微波辅助提取紫背天葵食品色素的研究

研究了微波辅助提取紫背天葵食品色素的新工艺,最佳工艺条件为:紫背天葵干花2g,提取剂为60%乙醇,提取剂用量为60g/mL,微波功率648W,提取时间200s,提取次数2次。在此条件下,色素提取率为96.8%,产率为9.98%,色价(1%,526nm)为10.5,pH值为6.5。

银染法对荞麦等6种粮食作物种子蛋白亚基指纹研究

利用SDS-PAGE和银染检测技术,对我国苦荞、甜荞、小麦、玉米、糯稻米、籼稻米等6种常见粮食粉的种子蛋白亚基进行比较研究,为其鉴别提供经济、快捷、有效的方法。结果发现:甜荞品种间种子蛋白亚基丰富,并显示高度变异性;苦荞种子蛋白质亚基不如甜荞丰富,各品种蛋白亚基变异性不高;荞麦在种子蛋白亚基指纹上与小麦、玉米、糯稻米、籼稻米等粮食粉均有显著差异,可以作为不同粮食作物种子粉鉴别的依据。

食源性致病菌的核酸可视微阵列检测技术

建立了一种快速检测3种食源性致病菌的核酸可视微阵列。分别设计与沙门氏菌invA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因、志贺氏菌ipaH基因两端互补的基片探针和检测探针,设计3种基因的特异靶序列,特异靶序列或基因组DNA一端与固定在玻片上的氨基化基片探针杂交,另一端与巯基化检测探针连接形成复合体。使胶体金与检测探针结合,通过银染放大信号,检测3种食源性致病菌DNA。结果表明:通过对检测探针分别与基因组DNA、PCR产物及特异靶序列的杂交银染结果比较,3种结果都显示阳性,表明该方法可直接利用基因组DNA实现对食源性微生物的快速、高效检测,对3种食源性致病菌DNA的检测下限为1 pmol/L,在1 mmol/L^1 pmol/L浓度范围内得到肉眼可见的清晰结果。探针与基因组DNA的杂交实验结果表明,微阵列对3种食源性微生物的检测具有较好的特异性。说明该技术可快速、简便检测食源性微生物,市场前景广阔。

干燥鸡胸肉宠物食品护色研究

为研究干燥鸡胸肉宠物食品在生产和贮藏过程中的颜色变化,减少因颜色变化引起的产品质量问题,采用三因素二次通用旋转组合设计,研究二丁基羟基甲苯(BHT)、柠檬酸和焦亚硫酸钠3种抗氧化剂对干燥鸡胸肉干贮藏过程中颜色变化影响规律。结果表明,BHT的护色效果最好,焦亚硫酸钠的护色效果次之,柠檬酸的护色效果最差。复配试验结果表明,0.02%BHT、0.10%柠檬酸、0.05%焦亚硫酸钠的组合配方护色效果最好,可有效改善干燥鸡胸肉宠物食品在生产和贮藏过程中颜色变化问题。

免疫金银染色法快速检测水产品中孔雀石绿残留的研究

目的研究一种快速、稳定地检测水产中孔雀石绿残留的方法。方法基于胶体金免疫层析技术,采用竞争法,以硝酸纤维素(nitrocellulose,NC)膜为载体,以孔雀石绿单克隆抗体为标记蛋白,制备一种金标免疫层析试纸条用于渔药残留快速检测,同时用免疫金银染色法提高试纸条的灵敏度。结果该检测系统选用20nm直径的胶体金用于标记抗体,最适p H为9.0,最适蛋白结合量为每1 m L胶体金结合15μg抗体蛋白。标记成功的抗体以1:10比例稀释并取20μL固定到用PBS(0.01 mol/L,10%蔗糖,0.05%吐温-20)预处理过的玻纤膜上,作为金标垫。用于包被NC膜的抗原与二抗浓度分别为3 mg/m L和0.7 mg/m L。用免疫金银染色法放大显色信号,制备的试纸条检出限为0.2 ng/m L,并应用到实际鱼样的检测中。整个测试时间约为10 min。结论本方法重现性良好,且置于室温环境下保存90 d后仍稳定可靠,为水产品中孔雀石绿残留的快速检测提供了一条可行途径。

专利蓝Ⅴ号钠盐注射液细菌内毒素检查法的研究

目的:建立肿瘤检测用药物专利蓝Ⅴ号钠盐注射液细菌内毒素检查方法。方法:按《中国药典》2015年版细菌内毒素检查法,对不同批号的样品进行干扰试验和细菌内毒素检查。结果:高浓度专利蓝Ⅴ号钠盐注射液对鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应有干扰作用,在稀释120倍时可排除干扰。结论:本试验建立的细菌内毒素检查方法可用于专利蓝Ⅴ号钠盐注射液的细菌内毒素检查,控制其产品质量。

2种食源性微生物胶体金银染技术的检测方法研究

目的建立一种可视化快速检测食源性微生物的新方法。方法设计与沙门菌Inva基因,大肠杆菌uid A基因5'端和3'端互补的巯基化探针和氨基化探针以及靶探针。氨基化探针连接醛基化玻片,并与提取的靶DNA或靶探针互补连接,靶DNA或靶探针另一端再与巯基化探针连接形成复合结构;利用胶体金生物亲和性好的特点,让胶体金和巯基化探针连接,银染放大信号,检测微生物。结果靶探针和靶DNA与两种探针杂交时分别选择1 mmol/L、100 nmol/L、1 nmol/L、100 pmol/L、1 pmol/L 5种浓度,并用不同靶DNA作对照;探针最低浓度为1 pmol/L,细菌靶DNA最低浓度为1 pmol/L,银染结果肉眼清晰可见。进一步验证实验结果,扩增Inva基因和uid A基因,分别得到400 kb和300 kb PCR产物,并与探针杂交银染,也得到了肉眼可见的清晰结果。结论该方法可以快速、简便的检测食源性微生物,市场前景广阔。