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Confusing finding of quantitative fluorescent polymerase chain reaction analysis in invasive prenatal genetic diagnosis:A case report
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作者 Cui Chen Tao Tang +2 位作者 Qi-Ling Song Yong-Jun He Yan Cai 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2023年第28期6895-6901,共7页
BACKGROUND Quantitative fluorescent polymerase chain reaction(QF-PCR)is a rapid prenatal diagnostic method for abnormalities on chromosomes 21,18,and 13 and sex chromosomal aneuploidy.However,the value of QF-PCR in di... BACKGROUND Quantitative fluorescent polymerase chain reaction(QF-PCR)is a rapid prenatal diagnostic method for abnormalities on chromosomes 21,18,and 13 and sex chromosomal aneuploidy.However,the value of QF-PCR in diagnosing chromosomal structural abnormalities is limited.In this article,we report a confusing QF-PCR finding in a pregnant woman who underwent amniocentesis.CASE SUMMARY The short tandem repeat marker AMXY(Xp22.2/Yp11.2)located on the sex chromosome exhibited a trisomic biallelic pattern,indicating that the karyotype of the fetus might be 47,XYY.Chromosome analysis performed on cultured amniocytes showed a normal male karyotype of the fetus.Copy number variation sequencing confirmed a 500 kb duplication at Yp11.2-Yp11.2(chrY:6610001_7110000)and a 250 kb duplication at Yp11.2-Yp11.2(chrY:7110001_7360000).CONCLUSION In conclusion,the comprehensive application of different methods could achieve a higher detection rate and accuracy for the prenatal diagnosis of chromosomal disorders through chromosomal testing. 展开更多
关键词 quantitative fluorescent polymerase chain reaction Copy number variation sequencing Prenatal diagnosis Partial duplication KARYOTYPING Case report
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FQ-PCR检测乙型肝炎病毒DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项在乙肝诊断中的应用价值
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作者 柯秋莉 梁晓芳 户丹 《临床医学研究与实践》 2024年第23期110-113,共4页
目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)-DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项在乙肝诊断中的应用价值。方法选择2021年1月至2023年10月本院接收的82例疑似乙肝患者作为研究对象,均通过FQ-PCR实施HBV-DNA检测,同... 目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)-DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项在乙肝诊断中的应用价值。方法选择2021年1月至2023年10月本院接收的82例疑似乙肝患者作为研究对象,均通过FQ-PCR实施HBV-DNA检测,同时予以时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项[乙肝病毒核心抗体(HBcAb)、乙肝病毒e抗体(HBeAb)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)],并分析检测结果。结果82例患者中,HBV-DNA阳性率为70.73%(58/82)。82例患者中,组合A(HBcAb+HBeAg+HBsAg阳性)占比91.46%(75/82),组合B(HBeAb+HBsAg阳性)占比63.41%(52/82),组合C(HBcAb+HBeAb+HBsAg阳性)占比37.80%(31/82),组合D(HBcAb+HBeAb+HBsAb阳性)占比6.10%(5/82),组合E(HBeAg+HBsAg阳性)占比64.63%(53/82)。组合A、组合B、组合C、组合D、组合E中HBV-DNA阳性率分别为53.33%(40/75)、7.69%(4/52)、29.03%(9/31)、40.00%(2/5)、5.66%(3/53),组合A中HBV-DNA阳性率均高于其他各项组合,差异具有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR检测HBV-DNA联合时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项诊断乙肝的准确度、灵敏度高于单独FQ-PCR检测HBV-DNA及时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在乙肝诊断中,FQ-PCR检测HBV-DNA与时间分辨免疫荧光法检测乙肝五项各具优势,积极联合应用有助于进一步提升诊断效能。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 乙型肝炎病毒DNA 时间分辨免疫荧光法 乙肝五项
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A quantitative polymerase chain reaction assay for the enumeration of brown tide algae Aureococcus anophagefferens in coastal waters of Qinhuangdao 被引量:1
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作者 GUO Hao LIU Yongjian +3 位作者 ZHANG Qi YUAN Xiutang ZHANG Weiwei ZHANG Zhifeng 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期132-136,共5页
Aureococcus anophagefferens, a small pelagophyte algae, has caused brown tide blooms in coastal waters of Qinhuangdao in recent years, presenting significant negative impacts on the shellfish mariculture industry. Und... Aureococcus anophagefferens, a small pelagophyte algae, has caused brown tide blooms in coastal waters of Qinhuangdao in recent years, presenting significant negative impacts on the shellfish mariculture industry. Under standard light microscopy, it is visually indistinguishable from other small algae in field samples due to its extremely small size. In this study, quantitative polymerase chain reaction(q PCR) based on 18 S r DNA sequences was developed and used to detect and enumerate A. anophagefferens. A linear regression(R2 = 0.91) was generated based on cycle thresholds value(Ct) versus known concentrations of A. anophagefferens. Twenty-two field samples collected in coastal waters of Qinhuangdao were subjected to DNA extraction and then analyzed using q PCR. Results showed that A. anophagefferens had a wide distribution in coastal waters along Qinhuangdao. Elevated A. anophagefferens abundance, category 3 brown tide blooms(〉200 000 cells/m L) occurred at Dongshan Beach and Tiger-stone Beach in August in 2013. In shellfish mariculture areas along coastal waters of Qinhuangdao, 4 stations had category 3 blooms, and 6 stations had category 2 blooms(35 000–200 000 cells/m L) in August and all stations had category 1 blooms(〉0 to ≤35 000 cells/m L) in October. Quantitative PCR allows for detection of A. anophagefferens cells at low levels in filed samples, which is essential to effective management and prediction of brown tide blooms. 展开更多
关键词 Aureococcus anophagefferens quantitative polymerase chain reaction(q pcr field samples
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Primary application of a real-time quantitative polymerase chain reaction for the detection of human breast cancer related novel gene-Metadherin expression 被引量:1
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作者 Bing Li Zhaozhe Liu Xiaodong Xie Yakun Wang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2010年第6期316-320,共5页
Objective:The aim of this study was to detect the expression level of Metadherin (MTDH) in peripheral blood of the breast cancer patients by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (PCR),and to e... Objective:The aim of this study was to detect the expression level of Metadherin (MTDH) in peripheral blood of the breast cancer patients by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (PCR),and to explore the relationship between expression of Metadherin gene in the patients peripheral blood and the clinic-pathological features in breast cancer. Methods:Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction was employed to determine the expression level of Metadherin gene in 80 peripheral blood samples of breast cancer patients and healthy donors. Results:The expression of Metadherin gene in breast cancer patients peripheral blood were positive,in which 34 breast cancer patients were highly expressed,accounting for 55.7%,while the expression of Metadherin gene in normal females peripheral blood were negative,there was statistical significance (Ratio = 2.02±0.81,P < 0.05); Ratio of the Metadherin expression in breast cancer patients peripheral blood and the glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase expression was 1.15 ± 0.36. REST software analysis showed that the expression of Metadherin gene was significantly up-regulated in breast cancer. Conclusion:The SYBR Green I quantitative real-time polymerase chain reaction method can successfully detect the expression level of Metadherin gene. Expression level of Metadherin gene in breast cancer patients peripheral blood is closely related to survival,and it maybe involved in the development of breast cancer and used as an indicator of prognosis. 展开更多
关键词 breast cancer Metadherin (MTDH) real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction pcr
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基于主成分分析的多重定量PCR荧光串扰校正
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作者 王鹏 王振亚 +8 位作者 汪舜 张杰 张哲 杨天航 王弼陡 罗刚银 翁良飞 张翀宇 李原 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1151-1157,共7页
聚合酶链式反应(PCR)是分子生物学常用的检测手段,主要用于对生物的DNA或RNA进行检测。由于荧光光谱重叠和滤光片过滤带宽限制,检测时所获得的荧光数据通常会包含荧光通道之间的串扰,串扰的存在使PCR结果分析变得复杂,并可能影响最终的... 聚合酶链式反应(PCR)是分子生物学常用的检测手段,主要用于对生物的DNA或RNA进行检测。由于荧光光谱重叠和滤光片过滤带宽限制,检测时所获得的荧光数据通常会包含荧光通道之间的串扰,串扰的存在使PCR结果分析变得复杂,并可能影响最终的检测结果。选择合适的光学元件,并确定通道间的补偿矩阵,可以降低甚至消除荧光串扰。目前荧光补偿矩阵大多通过迭代计算获得,还没有一种简单的方法可以从混合的多通道荧光数据中找到荧光补偿矩阵。为了快速获得荧光补偿矩阵,减小计算量,采用主成分分析法(PCA)中确定主成分的方式,基于搭建的测试平台进行单一染料实验,获得染料的荧光信号在各个检测通道的分布情况,计算得到荧光补偿矩阵。通过分析补偿矩阵,发现对于搭建的硬件系统,Cy5染料对Cy5.5通道串扰较大,串扰比例为8.76%,同时Cy5.5染料对Cy5通道串扰影响也相对较大,比例约为6.2%;其次是ROX染料对HEX通道串扰,比例约为2.68%;HEX染料对FAM通道串扰,比例约为1.58%;FAM染料对HEX通道串扰相对较小,比例约为0.25%,其余通道无明显串扰,与荧光光谱反映的结果一致。采用得到的荧光补偿矩阵对单一染料实验得到的原始荧光数据进行处理,有效去除了非目标通道的荧光串扰,实现了荧光通道数据的解耦,验证了方法的可行性。最后设计了染料颜色分辨实验,将不同浓度的多种染料进行组合测试,并采用所提出的方法将得到的数据进行荧光补偿。实验结果表明,荧光通道各自的线性相关性较高,五个荧光通道的线性相关系数r均大于0.99,该结果进一步验证了该补偿方法的有效性。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应(pcr)检测 光谱分析 主成分分析 多重荧光检测 荧光串扰 荧光分离
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基于直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测方法的建立 被引量:1
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作者 李浪 古莉冰 +6 位作者 朱丽 何建安 叶颖 张然 李华文 李福缘 顾大勇 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第3期358-364,共7页
目的建立基于直扩实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术的寨卡病毒快速检测方法。方法采用特殊功能的DNA聚合酶,以及优选PCR增强剂,以此建立直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测5种样本(全血、血清、唾液、咽拭子和尿)的方法。结果... 目的建立基于直扩实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术的寨卡病毒快速检测方法。方法采用特殊功能的DNA聚合酶,以及优选PCR增强剂,以此建立直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测5种样本(全血、血清、唾液、咽拭子和尿)的方法。结果5种样本检测限分别为血清103 PFU/mL,尿、咽拭子和唾液102 PFU/mL,全血104 PFU/mL,标准曲线的拟合优度的可决系数均在0.98以上,扩增效率均在90%~110%;寨卡病毒核酸成功扩增,非寨卡病毒核酸均未能扩增;尿、全血和唾液样本的重复性实验中106 PFU/mL和102 PFU/mL两个浓度的6个重复Ct值的变异系数均<5%。该研究建立的直扩RT-PCR技术的寨卡病毒检测方法与常规RT-PCR技术的检测结果一致,8个寨卡病毒样本,均只检测出2个血清样本,其余62个非寨卡病毒样本及12个阴性样本均未得到扩增。结论成功建立基于直扩RT-PCR技术的寨卡病毒快速检测方法,该方法简便快捷且灵敏度高、特异度强。 展开更多
关键词 寨卡病毒 直扩实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术 DNA聚合酶
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实时荧光定量PCR检测不同结核标本及其联合玻璃珠磨菌法检测的价值 被引量:1
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作者 张鑫 周辰刚 《临床和实验医学杂志》 2024年第6期637-641,共5页
目的研究实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与玻璃珠磨菌法联合用于不同结核标本检测中的价值。方法以回顾性分析为法,收集并分析2021年1月至2022年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院住院与门诊诊治的疑似结核病患者1200份不同临... 目的研究实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与玻璃珠磨菌法联合用于不同结核标本检测中的价值。方法以回顾性分析为法,收集并分析2021年1月至2022年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院住院与门诊诊治的疑似结核病患者1200份不同临床标本的qRT-PCR测定结果,其中血液样本469份,胸腔积液标本322份,心包积液标本16份,尿液标本25份,气管(支气管)肺泡灌洗液标本8份,腹腔积液标本34份,脑脊液标本143份,脓液标本31份,痰液标本152份;同时,对41份痰液标本予以玻璃珠振荡磨菌前后qRT-PCR定量检测效果分析。结果1200份不同结核标本的总检测阳性率为15.83%(190/1200),其中检出率最高的为气管(支气管)肺泡灌洗液标本,占比为37.50%(3/8),且门诊患者阳性率最高,占比为40.00%(2/5);脓液标本检出率第二,占比为35.48%(11/31),且住院患者阳性率最高,占比为38.46%(10/26);痰液标本检出率第三,占比为30.26%(46/152)。41份痰液标本经玻璃珠磨菌处理5 min之后,qRT-PCR检测核酸浓度明显高于处理前,差异有统计学意义(P<0.05);其中,14份痰液标本提升了菌株数量级,且11份含菌量为10^(2)拷贝/mL痰液标本于振荡研磨处理之后,7份痰液标本提升至了10^(3)拷贝/mL菌量数量级,磨菌处理后阳性检出率明显高于磨菌处理前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论气管(支气管)肺泡灌洗液标本、脓液标本、痰液标本检测中qRT-PCR的检出率较高,而qRT-PCR在其他结核标本检测中的检出率较低,qRT-PCR联合玻璃珠磨菌法检测可有效提升临床结核标本阳性检出率。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链式反应 玻璃珠磨菌法 结核分枝杆菌 检测
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酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量PCR法对乙型肝炎的诊断价值比较
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作者 张子夏 张燕红 《中国现代药物应用》 2024年第19期58-60,共3页
目的比较酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法在乙型肝炎诊断中的应用价值。方法选取120例疑似乙型肝炎患者作为本次研究对象,分别进行酶联免疫吸附测定法以及实时荧光定量PCR法检验。以病理检查为金标准,分析酶联... 目的比较酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法在乙型肝炎诊断中的应用价值。方法选取120例疑似乙型肝炎患者作为本次研究对象,分别进行酶联免疫吸附测定法以及实时荧光定量PCR法检验。以病理检查为金标准,分析酶联免疫吸附测定法和实时荧光定量PCR法的检查结果,对比两种检查方法的诊断效能,包括特异度、灵敏度以及准确度。结果120例疑似患者经病理检查确诊75例为乙型肝炎。酶联免疫吸附测定法检出阳性74例,阴性46例;实时荧光定量PCR法检出阳性75例,阴性45例。实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎的特异度、灵敏度以及准确度分别为93.33%、96.00%、95.00%,均明显高于酶联免疫吸附测定法的73.33%、82.67%、79.17%,差异有统计学意义(χ^(2)=6.4800、6.9963、13.3724,P<0.05)。结论采用实时荧光定量PCR法进行乙型肝炎的检测具有较高的准确率,可以为医生诊断和治疗方案的制定及调整提供良好的依据。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链式反应 乙型肝炎 酶联免疫吸附测定法 诊断效能
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探讨荧光定量PCR法与免疫胶体金法用于骨质疏松症手术住院患者感染监控的诊断价值
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作者 吴敏芳 董明治 +2 位作者 杨越 张艳 陈启 《系统医学》 2024年第1期57-59,63,共4页
目的本研究旨在探讨荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)法与免疫胶体金法检测用于骨质疏松症进行手术治疗住院患者感染监控的临床效果。方法选取2020年3月—2023年4月曲靖市第一人民医院收治的180例骨质疏松症进行... 目的本研究旨在探讨荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)法与免疫胶体金法检测用于骨质疏松症进行手术治疗住院患者感染监控的临床效果。方法选取2020年3月—2023年4月曲靖市第一人民医院收治的180例骨质疏松症进行手术治疗疑似住院感染患者作为研究对象,所有患者均先后接受荧光定量PCR法与免疫胶体金法检测,以细菌培养结果作为金标准,比较两种方法的检出率,评估两种检查方法的诊断效能。结果荧光定量PCR法的检验准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.67%、89.19%、98.60%、94.29%、97.24%,免疫胶体金法分别为82.78%、43.24%、93.01%、61.54%、86.36%,荧光定量PCR法的检验准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均明显高于免疫胶体金法检验,差异有统计学意义(χ^(2)=18.827、17.458、5.567、10.124、11.533,P均<0.05)。结论荧光定量PCR法检验在骨质疏松症进行手术治疗住院患者感染监控中具有良好的诊断效能。在骨科住院患者感染监控中予以微生物检验干预,有助于基于检验结果进行及早诊断和治疗,进而降低感染发生率和传播风险。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链式反应法 住院患者 骨质疏松症 免疫胶体金法 病原菌
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研究ELISA联合荧光定量PCR检测丙型肝炎病毒的效果
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作者 刘波 陈昌兰 《系统医学》 2024年第2期79-82,共4页
目的评估丙型肝炎病毒检测应用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)联合荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测的应用价值。方法选取2022年8月—2023年8月滕州市疾病预防控制中心接诊的90... 目的评估丙型肝炎病毒检测应用酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)联合荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测的应用价值。方法选取2022年8月—2023年8月滕州市疾病预防控制中心接诊的90例疑似丙型肝炎病毒患者为研究对象,采用ELISA联合荧光定量PCR检测,以丙型肝炎病毒(Hepatitis Virus C,HCV)RNA检测结果作为“金标准”,分析检测方式的应用价值。结果HCV RNA检测结果显示,阳性率为47.78%,ELISA检测的阳性率40.00%,荧光定量PCR检测发现阳性量率42.22%,联合检测的阳性率46.67%。ELISA检测与荧光定量PCR检测在灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值以及阴性预测值方面比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。联合检测的灵敏度为93.02%、准确度为94.44%、阳性预测值为95.24%以及阴性预测值为93.75%,显著高于ELISA检测的67.44%、76.67%、80.56%、74.07%,联合检测的灵敏度、准确度显著高于荧光定量PCR检测(76.74%、83.33%),差异有统计学意义(P均<0.05)。结论丙型肝炎病毒检测应用ELISA联合荧光定量PCR检测检出率高。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附试验 联合检测 荧光定量聚合酶链式反应 丙型肝炎病毒
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FQ-PCR检测肠黏膜结核杆菌DNA对肠结核的诊断价值 被引量:9
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作者 顾清 欧阳钦 夏庆杰 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第6期741-744,共4页
目的建立一种实时定量检测结核分枝杆菌(MTB)插入序列IS6110 DNA的方法,探讨其在肠结核(ITB)诊断中的价值。方法采用FQ-PCR技术对36例内镜活检ITB标本(30例石蜡、6例新鲜组织)、36例Crohn’s disease标本(16例石蜡手术标本,15例石蜡内... 目的建立一种实时定量检测结核分枝杆菌(MTB)插入序列IS6110 DNA的方法,探讨其在肠结核(ITB)诊断中的价值。方法采用FQ-PCR技术对36例内镜活检ITB标本(30例石蜡、6例新鲜组织)、36例Crohn’s disease标本(16例石蜡手术标本,15例石蜡内镜活检标本,5例新鲜内镜活检组织)及34例阴性对照标本进行IS6110 DNA的实时定量检测,并比较上述标本抗酸染色结果。结果13例ITB抗酸染色阳性,CD无1例阳性,抗酸染色对ITB诊断的敏感性36.11%。MTBIS6110DNA检测结果:23例ITB(63.89%)阳性,6例CD(16.67%)阳性,另有1例阳性为升结肠腺癌癌旁正常组织。MTBIS6110 DNA在ITB与CD中的阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。FQ-PCR对ITB诊断的敏感性为63.89%,特异性83.33%。FQ-PCR敏感性显著高于抗酸染色(P<0.05)。MTBIS6110 DNA阳性的ITB标本其定量结果范围为2.44×10-4-2.26×101拷贝/细胞。结论FQ-PCR检测MTBIS6110 DNA是一种快速有效的ITB诊断方法,其定量范围广,检测灵敏度高。对活检组织少、病理改变不典型、抗酸染色阴性组织的诊断和鉴别诊断尤有意义。 展开更多
关键词 结核病 胃肠 结核分枝杆菌 IS6110 fq-pcr 克罗恩病
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两种筛查宫颈肿瘤方法的比较:ELISA检测宫颈脱落细胞p16^(INK4a)蛋白与FQ-PCR检测8种共用型HPV DNA 被引量:3
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作者 丁莉 邹先进 +2 位作者 郑杰 蔡兰 姚爱香 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2010年第1期37-40,共4页
目的:探讨用ELISA方法检测p16INK4a蛋白在宫颈脱落细胞的表达,筛查宫颈癌。方法:选取宫颈组织活检标本1523例,活检前用棉拭子从标本中获取宫颈脱落细胞。用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测宫颈活检组织中8种亚型HR-HPV DNA,用ELISA... 目的:探讨用ELISA方法检测p16INK4a蛋白在宫颈脱落细胞的表达,筛查宫颈癌。方法:选取宫颈组织活检标本1523例,活检前用棉拭子从标本中获取宫颈脱落细胞。用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测宫颈活检组织中8种亚型HR-HPV DNA,用ELISA方法检测宫颈脱落细胞中p16INK4a蛋白的表达。结果:HR-HPV DNA阳性率在CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ及宫颈癌中,分别为91.9%,92.8%,94.4%,91.7%,其阳性率与宫颈病变严重程度无显著相关(P=0.893);非肿瘤性病变人群HR-HPV DNA阳性率16.3%;FQ-PCR方法的特异性83.7%。ELISA方法检测宫颈脱落细胞中p16INK4a表达用于筛查宫颈癌及CIN的总体敏感性和特异性分别为87.4%和92.4%,且宫颈病变级别越高,p16INK4a表达越强(r=0.773,P<0.001)。结论:FQ-PCR检测HR-HPV DNA用于筛查宫颈癌及CIN,敏感度高但特异性较低;ELISA检测p16INK4a蛋白表达具有较高的灵敏度和特异性,有望成为宫颈癌新的筛查方法在临床推广使用。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤变 P16^INK4A 酶联免疫吸附测定 荧光定量聚合酶链反应 高危型人乳头瘤病毒
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FQ-PCR技术在儿童支原体肺炎早期诊断中的应用 被引量:6
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作者 黄建宏 林心 +1 位作者 李文锋 冯小三 《分子诊断与治疗杂志》 2009年第1期18-19,共2页
目的研究荧光定量PCR检测在儿童支原体肺炎(MP)感染早期诊断中的作用。方法利用荧光定量PCR检测呼吸系统受感染儿童咽拭子中肺炎支原体(MP)的DNA含量,并与血清中MP特异性抗体(MP-IgM)检测阳性结果比较。结果共检测540例,在3岁以下患儿组... 目的研究荧光定量PCR检测在儿童支原体肺炎(MP)感染早期诊断中的作用。方法利用荧光定量PCR检测呼吸系统受感染儿童咽拭子中肺炎支原体(MP)的DNA含量,并与血清中MP特异性抗体(MP-IgM)检测阳性结果比较。结果共检测540例,在3岁以下患儿组中,咽拭子中MP-DNA阳性率显著高于血清MP-IgM的阳性率(P<0.05),而3岁以上各组中两种方法阳性率无显著差异(P>0.05)。结论荧光定量PCR法可作为早期快速诊断儿童(尤其3岁以下患儿)MP呼吸系统感染的方法。 展开更多
关键词 肺炎支原体 荧光定量pcr 呼吸道感染
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110例尖锐湿疣患者FQ-PCR检测结果分析 被引量:2
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作者 孙莹 徐明 +1 位作者 朱小华 徐金华 《中国艾滋病性病》 CAS 2008年第4期387-388,共2页
目的探讨尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)感染分型及其意义。方法采用荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测男女尖锐湿疣患者HPV感染分型。结果男性患者44例,检出阳性37例(84.09%),分型结果以HPV6/11型为主(91.89%);女性患者外阴标本33例,检出阳... 目的探讨尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)感染分型及其意义。方法采用荧光定量PCR技术(FQ-PCR)检测男女尖锐湿疣患者HPV感染分型。结果男性患者44例,检出阳性37例(84.09%),分型结果以HPV6/11型为主(91.89%);女性患者外阴标本33例,检出阳性26例(78.78%),分型结果以HPV6/11型为主(53.84%);宫颈标本33例,检出阳性19例(57.57%),分型结果以HPV6/11型为主(57.89%)。结论HPV6/11型是尖锐湿疣发病的主要型别,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)可作为尖锐湿疣诊断的指标。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 荧光定量聚合酶链反应 宫颈病理活检
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FQ-PCR检测造血干细胞移植受者HCMV感染及与淋巴细胞免疫表型变化的关系 被引量:1
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作者 方超平 王杨 +3 位作者 沈茜 张军 张倩 李闻捷 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第5期585-588,共4页
目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)DNA含量在异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)受者HCMV激活感染中的诊断价值和淋巴细胞免疫表型变化与HCMV激活感染的关系。方法应用FQ-PCR和酶联免疫吸附... 目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测人巨细胞病毒(HCMV)DNA含量在异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)受者HCMV激活感染中的诊断价值和淋巴细胞免疫表型变化与HCMV激活感染的关系。方法应用FQ-PCR和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测allo-PBSCT后受者HCMV DNA和抗HC-MV lgM抗体;用流式细胞仪测定淋巴细胞亚群。结果39例allo-PBSCT受者中19例检出HCMV DNA(〈30 d的有5例,2-3个月的13例,〉100 d的1例)。HCMV感染后血清HCMV、IgM阳性检出率非常低(4/19),且出现时间较晚。移植后早期HCMV DNA阳性组与阴性组及健康组比较CD4^+细胞、CD19^+细胞及CD4/CD8比值显著下降,CD8^+细胞和CD16+56^+细胞升高。HCMV阳性患者CD4/CD8比值在感染前后比较差异也有统计学意义。结论allo-PBSCT后HCMV活动性感染易发生于allo-PBSCT后早、中期,高峰期在移植后30-60 d;HC-MV活动性感染与细胞免疫功能紊乱互为因果,加重病情。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 异基因外周血造血干细胞移植 实时荧光定量聚合酶链反应 淋巴细胞亚群
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实时FQ-PCR在诊断解脲脲原体感染中的应用研究 被引量:3
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作者 亓春花 郭辉 +2 位作者 吕荣菊 刘爱华 王静波 《中国麻风皮肤病杂志》 2006年第10期825-827,共3页
目的:探讨实时荧光定量聚合酶链反应检测非淋病性尿道炎、宫颈炎等疾病中解脲支原体(Uu)感染的准确性及其在实验室诊断中的应用价值。方法:将临床116例标本分别用实时FQ-PCR检测及常规培养法同时检测,并对两种方法的检测结果进行分析比... 目的:探讨实时荧光定量聚合酶链反应检测非淋病性尿道炎、宫颈炎等疾病中解脲支原体(Uu)感染的准确性及其在实验室诊断中的应用价值。方法:将临床116例标本分别用实时FQ-PCR检测及常规培养法同时检测,并对两种方法的检测结果进行分析比较。结果:116例临床标本,Uu培养阳性49例,阳性率为42.2%,实时FQ-PCR阳性47例,阳性率为40.5%。Uu培养阳性的49例标本中,实时FQ-PCR法阳性46例,二者诊断符合率为96.6%,经卡方检验两种方法无显著差异(χ2=0.25,P>0.05)。实时FQ-PCR相对于培养法的敏感性为93.9%,特异性为98.5%,两法检测Uu的效率基本相当。结论:实时FQ-PCR法不仅能对标本中DNA模板拷贝数准确定量,而且比常规培养法更简便、快捷,但不能用于判定治愈。 展开更多
关键词 解脲脲原体 实时荧光定量聚合酶链反应 培养
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FQ-PCR溶解曲线技术分析白血病患者PBMC中T细胞TCRα/βCDR3谱系特征 被引量:3
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作者 孙永苹 石彬 +3 位作者 朱红倩 汤贤英 马锐 姚新生 《遵义医学院学报》 2014年第1期39-47,共9页
目的采用FQ-PCR溶解曲线技术分析临床白血病患者外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞TRAV和TRBV基因各家族的CDR3谱系特征。方法提取4例健康志愿者和15例临床白血病患者PBMC中mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因家族的C... 目的采用FQ-PCR溶解曲线技术分析临床白血病患者外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞TRAV和TRBV基因各家族的CDR3谱系特征。方法提取4例健康志愿者和15例临床白血病患者PBMC中mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因家族的CDR3区,FQ-PCR溶解曲线技术分析CDR3谱系特征,并测序分析单克隆家族CDR3区氨基酸序列的组成。结果 4例健康志愿者PBMC中α/βT细胞的CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,均表现为多峰图;而15例白血病患者PBMC中α/βT细胞CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,多数患者出现寡或偏峰型图、低或无峰型图、典型的单峰型图;不同白血病患者异常峰的频率不一致;单峰型图TRAV和TRBV PCR产物基因测序,未发现不同患者存在完全相同的CDR3区。结论FQ-PCR溶解曲线技术能很好的分析白血病患者PBMC中TCRα/βCDR3谱系的单、寡、多克隆性增殖;非T细胞白血病患者PBMC中TCRα/βCDR3的单峰(或寡峰)家族T细胞,可能来源于机体对肿瘤应答的T细胞,而在T细胞白血病患者,可能为肿瘤T细胞或机体抗肿瘤T细胞。本实验可为进一步研究白血病的免疫应答机制和个体化治疗提供基础。 展开更多
关键词 白血病 TCR CDR3 fq-pcr 溶解曲线
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FQ-PCR法痰结核杆菌DNA检测及其临床应用 被引量:2
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作者 宋予娟 《中国实用医药》 2014年第36期43-44,共2页
目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)法痰结核杆菌DNA检测及其临床应用。方法分别以FQ-PCR,集菌培养和染色镜检检测入选患者的痰标本,比较各方法在结核病诊断中的作用。结果三种检测方法的敏感性为71.8%,39.0%,26.5%,显示FQ-PCR法... 目的探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)法痰结核杆菌DNA检测及其临床应用。方法分别以FQ-PCR,集菌培养和染色镜检检测入选患者的痰标本,比较各方法在结核病诊断中的作用。结果三种检测方法的敏感性为71.8%,39.0%,26.5%,显示FQ-PCR法敏感度最高。结论FQ-PCR法具有简便、快捷、敏感、特异性高的特点,可以快速及时准确的为临床提供诊断依据。 展开更多
关键词 结核杆菌 荧光定量聚合酶链反应
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CNV-seq结合QF-PCR在孕早期流产物检测中的临床应用价值 被引量:2
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作者 郭芳芳 侯亚萍 +2 位作者 胡听听 彭海山 杨洁霞 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第3期166-170,共5页
目的:探讨拷贝数变异测序(CNV-seq)结合定量荧光聚合酶链反应(QF-PCR)在孕早期流产物遗传学检测中的临床应用价值。方法:收集2019年1月至2022年2月在广东省妇幼保健院就诊的孕早期(13周以内)孕妇流产物组织样本,通过CNV-seq结合QF-PCR... 目的:探讨拷贝数变异测序(CNV-seq)结合定量荧光聚合酶链反应(QF-PCR)在孕早期流产物遗传学检测中的临床应用价值。方法:收集2019年1月至2022年2月在广东省妇幼保健院就诊的孕早期(13周以内)孕妇流产物组织样本,通过CNV-seq结合QF-PCR检测流产物组织的染色体拷贝数变异情况,分析其中染色体拷贝数异常变异的分布及发生率并评估其临床价值。结果:4145例孕早期流产物组织样本中,65.01%(2695/4145)样本提示结果异常,包括51.97%(2154/4145)非整倍体、7.04%(292/4145)三倍体、3.98%(165/4145)部分非整倍体、0.70%(29/4145)同源单亲二倍体、0.05%(2/4145)四倍体以及1.28%(53/4145)微缺失/重复。在所有异常结果中,10M以上的大片段拷贝数异常占96.96%(2613/2695)。在1.97%(53/2695)的孤立性亚显微拷贝数异常中发现了3种复发性致病性亚显微拷贝数异常,分别是22q11.21微缺失/微重复、2qter微缺失(位于2q37.3末端区域内)。结论:CNV-seq结合QF-PCR检测分析孕早期流产物组织中染色体拷贝数变异,可为流产后精准的临床管理和再生育指导提供依据;发现3种潜在的可能与流产相关的致病性亚显微拷贝数异常。 展开更多
关键词 拷贝数变异测序 定量荧光聚合酶链反应 孕早期流产
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构建hnRNP B1相对定量的FQ RT-PCR检测方法
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作者 常珍 沈佐君 操乐杰 《临床输血与检验》 CAS 2007年第2期111-114,共4页
目的建立一种荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ RT-PCR)检测肺癌患者外周血hnRNP B1mRNA表达的相对定量方法。方法以hnRNP B1为待测基因,以β-actin为参照进行检测,建立标准曲线,确定实时RT-PCR的扩增效率;优化反应条件,使扩增效率接近10... 目的建立一种荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ RT-PCR)检测肺癌患者外周血hnRNP B1mRNA表达的相对定量方法。方法以hnRNP B1为待测基因,以β-actin为参照进行检测,建立标准曲线,确定实时RT-PCR的扩增效率;优化反应条件,使扩增效率接近100%,检测待检标本hnRNP B1和β-actin的循环阈值(Ct)。结果该法检测的最低拷贝数为103,线性范围为103~107拷贝,批内和批间变异系数(CV)分别为3.4%和11.3%。结论该方法具有灵敏、特异、数据处理简便可靠等特点,为其他肿瘤患者外周血中肿瘤细胞的检测提供了方法学启示。 展开更多
关键词 荧光定量聚合酶链反应 异质性胞核核糖核蛋白B1 肺癌
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