注射用单磷酸阿糖腺苷细菌内毒素检查方法研究

目的:建立注射用单磷酸阿糖腺苷的细菌内毒素检测方法并进行方法学验证,以期对该品种的质量控制标准进行统一规范。方法:按照《中国药典》2020年版四部通则1143“细菌内毒素检查法”,确定细菌内毒素的限值,进行干扰试验,并进行内毒素检查。结果:按经验拟定的限值标准(每1mg单磷酸阿糖腺苷中含内毒素的量应小于0.06EU)对15个厂家提供的25个批次的供试品进行细菌内毒素检查,结果均符合规定。结论:本文建立的细菌内毒素检查法检查,可用于注射用单磷酸阿糖腺苷的质量控制。

唑来膦酸细菌内毒素质量控制及rFC方法学研究

目的:统一唑来膦酸注射液细菌内毒素检测标准,并建立重组C因子(rFC)检测方法。方法:用凝胶法(BET)对13批次国家监督抽验唑来膦酸注射液进行检测;用2个厂家rFC试剂盒,对3个厂家不同浓度(500、100、50、25μg·mL-1)的唑来膦酸注射液测进行干扰试验。结果:规格100 mL:5 mg的,按1 mL<0.50 EU进行检测,其他规格的按1 mg<5.0 EU进行检测,结果均符合规定。25μg·mL^(-1)两个厂家rFC试剂盒回收率均在50%~200%之间。rFc法验证:对8批次唑来膦酸注射液,按25μg·mL^(-1)进行验证,对5批次唑来膦酸注射(100 mL:5 mg),按0.5 EU·mL^(-1)进行验证,回收率均在50%~200%之间。结论:唑来膦酸注射液的细菌内毒素检查法可拟定为:取本品,依法检查(通则1143),每1 mL中含内毒素的量应小于0.50 EU(100 mL及以上规格大输液);取本品,依法检查(通则1143),每1 mg唑来膦酸中含内毒素的量应小于10.0 EU。细菌内毒素重组C因子试剂盒检测方法:取本品,用细菌内毒素检查用水稀释为每1 mL含唑来膦酸25μg、或1倍稀释(规格100 mL:5.0 mg大输液),按试剂盒的说明书进行检测,回收率应在50%~200%之间。

重组C因子检测银杏叶提取物注射液细菌内毒素的方法学研究

目的:建立银杏叶提取物注射液的重组C因子细菌内毒素检测方法。方法:使用重组C因子法进行细菌内毒素方法学研究,并用鲎试剂动态显色法、家兔法对银杏叶提取物注射液进行对比研究。结果:金纳多注射液稀释至400倍及以下浓度进行试验,回收率均在《中国药典》规定的50%~200%范围内,符合药典规定,并与动态显色法和热原法结果一致。结论:本研究为重组C因子检测中药注射液细菌内毒素的方法学和标准的建立提供了实验依据。

注射用伏立康唑细菌内毒素检查研究

目的:统一注射用伏立康唑细菌内毒素检查法质量标准,避免一药多项、一项多限的问题。方法:按照《中国药典》2020年版四部通则1143“细菌内毒素检查法”,确定细菌内毒素限值,进行干扰试验,并进行内毒素检查。结果:细菌内毒素限值定为“每1 mg伏立康唑中含内毒素的量应小于0.75 EU”,对两个公司生产的15批次样品进行细菌内毒素检查,结果均符合规定。结论:所建立的方法,可满足安全需要,且生产厂家的工艺水平也完全可以达到此要求,可用于注射用伏立康唑细菌内毒素检查。

首批单核细胞活化反应检查法专用细菌内毒素国家标准品的建立与应用

目的 为《中华人民共和国药典》(2020年版)9301单核细胞活化反应检查法建立专用的细菌内毒素国家标准品,保障注射剂的质量安全。方法 通过生产制备、协作标定、均匀性考察等研究,建立了首批细菌内毒素国家标准品(单核细胞活化反应检查法专用)。结果 全国5家药品检验所使用3种方法进行协作标定,标定结果间经方差分析无显著性差异,加权平均值为每支152.0 EU,95%置信区间为每支136.2~169.5.0 EU,可信限率为10.96%。均匀性研究符合规定。待标品使用单核细胞活化反应检查法检测结果平均值为每支144.6 EU。最终确定待标品为细菌内毒素国家标准品(单核细胞活化反应测定用),效价为每支150 EU。结论 建立了首批细菌内毒素国家标准品(单核细胞活化反应检查法用,批号:150608-202101)。

细菌内毒素国家标准品的协作标定

目的:标定中国食品药品检定研究院细菌内毒素工作标准品(细菌内毒素检测用)。方法:以细菌内毒素国家标准品(9000 EU/支,细菌内毒素检测用)为标准,采用2020年版《中华人民共和国药典》四部1143细菌内毒素检查法中凝胶法和动态浊度法分别对给定的6支细菌内毒素工作标准待标品进行效价标定。结果:待标品预估效价为90 EU/支,标定结果除1支存在偏差外,其余5支效价均在可接受范围。结论:本批待标品采用动态浊度法进行检测时效价较凝胶法测定结果和预估效价均偏低,是否因环境或运输因素使其效价衰减,还有待进一步的实验研究。采用量反应平行线法对动态浊度法测定结果进行尝试计算,结果显示其试品间存在差异,其他全部符合平行,可能是配制时的浓度需要调整。

小牛脾提取物溶液细菌内毒素检查方法学研究

目的:建立小牛脾提取物溶液细菌内毒素检查方法,并进行方法学验证,完善小牛脾提取物溶液质量标准。建立细菌内毒素检查方法,完善小牛脾提取物溶液检验标准。方法:依据《中国药典》2020年版四部通则1143确定细菌内毒素限值,进行方法学验证。结果:含有0.625 mg·mL^(-1)多肽的小牛脾提取物溶液对细菌内毒素试验无干扰,细菌内毒素检查法质量标准建议拟定为:取本品,依法检查(《中国药典》2020年版四部通则1143),每1 mg多肽中含内毒素的量应小于0.8 EU。用拟定方法对3批次小牛脾提取物溶液进行细菌内毒素检查,结果均符合规定。结论:鲎试剂凝胶法可用于小牛脾提取物溶液细菌内毒素检查。

非水溶性样品用的细菌内毒素标准品的研制

目的为非水溶性样品细菌内毒素检测建立一批内毒素标准物质。方法将细菌内毒素原料通过分装冻干(不添加赋形剂)制备了候选品A和B。两批候选品采用3种方法(实验室个数:凝胶法13个、动态浊度法9个、动态显色法5个)进行协作标定。结果经统计分析,3种方法标定候选品A的效价几何平均值分别为680.1 EU、827.0 EU、800.8 EU,RSD分别为22.4%、16.2%、16.7%,3种方法的方差分析P值为0.067,差异无显著性,候选品A的效价加权平均值为774.0 EU(95%置信区间为721.0~831.0,FL%为7.10)。3种方法标定候选品B的效价几何平均值分别为1640.6 EU、1828.6 EU、3224.8 EU,RSD分别为33.9%、47.0%、54.4%,3种方法的方差分析P值为0.030,差异具有显著性,用卡方检验对权重进行校正,得到候选品B的校正加权平均效价值为1822.7 EU(95%置信区间为1548.7~2145.2,FL%为16.4)。根据结果淘汰候选品B。结论经国家标准物质委员会批准,候选品A成为我国首批细菌内毒素国家标准品(非水溶性样品专用),效价为每支700 EU。

超纯透析对维持性血液透析患者炎症状态及营养状况的影响

目的探讨超纯透析对维持性血液透析(MHD)患者血BUN、Scr、UA、Alb、Hb、Hct、CRP、β2-MG、Ca、P、iPTH水平的影响。方法选择本院52例血液透析(HD)患者,改造前使用一级反渗透及自配透析液,透析时间>1年,检测其上述观察指标。随机分为两组,每组26例,纯水组:改造后使用二级反渗透系统,并使用厂家专供A、B透析浓缩液;超纯组:纯水透析的基础上,透析机后安置EF-020微粒子过滤器获取超纯透析液。跟踪观察纯水组及超纯组治疗3、6个月后各观察指标的变化。结果专供透析液及超纯透析液细菌菌落数少于自配透析液(P<0.01)。纯水组及超纯组分别治疗3个月后,血Alb、Hb、Hct水平提高(P<0.01),3、6个月治疗组间比较无统计学差异(P>0.05);血BUN、Scr、UA、Ca、P、iPTH及β2-MG水平无统计学差异(P>0.05)。提高反渗水及透析液纯度后,CRP水平降低明显(P<0.01);3、6个月组间比较均有统计学差异(P<0.01,P<0.05)。纯水组及超纯组治疗6个月后,上述观察指标水平比较均无统计学差异(P>0.05)。结论提高透析用水和透析液纯度可减少透析过程中的单核细胞的活化,降低促炎症介质的释放,并能持续降低炎症状态,低蛋白血症及贫血状况均有明显改善,有效提高透析质量。

第7批细菌内毒素国家标准品的建立

目的建立第7批细菌内毒素国家标准品。方法冻干制备了2批细菌内毒素国家标准品候选品。以第2批细菌内毒素国际标准品(94/580)为基准,采用凝胶法、动态浊度法和终点显色法3种方法,组织了13家单位进行协作标定。结果与结论通过比较2批候选品标定结果的精密性及对3种标定方法是否存在显著性差异,最终确定其中1批候选品为第7批细菌内毒素国家标准品,效价为10000EU.支-1,批号:150600-200707。

细菌内毒素国家标准品研制技术规范的介绍

目的为保证细菌内毒素国家标准品的质量,规范研制工作,制定技术规范。方法详细介绍细菌内毒素国家标准品研制要求及主要工作流程。结果与结论进一步加强和规范了细菌内毒素国家标准品的管理工作。

獭兔在药品热原检查实验中的应用研究

目的研究獭兔在药品质量检验热原检查项目中的应用前景。方法按中国药典(2015年版)分别用普通级獭兔和新西兰兔进行市售药品甘油果糖注射液等4种供试品进行热原检查以及细菌内毒素国家标准品(灵敏度测试)的热原实验,观察比较实验兔的体温变化。结果市售4种注射液分别用獭兔和新西兰兔进行热原检查结果均符合规定,细菌内毒素国家标准品按5EU·kg^-1、10EU·kg^-1剂量静脉注射给药,獭兔、新西兰兔均有升温超过0.6℃,且无明显差别。结论獭兔可应用于药品检验中的热原检查实验。

生脉注射液细菌内毒素检查法研究

通过初步筛选试验和干扰试验对生脉注射液的细菌内毒素检查法进行了研究 ,结果表明 ,生脉注射液经 10倍稀释 ,用灵敏度为 0 .2 5EU·mL-

气相色谱-质谱联用辅助鉴定细菌内毒素标准品菌种来源的纯度

为分析内毒素标准品菌种来源的纯度,建立了采用气相色谱-质谱联用法、以N,O-双三甲基硅三氟乙酰胺作为硅烷化试剂对待测物进行衍生、对内毒素标准品所含的3-羟基脂肪酸种类进行检测的方法。色谱柱为DB-5(60m×0.25mm i.d.);载气为氦气,恒压,柱前压206kPa;进样器温度250℃;柱箱初始温度为90℃,保持5m in,以5℃/m in的升温速率升至280℃,保持5m in。进样量为1μL,不分流进样。质谱离子源为电子轰击离子源(E I),离子源温度为250℃,接口温度为280℃。通过对内毒素标准品和大肠杆菌、绿脓杆菌、去离子水中3-羟基脂肪酸种类的比较,探讨了通过3-羟基脂肪酸种类来辅助判断内毒素标准品菌种来源的问题。结果显示,来源为大肠杆菌的9 000EU/支内毒素国家标准品中只含有3-羟基十四烷酸;20EU/支的内毒素工作标准品中除含有3-羟基十四烷酸外,还含有3-羟基十二烷酸,说明其含有非大肠杆菌的细菌。

血液透析系统内毒素检测及其浓度含量控制

目的:依据血液透析治疗对内毒素的相关标准要求,采用鲎试剂法对透析液的内毒素含量进行检测,基于戴明循环(PDCA)管理模式加强对透析治疗过程管控,以提高透析治疗的医疗质量。方法:使用透析专用鲎试剂(凝胶法)对内毒素进行定性及半定量检测,动态浊度法鲎试剂检测内毒素浓度,根据国际标准及行内标准,判断所测的透析液是否合格。结果:利用凝胶法和动态浊度法检测,有少数透析液样本出现不合格的结果,针对不合格结果,及时进行了消毒处理。鲎试剂检测透析液的内毒素含量方法,能够强化血液透析内毒素浓度含量控制,有效地控制了微生物及内毒素污染,提高透析液质量。通过对处置过程形成记录,持续修订处置预案,改进处置措施,确保透析治疗医疗安全。对于异常检测结果,应迅速判明原因,启动处置预案,再次检测直至合格。结论:血液透析内毒素浓度含量控制是医院感染控制的重要内容,必须依据行业标准和医院感染控制要求,执行操作规程,加强预防控制。

诺氟沙星葡萄糖注射液细菌内毒素检查法研究

目的:建立凝胶法和光度法测定诺氟沙星葡萄糖注射液中细菌内毒素的方法。方法:按《中国药典》2015年版四部1143检查法,采用凝胶限量法和动态浊度法进行实验和结果判断。结果:拟定每1 mg诺氟沙星中含内毒素的量应小于0.75 EU,诺氟沙星葡萄糖注射液24倍稀释后对细菌内毒素检查法无干扰作用,即最大不干扰浓度为0.08 mg·mL^-1。结论:该品种采用细菌内毒素检查法代替热原检查法控制质量,方法可行。

内毒素工作标准品的效价测定及标示方法

目的:介绍内毒素工作标准品(CSE)效价的测定方法和标示方法。方法:以实例介绍美国 FDA 测定 CSE 的方法及要求,介绍现行标示 CSE 效价的两种方法——固定效价标示法和浮动效价标示法,对2种 CSE 效价标示方法的利弊进行分析。结果:用固定效价法标示 CSE,忽略了 RSE/CSE 比率差异的影响因率,影响 BET 实验的精密度和可信度。结论:应采用浮动法标示 CSE 效价。

对GB/T 14233.2-2005修订的建议

GB/T 14233.2-2005《医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分:生物试验方法》是我国现行的医用输液、输血、注射器具的国家推荐标准,自颁布以来,对医用输液、输血、注射器具类别的医疗器械检验具有极其重要的指导意义。本文主要结合GB/T 16886《医疗器械生物学评价》和《中国药典》标准现状及具体试验方法,对GB/T 14233.2-2005提出改进建议。

绿茶有效组分固定剂量联合对牙周炎大鼠的治疗效果

目的探讨绿茶4种主要有效组分联合用于牙周炎大鼠治疗的效果。方法将288只牙周炎模型SD大鼠随机均分为空白组(生理盐水)、单用1组(茶多酚)、单用2组(咖啡碱)、单用3组(铁)、单用4组(锌)、联用1组(茶多酚联用铁)、联用2组(茶多酚联用锌)、联用3组(咖啡碱联用铁)、联用4组(咖啡碱联用锌),共9组,均干预5 d;比较9组大鼠干预前后龈沟液中脂联素(ADP)及内毒素(RSE)的含量,血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-17(IL-17)含量,使用相加交互作用分析4个联用组对ADP的影响。结果干预后,ADP含量单用1组和单用2组高于空白组、联用1组高于单用1组、联用2组高于单用2组、联用4组高于单用2组,RSE含量正好相反(P<0.001);TNF-α含量,单用1组低于空白组、联用2组低于单用2组、联用4组低于单用2组(P<0.001);IL-17含量,4个单用组低于空白组,联用1组低于单用1组、联用2组低于单用2组、联用4组低于单用2组(P<0.001);4个联用组均存在相加交互作用,作用最强的是联用2组(AP=70.27)。结论绿茶中茶多酚和咖啡碱有抗菌作用,且茶多酚、咖啡碱、铁、锌兼有抗炎作用,其中茶多酚和锌搭配的使用效果最好。

大蒜素氯化钠注射液细菌内毒素检测方法的研究

目的研究大蒜素氯化钠注射液对细菌内毒素检查实验的干扰情况,并建立其细菌内毒素检查的质量标准。方法参照中国药典2000年版二部附录ⅪE细菌内毒素检查法和附录ⅪⅩF细菌内毒素检查法应用指导原则进行试验。结果供试品13倍稀释液无干扰作用。结论该制剂可以用细菌内毒素检查法控制产品质量。