血小板反应蛋白-1敲除对放射性肺纤维化的影响及其机制

目的探讨血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)对放射性肺纤维化的影响及其可能机制。方法选取6~8周龄雄性野生型C57BL/6小鼠(wild type,WT)和全身性敲除TSP-1小鼠(TSP-1^(-/-)),将小鼠分为野生辐照组(WT+IR)和TSP-1敲除辐照组(TSP-1^(-/-)+IR),每组各6只。采用60 Coγ射线全肺照射16 Gy建立放射性肺纤维化小鼠模型。照射后第16周,HE染色观察小鼠肺组织形态变化,天狼猩红染色观察肺组织胶原表达水平,qRT-PCR法检测小鼠肺组织中TGF-β1和CollagenⅠ的mRNA表达水平,micro-CT评价肺损伤和肺实变情况,FlexiVent系统评价小鼠肺功能水平,免疫荧光染色检测肺组织LC-3和p62的蛋白表达,透射电镜观察肺组织细胞自噬体。结果与野生辐照组相比,TSP-1敲除辐照组小鼠肺损伤减轻,肺组织胶原沉积减少,TGF-β1和CollagenⅠ的mRNA表达水平显著降低(P<0.01),肺功能水平有所改善。免疫荧光和透射电镜结果显示TSP-1敲除辐照组小鼠肺组织出现细胞自噬。结论TSP-1敲除能够减轻放射性肺纤维化,其机制可能与细胞自噬激活有关。

小鼠肺功能测定及其在放射性肺损伤中的应用

目的使用FlexiVent动物肺功能仪测量放射性肺损伤小鼠的各项肺功能参数,为评估放射性肺损伤模型小鼠肺功能变化情况提供数据支撑。方法170只C57BL/6小鼠随机分为对照组和辐照组,对照组再分为C0W组和C24W组,辐照组小鼠胸部经钴源一次性总剂量为15 Gy的γ射线照射后随机分为F8W组、F16W组和F24W组,测量小鼠体质量和肺功能指标,并对肺组织进行HE染色,观察肺组织病理改变。结果与C0W组相比,C24W组小鼠体质量、深吸气量、呼吸系统阻力、呼吸系统顺应性、中央气道阻力和体积压力环面积明显增加(P<0.05),呼吸系统弹性、组织弹性、静态顺应性显著降低(P<0.05)。与C0W组相比,辐照组小鼠体质量无明显差异(P>0.05),F16W组小鼠深吸气量、呼吸系统阻力、静态顺应性和小气道阻力变化显著(P<0.05)。HE染色显示,辐照组小鼠肺泡间隔增厚和炎症细胞聚集。结论通过FlexiVent动物肺功能仪测定C57BL/6小鼠肺功能指标的参考值,可为呼吸系统疾病研究提供参考依据;其中深吸气量、呼吸系统阻力和静态顺应性等可以作为放射性肺损伤的观察指标。

慢性阻塞性肺疾病动物模型建立的评价

建立动物模型是研究慢性阻塞性肺疾病重要技术手段之一。目前建立慢性阻塞性肺疾病的动物模型有很多种,但其评价方式却是多种多样的。笔者对慢性阻塞性肺疾病动物模型评价体系进行综述,包括主要评价体系如病理切片和肺功能,还有能够提示建模成功的炎性细胞水平如中性粒细胞水平、巨噬细胞水平和T淋巴细胞水平等,也对一些炎性介质水平的增高进行了评价如MMP/TIMP、IL-8和IL-4,此外还纳入了较新的评价方法如超极化气体^(129)X核磁气血交换动力学胸部检测。