贝复济治疗复发性口腔溃疡的临床研究

目的探讨贝复济(rb-bFGF)治疗复发性口腔溃疡(ROU)的临床疗效。方法选择ROU患者132例,随机分为两组,治疗组68例,用rb-bFGF局部喷洒溃疡面;对照组64例,用西吡氯铵漱口液(CPC)漱口。结果治疗组治疗ROU的有效率明显高于对照组。结论用rb-bFGF治疗ROU是行之有效的方法。

香烟及矽尘对肺泡巨噬细胞酸性磷酸酶和乳酸脱氢酶的影响

本实验对体外与香烟和(或)矽尘共同培养的肺泡巨噬细胞(AM)培养物上清液中酸性磷酸酶(AcP)及乳酸脱氢酶(LDH)的活性进行了测定。结果显示,AM-香烟-矽尘共同培养组上清液中AcP活性比单独的香烟或矽尘与AM共同培养组及单纯AM组高,说明香烟和矽尘对AM的影响具有协同作用。实验结果还表明我们已报导的AM-香烟-矽尘共同培养物上清液刺激人胚肺成纤维细胞生长这一现象,可能与AM某种(些)产物量的改变有关。

碱性成纤维细胞生长因子对人牙龈成纤维细胞成骨分化与增殖的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)对体外培养的人牙龈成纤维细胞(HGFs)成骨分化能力与细胞增殖的影响,探索b FGF在HGFs体外诱导成骨分化过程中的作用。方法采用组织块贴壁法体外培养HGFs,取第3代细胞进行如下分组培养。1组为普通培养基组,2组为普通培养基+10μg/L b FGF组,3组为成骨诱导组,4组为成骨诱导+10μg/L b FGF组。应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测HGFs增殖状况;用碱性磷酸酶染色法及茜素红染色法检测HGFs的成骨分化能力。结果在普通培养基和成骨诱导培养基中,10μg/L的b FGF均能促进HGFs的增殖(P<0.01);在成骨诱导培养基中HGFs具有骨向分化能力,形成钙结节;而10μg/L的b FGF对HGFs的碱性磷酸酶活性与矿化结节形成能力均无明显影响。结论 10μg/L的b FGF能促进HGFs的增殖能力,而对其骨向分化无明显影响。

重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗浅Ⅱ度烧伤的多中心Ⅳ期双盲、阳性药物、随机对照试验

目的比较重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-a FGF)与碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)治疗浅Ⅱ度烧伤的临床疗效差异。方法入选6个研究医院254例门诊浅Ⅱ度烧伤患者。治疗组给予银离子敷料联合a FGF(清创时清洗治疗,清创后给予喷雾治疗)。对照组给予银离子敷料联合b FGF(给药方法同a FGF)。记录创面愈合时间及愈合后的色素沉着情况。结果rh-a FGF治疗后完全愈合时间为(7.1±1.5)d,b FGF治疗后愈合时间为(9.2±1.8)d,两组随访过程中感染发生率分别为1.5%,9.2%,两组比较具有统计学差异(P>0.05)。但两组色素沉着评分分别为(2.2±1.6)分,(3.0±1.4)分,不具有统计学差异(P<0.05)。结论 a FGF可促进浅Ⅱ度烧伤愈合,预防感染,疗效优于b FGF,安全性相似。

富血小板纤维蛋白对粗糙钛板表面牙龈成纤维细胞增殖和分化的影响

目的探讨富血小板纤维蛋白对粗糙钛板表面人牙龈成纤维细胞增殖和分化的影响。方法体外培养人牙龈成纤维细胞,传至第4代与粗糙钛板联合培养用于实验。分别在普通培养基和含富血小板纤维蛋白的培养基中培养,MTT、RT-PCR、蛋白印迹技术进行检测。结果 MTT结果显示含加入富血小板纤维蛋白能明显促进粗糙钛板表面人牙龈成纤维细胞的增殖,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR提示两组均有Type(Ⅰ)collagen和bFGF的mRNA表达,含富血小板纤维蛋白组mRNA表达比普通组明显增强。WB提示,Ⅰ型胶原蛋白表达在含富血小板纤维蛋白组中明显增强。结论富血小板纤维蛋白能促进粗糙钛板表面人牙龈成纤维细胞的增殖和分化。

胰岛素对脂肪干细胞生长因子分泌功能的影响

目的了解不同浓度胰岛素对脂肪于细胞（ADSC）分泌生长因子功能的影响。方法获取人腹部脂肪组织分离培养ADSC，选择第3代细胞经免疫表型鉴定及脂源性诱导分化鉴定。根据培养液中胰岛素浓度，将ADSC分为1×10^-8、1×10^-7、1×10^-6mol／L3个实验组，常规培养至70％融合时，更换为含不同浓度胰岛素的无血清DMEM培养液培养3d。设无胰岛素培养液培养的ADSC为对照组。采用酶联免疫吸附测定法，测定ADSC的血管内皮生长闪子（VEGF）、肝细胞生长因子（HGF）分泌量；应用噻唑蓝比色法和羟脯氨酸比色法，检测ADSC上清液对Fb增殖及胶原合成的影响。结果1×10^-8、1×10^-7mol／L胰岛素组ADSC的VEGF、HGF分泌量分别为（471±41）、（762±66）ng／L和（643±64）、（930±67）ng／L，与对照组（286±47）、（577±84）ng／L比较，其含量显著增加（P〈0．05或P〈0．01）；而1×10^-6mol／L胰岛素组ADSC的VEGF、HGF分泌量无明显变化（P〉0．05）。1×10^-8、1×10^-7mol／L胰岛素组ADSC培养上清液有明显的促Fb增殖及胶原合成作用，以1×10^-7mol／L组作用更显著（P〈0．05或P〈0．01）。结论1×10^-8、1×10^-7mol／L胰岛素能显著促进ADSC分泌VEGF和HGF。

牙周膜成纤维细胞-富血小板胶的合成及其成骨活性表达的研究

目的:体外合成牙周膜成纤维细胞-富血小板胶(Periodontal ligament fibroblasts-Platelet-Rich Plasma gel,PDLFs/PRP-gel)并探讨其在临床应用中最佳植入时间。方法:体外合成PDLFs/PRP-gel;并测定其碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)含量;免疫组化法检测基质中骨涎蛋白(Bone sialoprotein,BSP)、骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)含量;Von Kossa染色法观察沉积钙盐。结果:PDLFs/PRP-gel基质内第6d时ALP含量明显增高,第8～10d达到峰值,11d后迅速下降,与对照组比较差异有统计学意义。基质内骨桥蛋白在15～16d时表达明显,与其他时间的实验组比较有统计学差异;骨涎蛋白在4～6d和15～18d时表达明显,与其他时间的实验组比较有统计学差异。PRP-gel缓释液培养的人牙周膜成纤维细胞约在第15d时出现钙化结节。结论:临床牙周组织再生术中宜选用在体外培养8～15d的PDLFs/PRP-gel进行植入。

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导向神经元样细胞分化的实验研究

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）离体分离和培养方法，探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮生长因子（EGF）、全反式维甲酸（RA）、神经营养因子（BDNF）在体外诱导BM—SCs向神经元样细胞分化的作用。方法采用出生3周SD大鼠的全骨髓细胞进行培养，传至第3代时，分为三组：A组，bFGF＋EGF＋RA进行诱导分化；B组，BDNF＋RA进行诱导分化；C组，RA诱导分化。在倒置显微镜下每日观察、记录BMSCs的诱导分化情况，并应用免疫细胞化学技术对细胞进行兔抗神经元特异性烯醇化酶（NSE）单抗鉴定。结果A组诱导5d后有大部分细胞具备神经元样细胞形态，胞体呈锥形或圆形，有较长单极或多极的突起，有NSE阳性细胞表达。而B组可有部分NSE阳性细胞、C组细胞有少量NSE阳性细胞。结论bFGF＋EGF＋RA、BDNF＋RA和RA均可在诱导BMSCs向神经样元细胞分化，bFGF＋EGF＋RA组更优于和BDNF＋RA组及RA组。