慢性阻塞性肺疾病的骨骼肌功能障碍与FOXO

骨骼肌功能障碍是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的重要组成部分,它包括呼吸肌以及外周非呼吸肌的功能下降,具体表现为:肌肉体积减小,运动强度下降,运动耐力下降。骨骼肌功能障碍严重影响到COPD患者的生活质量及疾病的预后。但是目前COPD的骨骼肌功能障碍发生的具体机制尚不十分明确。研究证实叉形头转录蛋白因子-O(fork head transcr iption factor protein O,FOXO)在维持骨骼肌的功能中具有重要作用。现就COPD患者的骨骼肌障碍与FOXO的关系进行综述。

PI3K/AKT/FOXO信号通路介导的自噬在糖尿病认知功能障碍中的作用

糖尿病作为一种高血糖为主要特征的代谢性疾病,会引起中枢神经系统损伤,造成脑组织结构和功能改变,进而导致认知功能障碍。目前,糖尿病对认知功能障碍的影响及相关调控机制已成为国内外研究的热点和难点。磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶B/叉头样转录因子(PI3K/AKT/FOXO)通路是自噬的重要上游调控机制。本文概述了PI3K/AKT/FOXO信号通路可调控Gs,Bnip3和Spk2等基因的表达;GS可以通过调控Gln-mTORC1通路,从而激活自噬;BNIP3促进LC3表达,上调自噬水平;此外,AMPK-FOXO3a-mTORC1也是自噬的重要上游调控机制。以上研究提示,FOXO3a可能是糖尿病认知功能障碍(DACD)治疗的重要靶点。通过本综述为临床上治疗DACD及其相关药物的研发提供更为深入的理论依据和分子靶点。

肝细胞癌患者TACE术后血清GP73、FOXP3表达及其与疗效的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者经肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗后血清高尔基体蛋白73(GP73)、叉头状螺旋转录因子(FOXP3)表达变化及其与疗效的关系。方法选取2019年5月至2021年8月在同济医学院附属同济医院接受TACE治疗的HCC患者198例。按照临床疗效判定标准将患者分为有效组(n=122)、无效组(n=76),对比两组患者治疗后GP73及FOXP3水平;分析GP73、FOXP3表达与临床疗效的关系;根据预后结局分为预后良好组(n=104)及预后不良组(n=94)。多元logistic分析影响预后的危险因素;ROC评估GP73、FOXP3联合检测对HCC患者的预后评估效能。结果有效组患者TACE治疗后的GP73、FOXP3表达显著低于无效组分别为158.67±69.53比179.73±61.35、0.65±0.18比0.77±0.20(P<0.05)。Spearman相关系数显示GP73、FOXP3表达与临床疗效之间均呈显著负相关(r=-0.662、-0.688,P<0.05);经Logistic回归结果显示,Child-Pugh分级、GP73、FOXP3是影响HCC患者预后的危险因素。联合GP73、FOXP3检测的曲线下面积为0.834,显著高于单一检测的0.653、0.597(Z=4.415、5.660,均P<0.01),敏感度为87.23%、特异度为85.58%。结论血清GP73、FOXP3表达与HCC患者TACE的疗效及预后均具有重要关联,联合GP73、FOXP3检测可提高对HCC患者预后的评估。

慢性阻塞性肺疾病的炎症反应与Foxp3、T-bet、GATA3表达失衡有关

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠调节性T细胞(Treg)、叉头状转录因子3(Foxp3)、T-bet、GATA连接蛋白3(GATA3)的变化。方法将30只大鼠随机分为对照组、模型组,每组15只。模型组大鼠采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入方法建立COPD模型。模型复制成功第28天,采用ELISA检测大鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)白介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平,流式细胞术检测外周血Treg表达,分别采用逆转录PCR及Western blot法检测肺组织Foxp3、T-bet、GATA3mRNA和蛋白表达。结果模型组大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润,肺组织结构破坏。与对照组比较,模型组大鼠血清IFN-γ表达升高(P<0.01),IL-4、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg降低(P<0.05);模型组Foxp3、GATA-3mRNA、蛋白表达降低,T-bet mRNA和蛋白升高(P<0.01)。相关性分析显示,T-bet、GATA-3、Foxp3基因和蛋白表达与IL-4、IFN-γ分泌相关(P<0.05)。结论 COPD炎症反应与T-bet、GATA-3、Foxp3表达失衡有一定关系。

非小细胞肺癌患者癌组织中HMGB1、MMP-9和FOXP3表达水平及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者癌组织中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子(FOXP3)表达水平及临床意义。方法选取100例NSCLC患者作为研究对象,采用回顾性分析法分析所有患者的临床资料及随访资料,根据其资料结果收集100例NSCLC患者的100份癌组织(研究组)及100份癌旁正常组织标本(对照组),所有标本组织均行HMGB1、MMP-9和FOXP3水平的检测,根据其资料及检测结果记录所有患者的性别、年龄等一般临床资料及肿瘤情况、HMGB1、MMP-9和FOXP3水平及预后等情况。结果(1)NSCLC患者癌变组织中HMGB1、MMP-9和FOXP3的阳性表达率均显著高于癌旁正常组织,比较差异间均具有统计学意义(P<0.05);(2)HMGB、MMP-9和FOXP3阴性和阳性患者其5年总生存率差异均具有统计学意义(分别为χ^2=6.863,P=0.009;χ^2=5.804,P=0.016;χ^2=8.854,P=0.003);(3)吸烟、肿瘤低分化、出现淋巴结转移以及HMGB1、MMP-9、FOXP3阳性表达和临床分期为Ⅲ+Ⅳ期的NSCLC患者其5年生存率均显著降低(P<0.05);(4)经多因素Cox比例风险回归模型分析:肿瘤低分化、临床分期为Ⅲ+Ⅳ期、出现淋巴结转移及HMGB1、MMP-9、FOXP3阳性均为影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论HMGB1、MMP-9和FOXP3在NSCLC患者的癌组织中均表现为较高水平,且其阳性表达联合肿瘤低分化、临床分期为Ⅲ+Ⅳ期和出现淋巴结转移均为影响NSCLC患者预后的独立危险因素。

免疫浸润相关基因mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达及其与预后的关系

目的探讨免疫浸润相关基因mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中的表达水平及其与预后的关系。方法选取延安大学附属医院2017年1月至2019年1月宫颈癌患者74例作为宫颈癌变组,宫颈癌前病变患者74例作为宫颈癌前病变组,另选取同期因子宫肌瘤行子宫切除术患者74例作为宫颈正常组,比较3组免疫浸润相关基因[人类白细胞抗原G(HLA-G)、叉状头螺旋转录因子3(FOXP3)、T细胞免疫球蛋白粘连蛋白-3(TIM-3)]、恶性生物学行为相关基因[侵袭基因p21-活化的激酶6(PAK-6)、zeste 2多梳抑制复合物2亚基增强子(EZH2)、增殖基因血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)、同源盒基因B7(HOXB7)]的mRNA相对表达量,分析免疫浸润相关基因与宫颈癌发生及宫颈癌恶性生物学行为的关系,并统计对比不同免疫浸润相关基因表达水平患者3年生存率。结果HLA-G、FOXP3、TIM-3 mRNA相对表达量为宫颈癌变组>宫颈癌前病变组>宫颈正常组(P<0.05);不同临床分期、分化程度,以及有无淋巴结转移、有无脉管浸润患者的HLA-G、FOXP3、TIM-3、PAK-6、EZH2、ANGPTL4、HOXB7 mRNA相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA高表达患者宫颈癌前病变进展至宫颈癌的风险分别是低表达患者的3.005倍、4.654倍、3.343倍;宫颈癌患者HLA-G、FOXP3、TIM-3 mRNA与侵袭相关基因PAK-6、EZH2 mRNA、增殖相关基因ANGPTL4、HOXB7的mRNA表达呈正相关(P<0.05);随访3年,失访2例,72例宫颈癌患者3年生存率为68.06%(49/72),HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA高表达患者3年生存率均低于低表达患者(P<0.05)。结论免疫浸润相关基因HLA-G、FOXP3、TIM-3的mRNA在宫颈癌与宫颈癌前病变中呈上调表达,会显著增加宫颈癌发病风险,且与宫颈癌恶性生物学行为密切相关,还可能对生存预后产生重要影响。

基于Akt/FoxO信号通路探讨熊果酸对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察熊果酸对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响及具体的分子机制。方法:选用人源结直肠癌细胞RKO为研究对象,用细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度的熊果酸(0、5、10、15、20、25、30μmol·L^(-1))处理RKO细胞的增殖抑制率,计算出24、48 h的半抑制浓度(IC50)。后续实验根据熊果酸处理RKO细胞24 h的IC50,选用2个浓度开展。集落形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测熊果酸处理RKO细胞后的凋亡率及细胞周期阻滞情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测熊果酸作用RKO细胞24 h,RKO细胞中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Raji细胞中Bcl-2、人T淋巴细胞白血病PMA反应基因(Noxa)凋亡蛋白表达情况,细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A(p21)、周期蛋白依赖激酶抑制因子1B(p27)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)周期相关的蛋白表达情况,以及蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、叉头框蛋白O3a(FoxO3a)、磷酸化FoxO3a(p-FoxO3a)通路蛋白表达情况。结果:与空白组比较,熊果酸组能够抑制RKO细胞的活力(P<0.05,P<0.01),熊果酸组RKO细胞的克隆形成率明显降低(P<0.05,P<0.01),呈现浓度依赖性;与空白组比较,熊果酸组熊果酸组(20μmol·L^(-1))细胞发生了周期阻滞,在合成前期即G0/G1期明显升高(P<0.05);与空白组比较,熊果酸组(15、20μmol·L^(-1))p21、p27蛋白表达增加,CDK4蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),熊果酸组细胞凋亡率升高,熊果酸组(20μmol·L^(-1))凋亡相关蛋白Bax、Noxa表达升高,Bcl-2表达降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组比较,熊果酸组(20μmol·L^(-1))下调p-Akt蛋白的表达,且上调p-FoxO3a的表达(P<0.05,P<0.01),Akt和FoxO3a总蛋白无明显变化。结论:熊果酸能够有效抑制结直肠癌细胞RKO的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与Akt/FoxO途径有关。

卵泡液 FoxO1 mRNA、 Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者IVF-ET临床妊娠的效能研究

目的探讨卵泡液中叉头框转录因子O亚族1(Forkhead box transcription factor O1, FoxO1)mRNA、天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)mRNA、生长分化因子-9(growth differentiation factor-9, GDF-9)水平与优质胚胎数的相关性及其预测不孕患者体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)临床妊娠的效能。方法选取2017年2月至2020年1月期间驻马店市中心医院收治的468例接受IVF-ET治疗的不孕患者进行病例对照研究, 根据是否妊娠分为妊娠组(n=248)、未妊娠组(n=220), 比较两组一般资料、取卵日性激素水平、卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平。采用Pearson分析卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9之间及其与优质胚胎数的相关性, 采用logistic回归方程分析IVF-ET临床妊娠的相关因素并以受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线分析卵泡液FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9预测临床妊娠的效能。结果妊娠组优质胚胎数多于未妊娠组[(2.59±0.68)枚比(1.78±0.62)枚, P<0.001], 基础卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone, FSH)水平、基础黄体生成素(luteinizing hormone, LH)水平低于未妊娠组[(7.16±0.29)U/L比(6.21±0.34)U/L, (8.72±1.24)U/L比(10.65±1.01)U/L, 均P<0.001], 取卵日雌二醇高于未妊娠组[(848.18±50.68)ng/L比(605.35±46.79)ng/L, P<0.001]。妊娠组FoxO1 mRNA、GDF-9水平高于未妊娠组, Caspase-3 mRNA水平低于未妊娠组(均P<0.001);FoxO1 mRNA与Caspase-3 mRNA呈负相关, 与GDF-9呈正相关(均P<0.001);Caspase-3 mRNA与GDF-9呈负相关(均P<0.001);FoxO1 mRNA、GDF-9与优质胚胎数呈正相关, Caspase-3 mRNA与优质胚胎数呈负相关(均P<0.001)。多元线性回归分析显示, 在排除混杂因素后, FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与优质胚胎数相关(均P<0.001)。以IVF-ET临床妊娠为因变量, 纳入优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9为自变量进行logistic回归方程分析, 结果显示优质胚胎数、基础FSH、基础LH、取卵日雌二醇、FoxO1 mRNA、Caspase-3、GDF-9均与临床妊娠结局显著相关(均P<0.001)。FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平联合预测IVF-ET临床妊娠的曲线下面积(area under curve, AUC)值为0.891, 大于FoxO1 mRNA指标单独检测(AUC=0.796, P=0.012)。结论 FoxO1 mRNA、Caspase-3 mRNA、GDF-9水平与胚胎发育及性激素水平有关, 且FoxO1 mRNA、GDF-9水平升高, Caspase-3 mRNA水平降低有利于临床妊娠, 三者联合检测可为评价IVF-ET临床妊娠提供参考。

微RNA-132和FOXA1在视网膜母细胞瘤中的表达水平及意义

目的研究微RNA-132(miR-132)、转录因子叉头框蛋白A1(FOXA1)在视网膜母细胞瘤(RB)的表达水平及其临床意义。方法选取2013年2月至2020年1月该院诊治的58例RB患者为RB组,并以同期60例体检健康者为对照组。以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测所有受试者血清miR-132、FOXA1表达水平;分析RB患者血清miR-132、FOXA1表达水平与临床病理特征的关系;分析RB患者血清miR-132与FOXA1表达水平的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清miR-132、FOXA1对RB的诊断价值。结果RB组血清miR-132、FOXA1表达水平均明显高于对照组(P<0.05);RB患者血清miR-132、FOXA1表达水平均与RB患者视神经浸润、淋巴结转移、分化程度相关(P<0.05),与RB患者性别、年龄、受累眼无明显相关性(P>0.05);RB患者血清miR-132与FOXA1表达水平呈正相关(r=0.598,P<0.05);血清miR-132、FOXA1对RB诊断的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.807、0.826,截断值分别为1.31、1.40,相应灵敏度分别为72.4%、70.0%,特异度分别为81.0%、86.2%;二者联合诊断RB的AUC为0.910,相应灵敏度、特异度分别为89.7%、84.5%。结论miR-132、FOXA1在RB患者血清中均呈高表达,miR-132与FOXA1可能相互作用进而影响RB发展进程,二者有望成为RB临床诊断的生物标志物。