患骨肿瘤黑熊血清蛋白的电泳分析

为了黑熊疾病的诊断与治疗,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法分离正常黑熊、患骨肿瘤黑熊个体的血清蛋白,结果表明:从正常黑熊个体血清蛋白中共分离出17条谱带,从患骨肿瘤黑熊个体血清蛋白中共分离出19条谱带;正常黑熊个体和患骨肿瘤黑熊个体的血清蛋白在电泳迁移率为0.21、0.23、0.27、0.29、0.35、0.37、0.43、0.44、0.47、0.54、0.56、0.60、0.62、0.64、0.67位置处的谱带分布一致;正常黑熊个体血清蛋白在电泳迁移率为0.38、0.48位置处有谱带分布,患骨肿瘤黑熊个体血清蛋白在这两处缺失,在电泳迁移率为0.22、0.25、0.26、0.33位置处的谱带为患骨肿瘤个体所特有;正常黑熊个体和患骨肿瘤黑熊个体部分相同谱带血清蛋白的活力存在差异。

两种样品制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳分离效果的影响

目的评价两种样品制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响,建立高分辨率、高重复性的血清2-DE图谱,为鉴定疾病相关血清蛋白质奠定基础。方法分别用热SDS法和直接溶解法处理大肠癌血清样品,采用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离总蛋白质,图像软件分析后,对其中3个差异蛋白质点行基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱鉴定。结果应用热SDS法处理血清总蛋白质进行双向电泳,可获得分辨率高、重复性好的人血清双向电泳图谱。对直接溶解和热SDS法处理的蛋白样品进行3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数为675±46和702±49,平均匹配点数为573±42和623±52,匹配率为85.3%和89.6%,分析3块不同胶间蛋白质点在IEF方向的位置偏差为(0.85±0.30)mm和(0.81±0.28)mm,在SDS-PAGE方向上的偏差为(1.02±0.18)mm和(0.97±0.12)mm。热SDS处理的2-DE胶蛋白质点质谱可获得高质量质谱图,并可以检测到相对低丰度的血清蛋白质。结论热SDS法是一种更有效的血清蛋白质样品制备方法,我们利用热SDS法处理血清样品建立了分辨率较高且重复性好的人血清蛋白质双向凝胶电泳图谱。

雌核发育草鱼近交F_1代的生化遗传特性

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,对雌核发育草鱼近交F1代、同龄正常两性生殖草鱼、鲤的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶 (EST)、超氧化物歧化酶 {SOD}以及血红蛋白、血清蛋白进行了分析。结果表明 ,雌核发育草鱼近交F1代EST、SOD同工酶以及血红蛋白电泳图谱与正常两性生殖草鱼电泳图谱存在有一定差异 ;

血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白去除方法的建立

目的建立血清蛋白质组学研究中高丰度蛋白的去除方法并评价其去除效果。方法应用Sigma公司2006年最新推出的血清白蛋白和IgG去除试剂盒(ProteoPrep Immunoaffinity Albumin and IgG Depletion Kit)去除血清中高丰度的白蛋白和IgG等,再用双向凝胶电泳(2-DE)分析去除的效果。结果本实验建立的血清中高丰度蛋白的去除方法,约95%的白蛋白和IgG能够被去除,2-DE图谱中蛋白质点更加清楚,部分低丰度蛋白得以显现。结论成功建立血清中高丰度蛋白的去除方法,可为今后的血清蛋白质组学研究奠定基础。

新疆4个品种绵羊群体遗传结构的研究

采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对巴什拜羊(43只)、哈萨克羊(41只)、中国美利奴羊(新疆军垦型)(42只)、罗姆尼羊(45只)的3个血清蛋白位点进行了多态性分析,计算了血清转铁蛋白(Tf)、酯酶(Es)及白蛋白(Alb)的基因型和基因频率及各位点的杂合度、群体平均杂合度及群体信息度。结果表明:4个品种绵羊在3个位点均为多态,在多态座位中Tf、Alb和Es分别出现了4、3和3种表型,分别受4、2和2个共显性等位基因控制。χ2检验显示,4个品种绵羊在3个座位上均处于哈代—温伯格平衡状态(P≥0.05),并且均表现出较高的杂合度,其值分别是:巴什拜羊0.5881、中国美利奴羊(新疆军垦型)0.5352、哈萨克羊0.5290、罗姆尼羊0.4964。

臭鼩血清蛋白和六种组织乳酸脱氢酶同工酶的研究

本实验对臭鼩的血清蛋白及心肌、骨骼肌、肾脏、脾脏、肝脏,睾丸6种组织器官的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶进行了聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳的分析研究。臭鼩血清蛋白存在15—17条带,各组织的LDH同工酶均由5条带构成,其中心肌LDH-1、LDH-2和肾脏LDH-1各出现1条亚带。

双向电泳分离技术的比较和优化

目的:比较优化人血清蛋白双向电泳(2-DE)分离技术,提高2-DE对血清蛋白的分辨能力。方法:收集健康人群标本,分别进行多次双向电泳,比较高丰度蛋白的去除前后及传统的考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色两种不同的染色方法等因素对双向电泳图谱质量的影响。结果:考马斯亮蓝染色和SYPRO-ruby荧光染色相比,血清2-DE图谱检测到平均蛋白质点数分别是(324±25)(n=3)和(785±30)(n=3);去除高丰度蛋白前后比较,未做处理的血清、去除蛋白和IgG血清的2-DE图谱检测到平均蛋白点数分别是(501±25)(n=3)和(813±22)(n=3)。结论:去除高丰度蛋白并结合SYPRO-ruby荧光染色可以大大提高血清低丰度蛋白的解析能力。此方法优化了血清蛋白质2-DE技术,为进一步开展疾病血清蛋白质组研究奠定了基础。

兴国红鲤、草鱼及其杂种一代血清蛋白质的电泳分析

用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳分析了兴国红鲤、草鱼及其杂种一代的血清蛋白。结果表明,它们各有不同的电泳图谱,杂种一代为双亲的嵌合型,相对而言,MA带偏向母本,MI带偏向父本。

血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱对肿瘤诊断与疗效监测的价值

目的探讨血清蛋白电泳图谱用于肺癌等恶性肿瘤诊断和疗效监测的价值。方法圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)用于血清蛋白检测。结果某些PAGE血清蛋白谱型为肿瘤患者所特有。肺癌、消化系肿瘤、卵巢癌和肾癌血清PAGE特异图谱阳性率均高于80%。肺癌患者治疗前后血清蛋白PAGE图谱有显著改变。结论血清蛋白PAGE图谱可用于肺癌等肿瘤的辅助诊断和疗效监测。

虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、溪红点鲑(Salvelinus fontinalus)及杂交种(虹鳟♀×溪红点鲑♂)血清蛋白多态性的研究

利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对虹鳟、溪红点鲑及杂交种(虹鳟♀×溪红点鲑♂)的进行了血液蛋白多态性研究,计算了各座位的基因频率、基因纯合度和Shannon信息指数,并探讨了群体间的亲缘关系和遗传距离。结果表明:(1)3个种群在α球蛋白、β1球蛋白、γ-球蛋白、前白蛋白和白蛋白5个座位上的遗传差异较大,血清蛋白座位的优势基因在不同群体中有不同的频率;(2)杂交种中出现部分双亲特异条带,表明杂交种整合了虹鳟♀和溪红点鲑♂的遗传信息,属两性融合生殖,是真正意义上的杂交种。(3)杂交种与虹鳟和溪红点鲑的遗传相似性系数分别为0.718和0.575,遗传距离分别为0.332和0.554,表明杂交种与两亲本的遗传差异不是对等的,而是偏向母本一方,U PGMA系统树也同样证明了这一点。

聚丙烯酰胺凝胶电泳分析615纯系小鼠血清蛋白

目的：根据各种蛋白质在一定的泳动条件下，都有一定的相对迁移率不同的特点，分析６１５ 纯系小鼠血清中的蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶上的分布，进行了定位分析。方法：采用高ｐＨ 不连续性聚丙烯酰胺凝胶电泳及蛋白质特殊染色法。结果：６１５ 鼠血清蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶上可分离出１３ ～１５ 条区带，脂蛋白３ 条、白蛋白２ 条、糖蛋白５ 条、铜蓝蛋白１ 条、血红蛋白１ 条、结合珠蛋白３ 条。根据每种蛋白质的Ｒｍ 值定位顺序从阳极到阴极依次为１ ．糖蛋白、２．脂蛋白、３ ．白蛋白、４．脂蛋白、５ ．糖蛋白、６ ．巨球蛋白（ 根据其它资料） 、７ ．铜蓝蛋白、８ ．结合珠蛋白、９ ．Ｈｂ、１０ ．运铁蛋白（ 根据其它资料）、１１ ．脂蛋白、１２ ～１４ ．均为糖蛋白。光密度扫描６１５ 鼠血清蛋白质相对面积比分别为白蛋白为４８－４、α１ 球蛋白为６－９、α２ 球蛋白２３－８ 、β球蛋白为５－０ 、γ球蛋白为１３－８ 。结论：６１５ 鼠血清蛋白质的定位分析对于６１５ 鼠可移植性淋巴细胞型白血病鼠的蛋白质研究具有一定的实际意义，利用Ｒｍ 值来作蛋白质定位分析简单易行，关键在于掌握实验条件的恒定。

华南虎、金钱豹、云豹血清蛋白和LDH同工酶的电泳研究

本文报道了华南虎、金钱豹、云豹的血清蛋白和LDH同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱和扫描曲线。分析结果表明:华南虎、金钱豹和云豹的血清蛋白电泳可分辨的区带数分别为13、14、13。在各区带的相对迁移率及含量方面显示出动物体蛋白在物种间存在着差异。3种动物血清LDH同工酶谱带均为5条,但仍各具特征性电泳图谱,且LDH同工酶表型分析结果提示,华南虎与金钱豹的电泳图谱较为接近。

妊娠过程中血清蛋白的动态变化

利用聚丙烯酰胺凝胶(PAG)电泳分离技术对266份不同孕期的正常孕妇和妊娠高血压综合征病人的血清蛋白电泳图谱进行了分析。在266份图谱中发现41个染色深度有变化的组分,代表血清蛋白含量的变化。在正常中期妊娠电泳图谱中少数呈1个或2个“V”形异常成分位于P区或O段、M段,其意义尚难肯定。在妊娠高血压综合征病例中没有发现特异性异常蛋白,但血清前白蛋白、白蛋白减少与T-77组分增多和同期正常孕妇相比有显著差异(p<0.05)。

盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验的几点改进

对盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验提出了几点改进,以满足本科生实验的要求。实验主要比较和分析了两种封胶方法(原胶布封胶与改进的琼脂糖封胶)和两种染色方法(原考马斯亮蓝染色法与改进的考马斯亮蓝染色法)对凝胶分离血清蛋白实验的影响。结果显示,改进的盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法是一种灵敏、快速、简便、安全、分辨率高的实验方法。结论:改进的盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离血清蛋白实验非常适合本科生实验。

猪血清中抗猪丹毒丝菌特异性IgG的纯化

为了获得纯度高、特异性好的抗猪丹毒丝菌特异性IgG,采用抗原反向吸附结合重组葡萄球菌蛋白A(SPA)亲和层析法对猪丹毒丝菌阳性血清进行纯化。结果表明,血清用量对IgG的纯化结果影响不大,而细菌的用量则与IgG的获得量成正比;用猪丹毒丝菌与阳性血清吸附,初步纯化出的猪丹毒丝菌特异性IgG,再用SPA亲和层析法特异性的浓缩和纯化IgG,获得的抗体含量为240μg/mL,即从8 mL阳性血清中获得360μg猪丹毒丝菌特异性IgG,其纯度接近100%,可用于噬菌体展示的靶分子。

药物处理心肌缺血大鼠有效性的研究

现代生物学表明,所有生物性状的变化是基因表达变化的结果.双向电泳是目前蛋白质常规分析技术中分辨率较高的方法.采用双向电泳技术分析了正常大鼠、心肌缺血模型大鼠、药物处理后的大鼠的血清蛋白组的差异,从而探讨利用双向电泳技术分析药物处理的有效性.

几种鲑鳟鱼血清蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究

采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与北极红点鲑处于同一亚组,而溪红点鲑独处于另一亚组。研究结果表明硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的亲缘关系远于与北极红点鲑的关系;同时还表明,以聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鲑鳟鱼血清蛋白的方法简单易行、重复性好。本研究结果对鲑鳟鱼的种属鉴定、良种选育、品种改良和遗传结构分析提供了试验依据;虹鳟的繁养殖需进一步规范化和标准化,减少蛋白遗传基因的流失,从根本上预防大规模疾病的暴发。

山猪血清蛋白质多态性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析研究

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了山猪血清蛋白质生化位点多态性的分布.结果表明,前白蛋白Pa、白蛋白Alb、后白蛋白Po可分离出4～6条区带,转铁蛋白Tf分离出2～3条区带.白蛋白的平均分子量约为69000Da,转铁蛋白的平均分子量约为88000Da.用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质重复性较好,分辨较高,测定蛋白质的多态性和分子量的变化对分析猪的遗传特征、选育优良品种和诊断诸多疾病有重要意义.

肺癌患者与肺结核患者血清蛋白的电泳分析

采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色的方法,对58例肺癌患者和32例肺结核患者的血清蛋白进行比较分析,发现有五种特异蛋白,分别存在于A区、C区、F区和G区。肺癌组和肺结核组比较,存在极显著性差异(P<0.01),提示有早期诊断肺癌的价值,有可能成为临床诊断肺癌的一个重要参考指标。

鱼血清蛋白质的微型双相电泳分析

本文采用改进的微型双相电泳系统，对兴国红鲤、草鱼及其杂交鱼血清蛋白质进行了分析，获得较清晰而稳定的结果，分析得出杂交鱼的血清蛋白质的组成更接近于父本草鱼。实验表明微型双相电泳是进行鱼类血清蛋白质分析的灵敏而有效的方法。