解硫胺类芽孢杆菌SY20中多粘菌素A1合成与调控相关基因表达分析

该研究以前期筛选的多粘菌素A1产生菌株Paenibacillus thiaminolyticus SY20为研究对象,首先探究菌株在不同生长阶段的抑菌活性变化规律;随后,利用实时荧光定量PCR,研究多粘菌素A1合成基因簇(pmx)五个基因pmxA、pmxB、pmxC、pmxD和pmxE在发酵过程中的表达情况。最后,探究多粘菌素调控基因sfp、ectB、spo0A和abrB表达水平。结果表明,在M63T培养基中,P.thiaminolyticus SY20抑菌物质在菌株生长的对数前期产生,至对数末期或平台前期(84 h)达到最大值;pmx基因簇各基因在菌生长对数前期(36 h)表达水平显著提高且基本呈现同步趋势;ectB与pmxA、pmxE基因的表达水平也基本同步;sfp和spo0A基因表达与抑菌活性呈正相关,而abrB基因与抑菌活性呈负相关。因此,在P.thiaminolyticus SY20发酵过程中,pmx基因簇表达水平先于抑菌活性达到最大值,ectB基因与多粘菌素A1合成密切相关,sfp和spo0A基因为正调控基因,而abrB基因为负调控基因,为多粘菌素合成与调控机制提供理论基础。

SY-G型高性能膨胀抗裂剂对混凝土性能的影响

本文研究了SY-G型高性能膨胀抗裂剂在C40混凝土中的应用效果,深入探讨该膨胀抗裂剂对混凝土抗压强度、抗水渗透性能、抗氯离子渗透系数及限制膨胀率的影响。结果表明:随SY-G型高性能膨胀抗裂剂掺量的逐渐增加,混凝土的抗压强度不断增大,抗水渗透性能和抗氯离子渗透性能逐步提升,限制膨胀率达到标准技术要求且表现出先快速后平缓的增长趋势。因此,SY-G型高性能膨胀抗裂剂有效地提高混凝土力学性能和耐久性,延缓或阻止其裂缝的产生,进一步提高混凝土的使用寿命。

SY土壤固化剂对砂质粉土工程性能的影响研究

采用SY土壤固化剂,以砂质粉土为固结对象,分别在水泥含量10%、15%和20%,固化剂掺量为0.5%、1.0%、1.5%和2.0%时,制成最大干密度的试样,进行了3、7、14和28 d无侧限抗压强度试验,28 d劈裂抗拉强度试验,水泥含量20%时,1.0%、1.5%和2.0%固化剂掺量时的抗渗试验,以及水泥含量20%、1.5%固化剂掺量时的冻融循环试验。结果表明,SY固化剂能显著提高砂质粉土的力学性能、抗渗、抗冻性能;在同一个固化剂掺量下,其力学性能、抗渗、抗冻性能随着水泥含量的增加而提高;固化剂掺量、水泥含量与土壤含量三者之间存在协调性。SEM测试和机理分析表明,SY土壤固化剂生成的大量二氧化硅凝胶和微膨胀的钙矾石晶体,使内部结构更加致密,从而提高了砂质粉土的宏观力学性能和抗渗、抗冻性能,可用于渠道防渗工程中。

SY-D15表面处理剂的性能研究

SY-D15表面处理剂具有良好的综合性能,对于不同的复合材料胶接体系都能够显著提高粘接强度,SY-14A胶粘剂-5405/HT3复合材料胶接体系和SY-24C胶粘剂-3218/SW-280A复合材料胶接体系的粘接强度能够提高30%以上,胶接接头具有优异的耐介质、耐热和耐湿热老化等耐久性能。

针刺通过颅脑损伤大鼠血清对SY5Y细胞内钙离子浓度的影响

目的:研究针刺通过颅脑损伤大鼠血清对SY5Y细胞内钙离子[Ca2+]i的影响。方法:采用激光共聚焦显微镜的动态扫描功能和荧光分子探针技术,从针灸血清学和细胞学角度,对针刺通过颅脑损伤大鼠血清对SY5Y细胞[Ca2+]i的影响进行研究。结果:各组血清孕育后SY5Y细胞[Ca2+]i相比较显示,模型对照组的荧光强度明显高于空白对照组(P<0.01),而针刺治疗组的荧光强度虽然也高于空白对照组(6h组除外),但明显低于模型对照组(P<0.01)。结论:颅脑损伤大鼠的血清可使SY5Y细胞[Ca2+]i升高,针刺可以通过血清减缓此过程的发生。

SY固化土构件在护坡工程中的性能及其机理研究

将SY土壤固化剂和水泥掺入砂壤土,制成不同形状规格的SY固化土护坡构件,分别在水泥含量15%,20%和25%,固化剂掺量为1%,2%,3%和4%时,制成最大干密度的试样,进行了3,7,14和28d无侧限抗压强度试验,以及水泥含量25%,固化剂掺量3%时的冻融循环试验。结果表明,SY固化剂能显著提高砂壤土的力学性能和抗冻性能;在同一个固化剂掺量下,其力学性能和抗冻性能随着水泥含量的增加而提高;固化剂掺量、水泥含量与土壤含量三者之间存在协调性。SEM测试和机理分析表明,SY土壤固化剂生成的大量二氧化硅凝胶和微膨胀的钙矾石晶体,使内部结构更加致密,从而提高了砂壤土的宏观力学性能和抗冻性能。SY固化土护坡构件完全满足护坡工程质量要求,具有较高的经济、社会和生态价值。

生防菌株SY286对葡萄霜霉病菌的抑菌效果

研究了生防细菌SY286菌株对葡萄霜霉病菌的抑菌效果,试验结果表明:SY286菌株在代谢过程中能够产生纤维素酶、蛋白酶和嗜铁素等抑菌代谢产物;SY286的发酵液成分可导致葡萄霜霉病菌菌丝及孢子囊出现皱缩、破裂等现象;SY286振荡培养3d,抑菌效果最大,达93.18%;60%的硫酸铵饱和度下提取的抑菌粗提蛋白对葡萄霜霉病菌的抑菌效果最好,抑菌效果可达76.30%。

海洋新细菌Zooshikella sp.SY01的培养条件研究

从海南三亚海域表面海水分离得到一株能产具有强效生理活性的灵菌红素类化合物的海洋新细菌Zooshikella sp.SY01,对这株细菌的培养条件进行了研究。在2216E培养基中分别加入色氨酸、组氨酸、内酯酸、樟脑、柠檬烯、干酪素、二苯胍、香豆素、间二硝基苯等9种不同物质,培养5d后,利用(+)ESI-MS技术测定了不同培养条件下代谢产物的产生情况。研究结果表明,加入色氨酸、组氨酸、干酪酸,不影响细菌灵菌红素的生物合成;加入内酯酸、樟脑、柠檬烯、二苯胍、香豆素对细菌生长或者灵菌红素的生物合成具有一定的抑制作用,能明显延迟培养液变红的时间;而加入间二硝基苯则能完全抑制细菌产灵菌红素类化合物。(+)ESI-MS对细菌Zooshikella sp.代谢产物相对分子质量检测的结果也表明,在不同培养条件下能够产生化学结构多样的代谢产物,尤其是在柠檬烯组,检测到系列相对含量高的较大相对分子质量的化合物,表明该菌具有丰富的生物合成潜力。深入研究并优化该菌的培养条件,有望从该菌的代谢产物中发现更多新的灵菌红素类化合物和其它新结构的活性先导化合物。

红参水提物对Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的探讨红参水提物对Aβ25-35诱导人神经瘤母细胞SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法用Aβ25-35处理SH-SY5Y细胞,模拟阿尔茨海默病患者脑内神经元的病理损伤模型,以不同浓度的红参水提物进行干预;用倒置显微镜观察其形态学的变化;MTT法测定细胞的存活率;流式细胞技术检测细胞的凋亡率以及线粒体膜电位的变化。结果50μmol·L-1Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞72h后,细胞变圆、聚集,其存活率为39.26%±3.16%、凋亡率为37.30%±0.69%,线粒体红绿荧光强度比值为0.45±0.10;而Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞与不同浓度(1、5、10mg·ml-1)红参水提物同时孵育后,明显减少了细胞损伤,升高了细胞存活率、降低了凋亡率,并升高了线粒体红绿荧光强度比值。结论红参水提物对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞凋亡有显著的保护作用。

酸面团酵母菌Sy22的分离与发酵性能评价

为了获得性能优良的面团发酵菌株,本试验从来自内蒙古的发酵酸面团中分离获得5株酵母菌株,分别对其发酵性能进行测定,最终选取性能优良菌株Sy22进一步研究。基于形态学、生理生化试验以及26SrDNAD1/D2区序列分析综合测试结果,菌株Sy22被鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。在30℃下发酵12h,分别对单独添加该菌株面团的发酵性能以及该菌株与类食品乳杆菌412联合发酵面团的发酵性能、活菌数进行研究,结果显示:单一酵母菌株发酵后,面团pH由6.07降至5.36,滴定酸度由3.6°T增加到5.02°T,发酵力为0～1.32%;联合菌株发酵后,酸面团pH由5.58下降至3.85,滴定酸度由5.24°T增加到14.02°T,发酵力为0～1.79%,酸面团中的酵母菌活菌数为8.2×108 CFU/g,乳杆菌412活菌数为9.6×109 CFU/g。由此得出,菌株Sy22可单独作为面团发酵菌株使用,能很好的参与面团的发酵;与类食品乳杆菌412联合后发酵能力好,并表现出良好共生性。

李氏5号方对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响

目的:观察李氏5号方在细胞水平上对神经细胞生长的影响,寻找最佳药物浓度.方法:不同浓度的李氏5号方作用于人神经母细胞瘤株SY5Y,利用MTT测定细胞的存活率,制定浓度-药效曲线得出最佳药物浓度.以MTT代谢率、LDH漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标.结果:李氏5号方在0.125～0.75 g*L-1浓度范围内均可增加SY5Y细胞的存活率.与正常对照组相比,加药组SY5Y细胞轴突长度和胞体面积均增加,MTT代谢率升高、LDH漏出率降低. 结论:李氏5号方具有营养神经细胞、促进神经细胞存活的作用.

芡实提取物对SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及体外抗氧化活性研究

目的观察芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物对过氧化氢(H2O2)诱导的SH-SY5Y神经细胞损伤的保护作用及其体外抗氧化活性。方法采用体外细胞培养的方法,建立SH-SY5Y神经细胞H2O2损伤模型。用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒法检测以上不同浓度芡实提取物对H2O2诱导损伤的SH-SY5Y神经细胞活力的影响,计算抑制率。用体外抗氧化实验方法检测芡实3种提取物清除DPPH、ABTS自由基及还原铁的能力。结果芡实80%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇提取物在含生药量10～30mg/mL浓度范围内,均表现出明显的抑制H2O2对SH-SY5Y神经细胞氧化损伤的作用(P<0.05,P<0.01),且对DPPH、ABTS自由基及三价铁离子有很好的清除作用及还原能力,其中芡实正丁醇提取物的作用最强。结论芡实具有保护SH-SY5Y神经细胞免受H2O2氧化损伤的作用,有着很好的抗氧化活性,其中正丁醇提取物的抗氧化活性最强。

热轧钢板桩SY390BZ的低温冲击韧性

试验用热轧钢板桩SY390BZ材料(%:0.23C、0.44Si、0.91Mn、0.06V、0.010P、0.002S)用55 kg真空感应炉冶炼并铸成Φ170 mm圆锭,轧成12 mm板,平轧最后一道次的压下量为20%,终轧温度880～900℃,空冷。测定了该钢的韧脆性转变温度,采用Quanta 400型扫描电镜和Olympus GX71型光学显微镜观察20～-60℃低温冲击断口和组织形貌。结果表明,室温时断口为大而多的等轴韧窝,具有较高的韧性(130 J);-40℃时,断口形貌韧窝比较小,而且非常浅,其韧性降低至30 J;用能量法计算得出其脆性转变温度为-30℃;钢中出现了带状组织以及Al_2O_3夹杂导致冲击韧性较低。

过氧化氢对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响

目的观察过氧化氢(H2O2)诱导SH-SY5Y细胞损伤后对线粒体膜电位的影响。方法向培养的SH-SY5Y细胞加入H2O2100、200、500μmol/L作用24 h诱导产生氧化损伤,应用MTT比色法检测细胞存活率,测定培养液中一氧化氮(NO)含量;并采用流式细胞仪检测细胞凋亡及线粒体膜电位。结果与空白对照组比较,其他实验组随H2O2浓度的加大,细胞存活率、线粒体膜电位逐渐下降,而NO的释放量及细胞凋亡数显著性增多,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 H2O2可引发细胞内NO的产生,使线粒体膜电位下降,导致神经细胞凋亡,从而造成脑细胞损伤,其损伤程度与H2O2浓度呈正相关。

SY/T 6477-2014含缺陷油气输送管道剩余强度评价方法先进性分析及软件开发

介绍了SY/T 6477-2014标准与之前版本的差异和完善之处,同时介绍了如何运用该标准进行剩余强度评价来确定已知缺陷所允许服役载荷、剩余寿命、检验周期等。为便于工程实际应用,基于此标准开发了剩余强度评价软件,包含数据管理与系统管理功能模块。以油气输送管道均匀腐蚀缺陷为例,介绍了所开发软件的评价过程,验证了软件的适用性。

救脑益智胶囊水提物对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响

目的 :通过观察救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y信号转导的影响 ,探讨此药促进神经细胞生长的可能机理。方法 :以人神经母细胞瘤株SY5Y为细胞模型 ,分为正常对照组和加药组。收集对照组及加药组细胞裂解物 ,取上清用Lowry法进行蛋白定量 ,将总蛋白量相等的样品进行免疫沉淀Westernblot分析。 结果 :与正常对照组比较 ,加药组SY5Y细胞蛋白激酶B(proteinkinaseB ,Akt/PKB) ,cAMP反应元件结合蛋白 (cAMPresponseelementbindingprotein ,CREB)、磷酸化的CREB (phosphorylatedCREB ,P CREB)表达增加 ,细胞色素C(cytochromeC ,cytC1)表达减少。结论 :救脑益智胶囊的生药水提取液能促进SY5Y神经母细胞存活信号通路中Akt/PKB ,P CREB的表达 。

低温贫营养好氧反硝化细菌SY13的反硝化特性

从底泥中分离出1株低温贫营养好氧反硝化细菌SY13,经常规生理生化鉴定和16SrDNA测序,鉴定出细菌SY13属于Acinetobacter sp.。考察了温度、pH、C/N比及接种量对菌株SY13硝酸盐还原活性的影响,初始硝酸盐浓度为15mg/L左右,温度为15℃时低温贫营养好氧反硝化细菌SY13的硝酸盐去除率为49.26%,在中性环境适应性较强,pH值为7.0时72h的硝氮去除率达到58.08%,随着C/N比不断增加,菌株SY13硝酸盐的去除效果逐渐增强,接种量为10%时,菌株SY13培养72 h后的硝氮去除率可达到59.62%。

API RP 5L3—2014与SY/T 6476—2013中关于落锤撕裂试验有关规定的对比

对比了API RP 5L3—2014与SY/T 6476—2013标准中落锤撕裂试验的适用范围、试样制备、设备参数、试验温度和试样评价等主要技术要求。分析认为:这两个标准在落锤撕裂试验取样位置、试验尺寸、试样保温条件和试验结果评定方面存在较大差异;API RP 5L3—2014只适用于管线钢管,对试样缺口半径尺寸要求较为宽松,保温介质为液体,不接受异常断口的评定;SY/T 6476—2013适用于管线钢管和制管用板卷、钢板,对试样缺口半径要求严格,保温介质为液体或气体,规范性附录B中规定了异常断口的评定方法。

低氧增强SY5Y培养细胞内nPKCε的膜转位

目的:通过观察低氧刺激对培养SY5Y神经母细胞瘤细胞内nPKCε和nPKCθ膜转位激活的影响,以探讨两者是否参与细胞低氧预适应的发生。方法:利用本室建立的体外培养SY5Y细胞低氧刺激模型,并应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白印记(Western-Blot)等方法,半定量分析SY5Y细胞内nPKCε、nPKCθ的膜转位水平。结果:SY5Y细胞经低氧刺激后,随刺激时间(0.5、2、4、6、8、12和24h)的延长,nPKCε在胞浆内的含量逐渐减少,而胞膜成分中的含量则明显增加,且于低氧刺激2h后的增高水平具有统计学显著意义(P<0.001);然而,nPKCθ在正常情况下只存在于胞膜成分内,且其含量不随低氧刺激时间的增加而改变(P>0.1)。结论:nPKCε可能参与了细胞低氧耐受的发生。

肌肽对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

目的探讨肌肽对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制。方法 SH-SY5Y细胞用含葡萄糖50mmol·L-1的高糖培养液和肌肽0.6,3和15mmol·L-1的培养液培养48h,相差显微镜下观察细胞形态的变化;MTT比色法测定细胞存活率;Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;CDFH-DA探针法检测细胞中活性氧(ROS)的水平,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)的含量。结果与正常组(低糖培养基)相比,高糖组细胞存活率明显降低(P<0.01);Hoechst33258染色发现细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率、细胞中ROS的水平、上清液中8-OHdG的分泌量明显升高(P<0.01)。与高糖组相比,肌肽0.6,3和15mmol·L-1组细胞存活率明显升高(P<0.01);Hoechst33258染色发现细胞核核固缩裂解减少,形态明显改善;细胞凋亡率分别降低至(20.65±1.13)%,(14.95±0.64)%和(9.95±0.61)%(P<0.01);细胞中ROS的水平分别降低至(182±16)%,(168±15)%和(140±10)%(P<0.05);上清液中8-OHdG的分泌量均明显降低,分别为2.780±0.154,2.136±0.100和(1.864±0.151)μg·L-1(P<0.01)。单纯肌肽组的细胞存活率、细胞核形态以及细胞凋亡率与正常组相比无显著差异,细胞中ROS水平和上清液中8-OHdG的分泌量均有所降低,分别为(88±9)%和(0.380±0.023)μg·L-1(P<0.05)。甘露醇组的各项指标与正常组相比无显著差异。结论肌肽对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与肌肽的抗氧化作用有关。