禽多杀性巴氏杆菌感染对麻保沙星在鸡体内药动学特征的影响研究

按每kg体重30万个CFU在鸡胸部肌肉注射接种禽多杀性巴氏杆菌(C48 1),人工诱发鸡急性多杀性巴氏杆菌病。选用90只51～60日龄健康未经多杀性巴氏杆菌苗免疫的岭南黄鸡,18只用作病理模型研究,其余72只随机分为6组,进行静注、肌注及内服麻保沙星(2 5mg/kg)在健康和禽多杀性巴氏杆菌感染鸡的药物动力学研究。用反相高效液相色谱法测定血浆中麻保沙星的浓度。用MCPKP药物动力学程序处理血浆药物浓度—时间数据。麻保沙星在鸡体内的药动学特征是吸收迅速且完全、分布广泛、消除缓慢。急性禽多杀性巴氏杆菌感染除显著延长了肌注及内服麻保沙星的消除半衰期、血药有效浓度维持时间和降低肌注给药的峰浓度外,对其他药动学参数无显著性差异的影响。

检测禽多杀性巴氏杆菌PCR方法的建立

为禽多杀性巴氏杆菌感染提供特异、敏感的诊断方法,本研究建立了检测禽多杀性巴氏杆菌PCR方法。该方法能从禽多杀性巴氏杆菌扩增出1条460 bp的特异片段,而无法从大肠杆菌、鸭疫里氏杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、禽1型副黏病毒、番鸭呼肠孤病毒和鸭基因组DNA扩增出目的片段。敏感性试验显示该PCR方法最低可检测出1 ng.L-1的细菌基因DNA。

禽霍乱巴氏杆菌的分离鉴定及基因分型

为确定疑似禽霍乱病例病原种类及其病原基因型,本研究采用细菌分离技术对病原菌进行实验室分离培养,应用传统方法和分子生物学方法对分离细菌进行鉴定,并应用PCR扩增和基因序列分析对分离细菌进行基因分型。结果显示,分离菌具有多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)典型培养特征,菌落形态和菌体染色特征、生理生化特性均与多杀性巴氏杆菌相符;PCR扩增到457bp的基因片段。采用5对分型引物对分离菌进行基因分型显示,仅有A型引物扩增到大小1 050bp的目的基因片段,序列分析也显示分离菌荚膜基因与A型多杀性巴氏杆菌参考菌株荚膜特异性基因同源性高达97.6%~100.0%,系统进化与A型多杀性巴氏杆菌处于同一进化分支。结果表明,疑似禽霍乱病例病原为A型多杀性巴氏杆菌,本研究结果将为禽霍乱的防控提供参考资料。

禽霍乱免疫母鸡血清抗体和蛋黄抗体消长规律及其相互关系的研究

通过对禽霍乱菌苗免疫产蛋母鸡的血清和蛋黄的抗体定时检测后发现，免疫母鸡的血清抗体和蛋黄抗体的升降趋势基本一致（ｒ＝０．９４），但后者较前者迟后３～６ｄ；血清抗体和蛋黄抗体的滴度分别在加强免疫后的１～３ｄ和３～６ｄ都有不同程度下降，加强免疫前的滴度越高，免疫后的滴度下降幅度越大；蛋黄抗体水平普遍比血清抗体水平低，两者间的差异极显著（Ｐ＜０．０１），这可能是与禽多杀性巴氏杆菌本身的主要抗原成分（ＴＩ抗原）在鸡体内主要产金ＩｇＭ有关。

三种恩诺沙星盐对人工诱发鸡巴氏杆菌病的疗效比较

采用试管肉汤两倍稀释法 ,测得乳酸恩诺沙星、盐酸恩诺沙星及恩诺沙星钾对鸡多杀性巴氏杆菌的最小抑菌浓度均是 0 .0 5mg/ L。按 5mg/ kg恩诺沙星的剂量 ,分别给人工诱发巴氏杆菌病鸡内服乳酸恩诺沙星、盐酸恩诺沙星及肌注乳酸恩诺沙星、恩诺沙星钾 ,每 1 2 h给药 1次 ,连续3d。这些药物对鸡巴氏杆菌病的治愈率分别为 1 0 0 %、96.7%、1 0 0 %及 1 0 0 %,而感染对照鸡的死亡率为 1 0 0 %。结果表明 ,上述三种恩诺沙星盐对鸡巴氏杆菌病的疗效无显著性差异 ( P>0 .0 5)

禽霍乱油乳剂灭活苗(TJ株)的研制与应用

从天津地区某些发病鸡场分离的２０余株禽多杀性巴氏杆菌中筛选４株（ＴＪ株）作为制苗用菌种，制成油乳剂灭活苗，进行物理性状检验与安全性、免疫性试验。用实验室制备的禽霍乱油乳剂灭活苗（ＴＪ株）对大港、静海等发病鸡场进行免疫接种，完全控制了禽霍乱的流行。

禽霍乱琼扩抗原和抗血清的制备

将禽多杀性巴氏杆菌 1,3和 4型菌株 ,分别接种于加有绵羊血红素的马丁氏肉汤中进行培养 ,将培养物混合后离心 ,并漂洗沉淀物 ,制成琼扩抗原 ,与NDV ,HAAV ,APIV ,IC ,SP ,MG ,MS和IBDV等抗血清无交叉反应。将 3个血清型细菌培养物等量混合后 ,免疫

某养鸡场禽霍乱分离菌对常用抗菌药物的敏感性研究

从六安地区某养鸡场禽霍乱病鸡上分离到1株禽多杀性巴氏杆菌,采用纸片扩散法和试管稀释法分别测定了青霉素钾、土霉素、硫酸卡那霉素、硫酸庆大霉素、硫酸链霉素、复方新诺明、甲砜霉素、氟哌酸、环丙沙星和恩诺沙星等10种药物对分离菌的体外抗菌活性。结果表明分离到的禽多杀性巴氏杆菌对青霉素钾和土霉素耐药;对硫酸卡那霉素、硫酸庆大霉素、硫酸链霉素、甲砜霉素、氟哌酸敏感;对复方新诺明、环丙沙星和恩诺沙星极敏感。两种测定方法得到的结果一致。因此复方新诺敏、环丙沙星和恩诺沙星可作为目前该发病场防治禽霍乱的首选药物。

无血(清)培养基MA_(12)增菌剂的研制及应用——Ⅰ.MA_(12)无血(清)培养基增菌剂对禽多杀性巴氏杆菌增菌效果试验

从多种成分的组合配方中研制成一种增菌效果显著的MA_(12)促细菌生长因子,在禽多杀性巴氏杆菌的培养基中,加入0.05—0.15％MA_(12)可替代3—5％的血(清)浓渡,二者繁殖菌数相似。以此制备的禽霍乱荚膜亚单位苗对家禽具有良好的免疫原性。MA_(12)是一种含植物生长素、微量元素等物质的增菌剂,可高压灭菌,使用方便,是一种廉价的血清代用品。本研究系国内首次报道。

禽霍乱新型疫苗的研究进展

禽霍乱是一种禽类的接触性、系统性传染病,发病率和致死率高,给养禽业发展造成巨大的经济损失。随着病原菌抗生素耐药问题的日益严重,疫苗应成为防控该病的主要手段。目前应用于我国家禽产业的疫苗包括传统的灭活苗和弱毒苗,但它们具有一定缺陷,如油乳灭活苗交叉保护差;自然弱毒株遗传背景不明,毒力时而返强等。因此,研制安全、高效、制备方便的新型疫苗是迫切需求,也是未来研究的趋势。本文针对近年来开发的减毒疫苗、亚单位疫苗、DNA疫苗等多种禽霍乱新型疫苗进行综述,为研制更安全有效的疫苗提供一定的参考。

禽霍乱多杀性巴氏杆菌的分离鉴定

确定某鸭场疑似禽霍乱病的病原种类,为其临床用药提供参考。采用细菌分离技术对病原菌进行实验室分离培养,对分离到的病原菌进行了鉴定、动物攻毒试验、药敏试验和基因分型。结果显示,分离菌20170549具有多杀性巴氏杆菌典型培养特征,菌落形态和菌体染色特征、生理生化特性,基因测序结果均与多杀性巴氏杆菌相符;该菌株对小鼠有强致病性;分离株对头孢噻呋、甲砜霉素、硫酸黏菌素、阿米卡星、恩诺沙星、卡那霉素、庆大霉素、多西环素、氟苯尼考高敏;采用5对分型引物对分离菌进行基因分型,结果仅扩增到大小为1 050bp的目的基因片段,与A型结果相符。研究结果可为禽霍乱的防控提供参考。

禽霍乱诊断及防治

禽霍乱属于一种禽类高传染性疾病,对于家禽的侵害程度极大。禽霍乱由巴氏杆菌所引起,通常以家禽与野禽之间的接触作为传播途径,在巴氏杆菌的侵害下,会导致家禽出现败血症,因此禽霍乱也被称为禽出血性败血症。在禽霍乱高发病率及致死率影响下,极易爆发大规模的传染,使家禽产生发热、腹泻及呼吸困难反应,如应对措施不当,将严重影响家禽养殖产业发展,造成难以承受的经济损失。该文主要论述禽霍乱病原与传播机制,对临床表现及诊断方法进行阐述,并提出相应的防治方法,以提升对禽霍乱的防治能力,为禽类养殖产业安全发展提供支撑。

1株致禽霍乱多杀性巴氏杆菌的病原学与分子生物学鉴定

为确定湖南某鸡场鸡群突然发病死亡的原因,对病料进行细菌分离鉴定,对获得的分离菌株G-2进行了病原学和分子生物学的系统鉴定。通过16S rDNA鉴定和Biolog鉴定,表明该病原菌为多杀性巴氏杆菌杀禽亚种;采用荚膜多重PCR分型、脂多糖多重PCR分型和多位点序列分型对其基因型进行了鉴定,结果显示该菌株为荚膜A型、脂多糖L1型、ST129型。利用SPF鸡进行动物回归试验,结果证实该菌株能引起SPF鸡典型的禽霍乱症状,肌肉注射7 CFU活菌可致死78日龄SPF鸡,10 CFU活菌可致死114日龄SPF鸡。结合临床症状和病理变化,表明引起鸡群死亡的病原为多杀性巴氏杆菌。