血管内皮生长因子和其受体Flt-1在青春期大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上的表达研究

目的:通过对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在大鼠睾丸、附睾及附睾内精子上表达的研究,探讨其在雄性生殖系统中的作用。方法:免疫组化SP法和免疫荧光法检测20只青春期SD大鼠睾丸、附睾及精子上VEGF和Flt-1蛋白的表达情况。结果:VEGF和Flt-1在大鼠睾丸和附睾组织及精子上均有特征性表达。睾丸内VEGF蛋白表达于生精细胞、精子细胞发育中的顶体、Sertoli和Leydig细胞胞质内;Flt-1只见于精子细胞发育中的顶体及Leydig细胞胞质中。附睾中VEGF表达于各段上皮主细胞胞质内,而Flt-1表达于头、尾段上皮主细胞胞质内,体部免疫染色阴性;两者在附睾上皮亮细胞、晕细胞和基细胞中均为阴性表达。免疫荧光染色显示,VEGF和Flt-1共同定位于附睾内精子头部的顶体,尾部的颈、中和主段。结论:VEGF和Flt-1蛋白在大鼠睾丸、附睾及精子中的特异性表达提示,他们可由不同生精上皮细胞、间质细胞和附睾主细胞产生,可能以自分泌或旁分泌的形式单独或共同作用于睾丸和附睾的生殖细胞或Leydig细胞,直接或间接地影响精子的发生、发育和成熟过程,并与精子的活动和受精能力有关。

Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1在结直肠癌中的表达及临床意义

背景与目的:近年来的研究表明,多种生物学指标与结直肠癌发生、发展以及手术后的复发转移、预后有关。本研究旨在探讨人结直肠癌组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达与各临床病理参数及预后的关系及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法,检测72例结直肠癌组织及其对照癌旁正常黏膜组织中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1表达的状况,分析其与临床病理参数及复发转移的关系。结果:在结直肠癌中Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF及其受体Flt-1的表达率分别为62.5%(45/72)、66.7%(48/72)、55.5%(40/72)、61.1%(44/72)、79.2%(57/72),均显著高于对照癌旁正常黏膜组织(P<0.01)。Survivin表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期及术后复发转移有关;MMP-2表达与淋巴结转移、TNM分期、术后复发转移有关;nm23-H1表达与淋巴结转移、TNM分期相关;VEGF表达与浸润深度、TNM分期及术后复发转移有关;而受体Flt-1表达与临床病理及预后因素均无关。结论:Survivin、MMP-2、nm23-H1、VEGF与结直肠癌的发生、发展密切相关,联合检测多个相关基因的表达能更准确地判断结直肠癌的生物学特征及预后判断。

胃癌组织VEGF,Flt1,bFGF,P^(53)表达与胃癌预后的关系

目的:探讨胃癌中VEGF,Fltl,bFGF,P53的表达及意义方法:应用SABC免疫组化法,研究VEGF,Fltl,bFGF, P53在胃癌中表达及与胃癌生长转移、临床病理特征、预后的关系. 结果:胃癌VEGF表达与肿瘤浸润深度有关(浆膜、浆膜外vs 肌层和黏膜层,P<0.01).P53表达与淋巴结转移相关(P53 阳性淋巴结转移组vs P53阴性淋巴结无转移组,P<0.05). VEGF与Fltl表达呈正相关(VEGF表达在Fltl阳性组vs在Fltl阴性组,P<0.01);影响胃癌预后的因素有临床病理分期、VEGF表达、肿瘤浸润深度、手术方式.Kaplan-Meier 研究显示VEGF表达与胃癌生存预后相关(P<0.05).Fltl, bFGF,P53表达与生存预后无关(P>0.05). 结论:P53表达与淋巴结转移相关.VEGF表达与肿瘤浸润深度和胃癌生存预后相关,VEGF表达可作为预测胃癌预后一项很好的指标.

血管内皮生长因子及其Flt-1受体在白血病细胞中的表达

目的 探讨人白血病细胞系血管内皮生长因子 (VEGF)及其Flt 1受体的表达 ,进一步阐明VEGF在白血病细胞异常增殖中的作用机制。方法 以人脐静脉血管内皮细胞系ECV3 0 4作为对照 ,采用RT PCR半定量技术和免疫组化检测体外培养的人白血病细胞系K5 62和HL 60中VEGF及Flt 1的表达。采用MTT试验观察VEGF反义寡核苷酸 (VEGF AS)对白血病细胞体外增殖的影响。结果 K5 62和HL 60细胞同时表达VEGF和Flt 1mRNA和蛋白。VEGF AS能够抑制白血病细胞体外增殖。结论 在白血病细胞异常增殖中自分泌VEGF可能起着重要作用。

补阳还五汤对早期糖尿病肾病患者血管内皮生长因子及其受体Flt-1的影响

目的:探讨补阳还五汤对早期糖尿病肾病患者血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(Flt-1)的影响。方法:将60例早期糖尿病肾病患者随机分为治疗组和对照组,两组均用西药常规治疗,治疗组加服补阳还五汤。采用酶联免疫法检测各组血清VEGF及其受体Flt-1水平。结果:治疗组血清VEGF及其受体Flt-1水平较治疗前明显下降(P<0.05),24 h尿蛋白量较治疗前明显下降(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。VEGF、Flt-1与尿蛋白呈正相关。结论:VEGF及其受体Flt-1在早期糖尿病肾病发病机制中起重要作用,补阳还五汤可降低早期糖尿病肾病患者血清VEGF及其受体Flt-1蛋白表达,是其保护肾功能的可能作用机制之一。

可溶性VEGF受体FLT-1克隆、表达及其对血管生成的抑制作用

目的 :克隆VEGF受体sFLT 1片段 1 3区 ,并使之在原核中进行表达以探讨其对内皮细胞增殖和血管生成方面的抑制作用。方法 :提取脐静脉血管内皮细胞总RNA ,克隆sFLT 1基因 1 3区 ,并使之在QIA表达系统进行表达 ;Ni2 + Sepharose6B亲和层析纯化、复性。应用MTT和鸡胚绒毛尿囊膜血管生成模型 ,探讨重组蛋白对血管生成的抑制作用。结果 :该表达系统能表达sFLT 1基因片段 ,表达量低。纯化后 ,经复性 ,sFLT 1具有与VEGF特异结合功能 ,1μg重组sFLT 1蛋白能抑制 10ngVEGF诱导的脐静脉内皮细胞增殖和 2 0ngVEGF诱导的鸡胚绒毛尿囊膜血管生成。结论 :sFLT 1基因片段能在QIA表达系统中得到表达 ,复性后重组蛋白具有与VEGF结合和拮抗VEGF生物学活性的功能。

人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外区2-3loop在Pichia.pastoris酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究

目的 :研究人Flt 1胞外区 2 3loopcDNA在Pichia pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt 1(2 3)。方法 :采用PCR扩增Flt 1(2 3)基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母表达载体中 ,构建重组质粒pPIC9K Flt 1(2 3) ,转化酵母宿主菌GS115 ,筛选His+ Muts 表型转化子 ,摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。表达产物经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,测定其生物学活性。结果 :SDS PAGE分析显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4d的表达量达上清总蛋白的 6 0 %以上。ELISA及Westernblot实验表明 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,Flt 1(2 3)纯度达到 90 %以上。生物学活性检测证实其具有结合hVEGF1 6 5 的能力和抑制hVEGF1 6 5 对HUVEC的促增殖功能。结论 :获得了具有生物学活性的可溶性重组Flt 1受体胞外区 2 3loop小片段 ,为进一步的动物实验和临床应用打下了基础。

艾灸头部组穴对VD大鼠脑内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mRNA表达的影响

目的观察艾灸头部组穴治疗血管性痴呆(VD)大鼠皮层、海马内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mR-NA表达,研究艾灸调控VD脑内血管新生机制。方法选取Wistar雄性老年大鼠,四血管阻断法制备大鼠VD模型,电脑随机数字表法随机分为艾灸组、西药组、模型组,另设假手术组对照。艾灸组取百会、大椎、神庭穴艾灸治疗,西药组茴拉西坦灌胃共2个疗程。神经行为学评分并结合跳台仪检测治疗前、第2疗程后学习记忆成绩;RT-PCR检测各组大鼠皮层、海马内VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mRNA的表达水平。结果经2个疗程治疗后,动物跳台实验的潜伏期、错误次数,以及神经行为学评分,艾灸组、西药组与模型组均有非常显著差异,表明艾灸、西药在提高VD大鼠潜伏期,降低VD大鼠错误次数以及对神经行为学评分影响均有明显疗效,且艾灸组明显优于西药组。与模型组相比,艾灸组皮层内VEGF及其受体Flt-1 mRNA的表达有明显差异,海马内VEGF及其受体Flk-1 mRNA的表达有显著差异;而西药组仅显示海马内VEGF或皮层Flt-1表达上调,没有观察到同一脑区VEGF及其受体同步明显表达。结论艾灸在改善VD大鼠学习记忆成绩、神经行为学评分的同时,通过调控VEGF及其受体Flt-1、Flk-1 mRNA的表达水平,促进了要害部位的血管生成,并最终激发了脑内神经的损伤修复机制。

Kai-1、Flt-4和Tiam-1在预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移中的价值

目的:探讨Kai-1、Flt-4(fms样酪氨酸激酶4)和Tiam-1(T淋巴瘤侵袭转移基因)在甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移中的作用,寻找预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移的分子标志物。方法:用免疫组织化学方法检测102例甲状腺乳头状癌Kai-1、Flt-4和Tiam-1表达情况,比较它们在甲状腺乳头状癌伴颈部淋巴结转移组和无转移组间的表达差异;对52例无淋巴结转移患者进行随访,了解术后颈部淋巴结转移发生率,评估Kai-1、Flt-4和Tiam-1在预测甲状腺乳头状癌伴淋巴结转移的价值。结果:甲状腺乳头状癌Kai-1、Flt-4和Tiam-1阳性率分别为61%、49%和84%,表达率均与颈部淋巴结转移有关(均P<0.01);Kai-1、Flt-4和Tiam-1表达呈正相关性;Kai-1、Flt-4和Tiam-1在预测甲状腺乳头状癌淋巴结转移的敏感度分别为90%、66%和94%,特异度分别为67%、67%和25%,准确度分别为78%、67%和49%;Kai-1在术后发生淋巴结转移组的表达率显著高于术后无淋巴结转移者。结论:Kai-1、Flt-4和Tiam-1表达异常可能与甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移有关,检测Kai-1和Flt-4表达情况有助于预测甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移。

当归对大鼠缺血性脑损伤后Flt-1、Flk-1mRNA表达的影响

目的:研究大鼠缺血性脑损伤后不同时间点Flt-1、Flk-1mRNA的表达及当归对其表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠,随机分为缺血损伤组和当归治疗组。采用线栓法制作大鼠短暂性大脑中动脉阻断(MCAO)与再灌模型,治疗组腹腔注射当归注射液(剂量5g/kg)。36只大鼠(每组各18只)在脑缺血/再灌后1d、3d、7d神经行为学评分完成后被处死,取大脑行氯化三苯四唑(TTC)染色以测脑梗死比;另取72只大鼠(每组各36只)在脑缺血/再灌后3h、6h、12h、1d、3d、7d分别被处死,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测缺血侧Flt-1、Flk-1mRNA的表达。结果:在同时间点神经功能缺损评分比较,缺血损伤组明显高于当归治疗组(P<0.05);在同时间点当归治疗组梗塞比明显小于缺血损伤组(P<0.01)。RT-PCR检测表明,缺血损伤组Flt-1、Flk-1mRNA在缺血/再灌后3h即开始表达增强,于3d达高峰,后逐渐降低;当归治疗组Flt-1、Flk-1mRNA表达比缺血损伤组明显增加,于3d达到高峰后缓慢降低至第7d仍保持较高水平。缺血损伤组和当归治疗组中Flt-1mRNA与Flk-1mRNA的表达呈正相关性,相关系数为r=0.957(P<0.01)。结论:当归可增强缺血性脑损伤后Flt-1、Flk-1mRNA表达。Flt-1、Flk-1mRNA的表达紧密相关。

血管内皮生长因子及受体Flt-1在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体Flt 1在膀胱癌血管生成中的作用及与膀胱癌分化程度的关系。方法采用免疫组化S P法对 4 0例膀胱癌及 5例正常膀胱组织中VEGF、Flt 1蛋白进行检测。结果VEGF及其受体Flt 1主要分布在膀胱癌组织血管内皮细胞和癌细胞胞质内 ,VEGF及Flt 1在G3(低分化 )膀胱癌血管内皮细胞和癌细胞中的表达高于G2 (中分化 )和G1(高分化 )并且明显高于正常组织 (P <0 0 1)。结论VEGF和其受体Flt 1与膀胱肿瘤的分级和分期密切相关 ,可以作为判断膀胱癌生长和浸润的指标之一。

电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质胎盘生长因子及其受体Flt-1 mRNA和蛋白表达的影响及其促进脑内血管再生的作用

目的观察电针对SD大鼠局灶脑缺血再灌注后大脑皮质胎盘生长因子及其受体Flt-1 mRNA和蛋白表达的影响,探讨电针促进局灶脑缺血再灌注后脑内血管再生的可能机制。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血再灌注模型。将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、电针组,将模型组和电针组分为局灶脑缺血2 h再灌注1、3和7天三个亚组。取双侧"合谷"穴为电针刺激穴位。采用免疫组织化学法检测胎盘生长因子及其受体Flt-1蛋白在缺血区大脑皮质的分布及其表达;逆转录聚合酶链反应检测缺血区大脑皮质胎盘生长因子mRNA和Flt-1mRNA的表达;免疫印迹法定量检测缺血区侧大脑皮质胎盘生长因子蛋白的表达。结果与正常对照组比较,模型组和电针组各时间点缺血区大脑皮质胎盘生长因子mRNA和蛋白及Flt-1 mRNA和蛋白的表达增加(P<0.05);电针组各时间点缺血区大脑皮质胎盘生长因子mRNA和蛋白及Flt-1 mRNA和蛋白的表达比模型组增加更为明显(P<0.05)。结论电针上调了局灶脑缺血再灌注大鼠缺血区大脑皮质的胎盘生长因子和Flt-1的表达,胎盘生长因子/Flt-1可能促进脑缺血后脑内血管再生。

VEGF受体flt-1和KDR在骨髓间充质干细胞中的表达及意义

目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)受体flt1和KDR在成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的表达情况,探讨MSCs分化为血管内皮细胞的可能性。方法:采用Percoll(1.073g·mL-1)分离液分离骨髓单个核细胞,体外培养MSCs,流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度,在激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)下观察flt1和KDR的表达,RTPCR检测VEGF作用下flt1及KDR表达改变情况。结果:经Percoll分离、体外培养扩增的MSCs,细胞纯度可达95%左右;flt1和KDR定位于MSCs的胞膜及胞浆;经VEGF处理的MSCs和flt1mRNA的表达较对照组增强,KDRmRNA的表达无明显改变。结论:培养的MSCs在体外稳定扩增,具有VEGF受体,传导VEGF的刺激,在适宜的环境和诱导因子的作用下,MSCs有望分化为血管内皮细胞。

电针对急性脑梗死大鼠VEGF/Flt-1基因及其蛋白表达的影响

[目的]以大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠为研究对象,通过观察血管内皮生长因子及其受体(VEGF/Flt-1)基因及其蛋白表达的变化以探讨电针对急性脑梗死大鼠血管新生的干预机制。[方法]将120只Wistar大鼠随机分为3组,即空白组、模型组、电针组,模型组和电针组按术后3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、12 d各分为7个时相组,每时相各8只。各组造模后,电针组依时相进行电针人中穴的治疗。各组大鼠依时间段处死后,进行实时荧光定量聚合酶连反应(PCR)及免疫组化的检测。[结果]电针组VEGF/Flt-1的mRNA及蛋白表达均较模型组有显著上调。[结论]电针对急性脑缺血大鼠VEGF/Flt-1的表达有良性调整作用,可促进缺血半暗带的血管新生。

光活化的金丝桃素对大鼠C6胶质瘤抑制作用及其对VEGF、Flt-1和MVD的影响

目的 研究金丝桃素被光激活后对C6胶质瘤的抑制作用及其对VEGF、Flt 1和MVD的影响。方法 将接种C6胶质瘤细胞后的 4 0只Wistar大鼠随机分为 5组 ,空白对照组、高和低剂量金丝桃素作用组、高和低剂量金丝桃素 +光照组 ,16天后切取肿瘤组织 ,称重计算抑瘤率 ,标本用SP法免疫组化染色 ,检测瘤组织中VEGF、Flt 1和MVD。结果 (1)光照下 ,当金丝桃素为 0 .8μg ml时 ,抑瘤率为 6 7.2 % ,金丝桃素为 2 .0 μg ml时抑瘤率为 82 .4 % ,非光照金丝桃素组对肿瘤无抑制作用。 (2 )VEGF在各组大鼠C6胶质瘤组织中均有表达 ,表达值较高 ,各组间无显著性差异。空白对照组中Flt 1表达较高 ,且微血管计数最多。金丝桃素 +光照组中Flt 1蛋白表达和MVD明显低于非光照组及对照组 (P <0 .0 5 ) ,呈剂量依赖关系。Flt 1与肿瘤MVD呈正相关 ,rFlt 1=0 .78。结论 光激活金丝桃素对Flt 1有抑制作用 ,对VEGF表达没有影响。光激活的金丝桃素能抑制大鼠C6胶质瘤生长的机制 ,可能是抑制肿瘤组织中Flt 1后 ,阻止了VEGF发挥效应 ,抑制了肿瘤间质血管生成 ,而抑制肿瘤的生长。

补阳还五汤对脑出血大鼠脑内Flt-1和Flk-1蛋白表达的影响

目的:探讨补阳还五汤对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子受体VEGFR-1(Flt-1)和VEGFR-2(Flk-1)蛋白表达的影响。方法:SD大鼠90只,分为3组各30只,模型组及补阳还五汤组(中药组)采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血模型,假手术组(对照组)作为正常对照。术后中药组用补阳还五汤灌胃。3组均采用Westernblot法分析脑内Flt-1和Flk-1蛋白表达。结果:对照组未见Flt-1和Flk-1蛋白表达;模型组造模后1dFlt-1和Flk-1开始表达,持续增高至21d;中药组补阳还五汤干预后7、14及21d时Flt-1和Flk-1蛋白表达均高于模型组(P<0.01),Flt-1于21d达高峰,Flk-1于14d达高峰(均P<0.01)。结论:补阳还五汤能增强脑出血大鼠脑Flt-1和Flk-1蛋白表达,以促进脑组织修复。

左归丸上调雷公藤多苷诱导卵巢功能低下大鼠卵巢PLGF及Flt-1水平

目的观察左归丸对雷公藤多苷致卵巢功能低下(diminished ovarianresev,DOR)大鼠卵巢胎盘生长因子(placental growth factor,PLGF)及其受体(FMS-like tyrosine kinasel,FLT-1)表达的影响,进一步了解左归丸促进血管生成的作用机制。方法雷公藤多苷灌胃造成大鼠卵巢功能低下,造模成功后,分别给予蒸馏水20g/kg、左归丸11g/kg、左归丸33g/kg、结合雌激素65μg/kg灌胃治疗后,观察各组动情周期变化,计算卵巢、子宫指数,采用免疫组织化学法及Western blot法检测大鼠PLGF及其受体Flt-1水平。结果造模后大鼠动情周期延长,治疗后大鼠动情周期逐渐恢复至正常。与模型组比,各治疗组的卵巢、子宫指数增高;各治疗组PLGF、Flt-1水平明显增高。结论左归丸可以通过上调雷公藤多苷模型大鼠卵巢组织PLGF,FLT-1水平,促进卵巢血管的生成,从而改善卵巢储备功能。

电针对脑梗死患者血清VEGF/Flt-1、BDNF表达以及临床效果的影响

目的探讨电针对脑梗死患者血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、血管内皮生长因子受体1/fms样酪氨酸激酶1(VEGF receptor-1/fms-like tyrosine kinase-1,Flt-1)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)的表达以及临床效果的影响。方法收集医院诊治的急性脑梗死患者160例为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组(80例)与研究组(80例),对照组给予右旋糖酐常规治疗,研究组给予电针治疗。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测VEGF mRNA、Flt-1 mRNA的表达量;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清BDNF的水平;比较两组患者的临床治疗效果、神经功能缺损评分与ADL评分;采用ELISA法检测血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、超敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;检测患者脑血流动力学指标:颈总动脉的平均血流量(Qm)、平均血流速度(Vm)、外周阻力(Rv)、动态阻力(DR)。结果与对照组比较,研究组患者好转率、总有效率显著升高(P<0.05),无变化发生率与恶化率显著降低(P<0.05);治疗后,两组神经功能缺损评分显著降低(P<0.05),ADL评分显著升高(P<0.05),且对照组与研究组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,与对照组比较,研究组患者血清VEGF mRNA、BDNF的表达水平显著升高(P<0.05),Flt-1 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05),IL-1β、IL-6、hs-CRP、TNF-α水平显著降低(P<0.05),Qm、Vm水平显著升高(P<0.05),Rv、DR水平显著降低(P<0.05)。结论电针治疗能有效提高急性脑梗死患者血清VEGF、BDNF的表达水平及降低Flt-1的表达水平,可改善患者神经功能及脑血流动力学。

FLT-1启动子荧光素酶报告基因重组体的构建和鉴定

目的:为探索FLT-1启动子靶向调控活性分析,克隆FLT-1启动子基因序列,构建并鉴定FLT-1启动子调控的荧光素酶报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增FLT-1启动子序列,定向亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic-luc中,构建含有正确目的基因的报告基因重组体pGL3-FLT-Basic-luc,通过限性内切酶酶切、PCR及测序进行鉴定。结果:通过酶切鉴定及基因测定证明,所克隆的基因产物与预期结果一致,序列无碱基突变。结论:成功构建了含有FLT-1启动子基因序列的荧光素酶报告基因真核表达载体,为下一步分析该启动子活性及血管疾病的基因治疗奠定基础。

VEGF和Flt-1在精索静脉曲张大鼠附睾中的表达变化

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1在实验性左侧精索静脉曲张(ELV)大鼠附睾组织中的表达变化,探讨它们与精索静脉曲张(VC)的关系及致男性不育的病理生理学机制。方法建立青春期雄性SD大鼠ELV模型,采用免疫组化SP法检测ELV及对照组附睾中VEGF和Flt-1的表达。结果 VEGF和Flt-1蛋白在大鼠附睾中均有表达,并具有细胞和区域特异性。ELV4周时双侧附睾中VEGF蛋白的表达明显上调(P<0.01),8周时则显著下降(P<0.01);而Flt-1蛋白在ELV4周左侧显著下降(P<0.01),右侧未见明显差异(P>0.05),8周组均显著下降(P<0.01)。结论 ELV引起大鼠附睾中VEGF和Flt-1表达量发生变化,可能影响精子的成熟,是VC引起男性生育力下降甚至不育的原因之一。