用改良绝对定量法检测正常孕妇与妊娠21三体胎儿孕妇外周血游离核酸浓度

目的运用一种改良的绝对定量PCR法比较分析正常孕妇组与妊娠21-三体孕妇组外周血中游离PLAC4-DNA浓度的变化;方法采用长片段扩增子代替质粒构建标准曲线,根据生成的标准曲线方程计算出两组孕妇外周血中游离PLAC4-DNA的浓度值,经两独立样本t检验分析两组结果差异;结果长片段扩增子构建的标准曲线方程:Y=-3.334X+43.438,R2=0.996,Eff%=99.478%。根据标准曲线方程得出,300例正常孕妇组PLAC4平均浓度:58.4 copies/μl,20例妊娠21三体孕妇组平均浓度:62.6 copies/μl,,经两独立样本t检验,P=0.439;结论改良的长片段扩增子构建标准曲线具有操作简便,成本低,准确性高的优点,可为绝对定量提供一种经济简便且有效的参考方法。通过绝对定量法检测得出正常组孕妇与妊娠21-三体孕妇组外周血中总的游离PLAC4-DNA的变化无统计学差异。