京大戟的化学成分研究

目的研究京大戟的化学成分,为寻找新的抗肿瘤活性成分以及为大戟质量标准研究提供合适对照品。方法用95%乙醇提取,硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和光谱数据分析确定结构。结果分得8个化合物,分别鉴定为正十八烷醇(octadecanol,Ⅰ)、3-甲氧基-4-羟基反式苯丙烯酸正十八醇酯(octadecanyl-3-methoxy-4-hydrox-ybenzeneacrylate,Ⅱ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅲ)、正三十烷酸(triacontanoic acid,Ⅳ)、2,2′-二甲氧基-3,3′-二羟基-5,5′-氧-6,6′-联苯二甲酸酐(2,2′-dimethoxy-3,3′-dihydroxy-5,5′-oxo-6,6′-biphenylformic anhydride,Ⅴ)、大戟醇(euphol,Ⅵ)、tirucallol(Ⅶ)、京大戟素(euphpekinensin,Ⅷ)。结论化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅵ和为首次从京大戟中分离得到。

甘遂中大戟二烯醇HPLC定量方法的测量不确定度评定

目的:探讨甘遂中大戟二烯醇的HPLC定量分析方法的测量不确定度的评定方法。方法:通过分析测量过程,确定并简化不确定度来源;利用HPLC法测定甘遂中大戟二烯醇的方法验证数据及样品代表性试验数据,通过统计学方法,量化不确定度分量;计算合成不确定度和扩展不确定度。结果与结论:用HPLC法测定甘遂中大戟二烯醇的扩展不确定度为12%。本文采用的评定方法可为HPLC法含量测定结果的测量不确定度评估提供参考。

大戟属4种植物中大戟醇的含量测定

目的建立大戟属植物中大戟醇(euphol)的高效液相色谱(HPLC)含量测定方法采用RP-C18色谱柱,以乙腈为流动相,流速1.0ml/min,检测波长为217nm。结果进样量在0.58～7μg范围内有良好的线性关系,r=0.9995;平均加样回收率为99.93%,RSD为2.18%(n=5)。结论该法简便准确、灵敏度高、重现性好,可用于大戟属植物中大戟醇的含量测定。

醋炙对甘遂3种三萜类成分的影响及肠上皮细胞的毒性

目的研究甘遂醋炙前后3种三萜类成分(大戟二烯醇、kansenone、11-oxo-kansenonol)含有量变化及其对肠上皮细胞的毒性。方法采用HPLC法分别在210、255、270 nm测定甘遂和醋甘遂饮片中该3种成分的量。采用MTT法检测3种成分对大鼠小肠隐窝上皮细胞IEC-6细胞增殖的影响。结果醋炙后大戟二烯醇、kansenone、11-oxokansenonol含有量均降低,降低率分别为13.43%、15.15%、14.79%。对IEC-6细胞的IC50分别为71.41、15.27和14.53μmol/L。结论甘遂醋炙后3种三萜类成分含有量的降低与醋炙减毒有一定的相关性。

京大戟醋制前后大戟二烯醇和甘遂甾醇的变化

目的比较京大戟醋制前后大戟二烯醇和甘遂甾醇的含有量变化,为京大戟醋制减毒机理研究提供一定的参考。方法采用RP-HPLC法,以Agilent XDB C8(4.6 mm×150 mm,5μm)为固定相,流动相为乙腈-水(93∶7),体积流量为1.0 mL/min,检测波长210 nm,柱温30℃。结果大戟二烯醇和甘遂甾醇的线性范围分别为0.524 4～10.4880μg(r=0.9999)和0.2132～4.264μg(r=0.999 8),加样回收率分别为97.36%和98.72%,RSD分别为1.07%、0.77%(n=6)。大戟二烯醇和甘遂甾醇经醋制后在乙酸乙酯超声提取液中的含有量降低较多。结论京大戟经醋制后,大戟二烯醇和甘遂甾醇含有量降低,为进一步研究京大戟醋制减毒机理和质量控制提供了依据。

生甘遂及其炮制品中2种三萜成分的含量研究

目的应用反相高效液相色谱法比较生甘遂和醋甘遂中大戟二烯醇及表大戟二烯醇的含量差异。方法样品以乙酸乙酯为提取溶剂,超声处理后,蒸干,加甲醇溶解,以HPLC法分析。采用Agilent C8色谱柱分离,柱温:30℃;以乙腈-水(95∶5)为流动相,流速:1.0mL.min-1;检测波长:210nm。结果考察了44份甘遂及其炮制品中的大戟二烯醇和表大戟二烯醇的含量情况。结论生甘遂及其炮制品醋甘遂中的三萜成分以大戟二烯醇及表大戟二烯醇为主,甘遂及醋甘遂中大戟二烯醇(Ⅰ)和表大戟二烯醇(Ⅱ)的含量消长变化有一定规律,二者之比(Ⅰ/Ⅱ)约为3∶1,可以只测定大戟二烯醇的含量来控制甘遂及其炮制品的质量。

京大戟中大戟二烯醇的HPLC测定

目的改进京大戟饮片的质量控制标准。方法采用薄层鉴别对京大戟进行定性鉴别。建立京大戟饮片中大戟二烯醇的HPLC定量测定方法。同时对其杂质、水分、灰分、浸出物等进行测定。结果京大戟饮片薄层色谱斑点清晰,分离度好。大戟二烯醇在0.39~3.88μg范围内线性关系良好,相关系数为r2=1.000;平均回收率为99.96%,RSD为0.97%（n=6）。结论京大戟饮片建议标准为杂质不得过3.0%;水分不得过8.0%;总灰分不得过7.0%,酸不溶性灰分不得过1.5%;浸出物含量不得低于20.0%;按干燥品计算,含大戟二烯醇（C30H50O）不得少于0.60%。

HPLC法测定京大戟中大戟二烯醇的含量

目的建立京大戟中大戟二烯醇的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,使用汉邦Benetnach C8（4.6 mm×150 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸（83∶17）,流速为1 m L·min-1,柱温30℃,检测波长为203 nm。结果大戟二烯醇进样量在0.47~2.85μg范围内呈良好的线性关系（r=0.9999）,平均加样回收率为99.96%（n=6）,RSD为0.97%。结论该方法能够准确测定京大戟中大戟二烯醇的含量。

醋京大戟饮片质量标准研究

目的对不同批次醋京大戟饮片样品进行分析,建立醋京大戟饮片的质量标准。方法以大戟二烯醇为对照品,采用薄层层析法和高效液相色谱法对醋京大戟饮片进行了定性和定量研究;并对醋京大戟饮片进行杂质检查,对灰分、水分和浸出物含量进行了测定。结果不同批次的醋京大戟饮片在杂质、水分和浸出物含量等方面均存在差异。薄层鉴别色谱斑点清晰,分离度较好。所建立的含量测定方法操作简单、准确、重现性好。结论建立了较为完善的醋京大戟饮片质量标准,填补了醋京大戟饮片质量标准方面的空白。

十枣汤凝胶膏剂HPLC法含量测定研究

目的研究建立十枣汤凝胶膏剂含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,分别以色谱条件Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.8%冰醋酸(65∶35),检测波长338 nm;Neptune C8色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(86∶14);流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm,建立测定十枣汤凝胶膏剂主成分芫花素和大戟二烯醇含量的定量分析方法。结果芫花素在0.09~1.35μg范围呈良好的线性关系,回归方程为Y_(1)=6.221×106X_(1)+2.118×10^(4)(r=0.9998),平均回收率为96.28%(RSD=0.92%),三批凝胶膏剂平均含量分别为0.0692、0.0681、0.0708 mg/g;大戟二烯醇在0.20~4.00μg范围呈良好的线性关系,回归方程为Y_(2)=9.932×10^(5)X_(2)+6.760×10^(4)(r=0.9999),平均回收率为97.69%(RSD=2.37%),三批凝胶膏剂平均含量分别为0.1260、0.1246、0.1276 mg/g。结论建立的十枣汤凝胶膏剂HPLC含量测定法精密度及准确度良好,可用于质量控制。

甘遂定量指纹图谱研究及响应面法优选醋制甘遂的炮制工艺

目的:建立并比较不同产地甘遂UPLC指纹图谱,并同时测定指标成分大戟二烯醇的含量;在此基础上对甘遂醋制工艺参数进行了优选。方法:色谱条件包括流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱)、检测波长为210 nm、流速为0.4 m L/min、柱温35℃;建立10批不同产地甘遂药材UPLC指纹图谱,对10批样品的相似度进行评价,并且测定大戟二烯醇含量;以大戟二烯醇和醇浸出物含量的综合评分为因变量,运用Box-Behnken试验考察加醋量、炒药温度、炒制时间对醋甘遂炮制工艺的影响,运用Design Expert 8.05软件对试验数据进行分析,确定醋甘遂的炮制工艺参数。结果:确定共有指纹峰14个,除一批来自山西的药材外,相似度均大于0.94;确定醋甘遂的炮制工艺参数为每100 g药材加醋40%,265℃,炒制7 min。结论:本实验建立的甘遂指纹图谱及大戟二烯醇含量测定方法有较强的针对性,优选的醋甘遂炮制工艺方法可行,为甘遂药材的安全性研究以及制定甘遂饮片的质量控制标准提供了科学依据。

HPLC法测定不同产地、生长年限、采收期的京大戟和甘遂中大戟二烯醇含量

通过对不同产地、生长年限、采收期京大戟和甘遂中大戟二烯醇的含量测定与分析,来确定京大戟和甘遂的最佳产地、生长年限及采收期。采用HPLC法测定市售京大戟和甘遂药材中大戟二烯醇的质量分数,评价市售甘遂和京大戟质量状况。试验所采集的不同产地的京大戟和甘遂共18个批次样品中有15个批次样品的大戟二烯醇含量达到了2015版《中国药典》规定的大戟二烯醇含量标准,总样品合格率为83.3%。其中江苏产的京大戟中大戟二烯醇含量最高(6.89%),广西产的大戟二烯醇含量最低(5.59%)且未达到药典规定含量;山西产的甘遂中大戟二烯醇含量最高(2.72%),陕西产的大戟二烯醇含量最低(2.11%)。2种药材中大戟二烯醇含量随着生长年限的变化而改变,其中,3年生京大戟及2年生甘遂中大戟二烯醇含量最高。京大戟在秋季采收、甘遂在春季采收时大戟二烯醇含量最高。本研究可为确定京大戟和甘遂最佳生长年限及采收期提供科学依据。

甘遂在不同配伍中大戟二烯醇的含量变化研究

目的：比较甘遂单煎、与甘草时煎及在甘遂半夏汤中群煎时大戟二烯醇的含量变化情况。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Dikma DiamonsilC8（200mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（94：6），检测波长为210nm，室温.结果：大戟二烯醇在1．2-12μg范围内呈现良好的线性，回归方程为y=32180x＋2155．4，r=0．9991；单药、对药、群药的平均回收率分别为97．87％、97．57％、97．34％。大戟二烯醇提取量的变化规律是对药〉群药〉单药。结论：建立的方法可用于甘遂的配伍变化研究，甘遂中大戟二烯醇的提取量随着配伍发生明显变化。

大戟脂药材中四环三萜类成分大戟二烯醇、大戟醇的含量测定及提取工艺优化

目的:建立同时测定大戟脂药材中大戟二烯醇和大戟醇含量的方法,并优化其提取工艺。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C8,流动相为乙腈-水(90∶10,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以大戟二烯醇、大戟醇含量、出膏率为评价指标进行综合评分,以乙醇体积分数、提取时间、溶剂用量为考察因素,采用L9(34)正交试验优化其提取工艺并进行验证。结果:大戟二烯醇、大戟醇检测质量浓度的线性范围分别为0.0304~1.216mg/mL(r=0.9996)、0.01~0.4 mg/mL(r=0.9999);精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2%,平均加样回收率分别为100.46%(RSD=1.03%,n=6)、99.36%(RSD=0.91%,n=6)。最优提取工艺为40 mL的95%乙醇回流提取1 h。经3次试验验证结果显示,大戟二烯醇的平均含量为94.43 mg/g(RSD=0.92%,n=3),大戟醇的平均含量为25.42 mg/g(RSD=0.98%,n=3),平均出膏率为51.42%,(RSD=1.95%,n=3),平均综合评分为98.87(RSD=0.92%,n=3)。结论:所建含量测定方法简便、准确,重复性好,可用于大戟脂的质量控制;优化所得提取工艺稳定、可行。

大戟脂有效部位及大戟二烯醇抗炎镇痛作用研究

目的考察大戟脂有效部位和大戟二烯醇的抗炎镇痛作用。方法取昆明种小鼠80只,随机分为8组,分别为大戟脂有效部位大、中、小(60,30,15 mg·kg^(-1))剂量组,大戟二烯醇大、中、小(30,15,7.5 mg·kg^(-1))剂量组,0.5%CMC-Na组和吲哚美辛组(10 mg·kg^(-1)),每组10只。通过二甲苯致小鼠耳肿胀法、毛细血管通透性实验和棉球肉芽肿实验,综合观察大戟脂有效部位和大戟二烯醇的抗炎作用;采用热板法、醋酸扭体法和福尔马林法,评价其镇痛作用。结果大戟脂有效部位和大戟二烯醇在三种炎症模型上均显示了一定的抗炎作用,同时表现出良好的镇痛作用,其中以大戟二烯醇高剂量组效果最佳。结论大戟脂有效部位和大戟二烯醇具有显著的抗炎镇痛作用,其中大戟二烯醇发挥主要作用。

羊毛脂醇及其衍生物的引产活性

羊毛脂醇及其衍生物羊毛脂酮、醋酸酯均具有引产活性,它们的引产活性较其差向异构体大戟二烯醇和大戟二烯酮弱,从而认为大戟烷型四环三萜 C_(-13)、C_(14)、C_(17)差向构型可增强引产活性。

蒙药材胡德日奈都日吉德的质量标准初步研究

目的:建立蒙药胡德日奈都日吉德的质量标准。方法:参照《中华人民共和国药典》(四部)2015年版相关方法,对胡德日奈都日吉德杂质、水分、灰分、浸出物进行检测;采用硅胶G薄层板,以大戟二烯醇为对照,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(10∶1)为展开剂,用10%硫酸乙醇溶液显色,对胡德日奈都日吉德进行鉴别;采用紫外分光光度法,以大戟二烯醇为对照,在545 nm波长下对胡德日奈都日吉德的活性成分萜类化合物进行定量分析。结果:胡德日奈都日吉德三批样品杂质在0.69%~0.75%之间,平均值为0.72%,RSD为4.26%;水分含量在7.68%~7.74%之间,平均值为7.72%,RSD为0.03%;总灰分0.20%~0.22%之间,平均值为0.21%,RSD为2.86%;酸不溶性灰分在0.21%~0.23%之间,平均值为0.22%,RSD为4.82%;浸出物1.24~1.35之间,平均值为1.31%,RSD为4.64%。在供试品的色谱中,与对照品色谱相应的位置上,显示相同颜色的斑点。总萜在0.6720~5.3790 mg/L呈良好的线性关系,该方法平均回收率为97.48%,RSD为0.478%,3批样品总萜含量在25.67~35.94 mg/g之间,均含量为31.03 mg/g。结论:根据实验结果,制定蒙药胡德日奈都日吉德药材(按干燥品计算)中杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分分别不得过1%,10.0%,0.4%、0.4%;水溶性浸出物不得少于1.0%;总萜含量不得少于20 mg/g。本办法可用于蒙药胡德日奈都日吉德药材的质量控制。

大戟内生真菌对其生长和两种萜类物质量的影响

目的探讨内生真菌促进大戟药材生产的方法。方法接种大戟内生真菌到大戟组培苗,将建立共生后的组培苗移栽室外,生长1年后,检测生物量和萜类的量。结果内生真菌E4(Fusariumsp.Ⅰ)和E5(Fusariumsp.Ⅱ)均促进了宿主植物生长,使根的鲜质量分别提高了49.45%和59.74%;并使大戟的折干率提高了2.99%和6.48%;同时提高了大戟组培期和室外生长1年后二萜物质异大戟素和三萜物质大戟醇的量。室外生长1年后,E4处理组,异大戟素和大戟醇分别比对照提高了92.79%和40%;E5处理组,异大戟素和大戟醇分别比对照提高了105.32%和241.38%。结论内生真菌E4和E5对大戟有促生长作用,并能同时促进其萜类的合成。

细叶杜香化学成分研究(Ⅰ)

目的研究细叶杜香Ledum palustre全草的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和高效液相色谱法等分离方法,对细叶杜香正己烷萃取物的化学成分进行分离并经波谱数据分析鉴定化合物的结构。结果从细叶杜香全草无水乙醇提取液正己烷萃取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为大戟醇乙酰酯（1）、lanosta-8,24-dien-3-one（2）、蒲公英萜酮（3）、泪杉醇（4）、（24S）-豆甾-4-烯-3-酮（5）、大戟醇（6）、异海松酸（7）、醋酸落叶松酯（8）、28-羟基-羽扇豆酮（9）、β-谷甾醇（10）、异水菖蒲二醇（11）、古柯二醇（12）、熊果醇（13）。结论化合物2、4-9、11、12为首次从杜香属植物中分离得到。

京大戟和甘遂炮制前后大戟二烯醇的含量比较

目的:建立有毒中药京大戟与甘遂生品、醋制品中大戟二烯醇的含量测定方法,并比较两者炮制前后的含量变化。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil ODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(98∶2),柱温为30℃,流速为1.0mL·min-1,检测波长为210nm。结果:大戟二烯醇进样量在0.42～6.23μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998);京大戟和甘遂生品的平均加样回收率分别为99.28%和99.80%,RSD分别为1.69%和1.83%(n=9)。京大戟中大戟二烯醇的含量明显高于甘遂,且醋制不会对大戟二烯醇的含量造成显著影响。结论:本方法能准确测定京大戟和甘遂中大戟二烯醇的含量。