表皮干细胞的研究进展

表皮干细胞(Epidermal stem cells,ESCs)是指表皮组织中具有不断增殖和分化能力的细胞。近年来,ESCs的研究取得了一定的进展,为临床疾病的治疗开辟了新思路。本文就ESCs定位、标记物、特性、调节机制及其应用前景等研究现况进行综述。

表皮干细胞与创伤修复

表皮干细胞具有无限增殖和分化的潜能,对维持表皮的自我更新、保持皮肤的正常结构以及对皮肤的创伤修复具有重要意义。表皮干细胞的研究已引起越来越多研究者的关注。本文就目前表皮干细胞的生物学特征、表面标记、分布特征和在创伤修复中的变化等方面的研究进展作一综述。

表皮干细胞中CK15和CD49f阳性率与年龄关系的初步探究

目的:探究人体包皮组织中分离的表皮干细胞CK15和CD49f阳性表达率与年龄的关系。方法:利用双酶法从1、11、28、31岁4个年龄组皮肤组织中分离表皮干细胞,用CK15和CD49分别进行标记,用流式细胞仪检测阳性率。结果:在研究的4个年龄组中,11岁年龄组皮肤中的细胞CK15和CD49标记物阳性率最高,分别为70.19%和25.27%;流式细胞仪分选出的CK15阳性和CD49f阳性表皮干细胞在体外可呈现克隆生长。结论:11岁年龄组的表皮干细胞活性较强,更适宜组织工程种子细胞的选用。

表皮干细胞鉴别与分离的研究进展

近年来,对干细胞的深入研究揭示了表皮主要由三种细胞成分组成表皮干细胞(epidermalstemcells熏ESCs)及其子代细胞——短暂增殖(transitamplifying熏TA)细胞、有丝分裂后(post鄄mitoticdiffer鄄entiating熏PMD)细胞。但由于尚未找到能够有效区别ESCs与TA细胞的方法,限制了以ESCs的分离及体外培养为基础的研究工作与临床应用。本文就ESCs的鉴别、分离方法的研究进展进行综述。

创伤愈合中P物质对表皮干细胞迁移及受体表达的作用

目的 探讨创伤愈合过程中感觉神经肽P物质 (substanceP ,SP)对表皮干细胞迁移及NK -1受体表达的影响。 方法 将实验鼠分为SP组、辣椒素组和对照组 ,三组均致背部全层皮肤缺损 ,SP组致伤当天开始创面给予SP(1次 /d) ,辣椒素组致伤前 1周皮下预注射辣椒素 (cap saicin) ,利用核标记物BrdU作为表皮干细胞的示踪剂 ,观察三组创面愈合速度、NK -1受体表达情况和表皮干细胞的迁移特征。 结果 SP组创面愈合速度最快 ,创缘BrdU阳性细胞率最高 ,峰值出现最早 ;辣椒素组愈合速度最慢 ,BrdU阳性细胞率最低 ,峰值出现最晚 ;SP组除创缘外 ,在创面肉芽组织中也出现了BrdU阳性细胞 ,另两组未出现。三组表皮干细胞表面NK -1受体染色阳性。 结论 表皮干细胞存在NK -1受体。SP能明显加速创面愈合速度 。

免疫荧光双标法在小鼠表皮干细胞分子标记筛选中的应用

目的用标记滞留细胞(LRCs)及免疫荧光双标记法进行小鼠表皮干细胞可靠分子标记的筛选。方法选择出生5 d的昆明小乳鼠进行腹腔注射5-溴,2-脱氧尿嘧啶(5-bromodeoxyuridine,BrdU),隔日注射,连续7 d。于注射后第90天进行取材,在冰冻切片上分别进行BrdU与整合素β1、P63和CD34的双重免疫荧光标记,观察这些标记物与BrdU的符合度。结果 90 d后小鼠皮肤上皮细胞中仍有少数阳性细胞,主要存在于毛囊的隆突部位,另有少数阳性细胞散落在基底层。免疫荧光双标的结果示,Brdu与整合素β1双标阳性的细胞占所有整合素β1阳性细胞的81%,占所有Brdu阳性细胞的94%;Brdu与P63双标阳性的细胞占所有P63阳性细胞的65%,占所有Brdu阳性细胞的86%;Brdu与CD34双标阳性的细胞占所有CD34阳性细胞的30%,占所有Brdu阳性细胞的62%。结论整合素β1与BrdU的符合率最高,P63其次。β1和P63是这些分子标记物中筛选干细胞最好的指标。

补益营卫方对衰老表皮干细胞增殖的影响

目的研究补益营卫方对衰老皮肤表皮干细胞增殖的影响,探讨其延缓皮肤衰老的可能机制。方法 10只3月龄SAMR1种小鼠作为年轻组,40只8月龄SAMP1种小鼠作为老年组和补益营卫方高、中、低剂量组,每组10只,药物组分别按高、中、低剂量灌胃饲养。老年组和年轻组生理盐水灌胃,连续6周。灌胃饲养结束前两周给小鼠腹腔注射BrdU,取背部皮肤冷冻切片。免疫荧光法检测各组表皮干细胞增殖标志物ki67的表达。原代C57BL/6小鼠表皮干细胞的分离及培养,MTT法选择5%加药浓度绘制生长曲线。MTT法检测表皮干细胞增殖率。结果与年轻组比较,老年组增殖标志物ki67的表达水平显著降低(P<0.05);经药物干预后,衰老表皮干细胞增殖标志物ki67的表达水平均升高,其中中、高剂量组表皮干细胞数目显著增多(P<0.05)。与年轻常规组比较,老年常规组原代培养的干细胞增殖率显著降低(P<0.05);经药物干预后,衰老表皮干细胞增殖率显著升高(P<0.05)。结论补益营卫方可能通过影响增殖标志物ki67的表达与干细胞增殖率,提高表皮干细胞的活性,增加表皮干细胞数量,延缓皮肤衰老。