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Enrichment of Fetal Nucleated Red Blood Cells by Multi-core Magnetic Composite Particles for Non-invasive Prenatal Diagnosis 被引量:1
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作者 PAN Ying WANG Qing +7 位作者 HUANG Wen-jun QIAO Feng-1i LIU Yu-ping ZHANG Yu-cheng HAI De-yang DU Ying,ting WANG Wen-yue ZHANG Ai-chen 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2012年第3期443-448,共6页
A novel kind of multi-core magnetic composite particles, the surfaces of which were respectively mo- dified with goat-anti-mouse IgG and antitransferrin receptor(anti-CD71), was prepared. The fetal nucleated red blo... A novel kind of multi-core magnetic composite particles, the surfaces of which were respectively mo- dified with goat-anti-mouse IgG and antitransferrin receptor(anti-CD71), was prepared. The fetal nucleated red blood cells(FNRBCs) in the peripheral blood of a gravida were rapidly and effectively enriched and separated by the mo- dified multi-core magnetic composite particles in an external magnetic field. The obtained FNRBCs were used for the identification of the fetal sex by means of fluorescence in situ hybridization(FISH) technique. The results demonstrate that the multi-core magnetic composite particles meet the requirements for the enrichment and speration of FNRBCs with a low concentration and the accuracy of detetion for the diagnosis of fetal sex reached to 95%. Moreover, the obtained FNRBCs were applied to the non-invasive diagnosis of Down syndrome and chromosome 3p21 was de- tected. The above facts indicate that the novel multi-core magnetic composite particles-based method is simple, relia- ble and cost-effective and has opened up vast vistas for the potential application in clinic non-invasive prenatal diag- nosis. 展开更多
关键词 fetal nucleated red blood cell(FNRBC) Prenatal diagnosis NON-INVASIVE Multi-core magnetic compositeparticle
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Detection of Fetal Nucleated Erythrocytes and Fetal DNA from Peripheral Blood of Pregnant Women
2
作者 张铭 陈汉平 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2003年第1期65-67,共3页
In order to search for a more reliable method of sorting fetal nucleated red blood cells (NRBCs) and DNA from maternal peripheral blood and to identify origin of NRBCs and DNA, NRBCs were isolated from peripheral bloo... In order to search for a more reliable method of sorting fetal nucleated red blood cells (NRBCs) and DNA from maternal peripheral blood and to identify origin of NRBCs and DNA, NRBCs were isolated from peripheral blood of 88 pregnant women by density gradient centrifugation and fluorescence activated cell sorter (FACS) respectively. Nested polymerase chain reaction was used to detect normal male SRY gene from blood plasma DNA of 65 pregnant women. The results revealed that fetal NRBCs were found in 14 of 27 maternal samples by density gradient centrifugation. The number of cells was from 1 to 10. Using FACS, CD71 + cells were identified among all 61 samples. The frequency was (0.35±0.25)×10 -2; The detectable rate of the SRY gene of blood plasma DNA from 46 women carrying male fetuses was 65.22 % (30/46). Non-detectable rate for 19 women carrying female fetuses was 94.74 % (18/19). It was concluded that the methods of sorting fetal NRBCs and DNA have already made great progress. The methods for fetal NRBCs and plasma DNA from maternal peripheral blood to diagnose genetic diseases seem to be the best methods of noninvasive prenatal diagnosis. 展开更多
关键词 nucleated red blood cells fetal DNA prenatal diagnosis
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孕早期红细胞叶酸与胎儿先天性心脏病的相关性研究
3
作者 赵忠良 神艳 张曙萱 《中外女性健康研究》 2024年第11期1-4,共4页
目的:通过检测孕早期的孕妇红细胞叶酸水平,来探讨胎儿先天性心脏病与红细胞叶酸的相关性。方法:选取2020年10月至2021年10月在本院产检的168例孕妇为研究对象,病史资料完整。收集孕期及分娩后诊断为先天性心脏病的病例,回顾性调查其母... 目的:通过检测孕早期的孕妇红细胞叶酸水平,来探讨胎儿先天性心脏病与红细胞叶酸的相关性。方法:选取2020年10月至2021年10月在本院产检的168例孕妇为研究对象,病史资料完整。收集孕期及分娩后诊断为先天性心脏病的病例,回顾性调查其母亲孕早期检测的红细胞叶酸。40例符合入组条件的病例设为观察组。选取同期正常的新生儿,回顾性调查孕早期的红细胞叶酸,选取128例设为对照组。将研究数据采用社会统计学软件SPSS 19进行统计分析。结果:对照组红细胞叶酸水平(2468.68±609.48)nmol/L,高于观察组的(2241.06±490.93)nmol/L,t检验P=0.033<0.05,差异有统计学意义,两组孕妇的红细胞叶酸数据通过单因素条件的Logistic回归分析,红细胞叶酸OR值=0.313<1,P<0.05。结论:红细胞叶酸与胎儿先天性心脏病的发生有相关性,是胎儿先天性心脏病发生的一个保护因素。 展开更多
关键词 红细胞叶酸 孕早期 胎儿先天性心脏病
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河北省健康胎儿脐带血血常规红细胞参数参考范围的研究与建立 被引量:1
4
作者 王俊霞 楚伟 +4 位作者 王方娜 石子佳 程青青 郑宗朋 高健 《中国医药科学》 2023年第12期75-78,共4页
目的建立河北省妊娠期胎儿脐带血血常规红细胞参数的参考范围,并探讨孕周、性别与胎儿红细胞参数参考范围变化的关系。方法收集河北省人民医院2010年5月至2021年7月因各种指征行产前诊断随访结果均正常的3069例孕18~38周的胎儿脐带血,... 目的建立河北省妊娠期胎儿脐带血血常规红细胞参数的参考范围,并探讨孕周、性别与胎儿红细胞参数参考范围变化的关系。方法收集河北省人民医院2010年5月至2021年7月因各种指征行产前诊断随访结果均正常的3069例孕18~38周的胎儿脐带血,进行脐带血血常规检测,根据不同孕周对血常规红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度的检测结果进行汇总分析。结果胎儿的血常规红细胞各参数结果呈非正态分布。随着孕周增加红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、平均血红蛋白浓度逐渐升高,红细胞平均体积、平均血红蛋白含量逐渐降低。不同性别胎儿红细胞计数、血红蛋白、平均血红蛋白浓度、红细胞平均体积、平均血红蛋白含量的总体差异具有统计学意义(P<0.05)。结论河北省22~38周健康胎儿脐带血血细胞参数在不同孕周及性别之间存在差异,应该独立制订河北省妊娠期胎儿的血细胞参数参考范围,有助于胎儿产前和早产儿疾病的诊断。 展开更多
关键词 脐带血 红细胞参数 胎儿血常规 参考范围
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流式细胞术联合血红蛋白电泳法在孕妇胎母输血检测中的应用价值
5
作者 李广伟 杨敏 马心慧 《中国社区医师》 2023年第32期85-87,共3页
目的:分析流式细胞术(FCM)联合血红蛋白电泳法(HBE)在孕妇胎母输血检测中的应用价值。方法:选取2020年5月—2022年5月解放军96605部队医院收治的60例疑似胎母输血综合征(FMH)患者作为研究对象。采集患者外周血,予以HBE、FCM、酸洗脱实验... 目的:分析流式细胞术(FCM)联合血红蛋白电泳法(HBE)在孕妇胎母输血检测中的应用价值。方法:选取2020年5月—2022年5月解放军96605部队医院收治的60例疑似胎母输血综合征(FMH)患者作为研究对象。采集患者外周血,予以HBE、FCM、酸洗脱实验(KBT)检测,以KBT检测作为本研究结果的标准分析HBE联合FCM检测FMH的准确性与敏感性。结果:60例疑似FMH的孕妇中2例确诊,FCM联合HBE检测准确率为96.67%(58/60),敏感性为100.00%(2/2)。结论:FMH检测中使用FCM联合HBE检测具有较高的价值,对于胎儿出血量予以动态监测,能够为医务人员准确判断疾病、评估、严重程度及制定针对性治疗方案提供有效参考。 展开更多
关键词 流式细胞术 孕妇 外周血 胎儿红细胞 胎母输血综合征
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基于免疫磁珠法的不同筛选方案对胎儿有核红细胞富集效果的比较 被引量:1
6
作者 唐苗苗 宾雅棣 +2 位作者 赵蓝波 李奇灵 孙超 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期155-161,共7页
目的:将密度梯度离心(density gradient centrifugation,DGC)与免疫磁珠法(magnetic-activated cell sorting,MACS)相结合,应用4种不同的筛选方案,对脐血中的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)进行分离,评估不同... 目的:将密度梯度离心(density gradient centrifugation,DGC)与免疫磁珠法(magnetic-activated cell sorting,MACS)相结合,应用4种不同的筛选方案,对脐血中的胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cells,FNRBC)进行分离,评估不同策略富集FNRBC的效果。方法:对10例脐血标本(12 mL/例)按4种不同方案进行筛选:DGC;DGC+MACS阴性筛选(CD45^(-));DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+));DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))。通过细胞计数板计数,K-B染色后显微镜下人工FNRBC计数,从获得总细胞量、FNRBC量和FNRBC比例经t检验后评估不同方案富集FNRBC的效果。结果:(1)与其他3组相比,DGC方案可获得的总细胞量(0.95×10^(7)/mL)最多,FNRBC数量(39.87/mL)最多,FNRBC比例最低(0.004‰),差异均具有统计学意义(均P=0.000);(2)与其他3组相比,DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))组合法所获得的总细胞量最少(0.81×10^(6)/mL),获得FNRBC数量也最少(7.47/mL),差异均具有统计学意义(均P=0.000);(3)DGC+MACS单种抗体筛选方案中,DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+))所获得总细胞量为1.99×10^(6)/mL,较DGC+MACS阴性筛选(CD45^(-))(2.56×10^(6)/mL)低,差异有统计学意义(P=0.000),而两方案所得FNRBC数量之间差异无统计学意义(P=0.910);(4)DGC+MACS阴性筛选(CD45^(-)),DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+)),DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))所得FNRBC比例之间差异无统计学意义(P=0.030、0.050、0.210)。结论:DGC方案获得FNRBC数量最多;DGC+MACS阴性/阳性筛选(CD45^(-)/CD71^(+))方案去除混杂细胞能力最强。在不降低获取目标细胞数量基础上,DGC+MACS阳性筛选(CD71^(+))方案富集FNRBC效果最好。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 密度梯度离心 免疫磁珠筛选
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妊娠期糖尿病患者氧化应激和EPO、FNRBC水平变化与胎盘组织学改变的关系 被引量:17
7
作者 杨晓菊 赵金霞 +1 位作者 戴淑真 王大伟 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期60-63,共4页
目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者氧化应激状态与脐血促红细胞生成素(EPO)和胎儿有核红细胞(FNRBC)水平变化及其与胎盘组织形态学异常发生率的关系。方法:选取28例GDM患者(GDM组)和22例正常妊娠妇女(正常对照组),采集其母血和脐血及对应... 目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者氧化应激状态与脐血促红细胞生成素(EPO)和胎儿有核红细胞(FNRBC)水平变化及其与胎盘组织形态学异常发生率的关系。方法:选取28例GDM患者(GDM组)和22例正常妊娠妇女(正常对照组),采集其母血和脐血及对应的胎盘标本,检测母血和脐血氧化应激标志物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)浓度,脐血EPO浓度和FNRBC计数,同时对胎盘组织进行病理学检测。结果:GDM组患者母血和脐血中的MDA及脐血中EPO浓度和FNRBC计数明显高于正常对照组(P<0.05),SOD浓度较正常对照组明显降低(P<0.05)。GDM组患者胎盘病理检查提示,与正常对照组相比:绒毛成熟不良、干绒毛小动脉增厚和绒毛间质毛细血管充盈明显的发生比例增加(P<0.05),并且母血和脐血中的MDA浓度与胎盘绒毛成熟不良的发生比例呈正相关(P均<0.05)。结论:胎盘绒毛发育和成熟的复杂过程可能受母胎氧化应激与抗氧化环境的影响,胎盘病理组织学显示GDM时绒毛血管发育与成熟的异常可能导致胎儿缺氧和不良后果。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 胎盘 氧化应激 促红细胞生成素 胎儿有核红细胞
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HIF-1α、VEGF在妊娠期糖尿病胎盘组织中的表达及其与胎儿缺氧的关系 被引量:10
8
作者 杨晓菊 杨宗利 +1 位作者 王学芹 戴淑真 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期962-966,共5页
目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在妊娠期糖尿病(GDM)胎盘中的表达及其与血糖控制效果和胎儿缺氧的关系。方法:选取GDM孕妇64例,其中血糖控制不良组(A组)22例,血糖控制良好组(B组)42例,同期分娩正常孕妇27... 目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在妊娠期糖尿病(GDM)胎盘中的表达及其与血糖控制效果和胎儿缺氧的关系。方法:选取GDM孕妇64例,其中血糖控制不良组(A组)22例,血糖控制良好组(B组)42例,同期分娩正常孕妇27例为对照组(C组)。采用Giemsa染色法计数脐血中胎儿有核红细胞(FNRBC);免疫组化SP法和RT-PCR技术测定HIF-1α和VEGF蛋白和mRNA在胎盘中表达;分析GDM组FNRBC水平与HIF-1αmRNA及VEGFmRNA表达的相关性。结果:①3组胎盘中均有HIF-1α和VEGF蛋白的表达,A、B组胎盘中HIF-1α和VEGF蛋白的表达呈较强阳性和强阳性。②A、B、C组胎盘组织中HIF-1α和VEGF蛋白阳性表达率两两比较差异均有高度统计学意义(P<0.01)。③A、B、C组胎盘组织中HIF-1α及VEGFmRNA表达水平两两比较差异均有高度统计学意义(P<0.01)。④A、B、C组脐血FNRBC计数水平两两比较差异均有高度统计学意义(P<0.01)。⑤A、B组脐血FNRBC水平与胎盘组织中HIF-1α、VEGFmRNA表达均呈正相关关系(P<0.01);A、B组胎盘组织中HIF-1α与VEGFmRNA表达亦呈正相关关系(P<0.01)。结论:GDM胎盘中HIF-1α和VEGF的高表达可能参与了GDM的发病过程,其表达水平与孕妇血糖控制效果有关,且能导致胎儿缺氧和不良后果。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 胎盘 缺氧诱导因子-1Α 血管内皮生长因子 胎儿有核红细胞
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影响Kleihauer-Betke实验结果的实验因素分析 被引量:7
9
作者 杨树法 翟燕红 王文娟 《国际检验医学杂志》 CAS 2013年第2期138-139,142,共3页
目的分析Kleihauer-Betke(K-B)实验的影响因素,以更好地诊断胎母输血综合征。方法分析不同因素对K-B实验的影响,确定最佳实验条件。以脐带血和静脉血的混合血为检测样本,计算K-B实验的回收率;以优化的K-B实验检测200例未孕妇女以及100... 目的分析Kleihauer-Betke(K-B)实验的影响因素,以更好地诊断胎母输血综合征。方法分析不同因素对K-B实验的影响,确定最佳实验条件。以脐带血和静脉血的混合血为检测样本,计算K-B实验的回收率;以优化的K-B实验检测200例未孕妇女以及100例疑似胎母输血综合征妇女,建立待产妇胎儿红细胞含量的参考值范围。结果在37℃脱色8min、伊红染色60s时,胎儿红细胞和成人红细胞积分光密度的比值最大为10.13±1.17,镜下胎儿红细胞染色呈强粉红色,折光性强,脐带血含量与K-B实验结果的相关系数r=0.999,回收率为84.75%~96.55%。待产妇胎儿红细胞含量参考值范围为小于0.68%。结论通过设立阳性对照、阴性对照以及回收率实验建立稳定的K-B实验,能够对胎母输血综合征作出正确诊断。 展开更多
关键词 胎母输血综合征 Kleihauer-Betke实验 胎儿红细胞
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联合干预离子通道提高PVDF膜富集胎儿有核红细胞的效率 被引量:3
10
作者 程宁 张丽娜 +2 位作者 徐向红 刘芳 白亚娜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期13-15,共3页
目的通过干预细胞膜阴离子通道(AE)和Na+/K+/2Cl-离子共转运体(NKCC),提高聚偏二氟乙烯(PVDF)膜富集脐血有核红细胞(NRBC)的效率。方法以密度为1.067的分离液分离NRBC,用AE抑制剂维拉帕米(verapamil)和NKCC抑制剂呋噻米(furosemide)联... 目的通过干预细胞膜阴离子通道(AE)和Na+/K+/2Cl-离子共转运体(NKCC),提高聚偏二氟乙烯(PVDF)膜富集脐血有核红细胞(NRBC)的效率。方法以密度为1.067的分离液分离NRBC,用AE抑制剂维拉帕米(verapamil)和NKCC抑制剂呋噻米(furosemide)联合干预,用流式细胞技术和巢式PCR观察干预前后离心法和过5μm孔径PVDF膜法富集NRBC的效率。结果最佳离心分离密度梯度为1.067。流式细胞仪检测离心分离的NRBC平均纯度为2.54%,干预后离心分离NRBC纯度为9.36%,NRBC富集率提升近3.7倍;过PVDF膜前NRBC为0.83%,过膜后NRBC为6.15%,干预后过膜将NRBC富集率提升了7.4倍。用巢式PCR检测,每ml血样中NRBC为120个时,干预后过膜的扩增条带的密度值由4.48升高至17.78,提升近4倍。结论维拉帕米和呋噻米能够通过改变脐血细胞性状,提高NRBC通过PVDF膜的效率。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 维拉帕米 呋噻米 聚偏二氟乙烯膜 流式细胞仪 巢式PCR
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Kleihauer—Betke实验诊断胎母输血综合征 被引量:5
11
作者 杨树法 翟燕红 王文娟 《现代检验医学杂志》 CAS 2012年第2期52-54,共3页
目的分析含胎儿血红蛋白(HbF)红细胞对K—B实验的影响,提高K—B实验诊断胎母输血综合征(FMH)的准确性。方法町2011年1月~6月间北京妇产医院就诊的100例正常未孕妇女、200例正常待产孕妇的血涂片进行KB实验检测,对含Hbt?红细胞... 目的分析含胎儿血红蛋白(HbF)红细胞对K—B实验的影响,提高K—B实验诊断胎母输血综合征(FMH)的准确性。方法町2011年1月~6月间北京妇产医院就诊的100例正常未孕妇女、200例正常待产孕妇的血涂片进行KB实验检测,对含Hbt?红细胞和胎儿红细胞进行区分,并确定两种细胞在正常待产孕妇血液内的参考值范围;通过对同时期就诊的123例胎心监护出现正弦样曲线、超声检查发现胎儿水肿、孕妇主诉胎动减少或不明原因死胎的可疑FMH产妇进行回顾性分析以验证胎儿红细胞参考值范围的准确性。结果胎儿红细胞呈深粉红色、折光性强,含HbF红细胞呈浅粉色、折光性差;含HbF红细胞在未孕妇女和待产妇百分含量的差并不具有统计学意义(μ=0.15,p=0.442〉0.05),参考值范围为0%~2.33%;待产妇胎儿红细胞浓度高于未孕妇女,胎儿红细胞在待产妇的参考值范围为〈0.67%;123例可疑FMH孕妇中,120例(97.56%)胎儿红细胞检测结果位于参考值范围内,其中未发现FMH患者,3例患者高于参考值范围,其中确诊两例FMH患者。结论含HbF红细胞是影响K—B实验检测胎儿红细胞准确性的重要因素,应建立孕妇两种细胞的参考值范围以保证实验准确性。 展开更多
关键词 胎母输血综合征 酸洗脱实验 胎儿红细胞
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促红细胞生成素、外周血有核红细胞与胎儿宫内生长发育受限及预后关系的研究 被引量:4
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作者 李宇阳 吴红敏 刘正娟 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2006年第10期1401-1404,共4页
目的:测定小于胎龄儿(SGA)和适于胎龄儿(AGA)血中的EPO、有核红细胞、血气分析的变化,找出胎儿宫内发育迟缓与EPO、有核红细胞、血气分析之间的关系,以期待为临床找到一种反映SGA慢性缺氧的理想指标。方法:采用ELISA法对24例SGA... 目的:测定小于胎龄儿(SGA)和适于胎龄儿(AGA)血中的EPO、有核红细胞、血气分析的变化,找出胎儿宫内发育迟缓与EPO、有核红细胞、血气分析之间的关系,以期待为临床找到一种反映SGA慢性缺氧的理想指标。方法:采用ELISA法对24例SGA和28例AGA血中EPO浓度进行定量检测,末梢血涂片经瑞氏染色计数100个白细胞中含有的有核红细胞数(NRBC/100WBC),并根据血常规中的白细胞数计算出有核红细胞的绝对计数(NRBC)。同时检测动脉血pH、BE和HCO^3-等指标。生后3—5天进行头部CT检查,以确定神经系统病变情况。结果:①SGA组和AGA组的体重分别是(1463.83±273.73)g和(1925.8±309.91)g;EPO值分别是(109.4±51.36)mIU/ml和(13.99±6.54)mIU/ml。NRBC/100WBC数分别是(56.67±24.75)个和(8.57±4.28)个;NRBC数分别是(5.627±3.14)×10^9/L和(0.98±0.506)×10^9/L;RBC数分别是(4.486±0.446)×10^12/L和(4.61±0.333)×10^12/L;pH值分别是(7.297±0.1163)和(7.36±0.0525);BE值分别是(-4.616±5.048)mmol/L和(-1.82±2.047)mmol/L;HCO3^-值分别是(22.81±5.246)mmol/L和(24.725±2.38)mmol/L。其中体重、EPO、NRBC/100WBC、NRBC、pH、BE两组比较有显著性差异(P〈0.05)。两组的RBC、HCO3^-比较无显著性差异(P〉0.05)。②经过相关性分析,SGA组的体重与EPO呈显著负相关,r值为-0.470(P〈0.05);AGA组的体重与EPO无相关性,r值为0.128(P〉0.05)。③EPO分别和NRBC/100WBC、NRBC呈正相关,r值分别是0.642(P〈0.05)和0.595(P〈0.05);EPO分别和BE、HCO3呈负相关,r值分别是-0.434(P〈0.05)和-0.487(P〈0.05)。④SGA组根据预后两组颅内出血7名,包括死亡2名,缺氧缺血性脑病3名。头部CT正常的为对照组。两组进行率的比较,P〈0.05,差异显著,说明EPO、有核红细胞的绝对计数显著升高的SGA预后较差。结论:①血中的EPO、NRBC/100WBC、NRBC、BE、pH在SGA组均明显高于AGA组,而RBC数在两组间无显著性差异。②SGA组的体重与EPO呈显著负相关。③血中EPO分别与NRBC/100WBC,NRBC呈显著正相关,与BE、HCO3^-呈负相关。④EPO、NRBC是反映小于胎龄儿慢性缺氧的理想指标,与预后密切相关。 展开更多
关键词 小于胎龄儿 促红细胞生成素 有核红细胞
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孕妇外周血胎儿有核红细胞富集的孕周选择 被引量:4
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作者 周云 翟志敏 +2 位作者 刘雨生 李庆 童先宏 《临床输血与检验》 CAS 2008年第2期99-102,共4页
目的 利用抗转铁蛋白受体(CD71)抗体和抗白细胞共同抗原(CD45)抗体双标法,检测不同孕周孕妇外周血中有核红细胞的比例,以期选择最佳孕周进行胎儿有核红细胞富集。方法 采用抗-CD71抗体和抗-CD45抗体双标法,应用流式细胞术(flow ... 目的 利用抗转铁蛋白受体(CD71)抗体和抗白细胞共同抗原(CD45)抗体双标法,检测不同孕周孕妇外周血中有核红细胞的比例,以期选择最佳孕周进行胎儿有核红细胞富集。方法 采用抗-CD71抗体和抗-CD45抗体双标法,应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测81例不同孕周孕妇外周血中有核红细胞的比例,并与未孕组和脐血组进行对照。结果 孕7~34周孕妇外周血中CD71^+/CD45^dim细胞的比例为(0.107土0.063)×10^-2,与未孕组和脐血组相比差异均有统计学意义;CD71^+/CD45^dim细胞在外周血中的比例在孕17~18周达峰值,为(0.144土0.096)×10^-2。结论 不同孕周孕妇外周血有核红细胞比例不同,孕17~18周比例最高。利用母血循环中的胎儿有核红细胞进行产前诊断,其最佳时间可选择在妊娠17~18周。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 转铁蛋白受体 白细胞共同抗原 流式细胞术 产前诊断
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密度梯度离心结合Keihuaer抗酸染色法富集孕妇外周血中FNRBC的研究 被引量:2
14
作者 何国平 刘雨生 +5 位作者 童先宏 郑圣霞 张荣 王念念 吴丽敏 周桂香 《临床输血与检验》 CAS 2009年第3期207-210,共4页
目的探索建立一种简便、快速、较低成本的用于孕妇外周血胎儿有核红细胞(FNRBC)富集的实验方法。方法采集18名孕周在8~16周的孕妇外周血10ml,经Percoll不连续密度梯度离心初步分离后,运用Keihuaer抗酸染色法对玻片上的细胞进行染色标记... 目的探索建立一种简便、快速、较低成本的用于孕妇外周血胎儿有核红细胞(FNRBC)富集的实验方法。方法采集18名孕周在8~16周的孕妇外周血10ml,经Percoll不连续密度梯度离心初步分离后,运用Keihuaer抗酸染色法对玻片上的细胞进行染色标记,显微镜下观察、辨别FNRBC的特殊染色及形态,对阳性涂片者进一步行胎儿血红蛋白(HBF)特异性抗体标记以证实其胎源性。结果经Keihuaer抗酸染色处理,阳性FNRBC的胞浆染色呈深红色,核蓝色,而母亲的有核红细胞胞浆不着色。18名孕妇外周血中有14名可检出FNRBC,平均1~6个阳性FNRBC/病例,阳性检出率为77.8%。14例FNRBC阳性玻片经HBF抗体标记亦证实相同结果,而4例Keihuaer抗酸染色阴性病例亦表现HBF标记阴性,两者检出符合率100.0%。结论密度梯度离心结合Keihuaer抗酸染色法用于富集FNRBC具有较高的特异性,实验操作方法简便、快速,有望用于无创性产前基因诊断的推广应用。 展开更多
关键词 密度梯度离心 胎儿有核红细胞 Keihuaer抗酸染色 胎儿血红蛋白
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半乳糖特异性植物血凝素富集胎儿有核红细胞 被引量:1
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作者 彭佳 黄庆 +1 位作者 府伟灵 任君 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第15期1905-1907,共3页
目的建立半乳糖特异性植物血凝素分离和富集胎儿有核红细胞的方法和反应装置,为胎儿有核红细胞用于产前诊断提供基础。方法选用38~40孕周正常分娩胎儿脐血,经半乳糖特异性植物血凝素反应体系分离和富集胎儿有核红细胞,半乳糖浓度为5... 目的建立半乳糖特异性植物血凝素分离和富集胎儿有核红细胞的方法和反应装置,为胎儿有核红细胞用于产前诊断提供基础。方法选用38~40孕周正常分娩胎儿脐血,经半乳糖特异性植物血凝素反应体系分离和富集胎儿有核红细胞,半乳糖浓度为50、100、100、150、200μg/mL、大豆凝集素浓度为10、20、30、40、50μg/mL。特异性荧光抗体染色后用激光共聚焦显微镜观察并计数分离和富集到的胎儿有核红细胞。结果半乳糖特异性植物血凝素反应体系能够有效分离和富集胎儿有核红细胞,当包被玻片的半乳糖浓度为100μg/mL、大豆凝集素浓度为20μg/mL时,与有核细胞的比率最高为(6.54±0.56)%。结论半乳糖特异性植物凝素可用于选择性地分离和富集胎儿有核红细胞。 展开更多
关键词 半乳糖 大豆凝聚素 胎儿有核红细胞
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利用孕妇外周血中胎儿有核红细胞行无创产前性别诊断的初步研究 被引量:2
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作者 张荣 刘雨生 +3 位作者 郑圣霞 何国平 李庆 童先红 《临床输血与检验》 CAS 2010年第3期204-207,共4页
目的建立一种利用孕妇外周血中分选出的胎儿有核红细胞(FNRBC)进行无创伤性产前诊断的有效方法。方法收集5例妊娠7~9周的人流妇女的绒毛及外周血20ml,采用抗-CD45和抗ε链双标细胞,流式细胞仪分选CD45dim的细胞经显微挑选出ε-链免疫... 目的建立一种利用孕妇外周血中分选出的胎儿有核红细胞(FNRBC)进行无创伤性产前诊断的有效方法。方法收集5例妊娠7~9周的人流妇女的绒毛及外周血20ml,采用抗-CD45和抗ε链双标细胞,流式细胞仪分选CD45dim的细胞经显微挑选出ε-链免疫荧光抗体阳性的胎儿有核红细胞,再采用单细胞多重置换扩增技术(MDA)进行全基因组扩增,以扩增产物为模板,常规PCR检测Alphoid基因片段,确定胎儿性别,与绒毛PCR结果比较。结果抗-ε链、抗-CD45双标记的5例标本流式分选CD45dim细胞后,所有标本均观察到血红蛋白ε链阳性细胞。怀有2例男性和1例女性孕妇的外周血分选出的阳性细胞经MDA和PCRAlphoid基因片段扩增,显示1例全基因组扩增失败;1例诊断为男胎,1例为女性,与绒毛PCR性别检测结果完全符合。结论ε-抗体、CD45双标的CD45dim细胞经流式分选后结合显微操作技术从母血中挑选出ε-血红蛋白阳性细胞,经全基因组扩增可以有效获取足够量的研究模板,保证后续分析的准确性,可应用于性连锁遗传疾病的无创性产前诊断。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 ε-血红蛋白 流式分选 全基因组扩增
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流式细胞术检测孕妇外周血中胎儿红细胞的应用价值 被引量:1
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作者 崔瑾 詹茜 +2 位作者 罗琴 李俊男 张玉洪 《检验医学与临床》 CAS 2022年第14期1873-1877,1881,共6页
目的探讨流式细胞术和血红蛋白电泳联合检测诊断胎母输血综合征的价值。方法采用抗胎儿血红蛋白(HbF)单克隆荧光抗体滴度试验找出流式细胞术检测时抗HbF单克隆荧光抗体与胎儿红细胞数量的最佳反应比,再对该方法的准确度、灵敏度、特异... 目的探讨流式细胞术和血红蛋白电泳联合检测诊断胎母输血综合征的价值。方法采用抗胎儿血红蛋白(HbF)单克隆荧光抗体滴度试验找出流式细胞术检测时抗HbF单克隆荧光抗体与胎儿红细胞数量的最佳反应比,再对该方法的准确度、灵敏度、特异度及重复性进行评价,最后对临床疑似发生胎母输血综合征的孕妇外周血分别采用流式细胞术和血红蛋白电泳进行胎儿红细胞和HbF检测。结果胎儿红细胞数量与抗HbF单克隆荧光抗体的最佳反应比为5×10^(4)个∶6μL;流式细胞术检测结果与血红蛋白电泳及K-B法结果均具有一致性,该方法的灵敏度随流式细胞仪收集红细胞总量的增加而增加,抗HbF单克隆荧光抗体对除HbF外的血红蛋白变异体无染色,并且对固定及渗透处理后的红细胞悬液在90 d内的检测结果重复性好;90例孕妇外周血标本中成功检出2例胎母输血综合征。结论该研究建立了流式细胞术检测胎母输血综合征的非创伤性产前确诊方法。 展开更多
关键词 胎母输血综合征 流式细胞术 血红蛋白电泳 胎儿红细胞
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孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞的产前基因分析 被引量:2
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作者 邹丽 朱剑文 +1 位作者 徐可树 张会军 《同济医科大学学报》 CSCD 2000年第4期339-340,343,共3页
为探讨母血中单个胎儿有核红细胞 (NRBC)行产前基因分析的可行性 ,对 45名孕妇外周血行不连续密度梯度离心 ,显微操作获取单个 NRBC,A组 2 4例进行引物延伸预扩增 (PEP) ,后行 Y染色体特异性 DYZ1基因的聚合酶链反应 (PCR) ,B组 2 1例... 为探讨母血中单个胎儿有核红细胞 (NRBC)行产前基因分析的可行性 ,对 45名孕妇外周血行不连续密度梯度离心 ,显微操作获取单个 NRBC,A组 2 4例进行引物延伸预扩增 (PEP) ,后行 Y染色体特异性 DYZ1基因的聚合酶链反应 (PCR) ,B组 2 1例直接进行 Y染色体特异性 DYZ1基因的 PCR。发现 45名孕妇中有 2 4名检出 NRBC,A组中男胎符合率为 70 % ,总符合率为 83.3% ,B组则均未扩增到 PCR产物。提示用母血中单个胎儿 NRBC经 PEP- PCR法行产前基因分析是可行的。 展开更多
关键词 孕妇外周血 单个胎儿有核红细胞 产前诊断
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母血中胎儿遗传物质与无创性产前诊断 被引量:2
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作者 费明钰 张毅 +1 位作者 贾音 孙树汉 《分子诊断与治疗杂志》 2010年第6期428-431,共4页
经过10余年的发展,利用母体外周血中胎儿遗传物质进行无创性产前诊断的技术正逐步面向临床。本文综述了目前较为广泛被研究的母血中的胎儿遗传物质,着重阐述了使用无创的方法获得母血中胎儿遗传物质的方法及其优缺点。
关键词 无创性产前诊断 母体外周血 胎儿有核红细胞 胎儿游离DNA 胎儿游离RNA
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胎儿有核红细胞的可识别标记 被引量:2
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作者 彭影 刘雨生 《国际遗传学杂志》 CAS 2007年第2期104-109,共6页
从母血循环中分离、富集和提取胎儿有核红细胞,进行无创性产前基因诊断,是近年来医学界具有重大意义的研究课题。胎儿有核红细胞由于自身特点较其他胎儿细胞更适用于产前诊断。有多种方法可用于分离胎儿有核红细胞,现就胎儿有核红细... 从母血循环中分离、富集和提取胎儿有核红细胞,进行无创性产前基因诊断,是近年来医学界具有重大意义的研究课题。胎儿有核红细胞由于自身特点较其他胎儿细胞更适用于产前诊断。有多种方法可用于分离胎儿有核红细胞,现就胎儿有核红细胞特异性标记进行综述。目前使用最多的阳性标记是CD71、CD36、GPA、血红蛋白等,同时使用CD45等阴性标记可以提高分选效率及纯化率。随着分子生物学、分子免疫学等学科的发展,会有更多的胎儿有核红细胞(nucleated red blood cells,NRBCs)特异性标记被发现,从而促进产前诊断的不断发展。 展开更多
关键词 胎儿有核红细胞 分选 母血 产前诊断
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