，缺氧能明显增加肺动脉内皮细胞ＰＤＧＦ一Ｂ链ｍＲＮＡ的表达，而ＰＤＧＦ一Ａ链ｍＲＮＡ表达无明显影响。提示缺氧可能是体内刺激肺动脉内皮细胞ｓｉｓ／ＰＤＧＦ一Ｂ链基因表达的因素之一，通过控制肺动脉平滑肌细胞增生和收缩，在肺动脉高压血管改建中可能具有重要作用。

大鼠脑血管内皮细胞中神经肽Y的Y_1受体

目的 对脑血管内皮细胞中神经肽 Y(NPY)的 Y1 受体进行精确定位 .方法 用针对 NPY的 Y1 受体 C末端肽片段的一种纯化的抗血清 ,用免疫组织化学方法和包埋前免疫金 -银加强法观察 Y1 受体在脑血管内皮细胞中的分布 .结果 大脑皮质和髓质、丘脑、下丘脑、小脑和脑干的微血管有散在的含 Y1 受体免疫反应的 (- Ir)内皮细胞 ,孤立的脑底动脉及其分支的一些内皮细胞也具有 Y1 受体免疫反应性 (- L I) ,Y1 受体 - L I分布于内皮细胞的血管腔面和平滑肌细胞面的细胞膜和胞质中 .结论 来源于血液、内皮细胞和血管周围神经的 NPY通过内皮细胞上 Y1 受体的介导 。

格列吡嗪控释片对2型糖尿病患者血管内皮功能的影响

目的 探讨格列吡嗪控释片对2型糖尿病患者血管内皮功能的影响。方法 76例2型糖尿病者,经2周洗脱期后,随机分为两组。一组4 0例应用格列吡嗪控释片;另一组36例应用格列本脲。根据达到目标血糖调整药物剂量,单药未能达标者加用阿卡波糖,治疗期12周。每位患者均采用高分辨率超声显像法,分别于治疗前后各进行一次右肱动脉血管内皮功能检测。结果 格列本脲组治疗前后肱动脉内径基础值、反应性充血及含服硝酸甘油后肱动脉内径变化,均无显著性差异[(3. 70±0 . 5 7)mm对(3 .72±0 . 5 9)mm ,(5 . 4 6±0 .82 ) %对(5 .70±0 .84 ) % ,(2 0 . 5±5 . 0 ) %对(2 0 . 1±5 . 1) % ,P >0 .0 5 ]。格列吡嗪控释片组治疗前后肱动脉内径基础值、含服硝酸甘油后肱动脉内径的变化,也无显著性差异[(3 .72±0 . 6 2 )mm对(3 .73±0 . 6 3)mm ,(19. 8±5. 5 ) %对(19. 9±5 . 8) % ,P >0 . 0 5 ];但反应性充血引起肱动脉内径变化,治疗前后具有非常显著性差异[(5. 6 7±0 .79) %对(9. 4 6±3 .81) % ,P <0 . 0 1]。结论 格列吡嗪控释片可能改善2型糖尿病者的血管内皮功能。

H2O2诱导内皮细胞凋亡及其机制探讨

【目的】探讨过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞功能损害中的作用及其机制。【方法】人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养后，分为对照组（A组），H2O2处理组（B组），H2O2和蛋白激酶C（PKC）抑制剂GF109203处理组（C组），H2O2和P38抑制剂Apigenin处理组（D组）。H2O2处理细胞30min后加入相应试剂作用24h。MTT法测定细胞存活率，Ki-67染色检测HUVEC增殖活性，免疫荧光染色方法检测细胞凋亡，Western blotting检测p53蛋白表达。【结果】①B组可诱导HUVEC功能损伤，使HUVEC的存活率降低、增殖活性降低、细胞凋亡增加，并使p53蛋白的表达上调；②C组可显著抑制H20z诱导的HuVEC功能损伤和p53蛋白表达的上调；而D组不能抑制H2O2诱导的HUVEC功能损伤和p53蛋白表达的上调。【结论】p53在氧化应激所致内皮细胞功能损害中起重要作用；而这些作用与PKC信号转导通路有关。

抗人肝癌血管内皮功能性单抗的筛选与鉴定

目的：筛选、鉴定抗人肝癌血管内皮功能性单抗，为治疗肝癌提供靶向治疗剂，并为分离获得肝癌相关的分子靶标打下基础。方法：采用活细胞荧光、MTT细胞增殖实验、成管实验和动物体内治疗实验，筛选鉴定抑制肝癌内皮细胞的功能性单抗。结果：从能与肝癌内皮细胞膜反应的119株克隆中，筛选出16株单抗显著地抑制肝癌内皮增殖其抑制率达21％～46％，46株能显著抑制肝癌内皮细胞的成管，3株单抗1F9、1285和1811能显著抑制肝癌移植瘤的生长抑制率分别为50．8％、48．7％和47．0％。选择1株体内抑瘤效果最好的1811单抗，通过抗体抗原亲和层析法进行纯化，并对纯化的单抗的相关抗原蛋白进行免疫组织化学实验鉴定，结果显示1811抗原在肝癌血管组织较高的表达而在正常肝血管组织极少表达。蛋白质印迹法显示其抗原相对分子质量约46×10^3。结论：采用大容量功能性抗体库技术成功获得了多株具有抑制肝癌内皮恶性生物学行为的功能性单抗，体内外抑制肺癌的生长，具有成为肺癌靶向治疗剂的潜力。其中1株可能是一个靶向治疗肝癌的新靶位。

糖尿病视网膜病变患者血清Ang-1、Ang-2水平变化及意义

目的研究血管生成素1和2(Ang-1、Ang-2)在糖尿病视网膜病变(DR)患者血清中的表达情况及其与DR病变程度的相关性。方法共纳入2型糖尿病(T2DM)患者160例,包括无DR患者63例(NDR组)、非增生型DR者51例(NPDR组)和增生型糖尿病视网膜病变患者46例(PDR组)。用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测Ang-1、Ang-2及内皮细胞特异性受体酪氨酸激酶(Tie-2)在糖尿病视网膜病变患者血清的表达水平。分析Ang-1、Ang-2与DR患者临床病理参数与比值之间的关系。结果在NPDR组血清Ang-2较NDR组明显升高,而且PDR患者的血清Ang-2较NPDR患者升高更明显;NPDR组血清Ang-1较PDR组、NDR组略有升高,但各组患者的血清Ang-1差异无统计学意义(P>0.05)。PDR组和NPDR组间患者的血清Ang-2水平和Ang-1/Ang-2比值比较,差异有统计学意义(P均<0.05)。NDR组、NPDR组和PDR组Ang-1/Ang-2比值依次为(3.57±1.32)、(2.36±0.64)和(1.70±0.54),差异有统计学意义(P<0.001)。各组患者Tie-2差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Ang-1/Ang-2比值与DR相关,随病情加重,水平呈下降趋势,该比值可用于辅助诊断DR。