内毒素性实热证猕猴视网膜血管直径变化研究

目的探索内毒素性实热证猕猴视网膜血管直径的变化。方法本研究采用内毒素肌肉注射建立猕猴实热证模型;造模成功后,利用Oxymap设备采集眼底图片,并对视网膜动、静脉直径进行分析;实热证组和对照组的直径大小变化数据分析采用独立样本t检验。结果内毒素性实热证猕猴模型造模成功。实热证组与对照组相比静脉、鼻侧动脉直径明显缩小(P<0.05);而颞上动脉和颞下动脉直径虽有不同程度缩小(P>0.05)。结论内毒素性实热证猕猴的视网膜血管直径会呈现不同程度的收缩。视网膜血管直径具有成为中医证候定量指标的潜力。

D-氨基半乳糖致敏的内毒素休克SD大鼠模型

目的:建立稳定的D-氨基半乳糖致敏的内毒素休克SD大鼠模型。方法:采用不同剂量的D-氨基半乳糖(D-GalN)和内毒素(LPS)剂量,分别以腹腔注射10 mg/kg、50 gmg/kg、100 mg/kg D-GalN,再分别以0.5 mg/kg、1.0 mg/kg、1.5 mg/kg、2.0 mg/kg LPS静脉注射。51只大鼠随机分组,以平均动脉压低于8.0 kPa(60 mmHg)为休克指标,持续6 h以上至实验结束动物不死亡为休克稳定标准,优化与实验要求相符的造模条件。结果:腹腔分别注射10 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg D-GalN和同时分别静脉注射LPS0.5 mg/kg、1.0 mg/kg组无动物死亡,但休克持续时间较短。静脉注射LPS2.0 mg/kg组动物死亡率较高。静脉注射LPS1.5 mg/kg和同时腹腔注射D-GalN100 mg/kg组,尽管有少量动物死亡,但休克持续时间最长(P<0.01)。结论:腹腔注射D-GalN100 mg/kg和静脉注射内毒素1.5mg/kg时可建立稳定的D-GalN致敏的内毒素休克SD大鼠模型。

血瘀证与血栓形成病证结合动物模型的研究

目的:以细菌内毒素(LPS)与角叉菜胶(Ca)两种因素联合造模,制备一种方法简便、稳定的血瘀证和血栓形成病证结合动物模型。方法:将大鼠随机分成正常对照组,LPS/Ca造模组。造模组动物先每只给予Ca 5 mgip,16 h后给予LPS 50μg.kg-1iv,以注射LPS时作为试验的0 h。于造模后24 h观察血栓形成,于造模后不同的时间点分批观察微循环变化、血液流变学指标、凝血指标和炎症反应指标。结果:LPS/Ca联合造模可建立稳定、重复性良好的血栓形成模型,不需剖杀动物在尾部即可肉眼观察和定量测量血栓。该模型还表现出微循环障碍以及全血黏度增高、血小板聚集率异常等血液流变学指标的改变,同时还由于血栓形成消耗了大量凝血因子和血小板,而表现出凝血指标延长。结果表明该模型具有明显的血瘀证客观指标的改变。模型早期动物血液中的炎性因子TNFα和IL-6明显增高,故该模型符合炎症诱导的热毒血瘀证特点。结论:LPS/Ca联合造模可建立一种操作简便、稳定的热毒血瘀证与血栓形成病证结合动物模型。

经小脑延髓池注射内毒素致家兔实验性脑水肿模型的研制

目的 经家兔小脑延髓池注射内毒素 ,制作类似临床所见的严重感染及毒血症导致的急性脑水肿模型 ,用于感染性脑水肿的实验研究。方法 选择 35只新西兰白兔 ,分为内毒素组 (30只 )和对照组 (5只 )。内毒素组于小脑延髓池内注射内毒素 10 0 μg/kg ,对照组注入等量灭菌纯水。分批于注射后 3h、6h、12h、2 4h、4 8h、72h处死家兔 ,留取脑组织 ,采用光镜和透射电镜观察脑组织的形态学改变 ,并测定脑组织的含水量。结果 注射内毒素后 3h ,脑组织含水量即升高 ,6～ 4 8h时明显高于对照组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,2 4h时脑含水量达峰值。光镜和电镜可观察到注射内毒素 6～ 2 4h后脑组织病变最严重。其中 2只兔在注射过程中出现意外损伤。结论 经小脑延髓池注射内毒素建立家兔实验性脑水肿模型简单、可靠、安全、适用 。

家兔失血性休克并内毒素诱发多器官功能障碍综合征模型制备

目的建立一种接近临床的失血性休克合并内毒素血症致多器官功能障碍综合征(MODS)动物模型。方法预实验组取32只家兔,股动脉放血诱发休克,随后回输全部血液。血压平稳后,在腹腔注射不同计量的内毒素(LPS,各8只),观察各组动物相应时间点(12、24、48h)的一般情况和死亡率。实验组分为模型组和正常对照组(各8只)。根据预实验结果,选定休克并10μg/kgLPS损伤动物为MODS模型组,进行上述相应时间点血浆炎性递质各个器官功能检测,并行病理学检查。结果股动脉放血快速回输并注射10μg/kgLPS组家兔MODS的死亡率在12、24和48h分别为12.5%、50.0%和62.5%,较符合MODS的临床表现。模型组动物在内毒素注入后12h已出现全身炎症反应综合征,24～48h各器官功能指标均出现2倍以上不同程度的升高,并伴有血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素6(IL6)的升高,明显的低血氧症和高碳酸血症。病理学观察显示肺、肝、小肠等出现不同程度的实质性损伤。结论该实验较好的重现了失血性休克合并内毒素血症致MODS的诱因和临床特点,为临床实验研究提供了一种可行性的MODS动物模型。

PAAF对大鼠血清TNF-α、内毒素及胃黏膜损伤的影响

目的探讨胰腺炎相关性腹水(pancreatitis associated ascetic fluid,PAAF)诱导的大鼠胃损伤作用及其相关机制。方法以PAAF诱导的SD大鼠胃损伤模型为研究对象,将32只SD大鼠(雌雄不拘)随机分为2组,每组16只。空白对照组,腹腔内注射生理盐水8ml/只;PAAF组,腹腔内注射PAAF8ml/只。于6h、12h分批处死大鼠,每时间点8只。测定血清内毒素和血清肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factor-α,TNF-α)的浓度,测定胃黏膜组织ATP酶的活性和TNF-α的浓度,于光镜下观察胃黏膜损伤情况。结果同时间点比较:PAAF组血清内毒素(LPS)、TNF-α、胃黏膜损伤程度和胃黏膜组织TNF-α的浓度,均较A组(空白对照组)增高(P<0.05),ATP酶活性显著降低(P<0.05)。结论PAAF能够引起大鼠胃黏膜的损伤。

内毒素致急性肺损伤幼猪模型建立的研究

目的建立一种内毒素诱导的急性肺损伤(ALI)幼猪模型。方法健康雄性幼猪16头随机分为正常对照组6头、内毒素(LPS)组10头。正常对照组给予0.9%氯化钠溶液(10ml/kg);内毒素组缓慢泵注LPS(15μg/kg),机械通气条件下观察肺氧合等肺功能损害的进程。结果注射LPS后6h动脉血氧分压/吸入氧浓度(PaO2/FiO2)、肺泡-动脉氧分压差(A-aDO2)出现显著改变,12h达到ALI标准,LSP组注射LPS3h、6h、12h肺动态顺应性和气道阻力与注射前0h比较,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组同一时间比较差异亦有统计学意义(P<0.05),支气管肺泡灌洗液分析及肺形态学出现显著异常。结论本法可诱导稳定的脓毒性ALI猪模型,供ALI病理生理机制及治疗方法研究之用。

抗菌药物诱导内毒素的产生及抗内毒素药物的研究进展

内毒素是革兰阴性菌的主要致病成分,抗菌药物在杀/抑菌的同时会诱导内毒素的产生,增加了疾病的治疗难度。体外实验、动物实验证实,抗菌药物诱导内毒素的产生与多种因素有关,提示在临床选用抗菌药物时应对药敏实验结果及其诱导内毒素释放的特性进行综合考虑。抗内毒素药物的研究近年取得了一些成效,其中中药制剂也显示了很好的抗内毒素作用,相信这类药物会有广阔的发展前景。

内毒素诱导的葡萄膜炎动物模型研究进展

葡萄膜炎是一种常见的眼部炎症,易反复发作且牵涉到眼内多种组织,其具体发病机制目前尚不清楚,因此有必要建立合适的动物模型以进行研究。已有研究表明,内毒素注射可以诱导动物的实验性葡萄膜炎。内毒素诱导的葡萄膜炎(EIU)动物模型已成为人们研究葡萄膜炎重要的动物模型,它对人们了解葡萄膜炎的发病机制及治疗葡萄膜炎做出了重要贡献。就该模型的发现、建立方法、炎症过程以及模型中涉及到的内毒素信号通路相关转录因子、细胞因子和一氧化氮(NO)等进行综述。

内毒素诱导感染性休克动物模型的建立及血清TNF-α测定

目的 :建立感染性休克动物模型 ,观察病理改变。方法 :大鼠经股静脉注射内毒素 (LPS) ,观察动物的平均动脉压 (MAP)、心率变化及存活率。同时测定血清肿瘤坏死因子 (TNF α)水平评定模型。结果 :大鼠MAP于注射LPS后迅速下降 ,升至正常后逐渐缓慢下降直至死亡 ;心率短暂上升后逐渐下降 ;病理改变主要表现为间质性肺炎 ;血TNF α在LPS注射 90min升至最高 ,以后逐渐下降。结论 :应用LPS建立的感染性休克动物模型MAP、心率变化与临床感染性休克相似 ,是一个理想的模型。

正交试验法优选D-氨基半乳糖敏化小鼠的内毒素休克模型

目的:建立D-氨基半乳糖敏化小鼠内毒素休克的规范化模型。方法:选择对内毒素休克小鼠死亡率有影响的3个因素:D-氨基半乳糖增敏剂量、内毒素攻击剂量及其给药途径,每个因素选取3个水平,按L9(34)正交试验表安排试验。以小鼠48h死亡率为评价指标,并通过验证试验,优化与实验要求相符的造模条件。结果:各因素对动物死亡率影响程度依次为:D-氨基半乳糖增敏剂量>内毒素给药途径>内毒素攻击剂量。采用D-氨基半乳糖600mg·kg-1敏化小鼠,腹腔注射内毒素0.5mg·kg-1的给药方案为佳。结论:规范内毒素休克模型的复制条件,将有利于科学评价药物的抗内毒素活性。

视网膜抗原免疫联合内毒素诱导的新的EAU小鼠模型

背景 葡萄膜炎的发病机制和治疗仍是目前的研究热点,但多年来该领域的基础研究仍是沿用传统的造模方法制备相关的动物模型,与人类的葡萄膜炎自然病程有较大偏差. 目的 本研究用大肠杆菌内毒素,即脂多糖（LPS）替代百日咳毒素（PTX）作为主要诱发因素,建立更符合人类自然发病环境的新型实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎（EAU）的动物模型,并与传统的造模方法进行比较,为研究该病的发病机制和有效的治疗方案提供实验依据.方法 6～8周龄的无特定病原体级雌性C57BL/6（H-2b）小鼠20只,按随机数字表法分为正常对照组、单纯内毒素注射组（EIU组）、多肽＋完全弗氏佐剂（CFA）注射组（EAU组）、多肽＋CFA＋LPS组（LPS-EAU组）.LPS-EAU组先用人类光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP 1-20）＋CFA免疫小鼠,免疫后第7天小鼠足底注射LPS,诱发小鼠EAU模型.采用组织病理学损害、眼球组织病理学评分、迟发型过敏反应、特异性淋巴细胞增生反应等评价指标对动物模型进行鉴定,并与LPS诱导的EIU及IRBP 1-20＋ CFA免疫诱导的EAU进行比较.结果 正常对照组小鼠虹膜睫状体及视网膜组织结构未见异常;EIU组小鼠虹膜睫状体可见轻微血管扩张、蛋白及纤维素渗出,但玻璃体和视网膜组织内未见血管异常及炎症反应;EAU组小鼠虹膜睫状体未见血管扩张及炎性渗出,但可见视网膜轻微血管周围炎及神经纤维层肿胀;LPS-EAU组小鼠视网膜结构紊乱,可见较多的炎性细胞浸润、光感受器细胞损伤及视网膜全层破坏.正常对照组小鼠和EIU组小鼠病理评分均为0分,EAU组病理评分为0.5分,而LPS-EAU组小鼠病理评分为3.0分,显著高于EAU组,差异有统计学意义（U=16.246,P=0.001）.LPS-EAU组小鼠耳廓增厚值为（35.60±0.55） tm,显著高于EIU组小鼠的（12.60±0.55）μm,差异均有统计学意义（q=23.003,P＜0.01）;但与EAU组小鼠的（34.80±0.84）μm比较,差异无统计学意义（q=0.820,P＞0.05）.LPS-EAU组小鼠的脾细胞体外培养的克隆数显著增加,其3 HTdR掺入值（CPM）为（8 540.00±54.77）/min,而EAU组的cpm为（8 484.00±47.75）/min,差异无统计学意义（q=56.634,P=0.069）,但与EIU组的cpm（2 050.00±50.00）/min比较,LPS-EAU组明显升高,差异有统计学意义（q=195.683,P=0.000）. 结论 LPS可以成功诱发小鼠的EAU,该动物模型在模拟病因方面更符合人类自然发病环境,为研究人类EAU的病因和发病机制提供了一个可能更好的动物模型.

四氢黄连碱体内抗炎作用的研究

目的通过多种炎症模型观察四氢黄连碱的体内抗炎作用。方法采用由多种炎性介质参与的角叉菜胶致大鼠足肿胀模型、二甲苯致小鼠耳肿胀模型以及小鼠内毒素休克模型,从整体上评价四氢黄连碱的体内抗炎作用。角叉菜胶致大鼠足肿胀模型分为:空白对照组、四氢黄连碱高剂量组(21 mg/kg)、低剂量组(7 mg/kg)以及阳性药地塞米松组(5 mg/kg),空白对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量的药物,30 min后,足跖皮下注射角叉菜胶,并分别在致炎前及致炎后1、2、3、4、5 h测量大鼠足趾厚;二甲苯致小鼠耳肿胀模型分为:空白对照组、四氢黄连碱高剂量组(30 mg/kg)、低剂量组(10 mg/kg)以及阳性药地塞米松组(5 mg/kg),空白对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量的药物,连续给药7 d,末次给药30 min后于小鼠右耳涂抹二甲苯,左耳为对照,l h后处死,取相同部位的耳片并称重;小鼠内毒素休克模型分为:空白对照组、阴性组、四氢黄连碱高剂量组(30 mg/kg)以及低剂量组(10 mg/kg),阴性组和空白对照组给予生理盐水,其余各组给予相应剂量的药物,给药后30 min,阴性组和四氢黄连碱组腹腔注射LPS(20 mg/kg),空白对照组给予等体积的生理盐水,每隔12 h记录1次小鼠的存亡情况,连续观察72 h。结果角叉菜胶致大鼠足肿胀模型中,四氢黄连碱可显著抑制大鼠足肿胀,高剂量组(21 mg/kg)对足肿胀的最大抑制率达到77.82%,低剂量组(7 mg/kg)对足肿胀的最大抑制率为62.39%,和阳性药地塞米松组(5 mg/kg,最大抑制率80.54%)的作用相当;二甲苯致小鼠耳肿胀模型中,四氢黄连碱可显著抑制小鼠的耳肿胀,其中高剂量组(30 mg/kg)对耳肿胀的抑制率达到74.03%,低剂量组(10 mg/kg)对耳肿胀的抑制率为53.93%,和阳性药地塞米松组(5 mg/kg,抑制率64.71%)的作用相当;四氢黄连碱可显著性提高内毒素休克小鼠的存活率,其中高剂量组(30 mg/kg)内毒素休克小鼠72 h内的存活率为70%,低剂量组(10 mg/kg)为40%,四氢黄连碱组的存活率与阴性组(30%)相比差异有统计学意义。结论四氢黄连碱具有较强的抗炎、抗内毒素休克作用,且抗炎机制可能与抑制炎性物质的渗出和炎症细胞因子的分泌有关。

具有中医“热毒血瘀证”表征的大鼠血液成分和流变学变化

目的研究具有中医"热毒血瘀证"证候的大鼠血液成分和流变学变化,以阐释"热毒血瘀证"的生物学基础。方法大鼠腹腔注射内毒素即脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),连续8周,从中西医学不同视角,观察注射期间和注射后不同时间点大鼠症状表现,包括采集舌像、检测白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-,αTNF-α)、血小板聚集、红细胞聚集和变形、血液粘度、血脂和凝血因子。结果注射毒素后大鼠活动减少,大便臭秽;尾部逐渐变得紫暗,舌质由红润变得暗、干涩、舌下静脉变长;给药第1周大鼠血液有凝血时间延长和血脂波动,随后有血液流变学异常和血细胞功能改变表现;4周至8周血小板聚集、血浆粘度和血脂升高。结论腹腔注射内毒素后,大鼠出现符合中医热毒血瘀证证候的舌像和体征,其生物学表现是一个动态过程首先是炎症反应并波及血液内成分变化和凝血变化,然后会引起微循环障碍和血流变的异常。这在一定程度反映中医"热毒血瘀证"的现代生物医学表现特征。

来曲唑联合细菌内毒素法建立PCOS肾虚血瘀大鼠模型评价

目的:采用来曲唑灌胃法联合细菌内毒素(LPS)腹腔注射构建PCOS肾虚血瘀病证结合大鼠模型,并对模型进行评价。方法:6周龄清洁级SD雌性大鼠分为模型组和空白组。模型组大鼠首先采取来曲唑灌胃法模拟肾虚PCOS模型,评估后选取成功模型大鼠继续给予细菌内毒素(LPS)腹腔注射,构建PCOS肾虚血瘀病证结合动物模型。空白组同环境下正常饲养。观察大鼠形态、体质量、动情周期变化、卵巢形态学和组织学;检测大鼠血清性激素水平、炎性因子、血脂、凝血功能及血液流变学。结果:PCOS模型大鼠体质量增加高于空白组,阴道上皮细胞失去周期性变化(P<0.05);血清性激素(LH、T)、空腹胰岛素(INS)浓度明显高于空白组(P<0.05),血清FSH、E2水平明显低于空白组(P<0.05);注射LPS后,大鼠表现出了体质量增加减慢、活动减少、皮毛失去光泽、爪甲干枯、大便臭秽、舌质由淡红变紫暗干涩,舌下静脉增粗变长;模型组大鼠血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平均高于空白组(P<0.05),总胆固醇(TC)显著高于空白组(P<0.01);模型组大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)浓度均高于空白组(P<0.05);模型组大鼠血浆凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)含量高于空白组(P<0.05);两组凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶原时间(APTT)差异无统计学意义(P>0.05);模型组血小板聚集率高于空白组(P<0.05),全血黏度、血浆黏度均显著高于空白组(P<0.01)。模型组大鼠卵巢表面苍白,卵巢体积增大,可见大量囊状卵泡形成;空白组卵巢色泽红、表面光滑。模型组卵巢组织颗粒细胞减少,囊状扩张卵泡易见;空白组大鼠卵巢颗粒细胞呈多层,囊状扩张卵泡不易见。结论:来曲唑联合细菌内毒素(LPS)所构建动物模型符合PCOS肾虚血瘀证特征。

精制清开灵注射液对内毒素致大鼠多脏器损伤保护作用的研究

目的:考察精制清开灵注射液对内毒素致大鼠多脏器损伤的保护作用。方法:将内毒素500eu/kg(200eu/ml,2.5ml/kg)尾静脉注入大鼠,造成大鼠多脏器损伤,并施以药物治疗。结果:精制清开灵注射液具有明显的抗内毒素作用,恢复内毒素导致的脏器损伤。结论:增强自由基的活力和抑制过氧化损伤是精制清开灵注射液保护机体组织损伤的作用机理之一。

中药方剂对实验性发热模型动物体温的影响

目的观察相关中药方剂(一至六号方)退热的药理作用。方法给大鼠注射酵母菌,给家兔注射内毒素,复制发热模型,测定药后各时间点肛温,计算各时间点体温变化。结果一至六号方均有不同程度的退热作用,其中一号方、三号方、四号方对内毒素引起的体温升高的抑制作用比较明显,二号方和四号方对酵母菌引起的体温升高的抑制作用比较明显。结论一至六号方对实验性发热模型动物体温有不同程度的缓解作用,尤其是四号方有良好的应用前景。

内毒素与角叉菜胶联合诱导的血栓形成模型的动物差异性比较

目的:比较不同品系大鼠或小鼠采用内毒素(LPS)和角叉菜胶(Ca)联合制备血栓形成模型的差异。方法:选用2种大鼠(SD和Wistar大鼠)和3种小鼠(昆明KM种,ICR,Balb/c)进行比较。造模方法为:动物先给予Ca(ip),大鼠为25 mg.kg-1,小鼠为150 mg.kg-1,16 h后大鼠和小鼠均给予LPS 50μg.kg-1(iv)。对照组给予同体积生理盐水。于给予LPS后24 h,观察动物尾部血栓形成情况。并于给予LPS后不同时间取血,检测动物的血液学变化(外周血白细胞、血小板、红细胞比容)和血清炎性因子TNFα和IL-6水平。结果:LPS/Ca联合造模在2种大鼠和3种小鼠均可诱导血栓形成模型,在动物的尾部均可见清晰的血栓。5种动物造模后的血液学动态变化过程相似,均于早期出现外周血白细胞和血小板显著下降。2种大鼠造模后均迅速出现血液炎性因子TNFα和IL-6分泌显著增高,二者产生TNFα和IL-6的时间动态过程一致。结论:采用LPS/Ca联合用药在5种动物上均可成功地制备出血栓形成模型,故本模型具有较广泛的动物适用范围,炎性因子的大量分泌是造成血栓形成的关键病理机制之一。

酒精联合内毒素诱导慢性胰腺炎模型的建立

目的:用酒精联合内毒素建立一个新型的慢性胰腺炎(Chronic pancreatitis,CP)的大鼠模型,为研究CP的发病机制提供合适的动物模型。方法:18只1月龄雄性SD大鼠随机分为对照组、酒精组和模型组,每组各6只。饲以25%酒精,12周后反复腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS),建立CP的动物模型。在光镜下观察胰腺组织显微结构变化,用Masson染色法观察胰腺组织胶原的改变,并测定胰腺组织匀浆中的淀粉酶和脂肪酶及血糖浓度。结果:模型组胰腺小叶内可见炎症细胞浸润,胶原纤维较对照组和酒精组明显增多,胰腺组织内淀粉酶和脂肪酶降低(P<0.05)。结论:在长期摄入乙醇的基础上反复腹腔注射LPS可造成CP发生,本模型可以用于CP的研究。

大承气汤对全身性炎症反应干预作用的实验研究

[目的]探讨大承气汤对全身炎症反应综合征(SIRS)的干预作用的机理。[方法]选用酵母多糖A诱导的小鼠SIRS模型,给予大承气汤后,分别在6h,12h和24h等时点用鲎试剂微量法测定小鼠血清内毒素含量,用放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量。[结果]SIRS状态下模型小鼠血清内毒素、TNF-α、IL-6均升高;与同时点模型组比较,大承气汤6h、12h时点可以明显抑制血清内毒素的升高(P<0.05或P<0.01); 大承气汤6h组TNF-α水平降低(与造模后6h组比,P<0.05); 血清IL-6水平方面,大承气汤各组比正常组升高的幅度均较模型各组低,在24h时点大承气汤组比模型组显著降低(P<0.05)。[结论]大承气汤在SIRS过程中可以有效地抑制内毒素的转移和TNF-α、IL-6等炎症反应性细胞因子的产生。