猪渗出性皮炎病原的分离鉴定

从广东省棠下、增城等地区猪场送检病料中,分离到9株葡萄球菌,经TH-16S细菌生化编码系统鉴定表明,其中4株松鼠葡萄球菌,3株木糖葡萄球菌,2株猪葡萄球菌。参考Genebank中登录的基因序列,设计合成可区分4种猪葡萄球菌表皮脱落毒素ExhA、ExhB、ExhC、ExhD的引物,并以此引物对2株猪葡萄球菌和其余7株葡萄球菌进行了PCR检测,结果表明1株为ExhB型,1株为无毒力型,其余7株葡萄球菌均不能产生表皮脱落毒素,用此9株葡萄球菌回归动物后证实,ExhB毒力型的猪葡萄球菌致病力强,很快死亡;无毒力型的猪葡萄球菌无致病力;4株松鼠葡萄球菌都有不同程度的致病性;3株木糖葡萄球菌无致病力,说明猪渗出性皮炎的发生与猪葡萄球菌所产生的表皮脱落毒素有关。

仔猪渗出性皮炎病原的分离鉴定及耐药性分析

为消除渗出性皮炎对仔猪的危害,对发生该病的病死仔猪进行细菌分离培养。通过革兰氏染色、生化试验与16SrDNA基因序列同源性分析鉴定:分离出的两株细菌为猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌。猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌能分别产生表皮脱落毒素ExhB和ExhC,表明这两株葡萄球菌都有致病力。猪葡萄球菌和松鼠葡萄球菌均对头孢菌素Ⅰ类(先锋霉素Ⅰ、Ⅴ、Ⅵ)、头孢噻肟和丁胺卡那敏感,在临床上可选择这些药物预防和治疗该病。

猪渗出性皮炎病原的分离鉴定

从疑似渗出性皮炎的哺乳仔猪体内分离到一株细菌,经革兰染色镜检以及TH-16S细菌生化鉴定系统和葡萄球菌16 SrRNA、gap基因通用引物鉴定。结果表明,该菌株为葡萄球菌,gap基因的核苷酸同源性为99%。动物试验发现,试验小鼠出现躁动、被毛竖立、精神沉郁,18 h死亡,说明该菌株对小鼠具有致病力。

猪葡萄球菌脱落毒素研究进展

猪渗出性皮炎是一种由猪葡萄球菌引起的哺乳或断奶仔猪的急性传染病。猪葡萄球菌产生的脱落毒素被认为是引起猪渗出性皮炎的主要因子之一,不同毒株可以产生不同的毒素,分别被命名为Ex-hA、ExhB、ExhC和ExhD 4种。论文就近年来对猪葡萄球菌脱落毒素的结构特征、生物学功能以及在诊断和免疫学方面的研究进行综述。

哺乳仔猪传染性渗出性皮炎的诊断与防控措施

哺乳仔猪渗出性皮炎是由猪葡萄球菌感染引起的急性接触性皮炎。本病主要发生在5周龄以内,在同窝或密切接触的哺乳仔猪当中相互传染,与季节、饲养管理、环境卫生等多种因素的共同作用有关。哺乳仔猪渗出性皮炎一旦发生或流行,单一治疗效果往往不理想,给猪场造成较大损失,只有采用综合性的防治措施,才能比较有效的控制该病的发生和流行。

猪源松鼠葡萄球菌脱皮毒素C抗体检测ELISA方法的建立与应用

本研究旨在建立一种简便、快速的检测猪源致病性由携带脱皮毒素(Exh)C的猪源松鼠葡萄球菌引起的猪渗出性皮炎抗体的间接ELISA方法。首先利用本实验室保存的致病性松鼠葡萄球菌rExhC重组蛋白和阳性血清,对ELISA各项反应条件进行摸索,确定了最佳工作条件。结果表明,rExhC蛋白抗原最佳包被浓度为0.5μg/mL,血清的最佳稀释度为1:100,抗原抗体最佳反应条件为37℃,1 h,酶标二抗最佳工作浓度为1:1 000,酶标二抗最佳反应条件为37℃30 min,封闭条件为5%脱脂乳37℃,2 h,底物显色条件为室温30min,阴阳性临界值为0.102。检测证实所建立的ELISA方法具有较好的特异性、敏感性和准确性。用所建立的ELISA方法检测了2011年在江苏省张家港市采集的335份猪血清样本,结果阳性率为31.94%,与公开发表的猪渗出性皮炎的阳性率相符。综上所述,本研究建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和敏感性,可用于猪源松鼠葡萄球菌引起的渗出性皮炎的检测。

泡沫敷料联合表皮生长因子在新生儿静脉外渗中的应用

目的观察自粘性软聚硅酮泡沫敷料联合表皮生长因子应用在静脉外渗后引起水泡的效果。方法采用便利抽样选择于2017年3月—2019年12月入住医院新生儿科药物外渗的新生儿共80例,按照随机数字表法将80例药物外渗患者随机分为对照组和治疗组,对照组使用表皮生长因子,治疗组给予自粘性软聚硅酮泡沫敷料与表皮生长因子联合应用治疗,比较2组患者治疗后效果。结果与对照组比较,治疗组外渗性损伤治疗效果显著,同一类药物渗出,治疗组的疗效亦显著优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗组显效时间较对照组缩短,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论自粘性软聚硅酮泡沫敷料联合表皮生长因子应用在静脉外渗后引起水泡疗效显著,可缩短治愈时间。

猪渗出性皮炎的原因分析与预防治疗

猪渗出性皮炎是现代养猪生产中常见的疾病之一,文章结合现代养猪现场中的几例病例报道,对猪渗出性皮炎的发病特点、临床症状、病理变化、疾病的预防与治疗进行探讨。

1株猪葡萄球菌强毒株的分离鉴定及致病性试验

为确定广东省增城某猪场产房仔猪暴发渗出性皮炎的致病菌,从病猪心脏、肺脏、病变皮肤分离并纯化细菌,经形态学观察,镜检,生化特性及gap基因的序列分析,确定为猪葡萄球菌,命名为ZC-4株。药敏试验结果显示该菌株对头孢拉定、头孢唑啉、新生霉素高度敏感,对头孢噻肟、万古霉素、庆大霉素中度敏感,对青霉素、阿莫西林、磺胺类药物、链霉素、恩诺沙星等均耐药。对分离株毒素基因进行检测,结果显示,分离株携带ExhA毒素基因,测序结果表明,其编码区全长为822bp,编码274个氨基酸;氨基酸序列与丹麦分离株ExhA基因(AF515453)的同源性最高,为99.6%;遗传进化分析显示,分离株所携带的毒素基因与参考菌株猪葡萄球菌ExhA毒素基因聚类紧密,位于一个小的分支内。分离株致病性试验结果显示,分离株接种25日龄健康断奶仔猪后24h,病猪耳根、四肢内侧、背部、腹部、臀部、尾根等部位出现蜕皮并露出有液体渗出的鲜红创面,继而皮肤形成一层厚厚的结痂,说明该菌株具有较强的致病性。本试验为猪葡萄球菌疫苗的研制及致病机制研究提供了理论依据。

猪葡萄球菌437-2株的分离鉴定及生物学特性

从发生渗出性皮炎的仔猪体内分离到1株细菌,根据其形态特征和生化特性,结合16S rRNA核苷酸序列分析,确定为猪葡萄球菌,并命名为437-2株。用1×10^(9)CFU/mL剂量的该菌株经皮下感染小鼠、仔猪,均能引起注射部位皮肤脱毛、破溃、有炎性渗出物、结痂等病变,病理学观察可见表皮局部上皮细胞消失、皮下小血管充血和炎症细胞浸润。应用PCR方法检测分离株携带的表皮脱落毒素相关基因并测序,结果显示该菌株携带表皮脱落毒素ExhD和ShetA基因。药敏试验结果显示该菌株对多种抗生素呈现不同程度的耐药,但对痢菌净、氟苯尼考、头孢曲松钠、阿米卡星敏感。上述结果为猪葡萄球菌引起的仔猪渗出性皮炎的病原学、发病机理及诊断靶标筛选等方面的研究提供了参考。

吉林省某猪场新发猪葡萄球菌引起的化脓性肺炎

对吉林省某猪场暴发的一种以呼吸困难、发绀和腹泻为主要临床特征,剖检以化脓性肺炎和纤维素性胸膜肺炎和腹膜炎为病变特征的疫病进行了深入研究。通过对送检病猪体内的实质器官和血液中分离出的葡萄球菌进行形态学鉴定、分离培养、生化特性鉴定和分子生物学鉴定,发现所分离的菌株为猪葡萄球菌,并将其命名JLHN15。由猪葡萄球菌引起猪化脓性肺炎或胸膜肺炎在国内外尚未见有报道,应引起国内临床兽医工作者重视。

重组人表皮生长因子凝胶在浅Ⅱ度烧伤创面护理中的应用

目的观察重组人表皮生长因子凝胶在浅Ⅱ度烧伤创面护理中的应用效果。方法选择50例浅Ⅱ度烧伤患者，采用同体对照法，将同一创面不同区域或同体对称部位的创面分为观察组和对照组。观察组采用重组人表皮生长因子凝胶加医用硅酮凝胶膏混合后湿敷创面；对照组采用医用硅酮凝胶膏湿敷创面。观察两组创面愈合时间、换药次数、疼痛状况及渗液情况的差异。结果观察组的创面平均愈合时间（8．6±1．6）d较对照组（11．8±1．7）d明显缩短，差异有统计学意义（t=-9．834，P〈0．05）。观察组换药次数（4．5±0．9）次较对照组（6．1-I-0．9）次明显减少，差异有统计学意义（t=-9．336，P〈0．05）。两组患者的换药疼痛程度相似，差异无统计学意义（x^2=0．272，P〉0．05）。两组在第2次换药时的渗液程度相似，差异无统计学意义（x^2=0．205，P〉0．05）；而在第3和4次换药时，观察组渗液程度较对照组明显改善，差异有统计学意义（x2分别为8．988，5．316；P〈0．05）。结论重组人表皮生长因子凝胶能减少浅Ⅱ度烧伤创面的渗液量，减少换药次数，可明显促进表皮生长，加速创面愈合。

猪葡萄球菌脱落毒素多重PCR检测方法的建立与初步应用

根据GenBank已发表的猪葡萄球菌的6种脱落毒素基因序列,设计合成了6对相应的特异性引物,通过特异性、敏感性和重复性试验建立了可行的多重PCR检测方法。用该方法对临床分离到的9株猪葡萄球菌进行检测,均扩增出了与预期大小相符的23SrDNA(662bp)条带;同时,其中6株分别扩增出了EXHA(316bp,2株)、EXHC(525bp,2株)和Shet-A(814bp,2株)基因特异性条带;另外3株均未扩增出任何毒素基因特异性条带,鉴定为无毒力菌株,以上结果与生化鉴定及单一PCR检测测序结果一致。结果表明,本试验所建立的多重PCR方法不仅操作快速方便、节约试验成本,而且具有高度特异性、敏感性和良好的重复性,可用于仔猪渗出性皮炎的诊断和猪葡萄球菌的快速鉴定。

猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的表达与纯化

为了研究猪葡萄球菌脱落毒素ExhA的生物学活性,试验以猪葡萄球菌的基因组DNA为模板,PCR扩增ExhA全基因序列,连接到pCold TF表达载体上,构建重组质粒pCold TF-ExhA,将重组质粒转入E.coil BL2（DE3）,IPTG低温诱导目的蛋白可溶性表达,重组表达的蛋白用Ni-IDA琼脂糖纯化树脂纯化,Western-blot及攻毒试验验证表达蛋白质的生物学功能。结果表明：成功构建了pCold TF-ExhA重组质粒,并且脱落毒素ExhA主要以可溶性形式表达,表达纯化的脱落毒素ExhA具有完整的生物学活性。说明表达的脱落毒素ExhA具有良好的抗原性。