吉马酮通过FOXO3-FOXM1轴调控甲状腺癌BCPAP细胞的增殖、迁移和化疗耐药

目的:探究吉马酮通过叉头盒蛋白O3(FOXO3)-FOX亚类M1转录因子(FOXM1)信号通路调控人甲状腺癌细胞BCPAP和多柔比星(DOX)耐药BCPAP细胞(BCPAP/DOX)的增殖、迁移和化疗耐药。方法:常规培养BCPAP细胞,用BCPAP细胞构建BCPAP/DOX细胞,用MTT法检测不同浓度吉马酮对BCPAP和BCPAP/DOX细胞增殖的影响。将BCPAP和BCPAP/DOX细胞分为Ctrl组(空白对照)、sh-NC组(转染sh-NC质粒)、低浓度吉马酮组(0.10 mmol/L)、高浓度吉马酮组(0.15 mmol/L)、高浓度吉马酮(0.15 mmol/L)+sh-FOXO3组(转染sh-FOXO3质粒),用转染试剂将sh-NC质粒和sh-FOXO3质粒转至相应的BCPAP和BCPAP/DOX细胞中。用CCK-8法、划痕愈合实验和WB法分别检测各组细胞的增殖、迁移能力,以及FOXO3、FOXM1、BAX、MMP-9和多药耐药-1(MDR-1)蛋白的表达。结果:在BCPAP和BCPAP/DOX细胞中成功地敲减了FOXO3的表达,低浓度和高浓度吉马酮均可显著抑制BCPAP和BCPAP/DOX细胞的增殖、迁移能力,降低细胞中FOMX1、MMP-9或MDR-1(BCPAP/DOX细胞)蛋白的表达,提升FOXO3和BAX蛋白的表达(均P<0.05),与低浓度比较,高浓度吉马酮的作用更为显著(均P<0.05),敲减FOXO3后可部分逆转吉马酮对这两种细胞的作用(均P<0.05)。结论:吉马酮可能通过FOXO3/FOXM1信号通路调控BCPAP和BCPAP/DOX细胞的增殖和迁移能力,降低BCPAP/DOX细胞化疗耐药性。

高糖通过下调FoxO1磷酸化诱导β细胞去分化

胰岛β细胞发生去分化现象是导致其功能减退的机制之一。已有研究证明,Fox O1与β细胞去分化密切相关。然而,高糖是否可通过Fox O1诱导β细胞发生去分化目前尚未见报告。本研究通过不同浓度高糖干预MIN6细胞,采用葡萄糖刺激胰岛素分泌试验(GSIS)检测β细胞功能;实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹、免疫荧光方法检测高糖干预后β细胞内祖细胞标志基因、β细胞标志基因及Fox O1的表达变化。结果显示,不同浓度高糖干预β细胞后,当浓度达到35 mmol/L时,β细胞祖细胞标志基因表达明显增加。且在该浓度时,检测到β细胞标志基因表达明显降低,MIN6细胞葡萄糖刺激胰岛素分泌功能减退,磷酸化Fox O1表达减少。上述结果提示,高糖可诱导胰岛β细胞去分化的发生,其机制可能是通过Fox O1介导。

上皮性卵巢癌组织中FOXC1 mRNA表达变化及其启动子区甲基化情况观察

目的观察卵巢上皮性肿瘤中FOXC1 mRNA表达变化及其启动子区甲基化情况。方法选择30例上皮性卵巢癌(A组)、14例交界性卵巢上皮性肿瘤(B组)和21例良性卵巢上皮性肿瘤患者(C组),取其手术切除卵巢组织标本,用RT-PCR法检测FOXC1 mRNA,用甲基化特异聚合酶链反应方法(MSP)结合琼脂糖凝胶电泳检测FOXC1基因启动子区甲基化状态及频率。结果 A、B、C组FOXC1 mRNA相对表达量分别为0.38±0.16、0.61±0.18、1.19±0.17,A组低于B组,B组低于C组(P均<0.05)。A组卵巢癌组织中FOXC1 mRNA相对表达量与临床分期及分化程度无关,与淋巴结转移有关(P<0.05)。A、B、C组卵巢组织中FOXC1基因启动子区甲基化频率分别为66.7%、50.0%、9.5%,A组高于B组,B组高于C组(P均<0.05)。A组FOXC1基因启动子区甲基化、未甲基化者FOXC1 mRNA相对表达量分别为0.32±0.14、0.45±0.17,P<0.05。结论上皮性卵巢癌组织中FOXC1 mRNA表达下降,FOXC1 mRNA表达与上皮性卵巢癌淋巴结转移有关。FOXC启动子区甲基化状态与其mRNA表达抑制相关。

叉头框(Fox)转录因子家族的结构与功能

叉头框(forkheadbox,Fox)蛋白家族是一类DNA结合区具有翼状螺旋结构的转录因子,目前已有17个亚族。Fox蛋白不仅能作为典型的转录因子通过招募共激活因子等调节基因转录,有些还能直接同凝聚染色质结合参与其重构,协同其他转录因子参与转录调节。PI3K-Akt/PKB、TGFβ-Smad和MAPKinase等多条信号通路都可以影响Fox蛋白的磷酸化水平,从而调节其活性。Fox蛋白在胚胎发育、细胞周期调控、糖类和脂类代谢、生物老化和免疫调节等多种生物学过程中发挥作用。

沉默FOXQ1基因抑制肝细胞癌SMMC-7721细胞迁移侵袭能力

目的:探讨沉默又头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)基因后对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)SMMC-7721细胞迁移侵袭能力的影响及其机制。方法:制备FOXQ1-shRNA、NC-shRNA重组慢病毒,将其感染到SMMC-7721细胞中;实验设干扰组、阴性对照组和空白组,用Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭能力;利用qRT-PCR和Western blotting法检测SMMC-7721细胞中FOXQl、MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。结果:随着肝癌SMMC-7721细胞的迁移侵袭能力的增强,FOXQ1的表达逐渐增加;干扰组较阴性对照组与空白组FOXQl表达水平降低[(0.34±0.03)vs(0.89±0.07)和(0.84±0.05),P<0.05];沉默FOXQ1基因后,SMMC-7721细胞的迁移侵袭能力显著下降[(9.67±1.15)vs(25.67±2.08)和(27.33±2.52),P<0.05],MMP-2与MMP-9表达水平下降[MMP-2:(0.35±0.04)vs(0.61±0.05)和(0.65±0.08);MMP-9:(0.40±0.05)vs(0.73±0.07)和(0.77±0.06),均P<0.05]。结论:沉默FOXQl基因的表达能够抑制肝癌SMMC-7721细胞的迁移、侵袭能力,其机制可能与MMP-2与MMP-9的表达下调有关。

异位表达FOXO4对胃癌细胞凋亡的影响

目的应用p CMV5-Flag和p LL3.7真核表达载体构建Forkhead box O4(FOXO4)基因的过表达质粒和干扰RNA表达质粒,研究其对胃癌细胞凋亡的影响。方法将FOXO4基因的开放阅读框克隆入p CMV5-Flag载体,将靶向FOXO4基因的siRNA克隆入p LL3.7载体,获得FOXO4的表达质粒Flag-FOXO4和干扰质粒FOXO4-shRNA。将获得的质粒及对照质粒通过脂质体转染MKN45和SGC7901胃癌细胞,Western blot检测其对细胞中FOXO4蛋白的表达和沉默效率。FCM检测其对细胞凋亡的影响,Western blot检测Cleaved Caspase-3的表达以及应用Real-time PCR检测其对促凋亡转录因子BCL-6的表达的变化。结果成功构建FOXO4的表达质粒Flag-FOXO4和干扰质粒FOXO4-shRNA。Western blot结果表明,Flag-FOXO4可以明显增加细胞FOXO4的表达,FOXO4-shRNA明显抑制细胞FOXO4的表达。FCM结果显示,Flag-FOXO4组与Control组相比较,MKN45细胞和SGC7901细胞凋亡显著增加了16.54%(P<0.001)和26.23%(P<0.001)。Western blot结果显示Cleaved Caspase-3表达与FCM结果一致。Real-time PCR结果表明Flag-FOXO4组细胞FOXO4下游促凋亡基因BCL-6的表达显著增加(P<0.01),FOXO4-shRNA明显抑制了细胞BCL-6的表达(P<0.01)。结论 FOXO4的过表达可能通过增加FOXO4下游促凋亡基因BCL-6的表达促进了胃癌细胞的凋亡。FOXO4的沉默降低了BCL-6的表达。

PI3K/AKT/FoxO信号通路在胰岛素类似生长因子1调节神经细胞PRNP基因表达中的作用

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/叉头状转录因子O亚家族蛋白(Fox O)信号通路在胰岛素类似生长因子1(IGF-1)调节神经细胞PC12细胞株PRNP基因表达中发挥的作用。方法将对数生长期的PC12细胞分为IGF-1组、实验1组和实验2组和对照组。IGF-1组加入终浓度80 ng/m L的IGF-1;实验1、2组先加入25、50μmol/L的PI3K/AKT/Fox O信号通路抑制剂LY294002,37℃培养30 min后再滴入80 ng/m L的IGF-1。对照组不加药物。继续培养24 h。采用实时荧光定量PCR法测算各组PC12细胞PRNP mRNA相对表达量,采用Western blotting法测算各组PC12细胞AKT、磷酸化AKT(p AKT)、Fox O3a和磷酸化Fox O3a(p Fox O3a)蛋白相对表达量。结果 IGF-1组PC12细胞PRNP mRNA及p AKT、p Fox O3a蛋白相对表达量高于对照组(P均<0.05)。实验1、2组PC12细胞PRNP mRNA及p AKT、p Fox O3a蛋白相对表达量低于IGF-1组(P均<0.05),且实验2组低于实验1组(P均<0.05)。结论 IGF-1通过磷酸化PI3K/AKT/Fox O信号通路蛋白AKT、Fox O3a调节PC12细胞PRNP基因表达。

FoxO3a基因rs2253310位点多态性与2型糖尿病的相关性

目的观察辽宁地区2型糖尿病患者Fox O3a基因rs2253310位点多态性,探讨rs2253310多态性与2型糖尿病的相关性。方法纳入2型糖尿病患者374例(病例组),非糖尿病健康志愿者283例(对照组)。检测并比较两组Fox O3a基因rs2253310单核苷酸多态性。测算不同rs2253310基因型患者的BMI,测量收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、空腹血糖(FBG)。结果病例组BMI、SBP、DBP、FBG高于对照组(P均<0.05)。两组Fox O3a基因rs2253310基因型GG纯合子为主,等位基因以G基因为主;病例组rs2253310位点G等位基因频率为73.4%、GG基因型频率为54.01%,对照组分别为74.56%、55.12%,两组相比,P均>0.05。病例组中不同rs2253310基因型患者BMI、SBP、DBP、FBG差异无统计学意义。结论 Fox O3a基因rs2253310位点多态性与2型糖尿病无相关性。

鹅FoxO1基因cDNA序列的克隆及组织表达

为了研究鹅FoxO1(forkhead box O1)基因的功能,根据GenBank已收录的鸡(Gallus gallus)、人(Homo sapiens)和小鼠(Mus musculus)等物种FoxO1基因序列的同源保守区域,设计特异性引物,利用RT-PCR技术克隆鹅FoxO1基因cDNA序列,并对基因序列进行了生物信息学分析。结果表明,成功克隆得到了鹅FoxO1基因cDNA序列,通过BLAST比对,鹅FoxO1基因与原鸡、人、小鼠的核苷酸序列同源性分别为97%、83%、82%,FoxO1基因在四川白鹅中表达水平总体表现为:皮脂>腹脂>腿肌>胸肌>肝脏。因此,FoxO1基因在多个组织中都有表达,且表达差异较大。

FOXD1在胶质瘤组织中的表达及其与患者预后的关系

目的:检测转录因子叉头框(forkhead box,FOX)基因家族成员FOXD1在不同级别胶质瘤组织中的表达,分析FOXD1表达高低与胶质瘤患者预后之间的关系。方法:收集40例中国医科大学附属第一医院神经外科2014年9月至2015年2月行手术治疗的胶质瘤患者肿瘤组织标本,7例颅脑外伤患者内减压切除组织作为对照。通过qRT-PCR以及免疫组化方法分析FOXD1在胶质瘤与正常脑组织中的表达,并行临床病理因素相关性分析。采用Kaplan-Meier法分析FOXD1表达与胶质瘤患者生存期之间的关系,通过检索GEO(GSE4290、GSE2223)及Rembrandt等基因数据库验证FOXD1在胶质瘤组织的表达及其与患者预后的关系。结果:qRT-PCR结果显示WHOⅣ级胶质瘤FOXD1的相对表达量高于正常脑组织以及II级胶质瘤组织(均P<0.01),免疫组化结果显示在胶质瘤组织中FOXD1蛋白的表达与患者WHO病理级别(χ~2=11.73,P<0.01)关联;FOXD1高表达组和低表达组生存率之间差异具有统计学意义(P=0.043)。多个基因数据库检索资料验证结果证实,FOXD1 mRNA在胶质瘤中的表达高于正常脑组织,FOXD1 mRNA表达的升高与胶质瘤患者术后生存期呈负相关。结论:FOXD1在胶质瘤组织中高表达,并且随肿瘤级别升高表达增高,FOXD1的高表达与胶质瘤患者预后呈负相关。

FOXQ1介导TGF-β1信号通路调控胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成

目的:探讨沉默叉头框蛋白Q1(forkhead box Q1,FOXQ1)基因对胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成的影响及其在转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)信号通路中的作用。方法:用FOXQ1-sh RNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒(NC-sh RNA)感染PANC-1细胞,流式细胞术检测感染率,实时荧光定量PCR(q PCR)和Western blotting法检测沉默效果。实验设FOXQ1-sh RNA组、NC-sh RNA组与空白对照组,用人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)进行体外血管生成实验,荧光显微镜下观察细胞血管生成能力。用q PCR、Western blotting法检测VEGF-A、MMP-2 m RNA和蛋白的表达水平;用TGF-β1(终质量浓度5 ng/ml)诱导FOXQ1-sh RNA组和NC-sh RNA组细胞,检测诱导前后细胞体外血管生成能力变化与FOXQ1、VEGF-A、MMP-2表达差异。结果:sh RNA慢病毒感染率为90%左右,FOXQ1-sh RNA组PANC-1细胞的体外血管生成数目显著少于NC-sh RNA组[(9.33±2.08)vs(28.67±2.52)条,P<0.05],其VEGF-A、MMP-2表达下调(均P<0.05)。TGF-β1增强各组细胞体外血管生成能力,促进FOXQ1、VEGF-A、MMP-2 m RNA和蛋白的表达水平(均P<0.05)。结论:FOXQ1介导了胰腺癌PANC-1细胞体外血管生成,其机制可能与VEGF-A和MMP-2的下调有关,且可能受TGF-β1通路的调控。

过表达FOXA2对结直肠癌LOVO细胞增殖和凋亡的影响

目的比较叉头框蛋白A2(forkhead box A2,FOXA2)在结直肠癌细胞系与正常结肠细胞系中的表达差异,并研究FOXA2对结直肠癌LOVO细胞系增殖、迁移以及凋亡的影响。方法 Real-time PCR检测FOXA2 m RNA的表达;在低表达细胞系LOVO细胞中转染过表达FOXA2质粒(FOXA2组)和阴性对照质粒(NC组),以未转染的细胞作为空白对照(CT组),Real-time PCR、Western blot技术验证转染效果;克隆形成实验、划痕实验以及流式细胞术检测过表达FOXA2后结直肠癌LOVO细胞增殖、迁移和凋亡的变化。结果 FOXA2m RNA在4种结直肠癌细胞系中表达均低于正常结肠细胞(P<0.05)。转染FOXA2过表达质粒后,FOXA2组细胞中m RNA和蛋白表达均高于NC组和CT组细胞(P<0.01),NC组细胞中FOXA2 m RNA和蛋白表达与CT组细胞之间差异无统计学意义(P>0.05);与NC组和CT组相比,过表达的FOXA2组LOVO细胞的克隆数和细胞迁移率均降低(P<0.05),NC组和CT组之间的克隆数和细胞迁移率差异无统计学意义(P>0.05);FOXA2组的LOVO细胞凋亡率高于NC组和CT组(P<0.05),NC组细胞凋亡率与CT组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FOXA2在结直肠癌细胞中低表达,过表达FOXA2后会抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移,促进癌细胞的凋亡。

FOXO3相关信号途径影响细胞自噬的研究进展

叉形头转录因子O亚型3(FOXO3)是FOXO家族的重要成员,其广泛参与机体的许多生物学过程,如细胞自噬、氧化应激反应、细胞周期调控及细胞凋亡,但具体的调控机制尚未明确。FOXO3参与自噬调控的活性受磷酸化及乙酰化等修饰的影响,并多与AMP活化的蛋白激酶、磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B等信号转导通路相关。此外,FOXO3还通过调节一些自噬相关基因如微管相关蛋白1轻链3、磷脂酰肌醇-3-激酶/囊泡蛋白分选相关蛋白34、γ氨基丁酸受体相关蛋白1等的转录调控自噬。因此,了解转录因子FOXO3在自噬调节中的作用有助于对经典自噬模型进行探究,也可对自噬相关疾病如肿瘤、衰老以及神经退行性变,包括帕金森病、阿尔茨海默病等疾病的治疗提供线索。

干预FoxM1表达对食管癌细胞增殖、周期及凋亡的影响

目的探讨干预FoxM1表达对食管癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法选择1高表达食管癌细胞株,构建FoxM1-shRNA干扰质粒转染食管癌细胞,观察干预FoxM1表达对食管癌细胞增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果成功转染后细胞中FoxM1蛋白水平表达明显降低(t=13.17,P<0.01),细胞增殖明显受抑并呈时间依赖性,72 h抑制效果最显著(68.0%±6.4%,P<0.05);干预组细胞增殖周期发生G_1期阻滞(59.14%±1.69%vs 40.51%±1.45%,t=14.23,P<0.01)、细胞凋亡增加(2.48%±0.49%vs 35.37%±0.56%,t=76.56,P<0.01)。结论干预FoxM1表达使细胞周期发生G1期阻滞并能促进细胞凋亡,从而抑制TE1细胞增殖,FoxM1可能是食管癌基因治疗潜在的有效靶点。

lncRNA FOXCUT和FOXC1在结直肠癌中的表达及其相关性

目的探析长链非编码RNA(lncRNA)FOXCUT和FOXC1在结直肠癌中的表达及其相关性。方法收集75例结直肠癌组织及癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学、蛋白印迹法检测FOXC1表达水平,Real Time PCR检测FOXCUT mRNA和FOXC1 mRNA表达,并分析其相关性及lncRNA FOXCUT与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织中FOXC1表达和lncRNA FOXCUT高表达率均高于癌旁正常组织(P<0.05)。lncRNA FOXCUT表达与结直肠癌TNM分期、AJCC分期、分化程度、远端转移、淋巴结转移等病理特征相关(P<0.05)。结直肠癌组织FOXC1 mRNA、FOXCUT mRNA表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。经相关性分析,结直肠癌组织FOXC1 mRNA表达与FOXCUT mRNA表达呈正相关(r=0.517,P<0.05)。结论 FOXC1与FOXCUT在结直肠癌组织中呈高表达,且FOXC1 mRNA与FOXCUT mRNA表达呈正相关,推测两者可能相互作用调控肿瘤细胞增殖及侵袭。

鱼藤素通过AKT/FoxO1信号通路诱导胃癌细胞凋亡的作用机制

目的:研究鱼藤素(De)诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的其作用机制。方法:运用CCK-8细胞活力检测法考察不同浓度(10、20、40、60、80、100 mol/L)鱼藤素作用24、48 h对SGC-7901胃癌细胞的细胞毒性;将SGC-7901胃癌细胞分为对照组及20、40 mol/L鱼藤素药物组,给药作用24 h后,蛋白质印迹法检测p-AKT^(Thr308)、叉头框蛋白O1(FoxO1)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)等蛋白的表达水平;运用蛋白激酶B(AKT)基因转染使SGC-7901胃癌细胞中AKT过表达,然后给予20、40 mol/L鱼藤素给药作用24 h,以未用AKT基因转染的SGC-7901胃癌细胞作为对照组蛋白质印迹法检测p-AKT^(Thr308)、FoxO1、Bcl-2等蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FoxO1、Bcl-2、Bax mRNA的表达水平。结果:不同浓度的鱼藤素对SGC-7901胃癌细胞均具有一定的细胞毒性;20、40 mol/L鱼藤素给药作用24 h能够显著降低SGC-7901胃癌细胞中p-AKT^(Thr308)、Bcl-2等蛋白的表达水平,升高FoxO1的表达水平;与对照组比较,AKT基因转染后,SGC-7901胃癌细胞中p-AKT^(Thr308)、Bcl-2等蛋白表达水平升高,FoxO1蛋白表达降低,与模型组比较,20、40 mol/L鱼藤素给药作用后能够降低p-AKT^(Thr308)、Bcl-2等蛋白的表达水平,降低Bcl-2 mRNA的表达水平,升高FoxO1及Bax的表达水平。结论:鱼藤素能够通过作用于AKT/FoxO1信号通路诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡。

IGF-1介导TDAG51对抑郁模型大鼠海马PI3K/Akt/FoxO3a信号通路的影响

目的:探讨胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导T细胞死亡相关蛋白51(TDAG51)对抑郁模型大鼠海马磷脂酰肌苷3激酶/蛋白激酶B/叉头状转录因子O亚族3a(PI3K/Akt/FoxO3a)信号通路的影响。方法:将50只大鼠按分层随机法分为空白对照组、CUMS组、CUMS+IGF-1组、CUMS+LV-TDAG51-shRNA组、CUMS+IGF-1+LV-TDAG51-shRNA组,每组10只。慢性不可预测轻度应激(CUMS)诱导产生抑郁症大鼠模型。CUMS+IGF-1组大鼠注射5 mL IGF-1(5 mg/mL)和300μL LV-NC慢病毒;CUMS+LV-TDAG51-shRNA组大鼠注射5 mL生理盐水和300μL LV-TDAG51-shRNA慢病毒;CUMS+IGF-1+LVTDAG51-shRNA组大鼠注射5 mL IGF-1(5 mg/mL)和LV-TDAG51-shRNA慢病毒。空白对照组及CUMS组大鼠注射5 mL生理盐水和300μL LV-NC慢病毒。检测大鼠体重和蔗糖消耗量的变化;旷场实验检测大鼠自主行为;实时荧光定量PCR检测大鼠海马TDAG51、PI3K/Akt/FoxO3a信号通路相关因子的mRNA表达;Western blot检测TDAG51蛋白表达及PI3K/Akt/FoxO3a信号通路相关因子的磷酸化水平。结果:与空白对照组相比,CUMS组大鼠体重、蔗糖消耗量、水平交叉数、垂直时间和PI3K、Akt、FoxO3amRNA表达及磷酸化水平显著降低(P<0.05);与CUMS组相比,CUMS+IGF-1组和CUMS+IGF-1+LVTDAG51-shRNA组大鼠海马TDAG51 mRNA和蛋白表达、PI3K、Akt、FoxO3a mRNA表达和磷酸化水平显著升高(P<0.05),体重、蔗糖消耗量、水平交叉数和垂直时间显著升高(P<0.05),CUMS+LV-TDAG51-shRNA组则低于CUMS组;与CUMS+IGF-1组相比,CUMS+IGF-1+LV-TDAG51-shRNA组大鼠海马TDAG51 mRNA和蛋白表达、PI3K、Akt、FoxO3a mRNA表达和磷酸化水平显著降低(P<0.05),体重、蔗糖消耗量、水平交叉数和垂直时间显著降低(P<0.05)。结论:IGF-1可能通过介导TDAG51活化抑郁症模型大鼠海马PI3K/Akt/FoxO3a信号通路,改善抑郁症症状。

FOXC1基因对肺癌A549细胞株生物学特性影响

目的探讨沉默叉头框蛋白C1(FOXC1)基因对肺癌A549细胞株生物学特性的影响。方法培养人肺癌A549细胞,随机分为siRNA-FOXC1组、错义siRNA组和空白对照组,应用实时荧光定量PCR技术检测细胞中FOXC1基因表达,Western blot法检测细胞中FOXC1蛋白表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell法检测细胞侵袭能力。结果siRNA-FOXC1组细胞FOXC1mRNA和蛋白相对表达量均低于错义siRNA组和空白对照组,差异均有显著性(F=2 521.827、37.226,P<0.05);siRNA-FOXC1组48、72和96h时细胞存活率均低于错义siRNA组和空白对照组,差异均有显著性(F=22.857～103.502,P<0.05);siRNA-FOXC1组细胞凋亡率高于错义siRNA组和空白对照组,差异有显著性(F=25.844,P<0.05)。划痕实验显示,siRNA-FOXC1组24h后划痕愈合率低于错义siRNA组和空白对照组,差异有显著性(F=70.260,P<0.05)。Transwell实验显示,siRNA-FOXC1组侵袭细胞数低于错义siRNA组和空白对照组,差异有显著性(F=95.879,P<0.05)。结论特异性沉默人肺癌A549细胞中FOXC1基因表达可减少细胞增殖,促进细胞凋亡,有效抑制细胞迁移及侵袭能力。

FOXD3基因在恶性肿瘤中的研究进展

人类叉头框蛋白(FOX)D3是FOX转录因子家族的成员之一,并可作为转录因子发挥许多生物功能,如调控细胞的形成、迁移和分化。此外,FOXD3还可通过与其他转录因子相互作用,参与广泛的生物学过程,如细胞分化、新陈代谢、增殖、迁移、凋亡,甚至肿瘤发生。FOXD3可作为抑癌基因,其在多种类型肿瘤中表达下调,并通过多种信号通路以及癌症相关基因相互作用促进肿瘤的发生和进展。将FOXD3作为恶性肿瘤治疗的新靶点,分析其与肿瘤发生发展的关系,对恶性肿瘤的诊治有重要意义。

利用GEO结肠癌芯片数据分析FOXC1及其相关基因的表达与意义

目的 探讨叉头框C1(forkhead box C1,FOXC1)在结肠癌的表达水平与临床病理特征及预后的关系,并分析预测与其表达密切相关的基因及其参与的生物过程。方法 利用高通量基因表达(Gene expression omnibus,GEO)数据库中结肠癌基因芯片数据分析FOXC1与临床病理特征及预后的相关性,采用R2平台,筛选出与FOXC1表达显著相关的基因进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书通路分析(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析。结果 FOXC1的表达与肿瘤分化程度有关(χ2=7.919,P=0.019)。Kaplan-Meier法分析显示FOXC1的表达与患者的总生存期有相关性(P=0.045)。采用R2平台检测出与FOXC1表达显著相关基因共608个(其中正相关387个、负相关221个),对GO及KEGG通路分析后发现FOXC1高表达的肿瘤样本富集到其中564相关基因,主要涉及到血管生成、细胞增生、凋亡、细胞粘附、蛋白磷酸化信号传导、转录因子结合和上皮间质转化等多个肿瘤发生、发展过程。肿瘤信号通路主要涉及Wnt信号通路。结论 FOXC1表达在结肠癌中是一种不良预后因素,可作为判断预后的标志物。FOXC1表达相关的基因参与了多个结肠癌生物过程和信号通路,可为结肠癌分子标志物的深入研究提供参考。