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脐带血造血干细胞体外生成红细胞过程中高效脱核体系的研究
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作者 陈晨 占启刚 +5 位作者 盛琦 张晶晶 应燕玲 章伟 朱发明 何吉 《浙江医学》 CAS 2024年第5期470-474,I0004,共6页
目的 研究磷脂酰肌醇三羟激酶(PI3K)、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)和细胞松弛素B对脐带血造血干细胞体外培养促红系脱核的作用,以期建立高效脱核体系。方法 采用磁分选富集脐带血CD34+细胞。在培养第0、4天添加干细胞因子(SCF)、IL-3、促... 目的 研究磷脂酰肌醇三羟激酶(PI3K)、组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)和细胞松弛素B对脐带血造血干细胞体外培养促红系脱核的作用,以期建立高效脱核体系。方法 采用磁分选富集脐带血CD34+细胞。在培养第0、4天添加干细胞因子(SCF)、IL-3、促红细胞生成素(EPO),培养第7天添加SCF、EPO,培养第11、15、18天仅添加EPO。分别于第7、11、15和18天添加PI3K(0、25、50、100 ng/mL)、HDAC2(0、60、150、300 ng/mL)、细胞松弛素B(0、25、50、75 ng/μL)3种脱核剂。采用正交设计实验分析3种脱核剂的浓度和添加时间4因素4水平对促红系脱核效果的影响,获得最佳脱核条件并作为优选组,以不加脱核剂培养作为对照组进行验证。细胞培养至第21天时,用流式细胞仪分别检测CD235+、SYTO-64-细胞,计算脱核率。使用血细胞计数仪检测RBC,ELISA法检测2,3-二磷酸甘油(2,3-DPG)、化学发光法检测ATP,观察细胞形态。结果 最佳脱核条件为培养第15天添加PI3K浓度为100 ng/mL、HDAC2浓度为150 ng/mL和松弛素B浓度为75 ng/μL。培养至第21天,优选组红细胞脱核率为(74.30±5.59)%,对照组为(28.30±14.10)%,优选组高于对照组(t=9.099,P=0.012)。培养体系获得RBC平均可达2×1010/L,红细胞ATP、2,3-DPG与正常红细胞无差异,红细胞形态与正常红细胞一致。结论 以上最佳脱核条件建立的培养体系可促进造血干细胞体外生成红细胞高效脱核。 展开更多
关键词 脐带血造血干细胞 红细胞脱核 磷脂酰肌醇三羟激酶 组蛋白去乙酰化酶 细胞松弛素B
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一种高效小鼠骨髓红系造血岛富集方法的建立
2
作者 郑凌岳 王竟苇 +1 位作者 佟静媛 石莉红 《生物技术进展》 2024年第3期466-472,共7页
红系造血岛(erythroblastic island,EBI)是哺乳动物红细胞终末分化的独特微环境,EBI研究对于深入理解生理和病理条件下造血微环境的组成和变化至关重要。骨髓中EBI分布较为分散,现有富集方法的富集效果不尽如人意。研究旨在建立一种新... 红系造血岛(erythroblastic island,EBI)是哺乳动物红细胞终末分化的独特微环境,EBI研究对于深入理解生理和病理条件下造血微环境的组成和变化至关重要。骨髓中EBI分布较为分散,现有富集方法的富集效果不尽如人意。研究旨在建立一种新的更高效的小鼠骨髓EBI富集方法。在前人研究的基础上进行了创新和优化,建立了以二次密度梯度沉降结合洗涤去除非EBI细胞团为核心的富集方法。通过细胞团形态观察、瑞氏吉姆萨染色、成像流式技术(imaging flow cytometry,IFC)等手段比较了该方法与现有富集方法的富集效果,在直接镜检和瑞氏吉姆萨染色中发现,方法4富集体系中少见单细胞,主要为以巨噬细胞为核心周围围绕红细胞的典型EBI结构。使用IFC技术对于F4/80、CD71以及CD11b进行分析,富集产物中约63.7%的细胞团为EBI,高出之前方法的最高标准(方法3),约38.4%。富集的EBI中发现巨噬细胞为CD11b^(-),且除红细胞外,部分EBI中存在CD11b^(+)细胞,与之前的研究相符。结果显示,该方法在没有造成EBI结构明显破坏的情况下,富集效果在去除单细胞以及非EBI细胞团等方面显著优于现有其他方法,适合对EBI纯度要求较高的研究,为造血微环境研究提供了有效的方法和手段。 展开更多
关键词 红系造血岛 红细胞 富集方法 成像流式
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Y Specific Sequence Gene Analysis of Single Fetal Nucleated Erythroblasts from the Peripheral Blood of Pregnant Women
3
作者 王陶然 陈汉平 +1 位作者 卢运萍 马庭元 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2001年第2期163-165,共3页
The single cell isolation technique was used to detect fetal nucleated erythroblasts at a single cell level from the peripheral blood of pregnant women in order to investigate the feasibility of this method for nonin... The single cell isolation technique was used to detect fetal nucleated erythroblasts at a single cell level from the peripheral blood of pregnant women in order to investigate the feasibility of this method for noninvasive prenatal diagnosis. Single fetal nucleated erythroblasts were isolated from the peripheral blood samples from 51 pregnant women by micromanipulation techniques after density gradient centrifugation. Nested polymerase chain reaction method was used to amplify the SRY gene. It was found that the concordance rate of amplification results with real fetal sex was 82.61 %. The sensitivity and specificity were 80 % and 87.50 % respectively. It was suggested that it is feasible and promising in non invasive prenatal diagnosis to detect fetal nucleated erythroblasts at a single cell level by using micromanipulation techniques. 展开更多
关键词 single cell peripheral blood of pregnant woman fetal nucleated erythroblasts nested polymerase chain reaction
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小鼠红白血病细胞在半相合型小鼠体内的生物特性 被引量:15
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作者 段连宁 郭坤元 +1 位作者 褚建新 丁顺利 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第3期218-221,共4页
把可移植性EL96 11H 2d小鼠红白血病细胞 ,接种给 (BALB/c×C5 7BL/ 6 )F1H 2d/b代 (CB6F1)小鼠并连续在CB6F1传代 ,观察红白血病细胞在半相合型小鼠体内的生物特性 ,为骨髓或造血干细胞移植中研究和观察移植物抗白血病 (GVL)作用... 把可移植性EL96 11H 2d小鼠红白血病细胞 ,接种给 (BALB/c×C5 7BL/ 6 )F1H 2d/b代 (CB6F1)小鼠并连续在CB6F1传代 ,观察红白血病细胞在半相合型小鼠体内的生物特性 ,为骨髓或造血干细胞移植中研究和观察移植物抗白血病 (GVL)作用提供实验对象。把EL96 11H 2d小鼠脾细胞经尾静脉接种给CB6F1H 2d/b小鼠 ,再把红白血病细胞在CB6F1传代接种 ,建立F1代红白血病模型。结果表明 :每只鼠在静脉接种 10 3 - 10 8个白血病细胞的情况下 ,发病率 10 0 % ;所接种的白血病细胞数量与存活时间呈线性关系 ;接种 10 6细胞的小鼠平均生存时间为 ( 9.6± 0 .8)天。在CB6F1体内连续传 4代 ,发病率 10 0 %。白血病细胞主要侵及肝、脾和骨髓组织 ,血红蛋白染色呈阳性 ,过氧化物酶反应阴性 ,对阿糖胞苷和环磷酰胺等化疗药物敏感。结论 :利用实验室常用的C5 7BL/ 6×BALB/c小鼠建立F1代小鼠红白血病模型 。 展开更多
关键词 半相合型小鼠 红白血病细胞 红白血病模型 红白血病 动物模型
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激素类除草剂二氯喹啉酸遗传毒性比较 被引量:10
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作者 曹向宇 惠秀娟 +1 位作者 马汐平 王捷 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期333-334,共2页
目的探讨激素类除草剂二氯喹啉酸的遗传毒性。方法应用鼠伤寒沙门菌体外回复突变试验(Amestest)和彗星实验(Comet assay)对激素类除草剂二氯喹啉酸的遗传毒性进行比较研究。结果Ames试验中TA97,TA98,TA100菌株无论代谢活化或非代谢活化... 目的探讨激素类除草剂二氯喹啉酸的遗传毒性。方法应用鼠伤寒沙门菌体外回复突变试验(Amestest)和彗星实验(Comet assay)对激素类除草剂二氯喹啉酸的遗传毒性进行比较研究。结果Ames试验中TA97,TA98,TA100菌株无论代谢活化或非代谢活化,皆为阳性结果,而TA102菌株则为阴性结果。彗星实验在500,1 000,2 000 mg/(kg.bw)浓度下,二氯喹啉酸对小鼠骨髓细胞的DNA损伤与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),且呈剂量-效应关系。结论激素类除草剂二氯喹啉酸具有一定的遗传毒性。 展开更多
关键词 彗星试验 AMES试验 二氯喹啉酸 骨髓细胞
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丙酯草醚对小鼠不同细胞DNA的损伤作用 被引量:4
6
作者 惠秀娟 孟玲玲 +2 位作者 曹向宇 谢明 王捷 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期932-933,共2页
目的探讨新合成的除草剂-丙酯草醚对小鼠离体骨髓细胞和精原细胞的DNA损伤作用。方法应用彗星技术测试不同浓度丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和精原细胞DNA的损伤情况。结果丙酯草醚在(10g/L)浓度下与对照组比较差异有统计学意义(P<0·... 目的探讨新合成的除草剂-丙酯草醚对小鼠离体骨髓细胞和精原细胞的DNA损伤作用。方法应用彗星技术测试不同浓度丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和精原细胞DNA的损伤情况。结果丙酯草醚在(10g/L)浓度下与对照组比较差异有统计学意义(P<0·05)。丙酯草醚对精原细胞作用更敏感,且在10,100,500mg/L浓度下呈剂量-反应关系。结论新农药丙酯草醚对小鼠细胞有一定的损伤作用。 展开更多
关键词 彗星试验 丙酯草醚 骨髓细胞 精原细胞 DNA损伤
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彗星试验在新农药毒性检测中的应用 被引量:4
7
作者 惠秀娟 孟玲玲 +2 位作者 曹向宇 谢明 王捷 《农药》 CAS 北大核心 2005年第7期299-302,共4页
综述了彗星试验在农药遗传毒性检测中的应用现状,测试了新型嘧啶苄胺除草剂—丙酯草醚等5种新农药对小鼠骨髓细胞和生殖细胞的DNA损伤情况,摸索了最适的彗星试验方法条件,比较不同细胞的敏感性,建立彗星试验标准操作规程(SOP),最终达到... 综述了彗星试验在农药遗传毒性检测中的应用现状,测试了新型嘧啶苄胺除草剂—丙酯草醚等5种新农药对小鼠骨髓细胞和生殖细胞的DNA损伤情况,摸索了最适的彗星试验方法条件,比较不同细胞的敏感性,建立彗星试验标准操作规程(SOP),最终达到彗星试验在新农药遗传毒性检测中的应用和推广。 展开更多
关键词 彗星试验 遗传毒性 骨髓细胞 生殖细胞
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KH基因的细胞、组织mRNA表达谱研究 被引量:2
8
作者 何於娟 蒋纪恺 +4 位作者 张彦 刘小珊 马凌娣 欧一衡 涂植光 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2004年第3期203-205,共3页
目的 研究 KH基因的细胞、组织 m RNA表达谱。方法 采用 8种细胞与 Wistar大鼠的 3种组织的RT- PCR与 12种正常人体组织的 Northern印迹杂交分析 ,了解该新基因在不同组织、细胞中的表达。结果  RT-PCR结果显示该基因可在人白血病 K5... 目的 研究 KH基因的细胞、组织 m RNA表达谱。方法 采用 8种细胞与 Wistar大鼠的 3种组织的RT- PCR与 12种正常人体组织的 Northern印迹杂交分析 ,了解该新基因在不同组织、细胞中的表达。结果  RT-PCR结果显示该基因可在人白血病 K5 6 2细胞和人脐带血有核细胞中表达 ;Northern印迹杂交结果表明该基因在正常人体脑组织中有表达。结论  展开更多
关键词 基因 KH RNA 信使 白血病 幼红细胞 急性 细胞系 苦参碱
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新型除草剂异丙脂草醚对小鼠细胞DNA损伤的比较研究 被引量:1
9
作者 惠秀娟 孟玲玲 +2 位作者 曹向宇 谢明 汪凌 《辽宁大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第2期115-117,共3页
应用单细胞凝胶电泳试验,测试了新合成的除草剂异丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和睾丸细胞的DNA损伤情况.实验结果显示:与对照组比较,异丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和睾丸细胞DNA均有一定损伤(p<0.05),且对小鼠睾丸细胞的作用更为敏感,呈剂量-... 应用单细胞凝胶电泳试验,测试了新合成的除草剂异丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和睾丸细胞的DNA损伤情况.实验结果显示:与对照组比较,异丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和睾丸细胞DNA均有一定损伤(p<0.05),且对小鼠睾丸细胞的作用更为敏感,呈剂量-反应关系. 展开更多
关键词 彗星试验 异丙酯草醚 骨髓细胞 睾丸细胞
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中药安迪注射剂对白血病K562细胞株增殖和凋亡的影响 被引量:1
10
作者 李妍 王四旺 +3 位作者 张海 谢艳华 王剑波 孙纪元 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第12期1081-1083,共3页
目的:探讨安迪(Adi)注射剂对人白血病K562细胞株增殖和凋亡的影响.方法:MTT法测定K562在Adi作用后的细胞活力(A值);流式细胞技术检测细胞凋亡变化;电镜观察细胞的形态学改变等;综合评价Adi对K562细胞株增殖和凋亡的影响.结... 目的:探讨安迪(Adi)注射剂对人白血病K562细胞株增殖和凋亡的影响.方法:MTT法测定K562在Adi作用后的细胞活力(A值);流式细胞技术检测细胞凋亡变化;电镜观察细胞的形态学改变等;综合评价Adi对K562细胞株增殖和凋亡的影响.结果:①MTT法测得Adi在(2.5~20.0)μg/mL浓度范围内能明显抑制K562细胞的增殖,并具有浓度依赖性,20.0μg/mL Adi作用36h的K562细胞株A值最低;②流式细胞仪检测结果显示10.0,20.0μg/mLAdi处理组K562细胞的凋亡率分别为50%和39%,明显高于对照组的10%(P〈0.05);③电镜下可见K562细胞呈典型凋亡样改变.结论:Adi能明显抑制K562细胞增殖,并具有显著促进细胞凋亡的作用. 展开更多
关键词 安迪注射剂 白血病 幼红细胞 急性 细胞增殖 细胞凋亡
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再生障碍性贫血患者幼红巨噬细胞黏附蛋白基因表达的探讨 被引量:1
11
作者 毛晓露 刘峰 +2 位作者 李归宁 陈治中 胡丽华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第6期981-983,共3页
目的:探讨再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓和外周血标本单个核细胞中幼红巨噬细胞黏附蛋白(EMP)基因的表达。方法:抽取18例再生障碍性贫血患者治疗前后的骨髓和外周血标本,另选10例健康骨髓捐献者为正常对照组,均分离骨髓和外周血单个... 目的:探讨再生障碍性贫血患者治疗前后骨髓和外周血标本单个核细胞中幼红巨噬细胞黏附蛋白(EMP)基因的表达。方法:抽取18例再生障碍性贫血患者治疗前后的骨髓和外周血标本,另选10例健康骨髓捐献者为正常对照组,均分离骨髓和外周血单个核细胞,分别提取细胞总RNA,用RT-PCR方法检测EMP mRNA。结果:再生障碍性贫血患者的骨髓和外周血中EMP表达水平分别显著低于正常对照组(P<0.05),而治疗后的表达显著增高(P<0.05)。结论:EMP mRNA可为再生障碍性贫血的诊断与治疗提供依据。 展开更多
关键词 贫血 再生障碍性 单个核细胞 幼红巨噬细胞黏附蛋白 逆转录-聚合酶链式反应
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原红细胞在体外EPO诱导下的增殖分化特征
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作者 李赛 马静 +2 位作者 葛晔华 薛社普 韩代书 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期1-6,共6页
目的 系统了解小鼠红细胞终末分化过程中细胞增殖和分化的动力学。方法 选用FVA细胞模型 ,利用密度梯度离心的方法从感染Friend致贫血病毒 (anemia inducingstrainofFriendvirus ,FVA)的小鼠脾脏中分离出同步的原始阶段红细胞 (FVA细... 目的 系统了解小鼠红细胞终末分化过程中细胞增殖和分化的动力学。方法 选用FVA细胞模型 ,利用密度梯度离心的方法从感染Friend致贫血病毒 (anemia inducingstrainofFriendvirus ,FVA)的小鼠脾脏中分离出同步的原始阶段红细胞 (FVA细胞 )。通过研究EPO诱导下细胞的生长曲线 ,3H TdR掺入率以及细胞分化过程中 β 珠蛋白 ( β globin)基因的表达和血红蛋白合成的时空关系 ,分析FVA细胞在体外EPO诱导分化过程中增殖及分化的特性。结果 FVA细胞在EPO诱导早期生长旺盛 ,诱导 2 4小时细胞数量达高峰 ,为 0时的 4倍 ;3H TdR掺入在诱导后 12小时达高峰 ;从诱导后12小时开始有β globin基因的转录 ,在 2 4小时达高峰 ,随后减低 ;从 18小时开始出现血红蛋白 ,至 48小时 ,几乎全部细胞都表达大量血红蛋白。结论 本研究结果阐明了FVA细胞在体外EPO诱导下增殖及分化的动力学 。 展开更多
关键词 红细胞 细胞增殖 终末分化 EPO诱导 Β-珠蛋白基因 细胞分化
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ErbB2 RNA干扰联合^(60)Co γ照射对U251细胞增殖及凋亡的影响 被引量:2
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作者 高玲 李峰生 +5 位作者 陈肖华 董波 张军权 饶亚岚 丛悦 毛秉智 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期302-307,共6页
构建特异性抑制白血病病毒致癌基因同源体2(ErbB2)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并检测联合^(60)Coγ照射对U251细胞增殖抑制及促进凋亡作用。设计、合成ErbB2特异性的19bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到Psflence2.1-U6-H1... 构建特异性抑制白血病病毒致癌基因同源体2(ErbB2)的小干扰RNA(siRNA)表达载体,并检测联合^(60)Coγ照射对U251细胞增殖抑制及促进凋亡作用。设计、合成ErbB2特异性的19bp短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到Psflence2.1-U6-H1载体中,构建ErbB2特异siRNA的表达载体,HindⅢ和BamHI双酶切及测序鉴定重组体,并转染U251细胞,四甲基偶氮唑盐法(Methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT)检测细胞增殖活性,Hoechst 33258染色,Annexin-(?)检测细胞凋亡情况。经双酶切与测序鉴定成功构建ErbB2-siRNA表达载体,转染星型胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞增殖活性(p<0.05),并诱导细胞产生时间依赖性凋亡,24h凋亡细胞百分比增加10.52%,48h凋亡细胞百分比增加50.65%。联合^(60)Coγ照射U251细胞增殖活性较单独转染进一步显著降低(p<0.05)。运用Psilence2.1-U6-H1载体构建的ErbB2-siRNA表达载体可有效抑制U251细胞增殖并促进时间依赖性细胞凋亡;联合^(60)Coγ照射可增加增殖抑制效果。 展开更多
关键词 小干扰RNA 白血病病毒致癌基因同源体2 U251细胞
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WHO分型标准在急性红白血病诊断中的临床应用
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作者 郝冀洪 胡蕊 +2 位作者 杨洪乐 朱芸 刘晓 《临床荟萃》 CAS 2010年第12期1049-1051,共3页
目的探讨WHO分型标准在急性红白血病(AML-M6)诊断中的临床应用价值。方法回顾分析51例WHO分型标准确诊的AML-M6,按法美英(FAB)分型标准重新进行评价,并对其临床特征、外周血、骨髓细胞形态学、细胞化学染色、免疫表型、细胞遗传学及预... 目的探讨WHO分型标准在急性红白血病(AML-M6)诊断中的临床应用价值。方法回顾分析51例WHO分型标准确诊的AML-M6,按法美英(FAB)分型标准重新进行评价,并对其临床特征、外周血、骨髓细胞形态学、细胞化学染色、免疫表型、细胞遗传学及预后情况进行分析研究。结果 51例AML-M6患者粒、红、巨三系均有不同程度病态造血,过碘酸雪夫反应(PAS)对其幼红细胞有特异性。结论形态学特征对AML-M6诊断仍然具有不可替代的地位。 展开更多
关键词 白血病 幼红细胞 急性 骨髓细胞 形态学
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红细胞终末分化期出现与珠蛋白基因表达增强子HS2序列特异结合的蛋白质因子 被引量:6
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作者 王鑫 刘丕旭 +1 位作者 章静波 薛社普 《解剖学报》 CSCD 北大核心 1994年第4期379-384,共6页
利用Southwestern印迹和电泳迁移率改变分析法,研究了处于终末分化阶段的人胚肝中、晚幼红细胞和经hemin诱导分化前后的K562细胞核抽提物中与地高辛标记的HS2探针特异结合的蛋白质。发现经hemin诱导后的... 利用Southwestern印迹和电泳迁移率改变分析法,研究了处于终末分化阶段的人胚肝中、晚幼红细胞和经hemin诱导分化前后的K562细胞核抽提物中与地高辛标记的HS2探针特异结合的蛋白质。发现经hemin诱导后的K562细胞样品中出现一些为诱导前缺如的,分子量为12,14,18,45和50kD的HS2结合蛋白。这些结合蛋白在印迹图谱中的位置(分子量大小)与存在于正常终末分化期红细胞中HS2结合蛋白的相近。同样,诱导后K562细胞核蛋白质与HS2形成复合物的电泳迁移图谱与正常分化的人胚肝红细胞核蛋白质-HS2复合物的相似,而与未经诱导的K562细胞核蛋白质-HS2复合物的迁移图谱存在差异。提示诱导分化和正常分化的红细胞表达一些新的HS2结合蛋白,这些仅在终末分化期红细胞中出现的HS2结合蛋白,可能是参与红细胞分化和珠蛋白基因表达调控的重要因素。 展开更多
关键词 红细胞 分化 珠蛋白 基因 表达
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姜黄素与羟基脲对K562细胞的体外联合作用
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作者 赵蓉 许建华 +2 位作者 柯丹如 林溪 陈元仲 《福建医科大学学报》 2000年第3期228-230,共3页
目的 了解姜黄素与羟基脲合用对人白血病 K5 6 2细胞的体外作用。 方法 采用 MTT法测定药物的体外杀伤作用 ,应用 AO/EB荧光染料染色观察药物诱导细胞凋亡 ,金氏公式进行联合用药分析。 结果 姜黄素 5 ,10μg/ml,羟基脲 2 5 ,5 0μ... 目的 了解姜黄素与羟基脲合用对人白血病 K5 6 2细胞的体外作用。 方法 采用 MTT法测定药物的体外杀伤作用 ,应用 AO/EB荧光染料染色观察药物诱导细胞凋亡 ,金氏公式进行联合用药分析。 结果 姜黄素 5 ,10μg/ml,羟基脲 2 5 ,5 0μg/m l同时给药 ,对 K5 6 2细胞可产生单纯相加的协同杀伤效果。姜黄素与羟基脲同时给药诱导 K5 6 2细胞凋亡率高于羟基脲单独用药 ,低于姜黄素单独用药。 结论 姜黄素与羟基脲同时联合用药可产生单纯相加的协同杀伤效用 ,姜黄素可部分逆转 K5 6 2细胞对羟基脲诱导凋亡的抗药性。 展开更多
关键词 姜黄素 羟基脲 药物协同作用 K562细胞株 白血病
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一种分离Wistar大鼠中幼、晚幼有核红细胞的有效方法 被引量:1
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作者 张庆一 薛社普 《解剖学报》 CAS 1988年第4期416-420,461,共6页
本文介绍采用改良的Harrison分离骨髓造血细胞方法,用40%和70%不连续Percoll介质梯度,从15天Wistar鼠胚肝中分离中幼、晚幼有核红细胞。从70%Percoll梯度界面(比重1.095 g/ml)可收集到高达96%左右的中幼、晚幼有核红细胞。经Giemsa染色... 本文介绍采用改良的Harrison分离骨髓造血细胞方法,用40%和70%不连续Percoll介质梯度,从15天Wistar鼠胚肝中分离中幼、晚幼有核红细胞。从70%Percoll梯度界面(比重1.095 g/ml)可收集到高达96%左右的中幼、晚幼有核红细胞。经Giemsa染色和联苯胺染色,光镜观察以及透射电镜检查鉴定,其中除极少量早幼红细胞和网织红细胞外,几乎没有其它类型细胞混杂。台盼蓝染色检查表明,分离后的中幼、晚幼红细胞保持95%以上的活性率,可用于细胞生物学和生物化学等分析。与其它同类方法比较,本方法有取材容易、操作迅速、简便和获取量高等优点。 展开更多
关键词 PERCOLL 细胞分离 中幼和晚幼红细胞 WISTAR大鼠
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巨噬细胞在红系造血中的作用 被引量:2
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作者 宋丹丹 吴凌云 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1223-1226,共4页
红系生成及其调节被认为发生于骨髓内的特定结构造血岛。巨噬细胞对红系生成的促进作用及与红系生成龛——造血岛的结构及功能完整性息息相关,而造血岛的完整性通过细胞间的黏附分子得以实现。在成年人红系生成的动态平衡中,巨噬细胞主... 红系生成及其调节被认为发生于骨髓内的特定结构造血岛。巨噬细胞对红系生成的促进作用及与红系生成龛——造血岛的结构及功能完整性息息相关,而造血岛的完整性通过细胞间的黏附分子得以实现。在成年人红系生成的动态平衡中,巨噬细胞主要发挥两方面的作用:一是保留未成熟红细胞于骨髓,促进有核红细胞分化成熟为网织红细胞,二是清除衰老的红细胞。近年来的研究发现,在生理或病理条件下,机体均可通过对巨噬细胞功能状态的调控来影响红系造血。本文综述了该方面近年来取得的新进展,讨论的问题包括巨噬细胞与红细胞之间的黏附及调控因子,巨噬细胞在红细胞发育分化中的作用和不同状态下巨噬细胞对红系造血的影响等。 展开更多
关键词 巨噬细胞 红细胞 红系造血 造血岛
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急性髓性白血病免疫球蛋白重链重因和T细胞受体γ基因重排的检测及意义
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作者 许莲蓉 乔振华 +4 位作者 苏丽萍 马梁明 王宏伟 张丽 朱镭 《山西医科大学学报》 CAS 2002年第5期406-408,共3页
为检测急性髓性白血病 (AML)患者免疫球蛋白重链基因 (IgH)和T细胞受体γ基因 (TCRγ)克隆性重排情况 ,并初步探讨其意义 ,采用聚合酶链反应 (PCR)检测 51例AML患者IgH及TCRγ基因重排。结果表明 ,51例患者中 9例 (1 7.65 % )发生IgH基... 为检测急性髓性白血病 (AML)患者免疫球蛋白重链基因 (IgH)和T细胞受体γ基因 (TCRγ)克隆性重排情况 ,并初步探讨其意义 ,采用聚合酶链反应 (PCR)检测 51例AML患者IgH及TCRγ基因重排。结果表明 ,51例患者中 9例 (1 7.65 % )发生IgH基因重排 ,1 1例 (2 1 .57% )出现TCRγ基因重排。由此可见 ,AML中确实存在系列失真现象 。 展开更多
关键词 急性髓性白血病 免疫球蛋白重链 T细胞受体 Γ基因重排 检测
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胶原支架促进人类多能干细胞向红细胞的诱导分化 被引量:2
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作者 王敏 潘旭 +5 位作者 毛斌 赖默温 滕嘉雯 陈谊金 周琼秀 马峰 《中国输血杂志》 CAS 2018年第4期326-331,F0001,共7页
目的建立人胚胎干细胞(hESCs)来源的造血干/组细胞向红细胞分化的体外3D培养方法。方法hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM-S3)基质细胞共培养14 d后获得CD34^+CD45^+造血干/祖细胞,对获得的CD34^+CD45^+细胞扩增5 d后,以相同... 目的建立人胚胎干细胞(hESCs)来源的造血干/组细胞向红细胞分化的体外3D培养方法。方法hESCs与小鼠主动脉-性腺-中肾区(AGM-S3)基质细胞共培养14 d后获得CD34^+CD45^+造血干/祖细胞,对获得的CD34^+CD45^+细胞扩增5 d后,以相同初始接种数量分别接种于胶原水凝胶、透明质酸水凝胶、Ⅰ型胶原蛋白构建的三维(3D)支架材料(简称胶原支架)中,在体外模拟骨髓微环境,做红细胞定向分化,以普通液体悬浮培养(简称液体培养)为对照,通过MGG染色、流式细胞术、免疫染色、qRT-PCR等手段分别对收获的细胞做形态学、红系特异性表面标志表达情况、红系细胞成熟程度以及红系细胞发育过程中相关基因的表达情况分析。结果红系定向分化14 d后,胶原支架中收获的总细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.50、1.19、1.33倍,GPA^+CD71^+细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.55、1.25及1.48倍;GPA^+CD36^+细胞数量分别是液体培养、透明质酸水凝胶、胶原水凝胶的1.65、1.07、1.36倍。结论利用Ⅰ型胶原蛋白构建的3D支架材料可模拟骨髓微环境,促进红细胞分化。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞(hESCs) 红细胞 胶原支架 三维(3D)培养
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