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Comparison of Multiplex Fluorescent PCR with Serum Type-specific Antibody Detection in Diagnosis of Genital Herpes
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作者 赖维 苏向阳 +2 位作者 万苗坚 黄怀球 黄朝伟 《Chinese Journal of Sexually Transmitted Infections》 2004年第1期7-11,62,共6页
Objectives: To compare multiplex fluorescent PCRwith serum type-specific antibody detection in thediagnosis of herpes simplex virus (HSV) infection andto evaluate its significance in the diagnosis of genitalherpes.Met... Objectives: To compare multiplex fluorescent PCRwith serum type-specific antibody detection in thediagnosis of herpes simplex virus (HSV) infection andto evaluate its significance in the diagnosis of genitalherpes.Methods: We detected HSV infection in 121 speci-mens collected from patients with genital herpesusing both multiplex fluorescent PCR and serum type-specific antibody detection. HSV viral isolation wasused as the standard control.Results: When compared with the viral isolation, thesensitivity and specificity for multiplex fluorescentPCR were 100% and 88.89%, respectively afterdiscrepant analysis. The sensitivity and specificity fortype-specific antibody detection was 77.68 % and77.78 %, respectively. However, the type-specificantibody detected HSV in two asymptomatic patientswhile the multiplex fluorescent PCR couldn’t detectany HSV DNA from those specimens.Conclusions: Multiplex fluorescent PCR is a verysensitive and specific method for detection and typingof HSV in the lesion of genital herpes, it failed todetect HSV DNA from the asymptomatic patients.Serum type-specific antibody detection was a lesssensitive and specific test but could detect the specificantibody from some asymptomatic patients. Thecombination of these two techniques would allow rapid,sensitive and accurate detection and typing of HSVand help clinical diagnosis and epidemiologic survey-ing of genital herpes. 展开更多
关键词 multiplex fluorescent PCR genitalherpes type-specific antibody DIAGNOSIS
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Light slowing and all-optical time division multiplexing of hybrid four-wave mixing signal in nitrogen-vacancy center
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作者 Ruimin Wang Irfan Ahmed +2 位作者 Faizan Raza Changbiao Li Yanpeng Zhang 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2020年第5期254-259,共6页
We report the experimental results of hybrid four-wave mixing and fluorescence signals from nitrogen-vacancy(NV)centers in diamond. The fluorescence signals are slowed owing to dark state. The observed delay time of l... We report the experimental results of hybrid four-wave mixing and fluorescence signals from nitrogen-vacancy(NV)centers in diamond. The fluorescence signals are slowed owing to dark state. The observed delay time of light slowing due to interconversion between NV^- and NV^0 is about 6.4 μs. The relative intensities of read-out signals change with the wavelength and power of writing pulse. Based on light slowing, we present the model of all-optical time division multiplexing. The intensity ratio in different demultiplexed channels is modulated by the wavelength and power of control field. It has potential applications in quantum communication and all-optical network. 展开更多
关键词 nonlinear optics fluorescENCE time division multiplexing
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野生型非洲猪瘟病毒多重数字PCR方法的建立
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作者 李松达 蒋亚君 +5 位作者 庞忠宝 黄颖 翟文竹 朱鸿飞 赵晓民 贾红 《动物医学进展》 北大核心 2024年第4期32-39,共8页
为建立一种鉴别诊断野生株和基因缺失株非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的方法,针对ASFV的B646L、EP402R、DP96R基因保守序列设计3套引物和探针,优化三重荧光定量PCR体系作为基础建立微滴式数字PCR(droplet digital PCR,d... 为建立一种鉴别诊断野生株和基因缺失株非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的方法,针对ASFV的B646L、EP402R、DP96R基因保守序列设计3套引物和探针,优化三重荧光定量PCR体系作为基础建立微滴式数字PCR(droplet digital PCR,dd PCR)检测方法,并对方法的特异性、灵敏性及重复性进行评估。结果显示,优化后的多重荧光定量PCR检测方法的标准曲线线性关系良好,对PRRSV、PEDV、PRV、VSV、PCV、RNase-free水、重组质粒标准品进行特异性检测,特异性良好;重复性试验结果显示,变异系数均小于2%;对3种重组质粒的最低检测下限均为102 copies/μL。参照上述多重荧光定量PCR方法优化后的条件,进行多重ddPCR检测方法的建立,并且对该方法进行评价。结果显示,ddPCR检测方法标准曲线的线性关系良好;特异性及重复性良好;最低检测下限B646L为11.6 copies/μL、EP402R为13.3 copies/μL、DP96R为16.9 copies/μL;ddPCR的检测灵敏度比荧光定量PCR有优势。使用建立的多重ddPCR方法对14份P3实验室中的样品进行实验室样品检测,样品检测符合率达到100%。成功建立了能够同时检测用于鉴别野毒株感染与疫苗株的荧光定量PCR和微滴式ddPCR方法。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 多重荧光定量PCR 微滴式数字PCR
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PCR技术在食品微生物检测中的应用研究 被引量:1
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作者 王迪 《食品安全导刊》 2024年第13期187-189,共3页
PCR技术因具有高灵敏度、高特异性和快速性的特点,在食品微生物检测领域广泛使用。本文阐述食品中常见的致病微生物、PCR技术的基本原理、食品中常见致病微生物的PCR检测方法,探讨PCR技术在食品微生物检测中的应用,并介绍PCR技术在食品... PCR技术因具有高灵敏度、高特异性和快速性的特点,在食品微生物检测领域广泛使用。本文阐述食品中常见的致病微生物、PCR技术的基本原理、食品中常见致病微生物的PCR检测方法,探讨PCR技术在食品微生物检测中的应用,并介绍PCR技术在食品微生物检测中的发展趋势。 展开更多
关键词 PCR技术 食品微生物 致病微生物 实时荧光定量PCR 多重PCR
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蜂蜜中转基因成分启动子和终止子的多重实时荧光PCR法检测
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作者 林碧莲 张雅薇 +8 位作者 高宇 何孟杭 邱秀玉 韩涛 张芳 傅德江 陈思琪 宋帆 柯振华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期69-77,共9页
为能高效率定位蜂蜜中的转基因可疑阳性样品,以10种转基因启动子和终止子(花椰菜花叶病毒35S启动子(pCaMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(tNOS)、玄参花叶病毒的35S启动子(p FMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因启动子(pNOS)、玉... 为能高效率定位蜂蜜中的转基因可疑阳性样品,以10种转基因启动子和终止子(花椰菜花叶病毒35S启动子(pCaMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子(tNOS)、玄参花叶病毒的35S启动子(p FMV35S)、农杆菌的胭脂碱合成酶基因启动子(pNOS)、玉米泛素基因的启动子(pUbi)、烟草的花蕊特异性TA29的基因发育调节启动子(pTA29)、豌豆二磷酸核酮糖羧化酶基因的终止子(tE9)、章鱼碱合成酶终止子(t OCS)、谷氨酰胺转移酶7终止子(tg7)、花椰菜花叶病毒终止子(tCaMV35S))为研究靶标,进行10种启动子和终止子的引物和探针组合筛选、反应条件优化、灵敏度测定、质控品测试比对等实验,建立3组多重实时荧光PCR反应体系,并将其应用于市售蜂蜜的检测。结果表明:建立的3组多重实时荧光PCR反应体系能精准检出目的基因,其灵敏度分别为0.01、0.04、0.04 ng/μL;14种转基因质控品的测试显示多重实时荧光PCR和单重实时荧光PCR的检测结果一致;40份市售蜂蜜的筛查中,有两份蜂蜜检出pCaMV35S和tNOS,其余未检出,该方法大大提高了检测效率。该方法为蜂蜜中转基因成分的检测提供了快筛快检技术,同时也适用其它产品转基因成分的检测。 展开更多
关键词 蜂蜜 转基因 启动子 终止子 多重实时荧光PCR
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肉串制品中猪牛羊源性成分多重荧光PCR检测方法研究
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作者 姚艳玲 周宇东 +4 位作者 王文宇 朱洪亮 陈婷 翁光灿 孙世元 《安徽农业科学》 CAS 2024年第18期184-187,共4页
[目的]建立畜类肉串产品中常见的黄牛、绵羊和猪源性成分的多重荧光PCR检测方法,实现肉串制品中动物源性成分的快速鉴别。[方法]比较磁珠法和柱膜法对肉糜组织中DNA的提取效果,优化实时荧光PCR多重检测方法,比较58、60℃2个退火温度下... [目的]建立畜类肉串产品中常见的黄牛、绵羊和猪源性成分的多重荧光PCR检测方法,实现肉串制品中动物源性成分的快速鉴别。[方法]比较磁珠法和柱膜法对肉糜组织中DNA的提取效果,优化实时荧光PCR多重检测方法,比较58、60℃2个退火温度下黄牛、绵羊、猪源性成分扩增效果。[结果]试验采用的2种DNA提取方法效果相似,DNA溶液的A_(260)/A_(280)值均能满足PCR检测要求;58℃为最优退火温度,此时黄牛、绵羊、猪源性成分均能有效扩增,且最低检出的DNA浓度均为10^(-3) ng/μL。方法中用到的引物和探针特异性较好,均未产生非特异性扩增。[结论]试验建立的黄牛、绵羊和猪源性成分的多重PCR检测方法能为肉制品中动物源性成分的快速定性分析提供方法参考。 展开更多
关键词 黄牛 绵羊 源性成分 实时荧光多重PCR
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马STR复合扩增体系的建立和应用
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作者 李威 鲁朦 +8 位作者 单晶 胡曼 鞠欣 郭佳佳 胡琦 王皋 陶莉 姜颖晔 孙树毅 《刑事技术》 2024年第6期633-638,共6页
本文为实现对马匹进行亲缘鉴定及个体识别,基于STR分型技术建立了一套包含20个STR基因座和1个性别识别位点的复合扩增体系,并对其进行性能评价以及实际样本扩增测试。应用荧光标记技术,选择HTG06、HTG07、COR022、CA425、HTG04、COR082... 本文为实现对马匹进行亲缘鉴定及个体识别,基于STR分型技术建立了一套包含20个STR基因座和1个性别识别位点的复合扩增体系,并对其进行性能评价以及实际样本扩增测试。应用荧光标记技术,选择HTG06、HTG07、COR022、CA425、HTG04、COR082、LEX54、COR069、AHT05、HMS03、HMS01、HMS06、HMS07、COR058、HTG10、ASB17、VHL20、HMS02、ASB02、LEX34、Amelogenin共21个遗传标记,进行引物设计、PCR复合扩增、CE平台测序,验证该体系的灵敏度、特异性及耐受性。对128份实际样本进行检测以及亲缘关系比对,并对其中的66份未知亲缘关系的样本基因做多态性统计。结果显示:该复合扩增体系检测128份马样本能够获得完整STR分型,在实际扩增中,无非特异峰产生,对于不同种属动物,例如牛、羊、猪、鸡、猫、狗、人DNA样本扩增时不出现特异性扩增峰;0.075 ng马标准品在10μL体系下仍可以获得完整分型;对于4种常见抑制剂的耐受性可以分别达到血红素200μmol/L、血红蛋白200μmol/L、腐殖酸100 ng/μL、EDTA 1.2 mmol/L。本研究建立的马STR复合扩增体系分型准确、性能优,可满足实验室对马匹亲权关系鉴定和个体识别的需求。 展开更多
关键词 法医遗传学 短串联重复序列 复合荧光扩增 亲权鉴定
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市售食品21种动植物过敏原成分的检测分析
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作者 何名扬 王鸣秋 +6 位作者 刘艳 李诗瑶 朱必婷 张涛 郭雅晴 周陶鸿 彭青枝 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第5期255-260,共6页
为进一步明确市售食品动植物过敏原标注情况,该研究建立一种可同时检测21种动植物过敏原成分的多重连接依赖性探针扩增(MLPA)技术,并对其进行灵敏度实验,并结合实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)检测技术对38种市售预包装食品中动... 为进一步明确市售食品动植物过敏原标注情况,该研究建立一种可同时检测21种动植物过敏原成分的多重连接依赖性探针扩增(MLPA)技术,并对其进行灵敏度实验,并结合实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-fqPCR)检测技术对38种市售预包装食品中动植物过敏原成分进行比较分析。结果表明,采用MLPA检测技术可同时对21种动植物过敏原成分进行检测,扩增峰之间不存在交叉干扰,扩增峰实际大小和理论大小相差≤3 bp,检出最低脱氧核糖核酸(DNA)质量浓度为1 ng/μL;RT-fqPCR、MLPA技术检测标注过敏原成分食品的检出率分别为51.5%、44.1%,此外,MLPA检测法检出了6个标注可能含有过敏原成分样品中的过敏原成分,10个样品中未标记的过敏原成分。因此,采用MLPA技术检测21种动植物过敏原成分的灵敏度更高。 展开更多
关键词 动植物过敏原 多重连接依赖性探针扩增 实时荧光定量聚合酶链式反应 多重检测
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Rapid prenatal diagnosis of trisomy 21 by fluorescent quantitative multiplex polymerase chain reaction
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作者 ZHENG Fang ZHOU Xin +5 位作者 ZHANG Yuan-zhen SUN Xiao-bo PENG Jian-hong WANG Chun-hong XIONG Chen-ling LI Xia 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2006年第6期514-517,共4页
Trisomy 21, also named Down syndrome was the most frequent autosomal aneuploidy and the most common cause of mental retardation. Fifty percent patients had congenital heart malformation. Every 20 minutes one case of t... Trisomy 21, also named Down syndrome was the most frequent autosomal aneuploidy and the most common cause of mental retardation. Fifty percent patients had congenital heart malformation. Every 20 minutes one case of trisomy 21 was born, and the incidence rate was 1 in 600 to 800 newborns in China.1 In two thirds of cases with trisomy 21, there was a spontaneous abortion, so the actual incidence was higher than that obtained postnatally. 展开更多
关键词 fluorescent quantitative multiplex polymerase chain reaction prenatal diagnosis Down syndrome HETEROZYGOSITY
原文传递
多重荧光PCR同时检测转基因成分35S和Nos方法的建立 被引量:33
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作者 刘光明 李庆阁 +4 位作者 王群力 梁基选 陈伟铃 栾国彦 苏文金 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期493-497,共5页
根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子... 根据商品化转基因作物中常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 35S)和根癌农杆菌终止子 (Nos)的序列特点 ,设计并合成了两对引物和相对应的荧光双链探针 ,建立一种应用荧光双链探针的多重荧光PCR同时检测转基因成分 35S启动子和Nos终止子的方法 .并利用该方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等 11份实物样品进行了检测 ,其中有 5份样品结果阳性 .结果表明所建立的多重荧光PCR方法能同时检测出 35S和Nos双组分 ,较常规PCR技术更为简便、快速、准确 ,有很好的应用前景 . 展开更多
关键词 多重荧光PCR 35S NOS 转基因作物 荧光双链探针 花椰菜花叶病毒启动子 极癌农杆菌终止子 检测方法
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多重荧光PCR鉴别羊肉掺假 被引量:19
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作者 杨冬燕 韦梅霞 +2 位作者 杨永存 李浩 邓平建 《食品安全质量检测学报》 CAS 2015年第2期555-562,共8页
目的建立可同时检测掺入羊肉中的猪、马、牛、鸭成分的多重荧光PCR检测体系。方法配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟羊肉掺假样品,掺假比例17%~45%。筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针... 目的建立可同时检测掺入羊肉中的猪、马、牛、鸭成分的多重荧光PCR检测体系。方法配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟羊肉掺假样品,掺假比例17%~45%。筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针对猪、牛、马、鸭两两配对的两重荧光PCR检测体系和其中3个任意组合的三重荧光PCR检测体系。结果模拟羊肉掺假样品两重荧光PCR检测结果显示,包括单个成分掺入比例低至7%的样品,其检测准确率为100%。而三重荧光PCR检测同时检测猪、牛、马、鸭四种肉品中的3种,其中猪肉、牛肉和马肉的掺假比例均为8%~15%;鸭牛肉掺假比例为5%~10%。三重荧光PCR检测结果显示,所有掺假样品中的各种掺假组分都被准确检出。结论本研究建立的多重荧光PCR检测体系能准确检出配制的模拟掺假羊肉制品中的猪、马、牛、鸭成分,可进一步研究以应用于市场肉制品及加工肉制品掺假的检测。 展开更多
关键词 羊肉 掺假 多重荧光PCR
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多重荧光PCR快速检测食源性致病菌的研究进展 被引量:15
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作者 刘占鳌 裴艳琴 叶华 《食品安全质量检测学报》 CAS 2020年第24期9308-9313,共6页
食源性疾病多由食源性致病菌引发,威胁个人健康及全球食品安全,而传统细菌分离、培养与鉴定由于需时较长,尤其是有的细茵难以培养,难以适应食源性疾病预防控制的需要,因此寻找有效、可靠的食源性致病菌高通量检测方法对于确保食品安全... 食源性疾病多由食源性致病菌引发,威胁个人健康及全球食品安全,而传统细菌分离、培养与鉴定由于需时较长,尤其是有的细茵难以培养,难以适应食源性疾病预防控制的需要,因此寻找有效、可靠的食源性致病菌高通量检测方法对于确保食品安全具有重要意义。近年来,食源性致病菌的核酸检测技术具有简便、耗时短、特异性强、灵敏度高等优点,已被广泛应用于食源性致病菌的检测,本文在总结食源性致病菌知识的基础上,着重对多重荧光PCR技术原理及在食源性致病菌检测的应用进展进行综述,以期为控制由食源性致病菌引发的食品安全隐患提供理论参考。 展开更多
关键词 食源性致病菌 多重荧光PCR 快速检测
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多重聚合酶链反应-毛细管电泳-激光诱导荧光法检测三种食源性致病菌 被引量:6
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作者 毛红霞 黎源倩 +2 位作者 裴晓方 何超 渠凌丽 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期473-477,共5页
建立了食品中常见致病菌大肠杆菌O157:H7的uidA基因、沙门菌的invA基因和志贺菌的ipaH基因的多重聚合酶链反应(PCR)产物的毛细管电泳快速检测方法。根据这3种致病菌的特异性基因序列设计多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系,采用7.0g/L... 建立了食品中常见致病菌大肠杆菌O157:H7的uidA基因、沙门菌的invA基因和志贺菌的ipaH基因的多重聚合酶链反应(PCR)产物的毛细管电泳快速检测方法。根据这3种致病菌的特异性基因序列设计多重PCR引物,优化PCR扩增反应体系,采用7.0g/L甲基纤维素为筛分介质,毛细管电泳-激光诱导荧光检测法同时检测了3种常见致病菌的PCR扩增产物。在优化的多重PCR反应和毛细管筛分电泳条件下,该方法可以同时检测沙门菌、志贺菌和大肠杆菌O157:H7基因的多重PCR扩增产物,22min内即可完成3种常见致病菌的毛细管电泳检测。迁移时间的相对标准偏差为1.47%-2.07%。与凝胶电泳法比较,该法简便快速,灵敏度高,可用于多种致病菌脱氧核糖核酸的检测,为食品安全提供了一种可靠的快速检测方法。 展开更多
关键词 多重聚合酶链反应 毛细管电泳法 激光诱导荧光检测 食源性致病菌
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多重荧光PCR在Y染色体微缺失检测中的应用 被引量:3
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作者 李卫巍 韩莹 +4 位作者 殷玉玲 吴秋月 张静 蒋卫军 夏欣一 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1011-1015,共5页
目的:Y染色体AZF微缺失检测是国内外公认的男性不育辅助检查之一,传统的PCR凝胶电泳因其缺点已不太适应临床需要。本文旨在探讨多重荧光PCR在AZF微缺失检测中的可行性。方法:收集AZF微缺失各种类型样本238例,正常男性样本62例,比对两种... 目的:Y染色体AZF微缺失检测是国内外公认的男性不育辅助检查之一,传统的PCR凝胶电泳因其缺点已不太适应临床需要。本文旨在探讨多重荧光PCR在AZF微缺失检测中的可行性。方法:收集AZF微缺失各种类型样本238例,正常男性样本62例,比对两种不同的检测方法(多重PCR凝胶电泳和多重荧光PCR),Kappa检验比较分析两种方法检测结果的一致性。结果:多重PCR凝胶电泳和多重荧光PCR检测300例临床标本,两者在位点检出率方面完全一致,差异无统计学意义。Kappa检验显示Y染色体AZFa、AZFb、AZFc 3个区6个位点P值及Kappa值均为1,两种方法一致性好,无统计学差异。结论:多重荧光PCR技术比多重PCR凝胶电泳法可大量节约时间,减少工作量,提高临床检验工作效率,是临床Y染色体微缺失检测的优选方法。 展开更多
关键词 Y染色体 AZF微缺失 多重PCR凝胶电泳 多重荧光PCR
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微流控芯片-激光诱导荧光快速检测4种食源性致病菌 被引量:16
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作者 李永新 黎源倩 +1 位作者 渠凌丽 何成艳 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1667-1671,共5页
建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法。根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23SrDNAIGS)基因、沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfbO157基因和志贺菌的ipaH基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重PCR... 建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法。根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23SrDNAIGS)基因、沙门菌的invA基因、大肠杆菌O157:H7的rfbO157基因和志贺菌的ipaH基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重PCR扩增,采用微流控芯片-激光诱导荧光检测食品中4种常见致病菌的多重PCR扩增产物。优化了多重PCR扩增和微流控芯片电泳分离的实验条件。当芯片电泳的筛分介质HPMC-50浓度为2.2%、溴乙锭(EB)含量为3.75μmol/L、电场强度为120V/cm时,pUC Mix DNA Marker8和待测致病菌的多重PCR扩增产物可以实现基线分离,600S内即可完成上述4种致病菌的同时检测,迁移时间的日内相对标准偏差为0.74%~2.09%。本方法能够检出1×10^2cfu/mL的副溶血弧菌、沙门菌、大肠杆菌O157:H7和志贺菌。方法特异性高,所设计的引物在10种非目的菌株体系中均未见扩增的片段。将本法应用于食品中上述致病菌的测定,获得了满意的结果,为常见食源性致病菌的快速检测提供了一种新的可靠分析手段,对保障食品安全具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 微流控芯片 激光诱导荧光检测 食源性致病菌 多重聚合酶链反应
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陈旧性骨骼DNA提取技术的研究 被引量:10
16
作者 叶健 季安全 +4 位作者 郑秀芬 姜成涛 赵鑫 张纯斌 胡兰 《中国法医学杂志》 CSCD 2001年第S1期8-11,共4页
对陈旧性骨骼建立一个高回收率并能除去 PCR 反应抑制物的提取 DNA 的方法。采用 CTAB 法提取 DNA。结果显示,该方法不但能有效去除 PCR 抑制物,而且对水泡、火烧、土埋以及10年左右的骨骼所提取的 DNA 均能成功地进行荧光标记 STR 多... 对陈旧性骨骼建立一个高回收率并能除去 PCR 反应抑制物的提取 DNA 的方法。采用 CTAB 法提取 DNA。结果显示,该方法不但能有效去除 PCR 抑制物,而且对水泡、火烧、土埋以及10年左右的骨骼所提取的 DNA 均能成功地进行荧光标记 STR 多基因座扩增检验。实验表明,该方法稳定,重复性好,适合陈旧骨骼标本的 DNA 提取。 展开更多
关键词 法庭科学 陈旧性骨骼 荧光标记 STR 复合扩增 法医 DNA 分型 十六烷基三甲基澳化胺(CTAB)
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多重PCR方法检测食品中转基因成分 被引量:16
17
作者 刘光明 苏文金 +3 位作者 梁基选 高榕 宋思扬 陈伟铃 《无锡轻工大学学报(食品与生物技术)》 CSCD 北大核心 2002年第4期379-383,共5页
根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 3 5S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列 ,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 (FDCP) ,分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分 3 5S启动子... 根据转基因农作物中最常用的花椰菜花叶病毒启动子 (CaMV 3 5S)和根癌农杆菌终止子(NOS)的序列 ,设计合成了两对不同的引物和相对应的两种荧光双链探针 (FDCP) ,分别建立了多重PCR、应用FDCP的实时荧光PCR同时检测转基因成分 3 5S启动子和NOS终止子的方法 .并利用该套方法对马铃薯、大豆、玉米、甜椒、番茄等实物样品进行了检测 ,发现 1 3份样品中有 6份检出3 5S启动子、NOS终止子 ,其余 7份样品的检测结果为阴性 .表明作者建立的多重PCR方法能有效检测出 3 5S和NOS成分 ,其中多重PCR法具有灵敏度高、特异性好的特点 ,多重荧光PCR法则更为简便、快速。 展开更多
关键词 多重PCR方法 检测 食品 转基因成分
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5个X-STR基因座荧光复合扩增体系的建立及法医学应用 被引量:4
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作者 刘秋玲 吕德坚 +3 位作者 孙宏钰 陆惠玲 伍祥林 伍新尧 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1459-1462,共4页
为了发掘更多多态性高的X染色体短串联重复(X-STR)基因座,以解决法医学实践中的特殊案例,建立了一组荧光复合扩增体系,同时检测DXS6803、DXS981、DXS6809、DXS6789和DXS7132 5个X-STR基因座,并用ABI PRISM 3100作毛细管电泳和GeneMapper... 为了发掘更多多态性高的X染色体短串联重复(X-STR)基因座,以解决法医学实践中的特殊案例,建立了一组荧光复合扩增体系,同时检测DXS6803、DXS981、DXS6809、DXS6789和DXS7132 5个X-STR基因座,并用ABI PRISM 3100作毛细管电泳和GeneMapper ID 3.1软件进行基因分型,结果清晰,灵敏度高,重复性好。最低检出限为0.25 ng,10~20 ng模板DNA能得到最佳结果,在实际检案中能得到满意结果。实验表明,本体系能为用X-STR基因座解决特殊的亲权鉴定案提供快速鉴定技术,是常染色体STR、Y-STR等鉴定方法的良好补充,在法医学实践中有较好的实用价值。 展开更多
关键词 X染色体短串联重复(X-STR) 荧光复合扩增 亲权鉴定 法医学应用
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3个X-STR基因座荧光标记复合扩增(英文) 被引量:3
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作者 刘秋玲 吕德坚 +3 位作者 祝家镇 陆惠玲 罗艳敏 方群 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1053-1059,共7页
为研究DXS6803、DXS981和DXS68093个基因座多态性及其在法医学中的应用,建立X染色体基因座(DXS6803、DXS981和DXS6809)的荧光复合扩增体系。用荧光标记引物PCR技术复合扩增3个基因座,并用ABIPRISM3100毛细管电泳及其软件进行基因分型。... 为研究DXS6803、DXS981和DXS68093个基因座多态性及其在法医学中的应用,建立X染色体基因座(DXS6803、DXS981和DXS6809)的荧光复合扩增体系。用荧光标记引物PCR技术复合扩增3个基因座,并用ABIPRISM3100毛细管电泳及其软件进行基因分型。结果在中国汉族340名无关男性个体及195名无关女性个体中,DXS6803、DXS981和DXS6809三个基因座分别发现了13、12、11个等位基因,男性个体共检出183种单倍型,单倍型多样性为0.9926。结果表明这3个基因座有较高的多态性信息,在个体识别和亲权鉴定(特别是在缺失双亲的特殊检案)中有重要的应用价值。 展开更多
关键词 X—STR 荧光复合扩增 毛细管电泳 多态性
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应用多重实时荧光PCR检测蜡样芽胞杆菌毒力基因 被引量:4
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作者 刘芳 陈国培 +4 位作者 王远洋 郭正洋 陈晶 刘钟栋 兰全学 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期255-260,共6页
目的:建立一种快速、准确、简便的蜡样芽胞杆菌毒力基因检测方法,为蜡样芽胞杆菌更深入的研究提供依据和便利。方法:采用Taq Man探针法设计了三重hbl A,hbl C,hbl D基因,三重nhe A,nhe B,nhe C基因,三重ces,ent FM,bce T基因的多重实时... 目的:建立一种快速、准确、简便的蜡样芽胞杆菌毒力基因检测方法,为蜡样芽胞杆菌更深入的研究提供依据和便利。方法:采用Taq Man探针法设计了三重hbl A,hbl C,hbl D基因,三重nhe A,nhe B,nhe C基因,三重ces,ent FM,bce T基因的多重实时荧光PCR体系检测蜡样芽胞杆菌毒力基因。结果:多重体系对蜡样芽胞杆菌毒力基因的检测具有良好的特异性和灵敏性,其最低检出限为63 CFU/m L。结论:利用上述体系对蜡样芽胞杆菌的毒力基因进行检测能够省时省力,特异性、灵敏性良好,具有实际应用价值。 展开更多
关键词 蜡样芽胞杆菌 多重Taq Man实时荧光PCR 毒力基因
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