酒精性肝损伤大鼠细胞色素P450 CYP2E1和细胞色素P450 CYP3A的代谢活性

目的观察酒精性肝损伤对大鼠细胞色素P450CYP3A(CYP3A)和细胞色素P450CYP2E1(CYP2E1)代谢活性的影响。方法采用ig给予白酒制备大鼠酒精性肝损伤模型,检测血清中谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性,采用HE染色法光镜下观测酒精对肝脏损伤程度。大鼠ip给予CYP3A探针药物咪达唑仑10mg·kg-1或ig给予CYP2E1探针药物氯唑沙宗50mg·kg-1后,采用高效液相色谱法测定不同时间点大鼠血浆中咪达唑仑和氯唑沙宗的血药浓度,并应用3P87软件计算其药代动力学参数,以考察CYP2E1和CYP3A的代谢活性的变化。大鼠ig给予氯唑沙宗80mg·kg-1后,热板方法测定大鼠添足次数和添足反射潜伏期。结果酒精性肝损伤可致大鼠肝小叶结构不清,肝索排列紊乱,肝细胞体积增大,呈弥漫性中度水变性,肝窦受压,大部分肝细胞胞浆内见大小不等的脂肪空泡;与正常对照组相比,酒精性肝损伤组大鼠GPT和GOT活性分别增加了16.0%和20.0%(P<0.05,P<0.01)。酒精性肝损伤致大鼠CYP2E1对探针药物氯唑沙宗的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了38.0%,30.5%和35.0%(P<0.05);酒精肝损伤组大鼠氯唑沙宗镇痛效果明显降低;酒精性肝损伤致大鼠CYP3A对探针药物咪达唑仑的代谢活性增强,AUC,t1/2和cmax分别降低了122.6%,54.9%和56.9%(P<0.01,P<0.05)。结论酒精性肝损伤可使大鼠CYP2E1和CYP3A代谢活性增强。

细胞色素P450 CYP2E1酶构型特征及其表达调控机制的研究进展

细胞色素P450CYP2E1酶参与代谢活化及失活多种前毒物、前致癌物和少数药物。在细胞色素P450超家族中,CYP2E1具有易介导自由基生成引发氧化应激反应的特征。CYP2E1表达水平可能是机体对环境和工业毒物或致癌物敏感程度的重要因素。研究表明,CYP2E1可被多种内、外源性物质所调控,并且CYP2E1的药理和毒理学功能与其以蛋白构型为基础的代谢行为密切相关。本文综述了CYP2E1基因多态性、酶构型特征与其代谢活性间的关系,并分析了其区别于其他细胞色素P450亚型的表达调控机制。

3Gyγ射线照射和丝裂霉素C对大鼠肝脏细胞色素P450含量及其同工酶CYP2B1、CYP2E1活性的影响

为研究3Gyγ射线全身照射和丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)对雄性(Sprague-Dawley,SD)大鼠肝脏细胞色素P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性的影响,分别给大鼠腹腔注射1mg/kgd的MMC(分1d,连续3d及6d用药三组),3mg/kg的MMC1d,3Gyγ射线全身照射,3Gyγ射线全身照射加1d3mg/kgMMC,另设空白对照和溶剂对照。各组处理结束后24h,处死大鼠取肝脏,制备微粒体,测P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性。实验结果表明,给MMC1mg/kgd,1d后P450含量、CYP2B1活性变化无统计学差异(p>0.05),CYP2E1活性明显上升(p<0.01);连续3d或6d后,P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性均无明显变化(p>0.05)。给3mg/kg的MMC1d,对P450含量、CYP2B1活性影响无统计学差异(p>0.05),CYP2E1活性上升明显(p<0.01);3Gyγ射线全身照射后,P450含量、CYP2B1活性无明显变化(p>0.05),CYP2E1活性下降(p<0.05);分析发现,3mg/kgMMC与3Gyγ射线之间没有交互作用。结果提示,γ射线可以抑制雄性SD大鼠肝脏CYP2E1活性,MMC对CYP2E1活性有诱导作用,但多次刺激使其耐受,P450含量、CYP2B1活性对γ射线、MMC不敏感。

来氟米特对急性化学性肝损伤小鼠肝Cyt.P450酶含量及CYP2E1 mRNA表达的影响

目的观察来氟米特(Lef)作用前后急性化学性肝损伤小鼠肝微粒体细胞色素P450(Cyt.P450)、细胞色素b5(Cyt.b5)含量及P4502E1(CYP2E1)mRNA表达水平的变化,进一步研究其治疗机制。方法采用CCl4诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,肝匀浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量以及肝微粒体细胞色素P450(Cyt.P450)和细胞色素b5(Cyt.b5)含量,RT-PCR法检测小鼠肝脏细胞色素P4502E1(CYP2E1)mRNA表达水平,并作肝组织切片病理观察。结果Lef明显降低CCl4急性肝损伤小鼠血清ALT、AST水平;降低肝匀浆MDA含量;提高GSH含量并提高肝微粒体Cyt.P450、Cyt.b5含量;抑制CYP2E1 mRNA表达;减轻肝脏病理损伤。结论Lef治疗CCl4所致小鼠急性化学性肝损伤,可能与其诱导肝微粒体Cyt.P450表达,抑制CYP2E1 mRNA转录及抗脂质过氧化有关。

细胞色素 P450 2E1 的研究进展

ＣＹＰ２Ｅ１在药物和人们经常接触的溶剂与环境污染物的代谢中具有重要作用。本文综述ＣＹＰ２Ｅ１的结构特点、基因、底物和探药以及影响其活性的主要因素。

CYP1A1、CYP2E1基因多态性与癌症易感性的研究进展

人类细胞色素P450(CYP450)在多种内源性及外源性物质的生物代谢中起重要作用。大多数CYP450存在基因多态性,其中CYP1A1、CYP2E1两个基因多态性与癌症的发生密切相关。本文综述了近年来人类细胞色素P4501A1(CYP1A1)和P4502E1(CYP2E1)与癌症易感性之间关系的研究进展。

新生儿基因CYP2E15′端RsaⅠ和PON2311位点多态性与早产的关系

探讨新生儿基因细胞色素P4 5 0 2E1(CYP2E1) 5′端RsaⅠ多态性和对氧磷酶 2 (二乙基对硝基苯磷酸酯酶 2 )基因 311位点 (PON2 311)多态性对早产的影响。采用横断面调查方法 ,使用统一的调查表 ,由安庆市各县医院对入院分娩孕妇及其单胎、活产、早产和对照新生儿进行调查 ,共得到有效样本 194个母亲 -新生儿对。单因素分析结果显示 :CYP2E1野生纯合子基因型 (cut/cut)与突变纯合子基因型 (uncut/uncut) /杂合子基因型 (cut/uncut)比较 ,对早产的影响不具有统计学意义。而PON2Ser311Ser纯合子基因型与Cys311Cys纯合子基因型 /Cys311Ser杂合子基因型比较 ,对早产的影响具有显著的统计学意义。进一步分析CYP2E15′端RsaⅠ位点多态性和PON2 311位点多态性是否存在交互作用 ,结果显示 :CYP2E1野生纯合子基因型和PON2Ser311Ser纯合子基因型这一组合与参照组比较 ,对早产的影响具有显著的统计学意义。基因CYP2E15′端RsaⅠ位点多态性与新生儿早产不相关 ,但基因PON2 311位点多态性与新生儿早产相关 ,且CYP2E15′端RsaⅠ位点多态性和PON2 311位点多态性之间对早产的影响存在交互作用。

普洱茶(熟茶)茶粉、黑茶茶粉、六堡茶对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞CYP2E1表达的影响

背景:CYP2E1是一种可被乙醇诱导的细胞色素P450酶。在非酒精性脂肪性肝病发病机制的"二次打击"学说中,CYP2E1介导的脂质过氧化发挥重要作用。目的:从改善氧化应激的角度探讨普洱茶(熟茶)茶粉、黑茶茶粉和六堡茶对非酒精性脂肪肝(NAFL)模型大鼠的辅助保护作用。方法:120只Wistar大鼠分为正常对照组、高脂模型组、降脂药物组以及低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 g/kg)普洱茶(熟茶)茶粉、黑茶茶粉、六堡茶组。以高脂饮食诱导NAFL模型,实验组予相应品种、剂量的茶汤灌胃35 d。处死大鼠,测定肝组织抗氧化指标,real time PCR检测肝细胞CYP2E1 mRNA表达,同时观察肝脏组织学表现。结果:适宜剂量的普洱茶(熟茶)茶粉和六堡茶能显著降低高脂模型大鼠的肝组织MDA含量,增高SOD、GSH-Px活性,抑制肝细胞CYP2E1 mRNA表达(P均<0.05)。高剂量六堡茶组肝脏组织学表现为轻度脂肪肝,高剂量普洱茶(熟茶)茶粉组和黑茶茶粉组表现为中度脂肪肝。结论:普洱茶(熟茶)茶粉和六堡茶对NAFL大鼠模型的肝脏抗氧化指标、CYP2E1基因表达和组织学表现具有积极作用,表明两者对NAFLD可发挥辅助保护作用,六堡茶的作用更为明显。

注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响

目的研究注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体细胞色素P450（CYP450）酶系CYPlA2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响。方法将SD大鼠分成盐酸头孢他美给药组和生理盐水空白组，每组6只，雌雄各半，给药组尾静脉注射盐酸头孢他美50mg／（kg·d），连续给药7d，每天2次。HPLC法同时测定CYP450的3种同工酶特异性探针底物在SD大鼠肝微粒体内代谢产物生成量和原型探针底物降解量，判断酶亚型活性变化。分析柱DiamonsilC，s（150mm×4．6mm，5／tm），流速1．0mL／min。CYPlA2代谢样品测定条件为甲醇（O．1％甲酸）（A）一水（0．1％甲酸）（B），0～5min：18VooA，5～10min：18％～60％A，10～15min：60oAA，检测波长为247nm；CYP3A4代谢样品测定条件为甲醇（A）-水（0．02％甲酸）（B），0～11min：40％～60％A，检测波长为223nm；CYP2E1代谢样品测定条件为甲醇（A）-水（B），0～10min：37oA～75％A，检测波长为287nm。结果探针底物及其代谢产物在测定浓度范围内线性关系良好（r≥0．9997），精密度RSD〈6％（n=5），提取回收率83．2％～97．5％。SD大鼠连续注射给予盐酸头孢他美后，CYP3A4的活性与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05），可能存在诱导作用；CYPlA2和CYP2E1的活性与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论静注给予盐酸头孢他美能诱导SD大鼠肝微粒体CYP3A4，对CYPlA2和CYP2E1没有诱导或抑制作用。提示经CYP3A4代谢的药物在临床上与注射用盐酸头孢他美合用时，可能存在潜在药物一药物相互作用。

CYP2E1和GSTM1基因型与胃癌易患性关系初探

应用病例对照分子流行病学的方法对细胞色素Ｐ４５０２Ｅ１（ＣＹＰ２Ｅ１） 、谷胱甘肽转硫酶Ｍ１（ＧＳＴＭ１） 基因型与胃癌易患性的关系作了初步探讨。采用ＰＣＲ 方法检测９１ 例原发性胃癌病例和９４ 例正常对照的ＣＹＰ２Ｅ１ 和ＧＳＴＭ１ 基因型。结果表明，ＧＳＴＭ１ 基因缺失与胃癌易患性有关，携带ＣＹＰ２Ｅ１ 的Ｃ１／Ｃ２ 或Ｃ２／Ｃ２ 基因型且ＧＳＴＭ１ 缺失者胃癌易患性增高，ＯＲ＝ ４５８ ，９５ ％ ＣＩ＝ １５４ ～１４１１ 。若同时有吸烟暴露，则胃癌的危险性显著增高（ＯＲ＝ ２０００ ，９５ ％ ＣＩ＝ ３６９ ～１３１６１） ，提示ＣＹＰ２Ｅ１ 和ＧＳＴＭ１

茶多酚对高脂饮食诱发大鼠非酒精性脂肪肝的防护作用以及对CYP 2E1表达的影响

目的:研究茶多酚对高脂饮食诱发大鼠非酒精性脂肪肝(NAFL)的防护作用以及对肝细胞色素P4502E1(CYP2E1)表达的影响,初步评价超声显像联合血脂、转氨酶检测对大鼠NAFL的诊断价值。方法:SD大鼠50只随机分为5组:正常对照组,茶多酚高、中、低剂量组(0.9g/kg、0.3g/kg、0.1g/kg)和模型组。除正常组外各组均给予高脂饮食。实验8周后,观察各组大鼠肝组织和血清MDA含量、SOD活性,肝组织GSH含量,肝功能酶学改变、脂质代谢、血清游离脂肪酸(FFA)水平,以及超声显像、病理组织学和CYP2E1表达的特点。结果:茶多酚高、中、低剂量组大鼠血清SOD活性、MDA含量和FFA水平,以及肝组织SOD活性、MDA含量、GSH含量与模型组相比差异均有显著性意义(P<0.05或P<0.01),各用药组大鼠血脂水平与模型组相比也有明显差异(P<0.05);组织学观察表明高、中剂量茶多酚均能明显减轻肝细胞脂肪变性(P<0.05);肝脏超声显像证实造模成功以及用药能减轻肝脏脂肪变性程度,CYP2E1的表达与肝细胞脂肪变性程度相一致。结论:茶多酚对大鼠NAFL具有良好的防护作用,并有一定的量效关系,超声显像联合血脂、转氨酶检测对NAFL有初步诊断价值。

细胞色素P450 2E1基因多态性与胃癌易感性的关系

目的:探讨细胞色素P4502E1(CYP2E1)基因多态性与胃腺癌易感性的关系,为胃癌高危人群的筛选和预防控制工作提供科学依据。方法:选择41例胃腺癌患者(胃癌组)及41例健康对照者(对照组),分别采用PCR-RFLP技术与多重PCR方法,检测CYP2E1基因型,观察其多态性,然后进行统计学分析。结果:CYP2E1C1/C1基因型(纯合子野生型)在胃癌组和对照组中的分布频率分别是61.0%和41.5%,差异具有显著性(χ2=6.71,P<0.05)。结论:CYP2E1C1/C1基因型与胃癌遗传易感性相关。

细胞色素P450 2E1在利福平减弱异烟肼引起肝脏发生氧化应激中的作用

目的研究利福平(RIF)减弱异烟肼(INH)引起小鼠肝脏发生氧化应激的作用机制。方法将♀ICR成年健康小鼠随机分为4组:50mg/kgINH组;100mg/kgRIF组;INH+RIF组:同时给予INH(50mg/kg)和RIF(100mg/kg);对照组:给予等容量的溶剂,所有小鼠每日均给予处理1次,连续处理1周。分析血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、总胆红素(TB)和总胆汁酸(TBA)水平,Griffith法测定肝脏组织谷胱甘肽(GSH)含量,TBARS比色法分析肝脏组织脂质过氧化水平,RT-PCR技术检测肝脏组织细胞色素P4502E1(CYP2E1)mRNA水平,Westernblot检测肝脏组织CYP2E1蛋白表达水平。结果 INH、RIF及RIF与INH共处理组小鼠血清中ALT均轻度升高,INH处理显著升高肝脏组织脂质过氧化水平并降低GSH含量,RIF共处理显著减弱INH升高肝脏组织脂质过氧化水平并降低GSH含量。单纯RIF处理显著下调肝脏组织CYP2E1蛋白表达水平,且RIF共处理显著减弱INH对肝脏组织CYP2E1蛋白表达的诱导作用;所有处理对CYP2E1mRNA水平无明显影响。结论 RIF减弱INH引起肝脏组织发生氧化应激中,CYP2E1发挥了一定作用。

柴胡水提液对大鼠肝CYP450酶含量及其亚型CYP3A、CYP2E1和CYP1A2活性的影响

目的:研究柴胡水提物对大鼠细胞色素CYP450酶含量及对亚型CYP3A、CYP2E1和CYP1A2活性的影响。方法:大鼠灌胃给予柴胡水提液7d后取肝脏称重并制备肝微粒体,紫外分光光度法测定肝微粒体细胞色素b5(Cytb5)、P450的含量及CYP3A的活性,高效液相法测定CYP2E1和CYP1A2的活性。结果:与空白对照组比较,柴胡水提液组大鼠肝指数无显著变化,CYP450含量减少但统计学意义(P>0.05),CYP1A2活性极显著降低(P<0.01),CYP2E1活性明显降低(P<0.05)。结论:柴胡水提液降低大鼠肝脏CYP450酶含量并抑制CYP2E1和CYP1A2的活性,由于抑制CYP450酶活性,减少对其他药代谢,提示若柴胡水提液与经CYP2E1和CYP1A2代谢的药物同用,有可能会影响这些药物的临床疗效,临床用药时应慎重考虑。

细胞色素P450 2E1在酒精性肝损伤中的作用及研究进展

酒精性肝病（alcoholic liver disease,ALD）是由各种肝脏细胞和损伤因子（包括氧化应激、亚硝化应激、凋亡诱导因子、内毒素和细胞因子等）相互作用导致的病理生理学病征。肝脏是药物、毒素、合成化合物及氧化产物进行解毒的重要目标器官[1]。

细胞色素P4502E1基因多态性与胃癌的关系

目的 探讨人体代谢亚硝胺的重要同功酶细胞色素 P45 0 2 E1( CYP2 E1)基因多态性与胃癌危险性的关系。 方法 应用病例对照分子流行病学研究方法 ,采用聚合酶链和限制性片段长度多态性技术 ,对福建省胃癌高发区长乐市 91例原发性胃癌病例和 94例人群对照的 DNA进行CYP2 E1基因型检测和分析。 结果 CYP2 E1的 C1/ C2和 C2 / C2基因型频率在胃癌病例和对照中分别为 36.2 6%和 2 4.47% ,Fisher's精确概率检验 χ2 =5 .344 ,P=0 .0 69。胃癌病例中罕见纯合子 C2 / C2基因型 6例 ( 6.5 9% ) ,而对照中仅 1例 ( 1.0 6% )。胃癌病例组 CYP2 E1的 C2等位基因频率显著高于对照组 ( OR=1.86,95 % CI=1.0 7～ 3.2 5 )。携有 CYP2 E1非 C1/ C1基因型者若饮酒或长期食用鱼露 ,发生胃癌的危险性明显增大。 结论 携带 CYP2 E1的 C2 / C2基因型的个体可能与胃癌的高风险有关。

细胞色素P450 2E1基因多态性与肺癌易感性的研究

目的 :研究与致癌物有关的代谢酶细胞色素P45 0 2E1(CYP 2E1)基因多态性和饮酒与肺癌易感性的关系。方法 :采用聚合酶链反应 (PolymeraseChainReaction ,PCR)和限制性片段长度多态性 (RestrictionFregmentLengthPolymorphisms ,RFLP)方法 ,分析 91例肺癌患者和 138例对照的Rsal认别的CYP 2E1基因型。 结果 :本次研究结果为CYP 2E1基因型频率在肺癌组和对照组的分布差异无显著性意义 (χ2 =1 35 5 ,P >0 0 5 ) ;CYP 2E1C1/C1基因型或饮酒单因素作用的比值比 (OddsRatil,OR)分别为 1 389和 3 33,而两者联合作用的OR为 5 4 1。结论 :CYP 2E1基因多态性与肺癌无明显相关性 ,但与饮酒有联合作用。

细胞色素P450 2E1的研究进展

细胞色素P450 2E1(CYP2E1)是机体对药物和低分子化合物代谢的主要酶之一,且CYP2E1的活性增强或高表达与临床多种疾病密切相关。文章综述了国内外CYP2E1的蛋白结构、功能、定位机制及基因多态性等方面的研究进展。从而为进一步探索机体内CYP2E1的生物学效应及其与临床疾病的相关性奠定基础。

甘草与海藻 大戟 芫花配伍对大鼠肝脏CYP2E1酶活性及mRNA表达的影响

目的研究甘草与海藻、大戟、芫花合用对CYP2E1酶活性的影响及在mRNA水平的调控作用。方法采用高效液相色谱法测定CYP2E1活性;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)评价药物对CYP2E1 mRNA水平的影响。结果甘草单用能明显诱导CYP2E1酶活性,与海藻、大戟、芫花合用后对CYP2E1酶活性的诱导作用没有甘草单用明显。CYP2E1 mRNA水平基本与酶活性水平相平行。结论甘草与海藻、大戟、芫花合用后诱导CYP2E1酶活性,酶活性变化可能主要通过影响基因转录来实现。