雄激素对卵泡发育影响的双重性

Follicular development is under the strict control of endocrine,paracrine and autocrine mechanism,among which androgen may have double impact on follicular development.Moderate androgen could contribute to facilitating the initiation of follicles from reserve to growth pool and ongoing follicular development.Androgen had been used to improve ovarian response and enhance the efficiency of ovulation introduction.On the other hand,hyperandrogenism in PCOS may inhibit selective follicle growth,lead to follicular arrest,and finally anovulation.

抗苗勒管激素与多囊卵巢不孕患者有无排卵的相关关系

目的研究抗苗勒管激素(AMH)与多囊卵巢(PCO)不孕患者有无排卵的关系,探讨AMH在卵巢卵泡生长和发育停滞中的作用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测35例正常卵巢形态的排卵妇女(A组)、29例PCO伴正常排卵妇女(B组)和38例PCO伴排卵障碍妇女(C组)的月经第2d(d2)血清及排卵前卵泡液(FF)的AMH水平。结果B组和C组的月经d2血清AMH水平比较,差异无显著性(5.87ng/ml和7.99ng/ml;P>0.05),但显著高于A组(2.52ng/ml;P<0.01)。月经d2血清AMH与小窦泡卵数呈正相关(r=0.53;P<0.05)。B组和C组排卵前单卵泡FF的AMH水平比较,差异无显著性(54.77ng/gpro和64.05ng/gpro;P>0.05),但显著高于A组(29.45ng/gpro;P<0.05)。结论多囊卵巢患者血清AMH水平升高,其颗粒细胞可能存在AMH分泌异常,但多囊卵巢患者AMH水平的增高可能不是造成卵泡生长停滞的原因。

卵泡颗粒细胞维持山羊卵母细胞减数分裂抑制状态的研究

通过在卵母细胞体外成熟过程中添加不同浓度的卵丘细胞或其外围壁层颗粒细胞进行共培养,对山羊卵母细胞成熟过程中卵泡颗粒细胞对卵母细胞减数分裂抑制作用及作用机制进行了探索。结果表明,成熟液中添加105和106个/mL卵丘细胞或外围壁层颗粒细胞的卵母细胞体外成熟率与对照组相比差异不显著(p>0.05),但添加5×106个/mL(41.2%)和107个/mL(24.6%)卵丘细胞或外围壁层颗粒细胞组的成熟率显著降低(p<0.05);添加5×106和107个/mL卵丘细胞组和颗粒细胞组卵丘不能正常扩展,卵母细胞核状态观察,停留在GV期;Rp-cAMP(Rp-cyclicadenosine monophosphothioate)膜渗透性cAMP对抗剂,诱导了107个/mL的卵丘细胞组(71.6%)和外围壁层颗粒细胞组(71.3%)的卵母细胞体外成熟率与对照组(72.0%)差异不显著(p>0.05)。在山羊卵母细胞体外成熟过程中,添加一定浓度的卵丘细胞及其外层的颗粒细胞可以提高卵母细胞胞质内的cAMP的水平,抑制卵母细胞减数分裂的启动,使卵母细胞停留在GV期。

绵羊卵泡成分对卵母细胞体外减数分裂调控的研究

哺乳动物卵巢中的卵母细胞一直处于减数分裂的停滞状态,卵泡内各成分被认为是产生抑制因子的主要来源。本研究以绵羊卵泡各成分为研究对象,用共培养的方法对卵丘细胞、颗粒细胞、膜细胞在卵母细胞体外减数分裂过程中的作用加以探讨。结果表明:1.卵泡整体及卵泡分泌物在体外可以有效地维持减数分裂停滞,经过24h培养,这两个处理组中,处于GV期的卵母细胞分别为69.6％和49.1％。经抑制处理后的卵母细胞脱离抑制环境后可以继发成熟,MⅡ比率可达88.9％。去掉卵丘细胞的裸卵其减数分裂过程不能被卵泡分泌物有效抑制,24h培养后其GV期比例为17.8％。以上结果说明卵泡中的抑制因子主要是通过卵丘细胞来发挥其调控作用的。2.用颗粒细胞与卵母细胞共培养,结果发现具有颗粒细胞卵丘细胞缝隙连接的卵母细胞(COCs)在培养24小时后47.4％达到MⅡ,与在不具有细胞连接的悬浮颗粒细胞中共培养的卵母细胞之间存在无显著差异,无论是紧密连接的颗粒细胞层还是悬浮在培养液中的颗粒细胞都不能有效抑制生发泡破裂(GVBD)的发生,只能将卵母细胞抑制在MⅡ以前的各个时期。以上结果说明颗粒细胞在体外分泌抑制因子的活力大大下降。3.卵泡膜细胞具有分泌抑制成熟分裂因子的能力,与膜细胞层共培养的卵母细胞在8h和24h时。

绵羊卵泡液和次黄嘌呤对卵母细胞体外减数分裂的影响

目的 利用在培养液中添加绵羊卵泡液和次黄嘌呤 ,抑制卵母细胞GVBD发生 ,延长转录活性 ,从而使卵母细胞真正成熟 ,提高胚胎质量及生产效率。方法 利用体外成熟技术对有屠宰采集的绵羊卵母细胞进行培养 ,培养液中添加卵泡液及次黄嘌呤 ,检查成熟效果。结果 将卵母细胞培养在 5 0 %和 10 0 %的卵泡液中 ,2 4h后处于GV期的卵母细胞分别为 19% (8 4 2 )和 33 3% (13 39)。在含有 4mmol L次黄嘌呤的培养液中 ,2 4h后有2 1 6 % (16 74 )的卵母细胞处GV期 ,而对照组中只有 6 % (3 5 0 ) ,经过次黄嘌呤处理的卵母细胞多数都停滞于PⅠ期(44 6 % ,33 74 )。在 4mmol L次黄嘌呤培养液中添加FSH并未使受到抑制的卵母细胞诱导成熟。结论 卵泡液和次黄嘌呤只能在有限的程度上抑制减数分裂的重新启动 ,并对减数分裂的全过程都有影响 ,这种影响程度与抑制因子的浓度相关 ,存在明显的剂量效应。