红花黄素对氧自由基所致的心肌细胞电生理异常的保护作用

目的 研究红花黄素 (saffloweryellowpigment,SYP)对氧自由基引起的豚鼠单个心室肌细胞电生理异常的保护作用。方法 采用全细胞膜片钳技术 ,观察预先应用红花黄素 (3.3μg L)后 ,对外源性氧自由基 (1mmol L的H2 O2 )引起单个豚鼠心室肌细胞动作电位时程 (actionpotentialduration ,APD)和离子电流改变的影响。结果 红花黄素能明显缩短H2 O2 诱发的动作电位时程 ;减轻H2 O2 对钙电流的抑制作用 ;但不能改变H2 O2 对内向整流钾电流(Ik1 )的抑制作用。结论 预先应用红花黄素对H2 O2 损伤有一定的拮抗作用 ,说明其能够清除氧自由基 。

快律宁胶囊对外源性自由基所致心律失常的影响

目的:研究快律宁胶囊(KLN)对外源性自由基所致心律失常的影响,对比研究KLN与维拉帕米对其的保护作用。方法:将SPF级SD大鼠分为对照组,维拉帕米组和KLN胶囊高、中、低剂量组,采用Langendoff灌流装置对大鼠离体心脏灌注硫酸亚铁/抗坏血酸的方法,复制外源性自由基所致大鼠心律失常模型,对比研究KLN胶囊与维拉帕米对其的保护作用。结果:与对照组相比,KLN胶囊可以剂量依赖地减少对外源性自由基所诱发室性早搏(VEB)、室速(VT)的发生次数(P<0.01);KLN胶囊3个剂量组及维拉帕米组均未出现室颤(VF),而对照组则诱发出VF,但差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,KLN胶囊高剂量组心律失常的出现时间较晚(P<0.05),而KLN胶囊中低剂量组、维拉帕米组心律失常的出现也有推迟的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,KLN胶囊3个剂量组的心率明显减慢,而且呈剂量相关性;与对照组性比,KLN胶囊高、中剂量组的心律失常评分明显降低(P<0.05),而KLN胶囊低剂量组和维拉帕米组则与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:KLN胶囊对外源性自由基诱发的心律失常可能具有预防和治疗作用,可以明显减慢心率,并可能对恶性心律失常(VT、VF)的发生具有一定的预防作用,其疗效优于维拉帕米。

卡托普利对·OH所致异常血流动力学的保护作用

·OH生成液0．05ml·100g－1经腔静脉注入心脏．可使麻醉大鼠的左心室收缩压力、左心室压力与心率乘积、左心室压力上升最大速率和左心室压力下降最大速率明显下降．而左心室舒张末期压和血浆丙二醛含量显著升高。给·OH前5miniV卡托普利110μg·100g－1，给·OH后继以18μg·100g－1·min－1静脉输注，对上述功能及生化指标的异常有明显改善效应。

不同外源物对亚麻籽油室温氧化自由基变化的影响

为了探究不同外源物对亚麻籽油室温氧化过程中自由基变化的影响。本实验以亚麻籽油为原料,利用电子顺磁共振和核磁共振技术考察不同外源物对亚麻籽油室温氧化过程中自由基和氢谱变化的影响。结果表明:在自然光、避光及添加叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ)、VE和叶绿素条件下,亚麻籽油室温氧化过程中产生4种自由基,即5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物未知自由基(5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide-X radicals,DMPO-X)、烷基自由基(R·)、烷氧自由基(RO·)和烷过氧自由基(ROO·),而添加偶氮二异庚腈(2,2’-azobisisoheptonitrile,ADVN)会引发无机碳中心自由基。自然光利于DMPO-X的生成;避光利于RO·的生成;TBHQ可有效减少RO·和ROO·的含量;VE可延迟DMPO-X最高信号强度的出现时间,对R·生成有明显抑制作用;叶绿素在氧化前期可抑制DMPO-X的生成,后期对RO·的产生有一定抑制作用;ADVN促进氧化过程中DMPO-X的产生,氧化中期和后期促进ROO·和RO·的产生。结论:在亚麻籽油室温氧化过程中,RO·的产生和分解与氧化程度直接相关,不同外源物主要影响亚麻籽油室温氧化过程中各种自由基含量变化,而对自由基的种类影响不大。

不饱和脂肪酸室温氧化过程中自由基的变化

为探究不饱和脂肪酸室温氧化过程中自由基的变化规律,本实验以油酸、亚油酸和亚麻酸为实验材料,采用电子顺磁共振和核磁共振技术,对室温氧化及外源物质影响下不饱和脂肪酸氧化过程自由基和核磁共振氢谱变化规律进行分析。结果表明:油酸氧化0~60 min期间所含自由基以烷基自由基(R·)为主,之后以烷过氧自由基(ROO·)和烷氧自由基(RO·)为主;亚油酸、亚麻酸氧化过程所含自由基均以R·为主;氧化期间脂肪酸(RH)被引发生成R·和H·,H·与ROO·结合生成氢过氧化物,部分氢过氧化物发生分解,且亚麻酸氧化和降解程度高于亚油酸和油酸;加入生育酚(tocopherol,VE)和特丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ)均可抑制RO·、ROO·等自由基的形成;加入偶氮二异庚腈(2,2’-azobis(2,4-dimethyl)valeronitrile,ADVN)的脂肪酸中所含自由基以R·为主,同时会引入无机碳中心自由基;加入叶绿素的油酸和亚麻酸组自旋总数分别在150 min和90 min明显升高,其余时间段呈波动式变化。结论:不饱和脂肪酸室温氧化过程中,不饱和程度越高的脂肪酸生成R·数量越多;加入的VE和TBHQ会提供H·,其与脂质自由基结合从而抑制链式反应进行,尤其会抑制ROO·、RO·生成;ADVN、叶绿素具有自由基引发效应,能促进链式反应进行。

补充外源性抗氧化剂对运动诱导的适应性变化的影响

采用文献资料法对补充外源性抗氧化剂对运动诱导的适应性变化的影响进行探讨。研究发现为了抵抗自由基的消极作用,运动爱好者常摄取外源性抗氧化剂来消除运动时产生的自由基。抗氧化剂的补充对运动带来的适应性变化有抑制作用,这可能是由于内源性细胞氧化还原状态的调节依赖于机体中复杂的自由基产生和消除系统,这些系统可以精确地调节特定的自由基。而常用的抗氧化剂不具备特异性消除自由基的能力,反而破坏了机体这些系统的调节能力,不仅消除了有害的活性氧/活性氮(ROS/RNS),还影响了细胞适应所需的相关信号。但以往研究在探讨运动或抗氧化剂对于机体氧化还原状态的影响时,没有将氧化还原状态的个体差异考虑在内。ROS/RNS浓度对运动训练适应性和运动表现具有非线性作用,运动时产生适量ROS/RNS有利于机体对运动产生良好的适应性变化,当运动时产生的ROS/RNS未达到对机体有害的浓度范围时,外源性抗氧化剂的补充可能会影响细胞适应所需的ROS/RNS相关信号,抑制机体对运动产生适应性变化。

丹参素异丙酯对外源性自由基致心律失常的影响

目的:观察丹参素异丙酯(IDHP)对外源性自由基所致心律失常的影响。方法:Wistar大鼠50只,随机均分为空白对照组、心律失常模型组、维拉帕米(VPL)1.00mg/L组、丹参素异丙酯4.00mg/L、0.04mg/L 2个剂量组。采用Langendorf灌流技术对大鼠离体心脏灌注硫酸亚铁(0.025mmol/L)和抗坏血酸(0.100mmol/L)的方法,复制自由基致心律失常的模型,观察IDHP对其影响。结果:空白对照组离体大鼠心脏无1例发生心律失常;心律失常模型组总心律失常发生率100.00%,主要为传导阻滞和室性早搏;VPL1.00mg/L组、IDHP4.00mg/L、0.04mg/L3个药物组与心律失常模型组相比,心律失常发生率明显降低。结论:IDHP具有抗外源性自由基所致心律失常的作用,与阳性对照药VPL相似。

在低温胁迫下外源ABA对高原水稻自由基清除系统的影响

喷洒外源ＡＢＡ（脱落酸１０－５ｍｏｌ／Ｌ）在水稻２叶期的幼苗上（３０００ｌｘ，１２ｈ／ｄ），２４ｈ后，分别测定了不同处理的水稻幼苗，发现在低温胁迫２～４ｄ（４±１℃，１０００ｌｘ，２４ｈ／ｄ）中以及回温恢复２～５ｄ（２±１）℃，３０００ｌｘ，１２ｈ／ｄ）中，自由基清除系统的膜保护酶──超氧物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化物酶（ＰＯＸ）的活性增加，非酶促保护系统中的抗氧化剂──抗坏血酸（ＡＳＡ）和还原性谷胱甘肽（ＧＳＨ）的含量增加，膜脂过氧化产物──丙二醛（ＭＤＡ）的含量减少．实验证明外源ＡＢＡ在光下能明显提高水稻幼苗自由基清除系统的防御能力。

双氢青蒿素诱导肿瘤细胞铁死亡及其机制研究

目的阐明双氢青蒿素(DHA)诱导肿瘤细胞铁死亡的作用及其机制。方法利用3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)检测DHA与FeSO4体外芬顿样(Fenton)反应生成氧自由基(·OH)的能力;MTT法检测DHA对人肝癌HepG2细胞的毒性(包括FeSO4与去铁胺预处理组)。MTT法考察谷胱甘肽(GSH)与铁死亡抑制剂(Fer-1)对DHA细胞毒性的影响;采用DCFH-DA染料考察DHA(包括FeSO4预处理组)诱导的细胞内活性氧的生成能力;采用C11-BODIPY581/591与DiO分别考察DHA(包括FeSO4预处理组)对细胞内脂质过氧化物生成能力以及细胞膜结构的影响;利用谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)试剂盒测定DHA(包括FeSO4预处理组)对HepG2细胞内GPX-4活性的影响。结果 Fe2+能够催化DHA发生芬顿样反应并生成·OH;DHA的半数抑制浓度(IC50)为(39.96±8.78)μmol/L,FeSO4与去铁胺分别能够增加或者降低DHA的细胞毒性;DHA处理后细胞内活性氧含量与脂质过氧化物含量升高,细胞形态变大,细胞膜呈散点状分布并呈现解离状态。FeSO4预处理组与DHA组相比较进一步增加细胞内活性氧含量与脂质过氧化物含量,并且细胞膜形态完全破坏。FeSO4能够增强DHA对GPX-4活性的抑制作用。结论 DHA通过芬顿样反应升高细胞内活性氧而最终诱导肿瘤细胞铁死亡。另外,外源性铁可以加速DHA发生芬顿样反应进而加速肿瘤细胞铁死亡的发生与发展。