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SS2人源分离株ZYH24EF的表达纯化及其单克隆抗体的制备
1
作者
徐公义
王海丽
+2 位作者
葛长城
王长军
唐家琪
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期44-48,共5页
目的建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法。方法将SS2四川人源分离株ZYH24EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF-GST)采用亲和层析法纯化、经凝血酶作用去除标签蛋白获得纯化的EF目的蛋白。以纯化的E...
目的建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法。方法将SS2四川人源分离株ZYH24EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF-GST)采用亲和层析法纯化、经凝血酶作用去除标签蛋白获得纯化的EF目的蛋白。以纯化的EF免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗EF单克隆抗体(McAbs)进行特异性分析,并建立猪链球菌EF检测方法。结果得到rEF-GST和EF相对分子量分别为62000和35000;建立了4株稳定分泌抗EFMcAbs的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2;腹水的特异性鉴定结果表明4株McAbs能特异性的识别EF;以2G1单抗腹水和抗EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF。结论4株抗EFMcAbs的制备对猪链球菌检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义。
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关键词
猪链球菌2型
胞外因子
表达
单克隆抗体
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职称材料
题名
SS2人源分离株ZYH24EF的表达纯化及其单克隆抗体的制备
1
作者
徐公义
王海丽
葛长城
王长军
唐家琪
机构
聊城职业技术学院
南京军区军事医学研究所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期44-48,共5页
基金
国家“十五”科技攻关(2003BA712A03-05)
国家自然科学基金(30600533)
江苏省自然基金(BK2008066、BK2006014)
文摘
目的建立猪链球菌2型(SS2)胞外因子(EF)的免疫学检测方法。方法将SS2四川人源分离株ZYH24EF抗原性强的区域进行克隆、原核表达,对表达的融合蛋白(rEF-GST)采用亲和层析法纯化、经凝血酶作用去除标签蛋白获得纯化的EF目的蛋白。以纯化的EF免疫BALB/c小鼠,间接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗EF单克隆抗体(McAbs)进行特异性分析,并建立猪链球菌EF检测方法。结果得到rEF-GST和EF相对分子量分别为62000和35000;建立了4株稳定分泌抗EFMcAbs的杂交瘤细胞系2G1、5H7、3H4和1F2;腹水的特异性鉴定结果表明4株McAbs能特异性的识别EF;以2G1单抗腹水和抗EF多克隆抗血清建立的夹心ELISA可特异地检测EF。结论4株抗EFMcAbs的制备对猪链球菌检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义。
关键词
猪链球菌2型
胞外因子
表达
单克隆抗体
Keywords
Streptococcus suis 2
extracdlular factor
expression
monoclonal antibody
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
SS2人源分离株ZYH24EF的表达纯化及其单克隆抗体的制备
徐公义
王海丽
葛长城
王长军
唐家琪
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
0
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