通里攻下法对严重创伤导致肠源性内毒素血症的影响

目的:观察通里攻下法对多器官功能障碍综合征(M ODS)或全身炎症反应综合征(S IRS)模型动物内毒素血症的影响。方法:40只纯种新西兰大白兔随机分为实验组和对照组,每组20只。用W iggers方法制成失血性休克模型,观察并记录M ODS或S IRS的发生率。实验组家兔每日经口灌服大承气颗粒剂1.25 g,连续3 d。所有动物于休克前及休克后1、3、7 d取血测定血清内毒素水平。结果:40只兔中29只(72.5%)发生M ODS。治疗后对照组内毒素水平呈升高趋势,而实验组呈下降趋势,实验组内毒素在治疗后7 d显著低于对照组(P<0.01)。结论:使用大承气颗粒能够控制严重创伤所致M ODS或S IRS模型动物内毒素血症。

肝素对小鼠实验性内毒素血症的保护作用

本文采用ＬＤ＿（７５）的Ｏ＿（１１１）Ｂ＿４大肠杆菌内毒素建立小鼠实验性内毒素血症模型，观察肝素对内毒素血症的保护作用。结果，生理盐水对照组存活率为３３．３３％，肝素对小鼠内毒素血症有显著保护作用，５．５Ｕ／２０ｇ小鼠组存活率６３．６４％（Ｐ＜０．０５）；３．０Ｕ／２０ｇ小鼠组为７９．１７％（Ｐ＜０．００５）；１．５Ｕ／２０ｇ小鼠组７５．００％（Ｐ＜０．００５）。肝素注射时间对小鼠内毒素血症保护作用依次为肝素与内毒素同时注射（７９．１７％）；内毒素注入后３０ｍｉｎ（７５．００％）；内毒素注入前３０ｍｉｎ（７０．８３％）和注入前６０ｍｉｎ（５８．３３％）。注射途径依次为静脉注射（７９．１７％）、皮下注射（７７．２７％）、腹腔注射（７５．００％）、肌肉注射（７０．８３％），统计学上无明显差异。表明中小剂量肝素对小鼠内毒素血症有明显保护作用，早期使用、静脉和皮下注射疗效明显。

中药方剂对实验性发热模型动物体温的影响

目的观察相关中药方剂(一至六号方)退热的药理作用。方法给大鼠注射酵母菌,给家兔注射内毒素,复制发热模型,测定药后各时间点肛温,计算各时间点体温变化。结果一至六号方均有不同程度的退热作用,其中一号方、三号方、四号方对内毒素引起的体温升高的抑制作用比较明显,二号方和四号方对酵母菌引起的体温升高的抑制作用比较明显。结论一至六号方对实验性发热模型动物体温有不同程度的缓解作用,尤其是四号方有良好的应用前景。

视网膜抗原免疫联合内毒素诱导的新的EAU小鼠模型

背景 葡萄膜炎的发病机制和治疗仍是目前的研究热点,但多年来该领域的基础研究仍是沿用传统的造模方法制备相关的动物模型,与人类的葡萄膜炎自然病程有较大偏差. 目的 本研究用大肠杆菌内毒素,即脂多糖（LPS）替代百日咳毒素（PTX）作为主要诱发因素,建立更符合人类自然发病环境的新型实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎（EAU）的动物模型,并与传统的造模方法进行比较,为研究该病的发病机制和有效的治疗方案提供实验依据.方法 6～8周龄的无特定病原体级雌性C57BL/6（H-2b）小鼠20只,按随机数字表法分为正常对照组、单纯内毒素注射组（EIU组）、多肽＋完全弗氏佐剂（CFA）注射组（EAU组）、多肽＋CFA＋LPS组（LPS-EAU组）.LPS-EAU组先用人类光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP 1-20）＋CFA免疫小鼠,免疫后第7天小鼠足底注射LPS,诱发小鼠EAU模型.采用组织病理学损害、眼球组织病理学评分、迟发型过敏反应、特异性淋巴细胞增生反应等评价指标对动物模型进行鉴定,并与LPS诱导的EIU及IRBP 1-20＋ CFA免疫诱导的EAU进行比较.结果 正常对照组小鼠虹膜睫状体及视网膜组织结构未见异常;EIU组小鼠虹膜睫状体可见轻微血管扩张、蛋白及纤维素渗出,但玻璃体和视网膜组织内未见血管异常及炎症反应;EAU组小鼠虹膜睫状体未见血管扩张及炎性渗出,但可见视网膜轻微血管周围炎及神经纤维层肿胀;LPS-EAU组小鼠视网膜结构紊乱,可见较多的炎性细胞浸润、光感受器细胞损伤及视网膜全层破坏.正常对照组小鼠和EIU组小鼠病理评分均为0分,EAU组病理评分为0.5分,而LPS-EAU组小鼠病理评分为3.0分,显著高于EAU组,差异有统计学意义（U=16.246,P=0.001）.LPS-EAU组小鼠耳廓增厚值为（35.60±0.55） tm,显著高于EIU组小鼠的（12.60±0.55）μm,差异均有统计学意义（q=23.003,P＜0.01）;但与EAU组小鼠的（34.80±0.84）μm比较,差异无统计学意义（q=0.820,P＞0.05）.LPS-EAU组小鼠的脾细胞体外培养的克隆数显著增加,其3 HTdR掺入值（CPM）为（8 540.00±54.77）/min,而EAU组的cpm为（8 484.00±47.75）/min,差异无统计学意义（q=56.634,P=0.069）,但与EIU组的cpm（2 050.00±50.00）/min比较,LPS-EAU组明显升高,差异有统计学意义（q=195.683,P=0.000）. 结论 LPS可以成功诱发小鼠的EAU,该动物模型在模拟病因方面更符合人类自然发病环境,为研究人类EAU的病因和发病机制提供了一个可能更好的动物模型.

氟罗沙星葡萄糖注射液细菌内毒素检测方法的探讨

目的:建立氟罗沙星葡萄糖注射液细菌内毒素的检测方法,制定细菌内毒素限值(L)。方法:氟罗沙星葡萄糖注射液按有效浓度范围稀释后,进行干扰试验考察。结果:氟罗沙星葡萄糖注射液经1倍稀释后对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论:时氟罗沙星葡萄糖注射液进行热原检查及细菌内毒素检查对比试验,两法符合率为100％。

扶正排毒液治疗内毒素休克实验研究

目的观察扶正排毒液对内毒素休克的治疗作用。方法本实验研究在复制家兔内毒素休克模型的基础上,观察扶正排毒液对内毒素休克的治疗作用,观察指标主要应用平均动脉压(MAP)。结果家兔注射内毒素(LPS)后,很快出现血流动力学的明显变化,血压迅速下降,表现为呼吸急促、口唇紫绀、耳缘静脉淤血、心率加快、体温下降、四肢厥冷等休克症状;应用扶正排毒液及地塞米松治疗后症状有所缓解,低血压得到纠正。结论扶正排毒液可以用于内毒素休克的治疗。

黑皮蛇、山白菜抗细菌内毒素的实验研究

目的探讨黑皮蛇、山白菜的抗细菌内毒素作用。方法采用鲎试剂凝胶法对黑皮蛇、山白菜抗细菌内毒素作用进行实验研究。结果在灵敏度为0.5EU/ml鲎试剂试验中,黑皮蛇、山白菜药液浓度1g/ml,均有抗细菌内毒素作用;不同药液浓度试验,抗细菌内毒素最低药液浓度:黑皮蛇为0.1g/ml,山白菜为0.05g/ml。结论黑皮蛇、山白菜均有较强的抗细菌内毒素作用。

大力王藤抗蛇毒及细菌内毒素的实验研究

目的探讨大力王藤药材抗蛇毒与细菌内毒素的作用。方法采用鲎试剂凝胶法测试大力王藤抗蛇毒及细菌内毒素的效果。结果大力王藤药液浓度为2 g/ml时,有抗眼镜蛇、竹叶青蛇、五步蛇毒和细菌内毒素的凝集作用;药液浓度为1.6 g/ml时,有抗蝰蛇毒的凝集作用;药液浓度为0.8 g/ml时,有抗蝮蛇毒的凝集作用。结论大力王藤有一定的抗蛇毒与细菌内毒素作用。

宽胸理肺汤合三子养亲汤改善慢阻肺的实验研究

目的:观察宽胸理肺汤合三子养亲汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠线粒体功能及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体通路表达的影响,探讨宽胸理肺汤合三子养亲汤对COPD的保护作用及其机制。方法:本实验采用熏香烟加气管注内毒素法制造COPD模型大鼠。将雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组(n=7)、COPD组(n=7)、低剂量组(n=7)、中剂量组(n=7)、高剂量组(n=7)、N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)组(n=7)。采用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、凋亡相关斑样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1,酶联免疫吸附试验法检测下游炎症介质(白细胞介素-1β、白细胞介素-18)的含量,MitoSOX Red探针检测大鼠肺组织线粒体活性氧生成情况,ATP检测试剂盒及JC-1检测试剂盒分别检测肺组织ATP含量及线粒体膜电位变化。结果:与对照组比较,COPD模型组大鼠肺组织线粒体ATP合成量显著降低,线粒体活性氧生成显著增加,差异有统计学意义(P<0.01),线粒体膜电位水平有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。宽胸理肺汤合三子养亲汤呈剂量依赖性升高COPD大鼠肺组织线粒体ATP合成量,降低活性氧生成(P<0.01),但对线粒体膜电位无显著作用。阳性对照药物NAC也可显著升高COPD大鼠肺组织线粒体ATP合成量,降低活性氧生成(P<0.01)。蛋白质印迹结果显示COPD大鼠核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3、凋亡相关斑样蛋白、胱天蛋白酶1-p10蛋白表达显著上升,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。宽胸理肺汤合三子养亲汤各剂量及NAC干预后,COPD大鼠的核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体各蛋白表达呈显著下降趋势(P<0.05)。酶联免疫吸附试验结果显示,COPD大鼠白细胞介素-1β、白细胞介素-18表达显著上升,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。宽胸理肺汤合三子养亲汤各剂量及NAC干预后,COPD大鼠的白细胞介素-1β、白细胞介素-18表达呈显著下降趋势(P<0.05)。结论:宽胸理肺汤合三子养亲汤可以明显改善COPD大鼠的肺组织病理变化,其机制可能与抑制线粒体损伤后释放的线粒体活性氧引起的下游NLRP3炎性小体活化通路反应有关。

细菌内毒素体外刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮实验模型的条件优化

目的优化细菌内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生NO实验模型的条件。方法采用Hank＇s液灌洗小鼠腹腔，收集腹腔留居巨噬细胞，利用铜绿假单胞菌脂多糖（LPS）作为内毒素刺激巨噬细胞产生NO，以Griess法检测培养上清液中NO的浓度，考察细胞浓度、LPS浓度、LPS刺激时长、培养液体积等因素对巨噬细胞产生NO的影响，优化实验条件，并用已知药物验证模型的可靠性。结果本实验条件下，细胞浓度对NO的产生具有关键性影响，最适浓度为6×lO‘个细胞，ml，96孔板中每孔100μl；LPS浓度〈1 μg／ml时，NO的产生随LPS浓度的增加而增加（P〈0．001），LPS浓度〉1μg／ml时，NO的增加的幅度明显下降，当LPS浓度为10／μg／ml时，NO产生达到峰值；NO的产生随LPS刺激时间的延长，其含量相应增加，24与48h之间的增加幅度大于48h与72h之间的增加幅度（P〈O．05）；培养上清中NO的含量与培养液的体积有一定关系，100m时的NO含量最高。阿司匹林（1 mmol／L）、地塞米松（10laxlol／L）、环孢霉素A（10μmol／L）均能明显抑制LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞产生NO（P〈0．001）。结论巨噬细胞浓度、LPS浓度、LPS刺激时长是建立内毒素刺激小鼠腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮实验模型的主要影响因素。推荐方案为：巨噬细胞浓度5×10‘个细胞，ml，100μl／孔；LPS浓度10μg/ml；LPs刺激时长24h或48h；培养液体积100～200μl。

大鼠实验性肝硬变腹水形成及其与内皮素的关系

目的 研究大鼠实验性肝硬变晚期腹水形成与内皮素及肠源性内毒素血症的关系 ,探讨肝硬变腹水形成的机制。方法 以大鼠为实验对象 ,分为正常对照组 (n =8)、肝硬变组 (n =12 )和肝硬变伴腹水组 (n =18)。实验组采用复合因子建立肝硬变大鼠模型。各组均测定腹主动脉血中内皮素和内毒素水平 ,肝硬变组还测定了腹水量。结果 随着肝硬变形成 ,大鼠血中内皮素水平增高 ,各组含量分别为 (99 6± 16 9) μg/L,(2 46 6± 2 1 3) μg/L和 (2 73 8± 12 4) μg/L。相关分析表明 ,肝硬变组腹水量与血中ET呈正相关 (r =0 81,P <0 0 5 ) ;内毒素水平增高 ,并与内皮素的浓度呈正相关 (r =0 74,P <0 0 5 )。结论 肝硬变腹水形成与血中内皮素升高相关 ,而内皮素的升高则源于肠源性内毒素血症的形成。

肝素对小鼠实验性内毒素血症的保护作用

采用LD75的O111B4大肠杆菌内毒素建立小鼠实验性内毒素血症模型，观察肝素对内毒素血症的保护作用。结果，生理盐水对照组存活率为33．33％，与对照组相比，肝素对小鼠内毒素血症有显著保护作用，5．5U／20g小鼠组存活率为63．63％（P＜0．05）；3．0U／20g小鼠组为79．17％（P＜0．005）；1．5U／20g小鼠组为75．00％（P＜0．005）。肝素注射时间对小鼠内毒素血症保护作用依次为肝素与内毒素同时注射（79．17％）；内毒素注入后30min（75．00％）；内毒素注入前30min（70．83％）和注入前60min（58．33％）。注射途径依次为静脉注射（79．17％）、皮下注射（77．27％）、腹腔注射（75．00％）、肌肉注射（70．83％），统计学上无明显差异。表明中小剂量肝素对小鼠内毒素血症有明显保护作用，早期适时使用效果明显，注射途径以静脉和皮下注射更好。

白细胞介素-10对内毒素诱导的实验性葡萄膜炎的治疗作用

目的 观察重组白细胞介素10（IL-10）对大肠杆菌内毒素（LPS）诱导的实验性葡萄膜炎（EIU）的治疗作用.方法 雄性Wistar大鼠56只随机分为3组,其中IL-10治疗组和阳性对照组各24只,正常对照组8只.治疗组和阳性对照组大鼠用LPS诱导EIU模型,治疗组24只大鼠在注射LPS前4.0、0.5 h分别按1μg/kg的剂量经尾静脉注射重组IL-10各1次,正常对照组大鼠同一部位注射等量生理盐水.阳性对照组和正常对照组大鼠用于对比观察.注射LPS后观察大鼠的发病开始时间和眼部表现,分别在注射LPS后4、24 h和3 d等3个时间点分批处理8只大鼠后取血和房水,检测血清和房水中肿瘤坏死因子（TNF）α、IL-6和IL-10水平,并进行病理检查和分级.结果 阳性对照组24只大鼠全部出现葡萄膜炎反应,平均发病开始时间为（3.81±1.05）h,平均炎症评分为3.67±1.97,平均组织病理学分级为3.08±1.77.治疗组24只大鼠也全部出现轻度葡萄膜炎反应,平均发病开始时间为（5.63±1.02）h,平均炎症评分为2.00±1.25,平均组织病理学分级为1.67±1.17.治疗组大鼠的发病开始时间明显迟于阳性对照组大鼠（t=4.95,P=0.00）,炎症评分（t=3.50,P=0.00）和组织病理学分级（t=3.28,P=0.00）也显著低于阳性对照组.正常对照组8只大鼠始终无阳性体征及病理改变.阳性对照组大鼠血清、房水TNF-α和IL-6水平明显高于治疗组和正常对照组（F=15.34,57.65,67.59,8.42;P=0.00）,治疗组大鼠血清和房水IL-10水平明显高于阳性对照组和正常对照组（F=17.84,7.76;P=0.00）.房水TNF-α、房水和血清IL-6与眼部炎症程度呈正相关（眼部表现评分r=0.58,0.31,0.81;组织病理学分级r=0.56,0.31,0.74;P=0.00）;血清IL-10与炎症程度呈负相关（眼部评分和组织病理学分级分别为r=-0.54,-0.55;P=0.00）,与发病开始时间呈正相关（r=0.73,P=0.00）;血清及房水TNF-α和IL-6水平与发病开始时间呈负相关（r=-0.47,-0.59,-0.77,-0.36;P＜0.05）.结论 IL-10能显著抑制LPS诱导的EIU模型中前炎症因子TNF-α和IL-6产生,减轻EIU眼部表现和病理损害,具有治疗EIU的作用.

大肠杆菌内毒素诱导的大鼠眼内炎表现及细胞因子的表达

目的 观察大肠杆菌内毒素（LPS）诱导的大鼠眼内炎模型组织病理学特征和玻璃体内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和LPS的表达模式.方法 采用随机数字表法将大鼠随机分为生理盐水对照组（SC组）136只、眼内炎组（EO组）168只、空白对照组（BC组）12只.E0组玻璃体腔注射5 μl LPS溶液诱导眼内炎动物模型;SC组注入等量无菌生理盐水;BC组不作任何干预.注射后6、12、24、48、72 h,5、7 d,观察大鼠眼部炎症表现并分别摘除各组眼球行组织病理学检查,并取其玻璃体检测细胞因子TNF-α、IL-1β和LPS的浓度.结果 EO组注射后6～72 h,眼内可见严重炎症反应,注射后7 d炎症基本消退.注射后24 h,眼内白细胞浸润数量为（1224.64±132.2）个/眼,达到高峰;注射后72 h,浸润细胞数量迅速下降至（342.25±47.7）个/眼.EO组注射后24 h,TNF-α和IL-1β浓度分别为（996.18±89.45）、（5556±1440）pg/ml,均达到高峰并持续至注射后48 h,随后迅速下降;注射后7 d,TNF-α和IL-1β浓度分别为（22.16±5.84）、（73.7±18.7）pg/ml.EO组注射后72 h,玻璃体腔内LPS含量迅速下降为（11.03±3.41）ng,7 d后玻璃体腔内LPS含量为（0.22±0.08）ng.结论 大鼠眼内炎模型的主要病理特征是大量白细胞眼内浸润,TNF-α、IL-1β的高水平表达以及玻璃体腔自发性细菌成分清除;TNF-α、IL-1β表达模式与LPS眼内清除过程一致.

大承气汤对不完全性肠梗阻大鼠ET和TNF-a影响的实验研究

目的:观察大承气汤对不完全性肠梗阻大鼠血清中内毒素(ET)和肿瘤坏死因子(TNF-a)含量变化的影响。方法:将60只SD大鼠根据随机分组法分为6组:空白对照组,模型对照组,假手术组,大承气汤高、中、低剂量组,每组10只。对除空白对照组和假手术组外的其余组大鼠制备不完全性肠梗阻模型,假手术组采用针线只穿透肠系膜而不结扎的方法处理。大承气汤高、中、低剂量组分别按1.16、0.58、0.29g/m L的剂量给予大承气汤灌胃治疗,其余3组给予相同剂量的生理盐水灌胃。运用酶联免疫法(ELISA)检测各组大鼠血清中ET、TNF-α的表达量,并进行比较。结果:与模型对照组比较,大承气汤高、中剂量组血清中ET含量及TNF-α含量均明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:大承气汤能够降低不完全性肠梗阻大鼠血清ET及TNF-a含量,保护不完全性肠梗阻小肠上皮细胞,具有肠屏障保护功能。

幼年感染细菌内毒素对成年实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠行为和病理的影响

目的:探讨大鼠幼年时期感染细菌内毒素对其成年后实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)神经功能损伤和中枢神经系统病理学的影响。方法:取同窝SD幼鼠,于出生后第3和第5天2次给予腹腔注射0.01 mg·mL^(-1)脂多糖(LPS)0.05mL或同等剂量无菌生理盐水。成年后(出生后第8周)用豚鼠脊髓匀浆免疫SD大鼠制作EAE模型,观察并比较这两组大鼠行为学与组织病理学变化。结果:与生理盐水对照组相比,LPS处理组SD大鼠EAE发病率明显降低(P<0.01),且中枢神经系统内炎症细胞浸润及神经髓鞘脱失也明显减轻(P<0.01)。结论:幼年时期感染细菌内毒素对成年SD大鼠EAE有明显的保护作用。