冷损伤对培养的血管内皮细胞合成因子Ⅷ相关抗原的影响

本实验用流式细胞术测定了冷损伤对体外培养的大鼠主动脉血管内皮细胞(VEC)合成因子Ⅷ相关抗原(ⅧR:Ag)的影响。结果表明,冷损伤后的大鼠VEC平均荧光强度增强,说明冷损伤可明显影响VEC合成ⅧR:Ag的功能,这在冷损伤的病理过程中具有重要作用。

骨折端Ⅷ因子相关抗原与血流量的实验研究

目的 研究骨折愈合过程中骨折端Ⅷ因子相关抗原和血流量变化的规律及其相关性。方法 选用 35只大耳白兔制作左侧桡骨骨折动物模型 ,分别于伤后 8、2 4、72h ,1、3、5、8周利用单光子放射计算机断层显像术 (SinglePhotonEmissionComputerizedTomography ,SPECT)测定骨折端血流量变化 ,之后取骨折端标本提取蛋白样本定量检测Ⅷ因子相关抗原。结果 骨折端血流量在致伤后 8h开始上升 ,1周时达顶峰 ,高血流量状态一直维持到第 3周 ,第 5和第 8周基本恢复到正常水平 ;骨折端Ⅷ因子相关抗原在伤后 2 4h开始增高 ,骨折后 3天达到较高的水平 ,该状态一直维持到骨折后的第 3周 ,到第 5周时开始出现较明显的回落 ,第 8周时基本恢复到正常水平。结论 伤后 72h骨折端血流量增高与骨折端血管生成有关 ,早期的血流量增加可能与骨折后的创伤反应有关。

VEGF在骨折愈合过程中对Ⅷ因子相关抗原表达变化影响的实验研究

目的 研究血管内皮生长因子 (VEGF)在骨折愈合过程中骨折端对Ⅷ因子相关抗原含量变化的影响 ,以确定VEGF对骨折端血管重建中的作用。方法 用 10 5只大耳白兔制作桡骨骨折模型 ,随机分为对照组、应用VEGF组、拮抗VEGF组 ,分别于伤后不同时间利用Westernblot方法测定各组动物骨折端Ⅷ因子相关抗原含量变化。结果 应用外源性VEGF后 ,骨折端Ⅷ因子相关抗原含量明显增加 ;拮抗VEGF则使骨折端Ⅷ因子相关抗原含量明显下降。结论 VEGF对骨折愈合过程中的血管重建具有重要作用 。

CD105和Ⅷ因子相关抗原对大肠癌新生血管标记的研究

目的探讨CD105和Ⅷ因子相关抗原(F8RAg)在大肠癌的表达意义,并将二者对大肠癌新生血管的标记作用进行对比。方法采用鼠抗人CD105单克隆抗体和鼠抗人F8RAg原单克隆抗体,应用免疫组化技术对40例大肠癌手术切除的新鲜标本及40例正常对照组的微血管进行定量检测,计数100倍视野下5个血管丰富视野的微血管密度(MVD),取其均值。结果大肠癌组织与正常对照组的MVD间的差异具有非常显著性(P<001);以CD105和F8RAg为新生血管标记物测得的大肠癌微血管密度间的差异具有非常显著性(P<001);以CD105标记的大肠癌微血管密度与大肠癌的淋巴结转移、远处转移及临床分期有关(P<001);而以F8RAg为标记物测得的MVD与淋巴结转移、远处转移及临床分期无关(P>005)。结论大肠癌新生血管形成与肿瘤的生长、转移及预后有关,CD105和F8RAg均在大肠癌有良好表达,但CD105在标染肿瘤新生血管上比F8RAg更具有特异性。

大黄虫丸对难治性肾病综合征Ⅷ因子抗原及纤维蛋白原的影响

目的 :探讨大黄虫丸对特发性膜性肾炎 ( MGN)肾病综合征 ( NS) 因子抗原 ( R:Ag)、纤维蛋白原 ( Fbg)的作用。方法 :选择 MGN— NS患者 60例 ,用美国 IL公司生产 ACT- 2 0 0自动凝血机检测 R:Ag、Fbg的变化。并随机分为治疗组和对照组 ,治疗组用大黄虫丸 ,对照组用潘生丁干预治疗。观察大黄虫丸对 MGN- NS患者血 R:Ag、Fbg的影响。结果 :实验组 R:Ag、Fbg水平较正常对照组显著增高 ( P<0 .0 0 1 ) , R:Ag、Fbg与 BUN呈显著正相关 ( P<0 .0 0 1 ) ,Fbg与白蛋白 ( ALB)呈显著负相关 ( P<0 .0 1 )。经用大黄虫丸治疗后 ,MGN- NS患者血 R:Ag、Fbg显著降低 ( P<0 .0 1 ,P<0 .0 5 ) ,明显优于潘生丁 ( P<0 .0 5 )。结论 :大黄虫丸能显著降低 MGN- NS患者 R:Ag、Fbg含量 ,改善高凝状态。

恶性肿瘤病人血浆纤维连结蛋白及因子Ⅷ相关抗原变化的研究

本文对94例恶性肿瘤患者血浆Fn及Ⅷ R·Ag浓度进行了测定。结果显示:乳腺癌患者血浆Fn升高,而食管癌、胃癌、肝癌则显著降低,并且各型肿瘤患者血浆Ⅷ R·Ag水平均显示不同程度的升高,其中以肝癌的改变最为明显。同时还发现这两种蛋白的变化与病人的临床一般状态差异显著。因此,我们认为测定恶性肿瘤患者血浆Fn和Ⅷ R·Ag水平可能在估计病情的严重性和预后方面具有重要价值。

低分子肝素对慢性肺源性心脏病失代偿期血清D-二聚体、凝血因子Ⅷ的影响

目的：探讨低分子肝素（LMH）抗凝治疗对慢性肺源性心脏病失代偿期（LCPCPHD）血清D-二聚体（D-D）、凝血因子Ⅷ相关抗原（ⅧR：Ag）及凝血因子Ⅷ（Ⅷ：C）的影响.方法：将70例LCPCPHD患者按就诊顺序1：1比例随机分成观察组和对照组,各35例,两组患者均给予常规综合治疗,包括：吸氧、解痉平喘、止咳化痰、抗感染,活血化瘀及扩血管等治疗,观察组在此基础上加用LMH 5000 u,1次/d.两组均以10d为一个疗程.观察两组D-D、ⅧR：Ag和Ⅷ：C治疗前后变化.结果：①观察组总有效率为91.4％ （32/35）,对照组总有效率为74.3％ （26/35）,两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;②两组治疗后血清D-D、ⅧR：Ag及Ⅷ：C浓度均明显下降,观察组下降更明显,与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）;③观察组治疗后血清D-D、ⅧR：Ag及Ⅷ：C浓度均明显下降,与治疗前对比差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论：使用LMH抗凝治疗LCPCPHD可降低血液的高凝状态,提高疗效.

人类白细胞抗原-DQA1区基因多态性与血友病A患者凝血因子Ⅷ抑制物的相关性研究

目的探讨人类白细胞抗原(HLA)-DQA1区基因多态性与血友病A患者凝血因子Ⅷ(FⅧ)抑制物发生的相关性。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术(PCR-SSP),对130例HA患者和90名健康对照者的HLA-DQA1区基因多态性进行检测。采用Bethesda法检测HA患者FⅧ抑制物活性。结果 130例HA患者中,检出6例FⅧ抑制物阳性患者(全部为重型),占重型患者的6.8%;对所检测FⅧ抑制物阳性患者HLA-DQA1区的各等位基因,占全部HA患者的等位基因阳性率及其在重型HA患者的等位基因阳性率作比较,差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论尚不能证明该区各等位基因与抑制物发生具有相关性。

LN-R和FⅧ-RAg在胃癌中的表达及意义

目的 :探讨层粘连蛋白受体 (LN -R)和人血管Ⅷ因子相关抗原 (FⅧ -RAg)在胃癌中的表达和微血管密度(MVD)计数的意义。方法 :应用免疫组织化学S -P法检测 6 8例胃癌组织中LN -R和FⅧ -RAg的表达及MVD的计数并分析其意义。结果 :LN -R阳性表达和MVD计数与肿瘤分化水平、浸润深度 (P <0 .0 1)及淋巴结转移 (P<0 .0 0 1)密切相关。不同组织学类型中LN -R的表达具有显著相关性 (P <0 .0 1) ,而MVD与胃癌组织学类型无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :LN -R和FⅧ -RAg的高表达与肿瘤分化、侵袭和转移的关系十分密切。LN -R和FⅧ

功能障碍性子宫出血患者子宫内膜Ⅷ-R Ag和MMP-9的表达

目的探讨Ⅷ因子相关抗原(Ⅷ-R Ag)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在功能障碍性子宫出血(DUB)患者子宫内膜的表达。方法采用免疫组织化学方法,对正常妇女与DUB患者的子宫内膜组织中Ⅷ-R Ag和MMP-9进行标记,并应用图像分析技术对其进行定量观察与分析。结果DUB出血区子宫内膜Ⅷ-R Ag表达显著低于其无出血区内膜和正常内膜,出血区子宫内膜MMP-9表达比其无出血部位内膜和正常内膜明显增多。结论DUB患者内膜组织异常出血和脱落与Ⅷ-R Ag和MMP-9异常表达有关。

血清前白蛋白和血浆因子Ⅷ相关抗原检测在肝病中的意义

本文采用免疫火箭电泳法测定82例肝病患者血清前白蛋白和血浆因子Ⅷ相关抗原的含量。结果显示,两者的改变与肝病受损程度密切相关,並对检测肝脏疾病有高度敏感性。为此,建议将血中这两种蛋白含量列为肝功能常规检测指标。

人白细胞DR抗原和第Ⅷ因子相关抗原在骨肉瘤血管内皮细胞中的表达

目的：检测骨肉瘤血管内皮细胞中人白细胞 Ｄ Ｒ 抗原（ Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ）和第Ⅷ因子相关抗原（ ＦⅧ Ｒ Ａｇ）的表达，及其对骨肉瘤生物学行为的影响。方法：应用 Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ和 ＦⅧ Ｒ Ａｇ 单克隆抗体对８０ 例骨肉瘤进行免疫组织化学染色。结果：骨肉瘤血管内皮细胞几乎不表达 Ｈ Ｌ Ａ Ｄ Ｒ，而 ＦⅧ Ｒ Ａｇ 呈高表达。结论：骨肉瘤血管内皮细胞主要表现为凝血功能而几乎丧失免疫功能，其与骨肉瘤的转移和预后有密切关系。

原发性高血压患者血浆第Ⅷ因子相关抗原和脂质过氧化物浓度的变化

对25例原发性高血压（EH）患者，采用酶联免疫吸附法测定血浆中反映血管内皮细胞（vEC）损伤的指标──第Ⅷ因子相关抗原（vWF），硫代巴比妥酸法测定血浆中反映氧自由基损伤水平的脂质过氧化物（LPO）。结果发现，EH患者血浆vWF和LPO浓度均显著高于正常对照组（P＜0．05），且LPO与vWF浓度呈显著的正相关（P＜0．05）。提示EH患者存在有VEC损伤，氧自由基是导致VEC损伤的重要因素之一。

CD105和Ⅷ因子相关抗原对大肠癌新生血管标记的研究

目的探讨CD105和Ⅷ因子相关抗原(F-8RAg)在大肠癌的表达意义,并将二者对大肠癌新生血管的标记作用进行对比。方法采用鼠抗人DC105单克隆抗体和鼠抗人第Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体,应用免疫组化技术对40例大肠癌手术切除的新鲜标本及40例正常对照组织的微血管进行定量检测,计数100倍视野下5个血管丰富视野的微血管密度(MVD),取其均值。结果大肠癌组织与正常对照组织的微血管密度(MVD)间的差异具有非常显著性(P<0.01);以DC105和Ⅷ因子相关抗原为新生血管标记物测得的大肠癌微血管密度间的差异具有非常显著性(P<0.01);以DC105标记的大肠癌微血管密度与大肠癌的淋巴结转移、远处转移及临床分期有关(P<0.01);而以Ⅷ因子相关抗原为标记物测得的MVD与淋巴结转移、远处转移及临床分期无关(P>0.05)。结论大肠癌新生血管形成与肿瘤的生长、转移及预后有关,DC105和Ⅷ因子相关抗原均在大肠癌有良好表达,但CD105在标染肿瘤新生血管上比因子更具特异性。

牙源性钙化囊肿的血管内皮细胞Ⅷ因子相关抗原及PCNA的免疫组织化学研究

为了解牙源钙化囊肿的囊肿型和肿瘤型内血管和细胞增殖活性之间的关系，本研究应用血管内皮细胞的标志性抗原VIII因子及增殖细胞核抗原（PCNA），对11例牙源性钙化囊肿进行了免疫组织化学研究，并以6例造釉细胞癌作对照。结果显示：囊肿型牙源性钙化囊肿的部分标本中，囊壁上皮下有VIII因子染色阳性的密集的新生小血管，囊壁上皮中PCNA染色阳性细胞也较多，显示囊壁上皮增殖活动较强的组织依，部分囊壁上皮下血管较少，PCNA染色阳性细胞也较少，显示囊壁上皮增殖较慢，相对稳定的组织学像。而在肿瘤型牙源性钙化囊肿中，肿瘤间质中VIII因子杂色阳性血管密度明显增加，并且血管管腔增大，PCNA染色见肿瘤的上皮团片中阳性细胞也明显增多，反映了肿瘤增殖活跃，生长较快。表明肿瘤内血管的增生与肿瘤的增殖有密切关系。

138例肾脏疾病因子Ⅷ相关抗原、抗凝血酶Ⅷ和纤维蛋白连结素的平行观测

肾脏疾病常并发静脉血栓,对此我们观察了部分血液凝固和抗凝指标。结果显示,肾脏疾病血液凝固性均增强;AT-Ⅲ蛋白含量在急性肾衰和狼疮性肾炎降低,但AT-Ⅲ活性改变不大;Fn测定在肾病组明显高于正常,其它肾脏疾病组则明显低于正常.因此治疗过程中,如何预防和降低其凝固性则显得十分必要。

针刺“百会”“太阳”改善局灶性脑缺血脑微血管内皮细胞功能的动态观察

目的:在分子水平探讨并阐明脑缺血损伤的炎性机理和针刺对局灶性脑缺血模型脑微血管内皮细胞功能的动态影响。方法:老龄雄性Wistar大鼠80只,随机分为缺血模型对照组、针刺治疗组各32只,假手术组、正常对照组各8只,前二组又分为造模后针刺1、3、51、0 d 4个时间段组,每时间段各8只。选取大鼠“百会”“太阳”穴进行手捻针治疗。采用大脑中动脉线栓阻塞法建立大鼠局灶性脑缺血模型;用免疫组化SABC法检测脑缺血后治疗1、3、51、0 d内皮素(ET-1)、FⅧ因子相关抗原和细胞间粘附分子(ICAM-1)的表达。结果:针刺不同疗程治疗,各组大鼠在治疗前后的神经症状行为评定分析有显著性差异(P<0.05)。模型组ET-1与ICAM-1均脑缺血后1 d即出现表达,各个时间点相比具有显著性差异(P<0.01);针刺治疗随时间的延长可明显降低其表达(P<0.05,0.01)。FⅧ相关抗原在微血管内皮细胞中的表达在缺血后3 d开始增加(P<0.05),并持续上升,各个时间点的差异具有统计学意义(P<0.01);针刺治疗随时间的延长可使其表达继续升高(P<0.05,0.01)。结论:针刺对脑缺血状态下海马CA3区多层面进行良性调节,并且这种良性机制随着干预时间的选择(早期/6 h)和疗程的适度延长(5 d以上),具有明显的累加效应。

猪脐静脉血管内皮细胞的分离与培养

采用1g/L胶原酶灌注猪脐静脉,消化分离内皮细胞并在适宜条件下培养。对培养细胞的生长特性进行检测,并对细胞进行第 因子相关抗原(F- RAg)和扫描电镜形态学鉴定。结果表明,70%细胞在24h内贴壁,第3～5天生长迅速,第4～5天长成单层。培养的细胞呈单层贴壁生长,典型铺路石状,第 因子相关抗原(F- RAg)检测阳性,证明培养的细胞为血管内皮细胞。

人脑胶质瘤微血管数与病理级别及预后关系的初步研究

目的探讨人脑胶质瘤微血管数（ＭＶＱ）与病理级别、术后复发、生存期及患者年龄、性别、肿瘤生长部位的关系。方法应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测６３例人脑胶质瘤组织中Ⅷ因子相关抗原（ＦⅧＲＡｇ）的表达，计数ＭＶＱ。结果高恶性度（Ⅲ、Ⅳ级）胶质瘤ＭＶＱ高于低恶性度（Ⅰ、Ⅱ级）胶质瘤（Ｐ＜０．０５）。术后１８个月内复发及生存期小于３年者ＭＶＱ均明显高于对应组（Ｐ均＜０．０１）。ＭＶＱ与患者性别、年龄及肿瘤生长部位无关。结论人脑胶质瘤ＭＶＱ与病理级别、术后复发及生存期关系密切。

真皮纤维瘤和隆突性皮肤纤维肉瘤分子表型差异及组织起源探讨

目的:探讨真皮纤维瘤(dermatofibroma,DF)和隆突性皮肤纤维肉瘤(dermatofibrosarcoma protuberans,DFSP)的组织起源和分化。方法:选取DF和DFSP各26例,收集详细临床资料,分析两组的组织病理形态;采用组织芯片对全部病例进行免疫组织化学染色分析,抗体为Factor ⅩⅢa,HLA-DR,CD34,CD14,S-100,MSA和Ki67;用体外转录法制备转化生长因子(transforming growth factor β,TGF-β)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)探针;用原位杂交法检测TGF-β和bFGF在肿瘤中的表达。结果:全部病例均不同程度表达FactorⅩⅢa,HLA-DR和CD34。三者阳性细胞率的中位数在26例DF中分别为:FactorⅩⅢa为90%,HLA-DR为70%,CD34为5%。三者阳性细胞率的中位数在26例DFSP中分别为:FactorⅩⅢa为10%,HLA-DR为5%,CD34为80%。3例DF和1例DFSP有少数细胞CD14阳性。2例DF和6例DFSP有少数细胞S-100阳性。3例DF和5例DFSP有极少数细胞MSA阳性。全部病例Ki67阳性细胞率小于5%。原位杂交检测结果:TGF-β在DF中的表达强度高于DFSP。结论:DF和DFSP不同程度表达树突状细胞(dendritic cell,DC)谱系特征,DF在组织形态和免疫表型上更趋向表达成熟DC特征,支持该肿瘤良性的生物学行为;而DFSP趋向显示不成熟的真皮储备细胞(dermal reserve cell,DRC)特征,与该肿瘤低度恶性生物学行为相符;某些肿瘤两种抗体表达的阳性细胞率呈中间状态;有关FactorⅩⅢa和CD34表达差异的认识和运用有助于肿瘤的诊断和鉴别诊断。