香芪生乳合剂的HPLC指纹图谱建立

目的:建立香芪生乳合剂HPLC-DAD法指纹图谱分析方法。方法:采用ACE EXCEL C_(18)-AR(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为203 nm,进样量为10μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本2004A)”分别对10批香芪生乳合剂的指纹图谱进行相似度评价,将对照图谱与单味药材进行色谱峰匹配,确定共有峰归属,结合混合标准溶液图谱对其共有峰成分进行指认。结果:10批香芪生乳合剂指纹图谱与对照图谱的相似度大于0.96,有36个共有峰,所有共有峰都能归属到单味药材。结论:建立的香芪生乳合剂HPLC指纹图谱可体现该复方中药制剂中多类成分的整体特征,为该制剂的质量控制提供方法依据。

维血宁的HPLC指纹图谱研究

目的建立维血宁的高效液相色谱指纹图谱。方法采用HPLC法,以虎杖苷、大黄素-8-O-β-D葡萄糖苷、大黄素甲醚-8-O-β-D葡萄糖、大黄素和大黄素甲醚为内参照物,色谱柱为Accurasil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-1mL·L-1磷酸水(梯度洗脱),检测波长为280nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,分析时间为90min。结果在HPLC指纹图谱中确定了5个主要共有峰,建立了维血宁的对照图谱。相似度比较结果显示,10批维血宁的对照图谱相似度均大于0.900。结论采用HPLC方法建立维血宁指纹图谱,方法稳定、可靠、简便,色谱图展现的各峰分离度较好,特征明显,可作为维血宁真伪鉴别标准,为维血宁的质量评价提供参考依据。

满天星试管苗与其玻璃化苗的RAPD指纹图谱分析

采用分离群体分组分析法(BSA),用100个随机引物对满天星的正常苗和玻璃化苗进行RAPD分析的结果表明,7个随机引物扩增出多态性差异条带。再用上述7个引物分别对试管苗及其玻璃化苗个体进行DNA的PCR扩增的结果显示,引物J20在2种苗中出现差异条带。

引起血流感染常见的革兰氏阴性杆菌蛋白指纹图谱的建立

目的建立引起血流感染的临床常见革兰氏阴性杆菌的蛋白指纹图谱,为血流感染快速诊断奠定基础。方法在血培养分析仪报阳后8小时内抽取报阳血培养基3 ml,经离心、红细胞裂解液溶解红细胞及无菌去离水洗涤后,留取细菌悬液,应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(surface-enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrome-try,SELDI-TOF-MS)和Au蛋白芯片检测细菌蛋白,采用Ciphergen Proteinchip软件自动采集数据。每个标本重复测定4次评价SELDI-TOF-MS检测细菌蛋白的重复性。结果在分子量5～20 kD范围内不同种细菌具有不同的蛋白指纹图谱;同种细菌具有相似的蛋白指纹图谱,主要蛋白峰分子量的变异系数<0.1%;同一株细菌蛋白指纹图谱具有很好的重复性,主要蛋白峰分子量的变异系数<0.05%。结论在分子量5～20 kD范围内不同种细菌具有特征性蛋白指纹图谱,为血流感染病原菌的快速鉴定提供了新思路。

北豆根饮片HPLC指纹图谱研究

目的 采用高效液相色谱法建立北豆根饮片的指纹图谱。方法 以北豆根饮片为分析对象,用 phenomenexC18(4 6mm× 15 0mm,5 μm)色谱柱,采用乙腈和 0 2 %磷酸水溶液线形梯度洗脱,流速 1ml·min-1,检测波长为 2 84nm,建立了 10批北豆根饮片样品的指纹图谱。结果 北豆根饮片指纹图谱共检出 33个共有峰,其精密度、稳定性、重复性均符合 中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行) 中的有关规定。结论 HPLC指纹图谱分析法可简便快速地用于北豆根饮片的质量评价。

毛竹黄、白笋个体的RAPD指纹图谱分析

报道了由37个随机引物扩增出的毛竹黄、白笋个体RAPD指纹图谱,从分子水平上证实了毛竹黄、白笋 个体存在真实的遗传差异。其中,29个引物在毛竹黄、白笋上扩增出相同的谱带,反映出两者在遗传背景上存在 一定的相似性;其余8个引物扩增出具有不同大小的多态性片段的RAPD谱带,反映出两者遗传上的差异。

临床常见葡萄球菌蛋白指纹图谱的建立

目的建立临床常见三种葡萄球菌的蛋白指纹图谱,为其快速诊断奠定基础。方法收集临床常见葡萄球菌包括金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及溶血性葡萄球菌,利用16S rDNA测序技术对其进行鉴定;表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF MS)技术检测其蛋白表达,采用Ciphergen Protein chip软件自动采集数据。评价该检测方法的重复性及细菌蛋白表达的稳定性。结果在分子量3 000～20 000 Da范围内,3种葡萄球菌有各自特异的蛋白指纹图谱;SELDI-TOF MS检测细菌蛋白的孔间重复性和芯片间重复性好,同一株细菌4次重复的蛋白指纹图谱相似;同种细菌不同株之间蛋白指纹图谱表达稳定,共有蛋白峰分子量变异系数≤0.5%。结论在分子量3 000～20 000 Da范围内,各细菌蛋白指纹图谱差异明显,为细菌的快速鉴定提供了新方法。