EB荧光探针表征阿霉素及其转铁蛋白复合物与DNA的相互作用

目的：研究阿霉素（ADR）及其转铁蛋白复合物（ADR—Tf）与DNA作用机理的差异。方法：利用荧光光谱法，以溴化乙锭（EB）为荧光探针研究阿霉素及其转铁蛋白复合物与DNA的相互作用，采用Scatchard方程，对作用机理进行判别。结果：ADR、ADR—Tf与DNA的结合常数（K）分别为1．10×10^6，1．95×10^6；结合位点数（n）分别为4．3，2．6。ADR、ADR—Tf与DNA的作用方式有所不同，前者通过嵌插作用，而后者则为静电作用。结论：ADR—Tf并不具有ADR插入DNA的特征，表明了两者在抗癌机制上存在一定的差异。

Ethidium bromide as a fluorescent probe for the interaction mode between titanocene dichloride and DNA

Since the discovery of anticancer efficacy of titanocene dichloride （Cp2TiCl2, TDC） by Koepf in 1979, the study of antitumor properties of metallocene complexes is one of the most active subjects after that of cisplatin in this field. Being highly active against

溴化乙锭标记DNA电化学探针的研究

以乙基 -( 3 -二甲基丙基 )碳化二亚胺盐酸盐 ( EDC)为偶联活化剂 ,将电化学活性物质溴化乙锭( Ethidium bromide,EB)成功地标记在人工合成的含有 2 1个碱基的寡聚 DNA片段上 ,制备成 EB标记 DNA探针 ;用电化学方法将待测样品 DNA片段固定在石墨电极表面 ,在一定的温度、p H值和离子强度条件下与EB标记 DNA探针进行杂交反应 ,从而对靶序列 DNA片段进行识别和测定 .此外 ,还讨论了该探针的电化学性质、荧光光谱、待测 DNA片段在石墨电极表面的电化学固定、 DNA链碱基长度对 EB标记 DNA电化学探针的影响以及探针的选择性、重现性和寿命 。

溴化乙锭探针研究劳氏青莲与脱氧核糖核酸的相互作用

用光谱探针溴化乙锭对劳氏青莲与脱氧核糖核酸的作用机制进行了研究。通过对体系的荧光光谱、吸收光谱及共振光散射光谱等方面的研究,结果表明,在pH为7.4的Tris-HCl缓冲溶液中,劳氏青莲与脱氧核糖核酸之间存在着嵌插作用,其结合常数为1.0×105L.mol-1。

盐酸黄连素作为脱氧核糖核酸荧光染料染色效果的研究

考察了盐酸黄连素(berberine hydrochloride)的荧光强度与双链DNA的相关性;优选盐酸黄连素在琼脂糖凝胶电泳中的最佳条件;将其染色效果与溴化乙锭(EB)进行比较;并从相对迁移率角度研究盐酸黄连素对DNA凝胶电泳的影响。结果显示,双链DNA对盐酸黄连素有明显的荧光增强作用,荧光强度与dsDNA的浓度正相关;凝胶中10 mg/L的盐酸黄连素可分辨出10 ng的100 bp DNA条带,在完全相同的操作条件下,对于小片段dsDNA,其灵敏度略低于EB。因盐酸黄连素在碱性溶液中带正电荷,使DNA相对迁移率减小,但较染料EB的影响小。该研究为盐酸黄连素在日常分子生物学研究中的应用提供了理论依据。盐酸黄连素可以作为琼脂糖凝胶电泳中DNA的荧光染料,其荧光强度能够满足常规应用,可以替代强致癌性染料EB。

荧光法研究丝裂霉素C与DNA的作用机制

以溴化乙锭(ethidium bromide,EB)为荧光探针,研究了丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)与小牛胸腺DNA(CT DNA)的作用机制.对荧光光谱、偏振荧光、Scatchard图、DNA热变性曲线等研究的结果表明,经Na_2S_2O_4还原活化后的MMC能与DNA发生作用,并且存在沟槽和部分嵌入两种结合方式.这一结果进一步证实了前人提出的MMC与DNA之间发生交联反应的结论.

小檗碱和溴化乙锭与DNA的光谱学作用研究

利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、琼脂糖凝胶电泳方法研究了小檗碱(berberine)和溴化乙锭(EB)与ct-DNA的光谱学作用.在ct-DNA存在时,berberine和EB的荧光强度都有较大的提高,pH的改变对二者荧光光谱的发射峰位与强度影响不大;紫外-可见吸收光谱随ct-DNA浓度的增加,表现出减色效应;二者都使ct-DNA的圆二色谱正负峰的吸收强度有所增加;琼脂糖凝胶电泳实验表明,EB-DNA体系的发光强度高于berberine-DNA体系.在DNA的定量测定中,可用无毒、副作用的小檗碱代替有致癌性的溴化乙锭,为安全、无环境污染、定量测定DNA提供了新试剂使用基础.

天然抗氧化剂与DNA的相互作用的研究

目的 :研究天然抗氧化剂与DNA的相互作用。方法 :以溴化乙锭 (ethidiumbromide ,EB)为荧光探针 ,考察天然抗氧化剂 (茶多酚、银杏提取物和竹叶提取物 )和多糖 (螺旋藻多糖、海藻多糖 1、海藻多糖 2 )对EB DNA体系的荧光强度的影响。结果 :茶多酚、银杏提取物、竹叶提取物的荧光抑制率与浓度之间呈线性关系且不存在饱和性 ,抑制率可达 95 %以上。荧光强度抑制率达 5. 0 %时 ,上述三种抗氧化剂的浓度较为接近 ,均约为 0 5mg/ml。而多糖的荧光抑制率具有饱和性 ,且抑制率相对很低 ,螺旋藻多糖、海藻多糖 1、海藻多糖 2对荧光强度的饱和抑制率分别为 16 . 6 % ,2 6 .1% ,32 . 6 %。结论 :天然抗氧化剂与EB DNA体系的DNA有不同的作用机制。

茶多酚与DNA相互作用的初步探讨

利用荧光探针溴化乙锭 (EB)研究了茶多酚与DNA相互作用时其荧光光谱的变化。实验表明 ,在实验质量浓度范围内 ,茶多酚对EB -DNA体系的荧光强度的抑制率几乎成线性关系 ,随它们质量浓度的增加 ,抑制率也升高 ,其半抑制质量浓度为0 5mg/mL ;茶多酚的荧光抑制率随质量浓度的变化不存在饱和性 ,且抑制率可达 95 %以上。并对茶多酚与DNA分子相互作用的机理作了初步探讨。

碱性藏花红和苯基芴酮与核酸作用的光谱学研究

利用荧光光谱法、紫外-可见吸收光谱法、圆二色谱法、凝胶电泳法对碱性藏花红及苯基芴酮与核酸的作用机理进行了研究.在ct-DNA存在时,碱性藏花红和苯基芴酮的荧光强度都有较大增加;碱性藏花红和苯基芴酮的紫外-可见吸收光谱随ct-DNA浓度的增加表现出不同程度的减色效应;二者都使ct-DNA的圆二色谱正峰的吸收强度有所增加,负峰的吸收强度有所减小;琼脂糖凝胶电泳实验表明,碱性藏花红-DNA体系受pH的影响较小且其发光强度高于苯基芴酮-DNA体系.将所得结果与溴化乙锭-DNA体系光谱性质进行了对比,得出碱性藏花红及苯基芴酮与DNA有发生类似于溴化乙锭的嵌插和插入作用的结论.

两种核酸染料染色效果的比较研究

用前染和后染两种不同的染色方法,研究比较SYBRGreenI和溴化乙锭(EB)两种核酸染料对凝胶中DNA的染色效果和灵敏度,及SYBRGreenI取代EB用于常规凝胶中核酸染色的可能性。结果表明,用前染法染色SYBRGreenI对琼脂糖凝胶中的核酸染色效果与EB相当;用后染法染色前者要优于后者,可显示5ng以下的DNA条带,在完全相同的操作条件下,其染色DNA条带背景清晰,灵敏度较高。因此,无致突变性新型染料SYBRGreenI可替代强致突变性染料EB用于检测凝胶中DNA片段大小、含量等,从而减少由于使用EB带来的环境污染和人体健康危害。

溴乙锭与脱氧核糖核酸的相互作用

[目的]探讨溴乙锭(EB)与脱氧核糖核酸(DNA)的相互作用。[方法]在0.05mol/LNa2HPO4-0.05mol/LNaH2PO4-0.10mol/LNaCl缓冲溶液(pH=7.30)中,研究EB在核苷三磷酸修饰电极及单链DNA(ssDNA)和双链DNA(dsDNA)修饰电极上的电化学行为。[结果]在dsDNA和ssDNA均可使EB的氧化峰负移,核苷三磷酸对峰电位改变与dsDNA和ssDNA相似。[结论]EB与DNA的相互作用是EB接受碱基的电子形成∏-∏共轭造成的。

PCR－SSCP检测肺癌细胞p53基因点突变

应用溴化乙锭（ＥＢ）染色的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对１０例非小细胞性肺癌组织标本ｐ５３基因外显子５～８进行分析，其中１例在外显子５～６；１例在外显子７；２例在外显子８发现异常电泳带．对１例经ＳＳＣＰ检测异常的ｐ５３基因进行核酸序列分析，发现第２８０位密码子由ＡＧＡ变成ＡＣＡ，其编码的氨基酸由丝氨酸变成半胱氨酸．结果证实：非小细胞性肺癌与ｐ５３基因突变有关；ＥＢ法ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术是一种简便、可靠的点突变检测法．

盘基网柄菌KAx-3中类免疫细胞的初步研究

以Ethidium bromide(EB)代替盘基网柄菌生长环境中所遇到的毒物,检测盘基网柄菌中是否存在能吞噬毒物的特定细胞.荧光显微镜下观察,细胞丘时期仅能看到EB加入后显现的暗红色轮廓;Hoechst33342定位细胞核,以确证EB被吞噬进细胞内;蛞蝓体时期少数细胞有明显的强荧光反应,随着蛞蝓体的爬行,含EB的细胞团被丢弃在遗弃的粘液鞘中.表明多细胞发育至蛞蝓体阶段存在一种能吞噬EB的细胞,最终将EB排出体外.流式细胞术检测发现,该类特殊的细胞主要来自于前柄细胞.结果显示,盘基网柄菌中存在简单的内在免疫细胞,为研究免疫系统在生物体的发生和发展提供了研究基础.

(Co(L-焦谷氨酸)_3)^(3+)配合物与DNA作用的荧光光谱研究

一些过渡金属配合物因能与DNA螯合而可以成为一种以DNA为靶分子的金属抗癌剂.以Co3+为中心离子的金属配合物易与DNA结合,光致发光强;且EB-DNA复合物中,EB发出的荧光比游离的EB本身发射的荧光强度大10倍.因此本文用EB作为荧光探针,通过荧光光谱法对〔Co(C5H7NO3)3〕3+与DNA的相互作用进行了初步研究,结果表明〔Co(C5H7NO3)3〕3+主要以静电形式与DNA作用,此结论通过〔Co(C5H7NO3)3〕3+-DNA-EB体系得到了验证.