脐血CD_3AK细胞诱导K_(562)细胞凋亡的实验研究

目的 探讨脐血CD3AK细胞诱导K5 6 2 细胞凋亡的作用。方法 用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖凝胶电泳 ,原位末端标记法检测 2 0例K5 6 2 细胞、2 3例CD3AK细胞诱导的K5 6 2细胞凋亡率。结果 K5 6 2 细胞自然凋亡率 (3.5 0± 0 .97) % ;经CD3AK细胞诱导的K5 6 2 细胞凋亡率 (2 7.38± 4.91) % ,二者之间具有显著性差异 (t=15 .1 P <0 .0 1)。结论 脐血CD3AK细胞能诱导K5 6 2 细胞凋亡。

放射性核素^(89)Sr诱发K_(562)癌细胞凋亡的放射毒理效应的分子机理研究

采用分子病理和定量病理技术研究放射性核素89Sr诱导的K562癌细胞凋亡、剂量效应关系和重要相关基因bcl-2和bax在其中的表达。结果表明,K562细胞经89Sr作用达6h和24h,提取DNA,琼脂糖凝胶电泳图谱上出现典型的“阶梯状”区带,伴有“拖尾”,面对照组未见“阶梯状”区带:荧光双标记流式细胞仪法定量检测见89Sr作用6、9、12、24和48h后,K562细胞凋亡率、K562细胞坏死率均较对照组有明显的升高(p<0.01)。免疫组织化学染色显示,对照组K562细胞中bcl-2、bax均何表达,bcl-2表达阳性细胞率82.8％,bax表达阳性细胞率44.4％,bcl-2/bax比值1.86,89Sr作用24h后的K562细胞中,bcl-2表达阳性细胞率31.4％,bax表达阳性细胞率38.2%,bcl-2/bax比值0.82与对照组相比,差异具有显著性(p<0.05);结果显示,放射性核素89Sr照射K562细胞后,细胞凋亡与细胞坏死并存,且89Sr诱导K562细胞的凋亡可能是通过bcl-2表达蛋白降低,bcl-2/bax比值下降而调控的。

脐血CD_3AK细胞和其培养上清诱导K_(562)细胞凋亡

目的 探讨脐血CD3 AK细胞和其培养上清 (CS)诱导K562 细胞凋亡。方法 用细胞形态学观察 ,DNA琼脂糖电泳 ,原位末端标记法检测K562 ,CD3 AK细胞诱导的K562 ,CS诱导的K562 细胞凋亡率。结果 K562 细胞自然凋亡率 3.5 0± 0 .97% ;CD3 AK细胞诱导的K562 细胞凋亡率 2 7.38± 4.91% ,P <0 .0 1,CS诱导的K562 细胞凋亡率为 33.0 9± 5 .2 2 % ,P <0 .0 1。结论 脐血CD3 AK细胞和其培养上清能诱导K562 凋亡。

铁对热暴露K_(562)细胞活力及热应激蛋白的影响

目的 观察微量元素铁对热暴露K56 2 细胞活力及热应激蛋白HSP 70影响 ,探讨铁发挥热保护作用的可能机理。方法 以K56 2 细胞为研究对象 ,在普通培养基RPMI164 0里分别添加了不同浓度的硫酸铁、柠檬酸铁配制成实验培养液 ,MTT法测定细胞活力 ,Tissieres方法测定热应激蛋白HSP 70含量。结果 一定浓度的硫酸铁 (10 0～ 40 0μmol/L)、柠檬酸铁 (10 0～ 2 0 0 μmol/L)能显著提高K56 2 细胞的热耐力 ,且热应激蛋白 (HSP 70 )的合成也明显增加。结论 硫酸铁、柠檬酸铁能显著提高K56 2 细胞的热耐力 ,但它们作用浓度和效果不同 。

丙氧鸟苷对K_(562)细胞抑制增殖和诱导分化作用

目的 研究丙氧鸟苷 (GCV)抑制K562 细胞增殖作用和机制。方法 细胞培养、集落培养、联苯胺染色。结果 0 .6 2 5～ 40 μmol浓度的GCV对K562 细胞有明显的抑制增殖作用 ,作用 4d时的半数抑制量 (IC50 )为 2 .99μmol,作用 7d后克隆形成抑制率达 43% ,联苯胺染色阳性细胞百分率随药物剂量的增加和培养时间的延长而逐渐增加。结论 GCV体外抑制K562

TNF-α对K_(562)细胞细胞毒作用的实验研究

为探讨肿瘤坏死因子 α(TNF- α)对 K5 6 2 细胞的细胞毒作用 ,应用原位末端标记法、细胞形态学观察、DNA琼脂糖凝胶电泳检测分析 K5 6 2 ,经 TNF- α(5 0 ng/ml、1 0 0 ng/ml、1 0 0 0 ng/ml)诱导的 K5 6 2 。结果显示 ,K5 6 2 细胞自然凋亡率 (3.5 0± 0 .97) % ,TNF- α(5 0 ng/m l、1 0 0 ng/ml)诱导的 K5 6 2 细胞凋亡率分别是 (2 1 .35± 4.46 ) %、(2 7.38±4.91 ) % ,差异有显著性 (P<0 .0 1 ) ;TNF- α(1 0 0 0 ng/ml)诱导 K5 6 2 细胞坏死。说明小剂量 TNF- α诱导 K5 6 2 细胞凋亡 ,大剂量 TNF- α诱导 K5 6 2

脑灵素对K_(562)细胞及人血淋巴细胞DNA合成的影响

应用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法研究脑灵素对淋巴细胞及Ｋ５６２细胞ＤＮＡ合成的影响。结果表明，脑灵素对肿瘤细胞有抑制合成的作用，使＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率下降，其下降程度与其浓度有关；而对正常巴细胞掺入功能不表现增强或抑制作用。

LAK细胞可溶性因子介导K_(562)细胞的损伤

采用^(51)Cr释放方法探讨LAK细胞可溶性因子介导的K_(562)细胞的损伤。15例中有12例LAK细胞培养上清介导的K_(562)细胞的损伤为10.96±5.15％。将LAK细胞洗去培养上清后与K_(562)细胞共育6小时,5例此种效靶细胞共育后的上清介导的Ks6z细胞的损伤为12.41±6.54％。结果表明,LAK细胞杀伤K_(562)细胞的作用至少一部分是由LAK细胞分泌的可溶性因子完成的。

^(60)Coγ射线对K_(562)细胞及其耐热亚群杀伤作用的研究

目的 研究６０Ｃｏ γ射线对Ｋ５６２ 细胞及其耐热亚群的杀伤作用。方法 先诱导产生Ｋ５６２ 细胞耐热亚群，然后应用不同剂量６０Ｃｏ γ射线照射和５－ Ｆｕ 对Ｋ５６２ 细胞株及其耐热亚群的放射敏感性进行测定。结果 Ｋ５６２ 细胞耐热亚群对射线照射和５ － Ｆｕ 具有一定程度的耐受性；５ － Ｆｕ 联合不同剂量的照射有部分的相加作用。结论 Ｋ５６２ 细胞热耐受性、耐药性及放射抗性之间有一定的必然联系。提示在临床热疗工作中。

砷剂对K_(562)细胞凋亡作用的基础研究

[目的]研究三氧化二砷对K562细胞凋亡的诱导.[方法]采用人红白血病细胞株K562细胞常规培养,给不同浓度的三氧化二砷,在不同的时间收获细胞,用台盼蓝排染法,DNA荧光染料Hoechst33342荧光染色法,及碘化丙啶(PI)与Hoechst33342共染计数坏死细胞的PI阳性率等方法,检测其对K562细胞的影响.[结果]三氧化二砷能够诱导K562细胞凋亡.并且呈现浓度依赖性和时间依赖性.[结论]三氧化二砷主要以诱导肿瘤细胞凋亡而表现其毒性作用.

卡介克蟹对肿瘤细胞株K_（562）的体外杀伤效应

卡介克蟹注射液是卡介苗（ＢＣＧ）的提取物，我们应用ＭＴＴ法已证实其对Ｋ５６２细胞的能量代谢有直接的抑制作用。本组实验用极限稀释法研究了卡介克蟹对Ｋ５６２肿瘤干细胞单个克隆细胞的影响；并观察卡介克蟹作用Ｋ５６２后，其细胞超微结构的改变。结果显示：浓度为１／８～１／１２８的卡介克蟹对Ｋ５６２肿瘤干细胞有直接的抑制作用，其克隆存活分数为０．４６～０．８２；高浓度的卡介克蟹（浓度为１／８）作用Ｋ５６２１０ｈ后，电镜可见肿瘤细胞质中出现大量空泡结构。提示：高浓度卡介克蟹对肿瘤细胞有直接的杀伤作用。

抗白一号诱导白血病K562细胞凋亡作用的研究

目的 :研究抗白一号对白血病细胞株K5 6 2细胞的影响 ,并探讨其机制。方法 :采用MTT法检测细胞毒作用 ,利用Wright Gimesa染色法、Hoechst33342荧光染色等手段观察凋亡细胞的形态结构变化 ,应用透射电镜技术和流式细胞分光光度术进行凋亡定性定量观察 ,并探讨凋亡抑制基因bcl 2蛋白表达 ,应用原位末端标记检测DNA断裂。结果 :抗白一号对细胞具有明显的生长抑制作用。在其作用下细胞呈现典型的凋亡形态学变化。流式细胞仪分析表明抗白一号能使K5 6 2细胞发生凋亡 ,凋亡率呈现对浓度和时间的依赖性 ,并发现抗白一号使K 5 6 2细胞bcl 2基因的表达下调。结论 :抗白一号能诱导K5 6 2细胞发生凋亡 ,其作用机制与bcl 2基因表达的下调有关。

姜汁用量对姜浸半夏炮制品的影响

采用5种不同比例量姜汁冷浸半夏,结果表明,半夏炮制品对小鼠腹腔刺激性与生半夏相比均有下降,但与姜汁加入量无明显相关性,以1:1姜浸半夏刺激性最小。半夏炮制品总生物碱含量均高于生品,且这种含量的高低与体外培养的K_(562)肿瘤细胞的增殖抑制率一致。半夏炮制品中β-谷甾醇的含量与姜汁用量呈相关性,但仅1:1姜浸半夏高于生品。综合诸因素,单纯以姜汁浸半夏应以1:1的比例为佳。

螺旋藻多糖对CD_3AK细胞增殖能力的影响

研究了螺旋藻多糖（PS）对CD3McAb激活的杀伤细胞（CD3McAbactivatedkillercells,CD3AKcells）增殖能力的影响。结果表明，当PS浓度为2．5μg／ml培养体系条件下，对CD3AK细胞具有明显的刺激细胞增殖作用（P＜0．02）；对培养长达23d的CD3AK细胞杀伤肿瘤细胞（K563细胞）的活性仍维持在较高的水平（46．5％～50％）。

预热对白血病患者胸腔渗出细胞H_2O_2的影响

目的探讨预热对肿瘤细胞过氧化氢敏感性的影响及其机制。方法将白血病患者胸腔渗出细胞(K562)在40℃预热不同时间,诱导细胞热应激蛋白70(HSP70)高表达,用RT-PCR检测细胞HSP70mRNA水平;将细胞暴露于0.1,0.2,0.4,0.8mmol的H2O216h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,观察预热对不同水平H2O2敏感性的影响;保持H2O2浓度为0.2mmol不变,观察不同预热时间对细胞H2O2敏感性的影响。结果40℃预热后细胞的HSP70含量升高,在预热120min后达到最高,以后缓慢下降,可维持10h以上;预热细胞对不同浓度H2O2的敏感性均显著低于未预热细胞;对于相同浓度的H2O2而言,预热120min的细胞对敏感性最低。结论预热可以引起细胞HSP70表达增高,降低细胞对H2O2的敏感性。

铕—5—氟尿嘧啶抗肿瘤作用实验观察

本文报道铕-5-氟尿嘧啶对体外培养的人红白血病K_(562)细胞及小鼠白血病L_(1210)细胞,用小孔板法,100.0、50.0、10.0、5.0μg/ml终浓度剂量,24小时后,残留率分别为35.7%、53.6%、68.9%、84.1%及29.6%、48.2%、74.0%、82.4%;对小鼠移值性肿瘤S_(180),用70.0mg/kg剂量,瘤重抑制率为36.2%;用35.0mg/kg剂量,瘤重抑制率为31.5%;铕-5-氟尿嘧啶小鼠单次腹腔注射LD_(50)为343.3～405.9mg/kg。