诊断华支睾吸虫病的Fast-Dot-ELISA试剂盒的建立及应用

本文用5×2孔的白色聚氯乙烯板(白色PVC)作载体,研制、建立的诊断华支睾吸虫病的白色PVC-Fast-Dot-ELISA试剂盒,检测华支睾吸虫病人血清610份和其它奇生虫病及健康人血清764份,敏感性为97.9％,特异性为97.2％,交叉反应0-7.7％,平均3.5％。试剂盒与NC-Dot-ELISA和PS-ELISA比较,敏感性、特异性均无显著差异。试剂盒稳定性良好。现场应用显示,与粪检的阳性符合率为97.6％,总符合率随粪检方法及检查次数不同而升高。本试剂盒的特点是:试验载体和试验容器合一,孔浅而大,易于洗净,操作方便,快速,全程只需30min,适用于基层群体查病及临床快速检测。

PVC-Fast-Dot-ELISA法检测华支睾吸虫抗体的研究

目的 了解和掌握华支睾吸虫在苏北南通不同人群中的感染情况 ,分析和找出华枝睾吸虫感染与人们的年龄、职业和生活尤其是饮食习惯等因素之间可能存在的联系。方法 应用 PVC- Fast- Dot- EL ISA法检测受检者血清华枝睾吸虫抗体。结果 华枝睾吸虫抗体总阳性检出率为 3.92 % (17/ 434)。其中厨师、渔民区 2 0岁以上成人及个体户老板华枝睾吸虫抗体阳性检出率分别为 6 .45 % (2 / 31)、5 .5 9% (9/ 16 1)和 4.2 9% (3/ 70 ) ,明显高于正常对照组 (0 .86 % ,1/ 115 ) ,统计学上差异显著。 (x2 值分别是 3.5 2、4.0 1和 2 .2 8,P值均 <0 .0 1)结论 苏北南通华枝睾吸虫人体感染的情况不容忽视。华枝睾吸虫感染与职业以及接触生鱼和吞食半生不熟的鱼虾的机会密切相关。建议有生鱼接触史或经常食用生及半生不熟鱼虾者必须定期检测华枝睾吸虫抗体 。

COPT IFAT和FAST-ELISA抗体检测诊断日本血吸虫病的比较研究

用COPT、IFAT和FAST-ELISA对采自湖北、湖南、四川、江苏、上海等地的日本血吸虫病人344例及治愈者68例,华支睾吸虫病和肺吸虫病人48例,健康人93例血清进行了单盲法抗体检测.COPT、IFAT和FAST-ELISA对血吸虫病的敏感性分别为93.9%、99.4%和99.7%;特异性分别为100.0%、82.3%和37.6%;对血吸虫病治愈者均有不同程度的转阴率;它们的youden’s指数分别为0.87、0.60和0.26.

滤纸血和血清快速ELISA检测囊虫病抗体的比较研究

本文使用滤纸血和血清同步进行快速ELISA试验检测囊虫病抗体的效果作了比较研究。滤纸血和血清的阳性检出率分别是78％、75％。滤纸血和血清的几何平均滴度分别是45和716。选择阳性的血清和滤纸血各5份,在不同时间内进行4次重复试验,血清的OD值变异系数为2～8％,滤纸血为4～12％。滤纸血于4℃冰箱内至少可保存4周,不影响阳性结果的判定。表明滤纸血快速ELISA是一种简便、快速的方法,在囊虫病血清流行病学调查中有其实用价值。

快速ELISA、快速斑点ELISA和IHA检测华支睾吸虫病效果的比较

采用快速ELISA、快速斑点ELISA和间接血凝试验（IHA）三种方法平行检测经粪便检查虫卵阳性的华支睾吸虫病人血清152份。结果快速ELISA的敏感性为98．68％，快速斑点ELISA为对，13％，IHA为63.16％，经比较敏感性之间差异均有显著性。以三种方法检测不同感染度的病人血清时，轻度感染者（EPG＜500）以快速ELISA最敏感（敏感性为98．89％）；以三种方法同时检测非流行区健康人血清106份，结果快速ELISA的特异性为97．17％，快速斑点ELISA为94．34％，IHA为92.45％，但三种方法比较特异性差异无显著性。因此，在临床诊断和大规模的流行病学调查中，最好选用快速ELISA。

快速ELISA和压片镜检法对猪胴体中旋毛虫检验的比较

应用快速酶联免疫吸附试验(ELISA)分别对448头猪胴体和895头猪胴体检测旋毛虫抗体,并与常规压片镜检法进行了比较。前者检测结果表明:血样、肌样ELISA检测旋毛虫抗体阳性检出率分别为9.82％(44/448)和9.15％(41/448),压片镜检法检出有虫体猪阳性检出率为4.91％(22/448),压片镜检法与血样、肌样ELISA的检测结果有明显差别(P<0.05);镜检法检出虫体的22头猪胴体,血样ELISA均为阳性,肌肉样ELISA有21头相符:ELISA与血样ELISA比较,它们的阳性符合率为93.18％(41/44)。后者检测结果表明:ELISA检测旋毛虫抗体阳性检出率为6.59％(59/895),压片镜检法旋毛虫阳性检出率为3.01％(27/895),压片镜检法与ELISA的检测结果有明显差异(P<O.05)。快速ELISA对猪囊虫肉未见发生交叉反应;在猪胴体上采取血凝块、肉块或新鲜断面上组织液做快速ELISA反应,均获得满意结果。试验结果表明,本法灵敏度高、特异性强、操作简便、快速、完成整个过程需要10～13分钟;在定点屠宰检疫或进行市场肉品兽医卫生监测时,采用快速ELISA能提高猪肉肌旋毛虫检出率。

应用快速-ELISA对旋毛虫病进行诊断和流行病学调查

应用旋毛虫幼虫溶解抗原,以快速-ELISA 法检测49例旋毛虫病人,全部皆为阳性;而100名正常人皆为阴性1105例其它9种寄生虫病人,仅日本血吸虫病人有交叉反应。并用此法对河南省新野县371例从事食品卫生工作人员和被宰杀的258头猪进行流行病学调查。证实该法具有较高的阳性符合率。对本试验的重复性、稳定和变异系数、存放时间、抗原经热处理等均进行了系统观察。用 Shewart控制图观察和控制试验结果。

诊断抗原的纯化在牛γ-干扰素ELISA法中的应用

比较皮内变态反应(TST)、抗酸染色、牛结核ELISA(PPD-ELISA)和γ-干扰素ELISA法(IFN-γ-ELISA)对牛结核的检测结果,并通过比较牛PPD、禽PPD、亲和层析牛PPD(牛PPD’)的IFN-γ-ELISA检测结果,探索诊断抗原的纯化在牛IFN-γ-ELISA法中的应用.结果表明,与抗酸染色相比,IFN-γ-ELISA的敏感性、特异性和符合率都比较高,分别为83.33%(5/6),98.14%(53/54),98.33%(58/60);牛PPD、禽PPD、牛PPD’3种特异性抗原刺激产生IFN-γ释放反应的结果表明,1例抗酸染色阳性的牛,未经亲和层析处理牛PPD的IFN-γ-ELISA检测OD值偏高,判为牛结核阳性,亲和层析纯化牛PPD的IFN-γ-ELISA检测OD值较低,判为牛结核阴性,表明亲和层析处理能排除环境分支杆菌对试验的干扰,IFN-γ-ELISA法有望替代TST法在中国推广使用。

一种新型的华支睾吸虫病快速ELISA诊断试剂盒

一种新型的华支睾吸虫病快速ＥＮＩＳＡ诊断试剂盒．检查华支睾吸虫病人血清４５３份．非流行区健康对照者血清３５６份．敏感性为９２．１％（４７／４５３）．特异性９８．３％（３５０／３５６）。试剂盒配备齐全．微量检测（血清用量２０～１０微升）．开盒即用、操作简便、整个检测过程约需１５ｍｉｎ．肉眼判断结果．重复性和稳定性良好，特别适合基层医疗卫生单位和现场使用。

日本血吸虫31/32kDa分子抗原快速诊断试剂盒的研制与现场应用

目的基于纯化的日本血吸虫31／32kDa分子抗原，建立一种敏感、特异、简便、快速诊断血吸虫病的试剂盒。方法采用Chappell方法分离纯化Sj31／32kDa抗原并建立快速ELISA，检测急、慢性血吸虫病人，并以肺吸虫病人、肝吸虫病人及正常人血清作为平行对照。结果血吸虫病人457例，阳性检出率为94．3％，67例肺吸虫病人及76例肝吸虫病人血清均未出现明显交叉反应，正常人群假阳性率为1％。结论提示采用纯化的优势诊断抗原分子建立的快速诊断试剂盒有较好的现场应用潜能，且具有简便、快速、无需特殊设备等优点，值得推广应用。

不同饥饿刺激对下丘脑穹隆周区orexin-A神经元的影响

目的:通过观察下丘脑穹窿周区orexin-A神经元对不同刺激方式的反应特性探索能够激活该系统的高效而适宜的方法。方法:采用禁食、腹腔注射胰岛素和2-DG三种饥饿刺激方式,利用免疫组织化学染色及ELISA检测相结合的方法对大鼠穹隆周区orexin-A神经元的Fos的表达,脑脊液中orexin-A的浓度进行了对比分析。27只SD大鼠随机分为六组,分别进行禁食2 d,腹腔注射胰岛素或生理盐水存活5 h,腹腔注射2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)或生理盐水存活2 h和正常对照处理,动物的饮水量保持正常。结果:三种饥饿刺激引发的Fos表达比较类似,主要集中于下丘脑背内侧核,下丘脑外侧区和下丘脑后区,2-DG组的Fos表达最为浓密。三种刺激对orexin-A神经元的数量无明显影响,但orexin-A/Fos双标细胞数占所有orexin-A阳性细胞数的比例以2-DG组最高,为26%;禁食2 d组次之为21%;胰岛素组最低为14%。禁食组和2-DG组的双标细胞率与胰岛素组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示禁食组脑脊液中orexin-A的含量显著高于对照组23%,而其它两组与对照组相比没有差别。结论:本研究提示orexin-A的功能状态与刺激方式密切相关:急性刺激如2-DG注射适于研究神经元的激活状态,而慢性刺激如禁食适于研究激活后导致的orexin-A表达变化。

动物组织中新霉素残留快速检测方法

以兔抗新霉素多抗为包被抗体，以新霉素-HRP连接物为标记物，TMB为显色底物，三氯乙酸提取法为样品前处理方法，建立了一种适用于动物组织中新霉素残留量的竞争性直接酶联免疫快速检测方法．该方法可测定新霉素残留的线性范围为0．6～50．0ng／mL，线性方程为y=-0．4127x＋1.1859，相关系数为0．9936，半抑制率IC50为5．0ng／mL，板内变异系数小于5．6％，板间变异系数小于5．3％，检出限为0．6ng／mL，回收率在80％～120％之间．

华支睾吸虫病快速诊断试剂盒质量控制10年分析

目的 建立华支睾吸虫病快速诊断试剂盒的质量控制体系,并以此对试剂盒进行质量监控。方法 建立了由200份确诊病人血清混合而成的阳性质控品和由200份非流行区健康人血清混合而成的阴性质控品,确定了包括对阳性质控品和阴性质控品的检测标准。结果 对10年104批次共101万人份的诊断试剂盒进行了监测,阳性质控品和阴性质控品的平均吸光度值分别为0.444和0.066,总阳性质控品和总阴性质控品变异系数分别为7.60％和10.72％。结论 华支睾吸虫病快速诊断试剂盒具有高度的敏感性、特异性和稳定性,质量监测体系也是一种性能可靠、行之有效的质量控制方案。

果蔬中灰霉菌的快速检测

介绍了灰霉菌侵染葡萄的方式、果实采后的防治方法以及灰霉菌的传统检测法、快速检测法,并将以ELISA法为主的快速检测法与传统检测法进行了比较。结果表明,ELISA法灵敏度高、干扰小、安全性高、污染少,而且操作简便、快捷。

检测感染旋毛虫猪血清中循环抗原以诊断和监测本病的研究和应用

用目测快速双抗体夹心—ELISA法检测61头感染旋毛虫猪血清中CAg,40头(65.6±6.1％)呈阳性反应。100头正常猪均为阴性,30头感染囊虫和30头感染弓形体的猪,仅有1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应,该猪未能追踪检查是否合并旋毛虫感染。对北京海淀区224头(1987年自外地引进),陕西商县50头和河南省新野县258头被屠杀的猪,进行流行病学调查,35头(6.6％)CAg显示阳性,其中71.4％(25/35)同时伴有抗体阳性。本法以TMBS为底物,不仅对人体无毒,而且不需新鲜配制,配好的底物溶液可以长期保存备用。本实验操作简便,完成全过程仅需20分钟,以目测观察结果,特别适于基层开展应用。实验中所需特异性抗体及酶的结合物,均系我室自制,价格低廉,相当稳定,在低温下保存2年,其效价不变,对人和动物均适用。

食品微生物快速检测技术的研究进展

随着食品安全问题越来越受到人们关注,食品微生物的快速检测显得尤为重要,本文主要介绍了食品快速检测方法的发展历程,以及近年来最新的食品的快速检测方法。

实验动物机会致病性原虫感染调查

目的了解实验动物的感染情况 ,为更好地科学饲养、管理实验动物 ,提高实验动物质量奠定基础。方法采用Dot-ELISA法、肺印片姬氏染色法及改良抗酸染色法对 30只Wistar大鼠、10 0只昆明鼠及 12 0只家兔进行检查[1] 。结果大鼠、小鼠及家兔弓形虫的阳性感染率分别为 6 7%、5 %及 2 0 8%;卡氏肺孢子虫的阳性感染率分别为 2 0 %、2 %及 0 %;受检动物的粪便均未查到隐孢子虫卵囊。结论从实验的结果来看 ,我院实验动物中心提供的实验动物尚未达到贵州省制定的一级动物标准 ,表明我院实验动物中心在管理、饲养动物方面存在一定的不足。

血红蛋白酶联免疫测定的建立及应用研究

目的建立方便、灵敏、特异性强的针对人血红蛋白(HGB)的快速ELISA法。方法用自制的抗人血红蛋白单克隆抗体(HGBMcAb)常规包被聚乙烯反应板,建立快速ELISA法,与愈创木酯法和免疫胶体金检测试纸法、常规ELISA法相比较,并作相关性分析。结果动物肉类、含过氧化物酶的新鲜蔬菜、铁剂、维生素C及对化学法有干扰作用的某些药物,对此法检验结果均无影响,对消化道出血和肿瘤等疾病的诊断和检测,本法较其他方法优点明显,易于推广。结论本法特异性强、灵敏度高、稳定性好、简易快速、无需特殊仪器设备,有广泛的应用价值。

污水中大肠杆菌的酶联免疫检测方法研究

以城市污水处理厂二沉池出水为检测目标,比较了夹心法和直接法2种酶联免疫反应方式,分析包被抗体和酶标抗体浓度、菌液预处理等因素对检测灵敏度的影响,确定了ELISA的最佳工作条件.结果表明,检测大肠杆菌的线性区间为10CFU/mL^6×104CFU/mL,最低检测限达到10CFU/mL.与传统检测方法相比,该技术具有操作简单,节省时间和费用,反应灵敏度高等优点.

应用微量末梢全血检测华支睾吸虫病抗体研究

应用微量末梢全血快速ＥＬＩＳＡ法检测江门地区６３例居民标本中特异性华支睾吸虫抗体。与静脉血清、末梢血清检测结果对照，总符合率分别为９３．６５％和８７．３０％．其抗体阳性检出率与上述两法比较差异无显著性。以静脉血清检测为参照，末梢全血法的阳性和阴性预测值分别为９０．０％和９５．３５％。末梢全血快速ＥＬＩＳＡ用血量少，取血方便、易于接受，在华支睾吸虫病诊断尤其是现场普查中有较高的实用价值。