esp1基因Tet-on载体的构建及在Hela中的可调控性表达

目的构建esp1-pTRE-d2EGFP可调控真核表达载体,检测其在Hela细胞内的表达情况。方法将esp1导入pTRE-d2EGFP载体中。用脂质体将pTet-on、PTK-Hyg和esp1-pTRE-d2EGFP共转染入Hela细胞,以不同浓度的DOX诱导,用Real-time PCR、Western blot检测esp1表达水平。结果我们构建的可调控性表达载体能在Hela细胞内表达,不同浓度药物诱导的esp1表达水平明显不同。结论成功构建了esp1-pTRE-d2EGFP真核表达载体,并可在Hela细胞内表达。为进一步观察esp1与肿瘤发生、发展的关系奠定了基础。

PTTG ESP1在A549 SPC-A-1细胞株SG_2/M期的表达

目的 探讨PTTG (pituitarytumortransforminggene)、ESP1(estradiol stimulatedprotein 1)在A5 49、SPC A 1细胞S、G2 M期的表达。方法 用双胸苷同步化法同步化A5 49、SPC A 1细胞及MRC 5细胞,分别收集S、G2 M期总RNA ,做Real timePCR。结果 PTTG在A5 49细胞和SPC A 1细胞的S期表达比G2 M期表达高,在MRC 5细胞的在S、G2 M期中PTTG均无表达;ESP1在A5 49细胞与SPC A 1细胞及MRC 5细胞的S期表达均比G2 M期表达低。结论 PTTG在MRC 5的S、G2 M期都无表达,在A5 49、SPC A 1的S期比G2 M期表达增高,提示肿瘤细胞的染色体非整倍体与PTTG的表达增高有关;ESP1在MRC 5和A5 49、SPC A 1的S期比G2 M期表达低,说明细胞中姐妹染色体的分离主要依靠于ESP1在G2 M期被激活,而导致姐妹染色体的分离。

esp1在A549和Hela细胞中的表达及对染色体倍性的影响

目的观察esp1(estradiol-stimulated protein)在A549和Hela两种肿瘤细胞株中的表达与染色体倍性的关系。方法提取肿瘤细胞A549、Hela及分别转染pIRE-S2-EGFP-ESP1的相应肿瘤细胞总RNA,逆转录,real-time quantitative PCR检测,比较esp1在肿瘤细胞中的表达变化;VIDEOTEST-KARYO3.1分析相应的染色体数目变化;流式细胞仪检测其染色体倍性的改变。结果转染pIRE-S2-EGFP-ESP1后esp1表达上调(P<0.01),染色体数目减少(P<0.01),染色体倍性降低(P<0.01)。结论esp1上调表达可以抑制肿瘤细胞异常分裂相,降低染色体倍性,但是esp1在A549和Hela两种肿瘤细胞株中的表达没有观察到明显差异。

A549细胞转染esp1基因后生物学行为的变化

目的:观察A549细胞转染esp1基因后细胞生物学行为的改变。方法:将IRE-EGFP-esp1质粒用Fu-GENE6脂质体转染到肺腺癌细胞A549,经G418筛选获得转染阳性的细胞系(esp1-A549)。采用DNA荧光染色流式细胞仪分析转染后细胞DNA含量、倍性及细胞周期,计算S期细胞比率(SPF)和DNA指数(DI);采用细胞表面磷脂酰丝氨酸检测法和闪烁计数法分别检测细胞凋亡和增殖情况,同时检测软琼脂集落形成能力。以未转染(A549)、转染空载体(neo-A549)的细胞作对照。结果:与其他2组比较,esp1-A549细胞的DI、SPF及细胞增殖率降低,细胞凋亡率升高。esp1-A549细胞软琼脂集落形成数为3.5±0.6,克隆形成率为12.5%,低于A549细胞的23.3±0.2(t=4.93,P=0.004)和46%。结论:esp1基因的上调表达对A549细胞部分恶性生物学表型具有一定的抑制作用。

esp1基因上调表达对A549细胞凋亡影响的研究

目的观察A549细胞转染esp1基因后细胞凋亡情况。方法将含esp1基因的IREEGFP质粒用FuGENE6脂质体转染到肺腺癌细胞A549,经G418筛选获得转染阳性的细胞系,检测转染细胞染色体数目及利用AnnexinV和TUNNEL试剂盒检测细胞凋亡的变化。结果A549细胞转入esp1基因后染色体异常分裂象减少,转染后细胞增殖减少,而去血清培养诱导的凋亡增加。结论esp1的上调表达不仅对于肿瘤的异常染色体分裂象以及肿瘤细胞的异常增殖有一定的抑制作用,且对A549细胞的凋亡有促进作用。

基于STM32和ESP32-A1S的航天主题宣传机器人设计与实现

本文基于STM32单片机和ESP32-A1S处理器实现了对机器人的可视化编程和控制。以Microsoft Visual Studio 2022为集成开发环境(IDE)的C#语言开发的WPF程序,完成了机器人设备的连接和机器人数据的下载、制作以及数据从机器人上传到电脑的功能。搭载的ESP32-A1S的智能语音模块使机器人可以对答,使航天主题宣传机器人更具创新性和多功能性,达到了航天主题宣传的效果。

Separase上调对肿瘤细胞染色体分离作用的研究及条件表达载体的构建

目的 研究esp1在肺腺癌细胞株spc细胞中对染色体分离的作用,为肿瘤的基因治疗探索新的方法。方法 将已有的含esp1基因的EGFP N1质粒转染spc细胞,检测其转染效率及对染色体分裂相的影响。同时构建能依赖四环 素调控的含有esp1基因的pTRE- d2EGFP质粒载体。结果 表达载体EGFP N1 esp1转染成功,染色体异常分裂相减少。表 达载体pTRE -d2EGFP esp1构建成功。结论 esp1的上调表达对于肿瘤的异常染色体分裂相有一定的抑制作用,对于肿瘤 治疗有潜在的应用价值。

GE软启动控制系统启动顺序不正常结束原因分析

本文介绍了GE公司同步电动机软启动系统采用帕特尔开关变压器软启动装置的启动过程,针对GE软启动控制系统启动顺序不能正常结束的故障进行了详细地分析,并给出了解决方法。

小如麻雀，声如洪钟——ELAC Cinema 1 ESP音箱

每个月,在市郊工作的朋友都会让我为她买本<ELLE>,每一次,当我从怀里掏出38块钱交给书摊老板的一瞬间,心里都会跳出这么一句话:真贵!不过,热衷追求时尚的朋友却并不这么认为,因为在某种程度上,它代表了一种品味,恰恰是这种品味,会让人觉得:付出,还是值得的.