Study on Propagation of Chicken Infectious Bursal Disease Virus on Vero Cells Using Microcarriers in Fermentor

It was in flask optimization tests proved that 2% serum, pH 7.0, 5:10 000 inoculation concentration of infectious bursal disease virus (IBDV) and 108 hours cultivation for IBDV harvest after its inoculation were the optimal conditions when IBDV was propagated on Vero cells. 250 ml self-made spinner bottle and 5 L stirring fermentor tests proved that IBDV could maintain higher liters for a long time and the highest liters of IBDV in a spinner bottle and a fermentor were 8.875 and 8.58 ( - lgTCID50/0.1 ml) respectively when IBDV was proliferated on Vero cells using 2 g/L microcarriers in a spinner bottle and a fermentor and was cultivated under the optimum conditions obtained from flask tests after Vero cells had developed a confluent monolayer on microcarriers, which were at least one titer higher than the highest titer in the traditional rolling bottle. All these results suggested that this technology could be applied to large scale production for IBDV.

具有N_2O控逸能力的异养硝化-好氧反硝化菌株的筛选鉴定

利用BTB平板培养基以及硝化-反硝化性能测定,从实验室驯化成熟的SBR反应器中筛选出3株异养硝化-好氧反硝化菌.其中WYLW1-6菌株的硝化-反硝化性能尤为突出,经16S rDNA基因序列分析和Biolog测定,该菌株属于蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).在摇瓶培养时,对该菌株设计L4(23)的正交试验,结果发现,菌株WYLW1-6投加到水中后启动迅速,且生长适应性强,优选条件下,其氨氮最大去除率可达95.21%.用发酵罐对其扩大培养测定N2O逸出量,表明该菌脱氮效果良好,NH4+-N去除率达到97.19%,TN去除率为96.63%,N2O逸出量为1.849 2 mg,其中N2O-N量为1.176 8 mg,N2O-N量占水中脱除TN量的0.598%.菌株WYLW1-6能够独立完成生物脱氮的全过程,高效脱氮的同时N2O逸出量低.该菌可用于构建一个低NO逸出的高效脱氮菌系,从而实现NO生物控逸.

腐乳发酵过程中酶活力和化学组分变化研究

通过发酵罐培养高大毛霉MHC-7,并对腐乳发酵过程中酶活力及化学组分变化规律进行研究。结果表明:MHC-7在发酵罐扩大培养条件下,最佳发酵时间是30h。蛋白酶、α-淀粉酶、α-半乳糖苷酶、谷氨酰胺酶、纤维素酶、脂肪酶、糖化酶和果胶酶活力在豆坯上产酶的峰值时间分别是48、36、48、48、66、36、30和72h;在腐乳后发酵中除谷氨酰胺酶呈上升趋势,其它几种酶都呈下降趋势,粗蛋白、粗脂肪和还原糖含量随着发酵时间的延长不断下降,氨基态氮、游离脂肪酸和总酸含量不断增加;当达到谷氨酰胺酶≥86.3U/g、总酸≥1.0%、氨基态氮≥0.45%、还原糖≤1.1%及黏度≤2×105mPa.s时可以作为为判断腐乳成熟的标准。

蔗渣水解液发酵乙醇的研究

研究了酵母（Ｐｉｃｈｉａｓｔｉｐｉｔｉｓ）Ｙ７１２４在限制供氧条件下尽管反应初期葡萄糖消耗速率大于木糖，但在一定时间后，葡萄糖的消耗速率变慢，而木糖消耗速率变快直至耗尽的现象。建立了气升柱以Ｐ．ｓｔｉｐｉｔｉｓ转化木糖为目的和以溢流柱Ｓａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｉｖｉｓｉａｅ转化残留葡萄糖为目的的串联发酵乙醇工艺，即流加５倍浓缩的蔗渣水解液，Ｄ＝０１ｈ－１，还原糖总利用率为９７２％，酒精浓度为４６５ｇ／Ｌ，生产率为４１ｇ／Ｌ·ｈ。

酿酒酵母CWY132发酵罐小试生产2-苯乙醇

对酿酒酵母CWY132发酵罐小试生产2-苯乙醇发酵工艺中的pH、溶氧水平和补糖方式等参数进行了研究。实验表明,最适培养条件为初始pH5.5,培养过程中不需要调节和控制pH值;在细胞生长阶段维持较高的溶氧,在稳定期降低溶氧量对2-苯乙醇的合成具有显著促进;通过补糖方式逐步添加葡萄糖有利于提高2-苯乙醇的产量。在优化的培养工艺条件下,2-苯乙醇产量达到最高为4.1 g/L,已是目前报道的酿酒酵母能够耐受的最大浓度,摩尔转化率为79.43%。

茯苓摇瓶补料液体发酵和发酵罐补料液体发酵

在茯苓摇瓶液体发酵条件研究的基础上,进一步探讨了茯苓摇瓶补料液体发酵和发酵罐补料液体发酵的发酵工艺,为其产业化打下基础。通过每升发酵液中茯苓菌丝体干重的测定,确定最佳的液体发酵补料工艺。发酵罐液体补料发酵较摇瓶补料液体发酵大大缩短了发酵时间,使发酵时间从168h缩短为120h;发酵罐液体补料发酵还较摇瓶补料液体发酵提高了茯苓的生物量,使菌丝干重从10.74g/L增长到11.95g/L。

CFD数值模拟在柠檬酸发酵罐搅拌系统设计过程中的应用

采用CFD(computational fluid dynamics)数值模拟对600 m3柠檬酸发酵罐搅拌系统设计方案进行分析,结合柠檬酸发酵工艺,综合考虑搅拌轴功率、流型、传质混合能力,提出了2种设计方案,并对其进行了数值模拟及传质混合能力分析,通过对比确定最优方案。

硫酸软骨素裂解酶ABC产生菌的筛选及发酵工艺研究

从成都井研生猪屠宰厂等地采集的样品中平板分离粗筛到 4 8株硫酸软骨素裂解酶 ABC产生菌 ,进一步复筛出一株高产、稳定的硫酸软骨素裂解酶 ABC产生菌株 GT38,初步鉴定为彭氏变形菌 (P.pen-neri)。通过单因素实验和正交分析研究了摇瓶最适产酶条件和 2 L 实验室小罐发酵工艺 ,该菌的最适发酵工艺为培养基大豆蛋白胨 2 .5 % ,蔗糖 1.5 % ,Na Cl0 .4 % ,硅油 0 .0 5 % ,p H7.5 ,接种量 5 % ,通气量 1∶ 1～1∶ 1.2 (v/ v) ,搅拌转速为 6 0 0 r/ min,30℃发酵 10 h,酶活力单位高达 32 2 U/ L。

利用生物反应器和Vero细胞培养鸡传染性法氏囊病病毒的研究

通过对血清、pH、接毒量和收毒时间等培养条件的优化 ,确定鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)在Vero细胞上增殖的最佳培养条件为 :血清 2 %,pH 7.0 ,接毒量 5∶10 0 0 0 ,收毒时间为接毒后培养 10 8h。 2 5 0ml自制搅拌瓶和 5L搅拌式生物反应器研究结果表明 ,在 2g/L微载体的Vero细胞悬浮培养系统中 ,待细胞刚长满微载体时 ,按照确定的IBDV最佳增殖条件换液培养 ,病毒可在较长一段时间维持高的病毒滴度 ,最高滴度分别可达 8.875和8.5 8(-lgTCID50 ) ,比传统转瓶生产方法至少提高 1个毒价 ,可用于IBDV规模化生产。

茯苓发酵罐补料液体发酵的研究

发酵罐补料液体发酵是实现茯苓高密度液体发酵的有效发酵方式。本文探讨了补料液的葡萄糖浓度、氮源浓度及补料时间对茯苓发酵罐液体发酵的影响。最佳茯苓液体发酵工艺提高了茯苓菌丝体和胞外多糖的产量,缩短了液体发酵的时间。

三七渣浅盘发酵生产蛋白饲料的研究

文章考察了料层厚度、翻料操作和麸皮比例3个关键因素对黑曲霉/产朊假丝酵母浅盘发酵三七渣生产蛋白饲料的影响。研究结果表明,料层厚度对品温和发酵培养物真蛋白含量影响显著（p〈0.05）,增加料层厚度将导致品温升高和发酵培养物真蛋白含量降低,适宜的料层厚度为2~3 cm;翻料操作可以降低品温并提高发酵培养物的真蛋白含量。麸皮比例对发酵培养物的真蛋白含量影响显著（p〈0.05）,适宜的麸皮比例为10%。

啤酒发酵罐清洗的改进

通过卫生监控,进一步了解发酵罐的污染状况,发现啤酒生产中,对发酵罐罐体的清洗未达到微生物清洁度,是导致发酵液污染杂菌的主要原因。通过对CIP清洗系统和部分设备参数的改进、选择合理的消毒剂、进行CIP清洗流程优化等研究,提高了对发酵罐的清洗和消毒效果,将发酵罐罐壁的微生物污染程度控制在10个/m2以下,大大地降低了发酵液中杂菌污染的程度。

1株广谱苏云金芽孢杆菌及其发酵条件的研究

从土壤中分离出几株广谱杀鳞翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌。其中杀虫效果最好的1株C-33血清型为H5,产生近方形和菱形的伴孢晶体,含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1C基因,产生144 kDa和77 kDa的晶体蛋白质。毒力生物测定证明C-33对棉铃虫及甜菜夜蛾有高毒力。对该天然广谱Bt菌株C-33进行了摇瓶发酵和小试发酵试验,结果表明其发酵性能良好。通过2L全自动罐发酵试验,优化了发酵培养基和发酵条件,发酵效价达到3400～3700 IU/μ1(棉铃虫)。

冰核活性细菌在5L发酵罐上培养条件的研究

对5L发酵罐上培养冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206的发酵工艺条件进行了系统的研究,确定了最适的工艺条件为:通气量2L/(L·min),搅拌速度500r/min,接种量10%,最适培养时间48h,所获得的Xan-thomonasampelinaTS206菌体干重为12·934g/L,冻滴率为100%。

外环流式发酵罐用于玉米生料酒精发酵的研究

对玉米粉悬浮液沉降情况的研究表明,沉降界面初始沉降速度随初始浓度的增加而减小。对外环 流式发酵罐用于玉米生料酒精发酵进行研究,结果表明,起始阶段,玉米粉悬浮液要在外环流式发酵罐中完成强制 回流循环,必然存在一个最小回流量Q;通过恒流泵强制发酵醪循环可以显著缓解原料沉淀造成的不利影响,有利 于发酵罐中的传质;发酵20 h,强制循环发酵液中酵母细胞出芽率较自然发酵提高84．8％,死亡率降低100％,发 酵70 h时酒精度提高11．5％;采用外环流式发酵罐进行玉米生料发酵酒精时,较大的高径比对发酵有利。

球孢白僵菌固态罐发酵产孢培养的研究

建立了一套两升圆柱体玻璃发酵罐的固态通风培养装置及通风系统。以球孢白僵菌Bb371为生产菌,培养基220g(82%麸皮+4.5%黄豆粉+4.5%玉米粉+9%稻壳)作为生产原料,接种30ml,23℃培养温度下,分阶段调节通风量和空气湿度,培养5d,产孢量可达到116亿/g干培养基。

耐高温腐乳毛霉发酵过程中酶活力变化的研究

在腐乳前发酵试验中对蛋白酶、α-半乳糖苷酶、纤维素酶、脂肪酶、α-淀粉酶、谷氨酰胺酶、糖化酶、果胶酶活的研究。结果表明：MHC-7摇瓶发酵培养最佳时间是34~38 h。MHC-7在豆坯上发酵培养最佳时间是32~34 h。在腐乳后发酵45天左右,各种酶活力不断下降,而谷氨酰胺酶酶活力持续增长使腐乳鲜味一直增长。当蛋白酶（65.4 U/g）、α-半乳糖苷酶（35.8 U/g）、脂肪酶（50.1 U/g）、α-淀粉酶（57.3 U/g）时腐乳已基本成熟。

产洛伐他汀紫红色红曲霉的发酵罐补料液体发酵的研究

产洛伐他汀紫红色红曲霉的发酵罐补料液体发酵的发酵液经预处理后,用高效液相色谱法测定Lovsdtatin含量。在发酵培养第48 h、60 h、72 h和84 h,分别以100 mL、200 mL、200 mL和100 mL的葡萄糖和蛋白胨补料为最佳发酵工艺。在最佳发酵工艺下,Lovsdtatin产量最高达79.83 mg·L^(-1),发酵时间为119 h。发酵罐补料液体发酵是提高产洛伐他汀红曲霉发酵水平的一种有效方式。

内循环气升式发酵罐的特性及其用于谷氨酸发酵的研究

对50L内循环气升式发酵罐的混合、传质、气含率、液体循环等性能进行了系统的研究,优选出设备的最佳结构及得出氧的体积传质系数(k_L a)关联式。在此基础上,进行了谷氨酸的一次低糖发酵试验,得出适用于此设备的谷氨酸发酵最佳工艺。实验结果的最高产酸率为7.69%,转化率为58.8%,比使用同一菌种的用机械搅拌罐发酵的产酸率(6.0%)及转化率(44%)分别提高28.2%和33.6%。

Bacillus cereus SG03 10L发酵罐中产胞外胆固醇氧化酶发酵条件优化

目的:优化菌株Bacillus cereus SG03在10L发酵罐中产胆固醇氧化酶的工艺条件,为该菌株的进一步应用提供依据。方法:在10L发酵罐中,通过单因素实验,分别考察了培养液起始pH、搅拌速率、溶解氧(DO)浓度对Bacillus cereus SG03产胞外胆固醇氧化酶的影响。结果:较佳的发酵条件为培养液起始pH6.8、搅拌速率250r/min、溶解氧(DO)浓度80%。在此基础上,对发酵过程进行了两阶段DO控制,发酵前20h DO控制在90%,然后调整为20%,直至发酵结束。较单一DO控制,最大胞外胆固醇氧化酶产量、生产效率分别提高了30.2%和20.0%,达到了1.38U/mL和0.03U/(mL·h)。