Genetic Analysis of Embryo Production Frequency in Wheat × Maize Cross

A DH population derived from C49S-87/01Y1-1069 was used to study the inheritance of wheat haploid embryo production frequency（EPF） in wheat × maize cross with the mixed major gene and polygene inheritance model of quantitative traits. The results showed that the EPF of wheat × maize cross was controlled by two dominant epistatic genes and polygene with gene effects of 1.95 for the first major gene, 6.69 for the second one and 2.80 for the polygene. The inheritability of major genes was as high as 72.09%, suggesting that the differences in EPF among wheat materials were mainly influenced by genotype. However, non-genetic factors were still important, especially for wheat materials with low EPF.

提高小麦×玉米产生的单倍体成胚率的研究

为了提高小麦×玉米产生单倍体的频率,采用人工控制环境条件的室内离体培养法和田间常规杂交法诱导小麦×玉米单倍体,研究了不同生长环境下的成胚率、环境温度对离体培养法成胚率以及T>10℃有效积温对常规杂交法成胚率的影响效果.结果表明,就平均成胚率而言,室内离体培养法(23.6%)高于常规杂交法(18.1%),且以20℃、光照3 000 Lx、12 h/d、相对湿度70%条件下离体培养杂交穗14 d获得的成胚率最高(28.6%);授粉后足够的T>10℃有效积温是高成胚率的必要条件,获得最高成胚率的T>10℃有效积温在187.9～254.9℃之间;授粉后环境温度是影响成胚速率的重要因素,以20℃最佳.

影响大豆体细胞胚萌发率的因素

研究了影响大豆体细胞胚萌发率的几种因素。结果表明 ,基因型间、培养基间大豆体细胞胚的萌发率差异达显著水平 ;同一大豆品种 。

提高大白菜游离小孢子胚诱导率的研究

采用游离小孢子培养方法,对提高大白菜小孢子胚诱导和形成的因素进行了研究.结果表明,24个大白菜品种(品系)在NLN-13液体培养基中有21个品种诱导出胚.各品种间小孢子胚产量差别极大,每花蕾产胚在0.1～14.66个之间.比较添加不同浓度蔗糖和激素的NLN培养基的培养效果,以NLN+13%蔗糖的效果较好.接种后,小孢子在33℃高温预处理24～48 h,产胚量较高.B5+6-BA 0.2 mg/L+3%蔗糖+1%琼脂培养基有利于小孢子胚长成植株.

Cu^(2+)对小麦幼胚脱分化和高频再生特性的影响

以小麦品种(系)千斤早和9848的幼胚组织为材料,研究了Cu2+对小麦幼胚组织脱分化和再分化特性的影响。结果表明,诱导培养基中的Cu2+对小麦幼胚愈伤组织的形成无显著影响,但可显著提高被诱导愈伤组织的再分化能力。在供试Cu2+浓度范围内,千斤早的愈伤组织再分化率比对照提高了37.9%～72.4%,9848比对照提高了8.2%～21.2%。分化培养基中的Cu2+对小麦幼胚愈伤组织再分化的影响表现出低浓度促进、高浓度抑制的效应,对愈伤组织再分化的最佳正向效应浓度千斤早为1.0μmol/L,比对照提高101.4%;9848为1.0～5.0μmol/L,分别比对照提高102.5%～116.6%;Cu2+对小麦幼胚愈伤组织再分化的影响远高于对幼胚组织脱分化的影响。

小白菜游离小孢子培养及其再生植株

在NLN-13添加活性炭的液体培养基中,20个小白菜品种有18个诱导出小孢子胚.各品种间小孢子胚产量差别较大,每花蕾产胚在0.026～26.89个之间.比较NLN培养基中蔗糖、植物生长调节物质浓度效果表明,NLN+蔗糖130 mg·L-1效果较好.接种后小孢子在33℃高温预处理24 h产胚量较高.B5+6-BA 0.1 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1+蔗糖30 mg·L-1+琼脂11mg·L-1培养基有利于小孢子胚长成植株.

小麦×玉米诱导小麦单倍体高效系统的建立

为建立一套高效的小麦×玉米单倍体诱导系统用于构建小麦DH群体,采用杂交后剪穗进行人工控制环境条件的室内离体培养法和田间常规杂交法诱导小麦×玉米单倍体,研究了不同培养环境、离体培养时环境温度、常规杂交法时T＞10℃有效积温对单倍体成胚率和成苗率的影响.结果表明：就平均成胚率而言,离体培养法（23.6%）＞常规杂交法（18.1%）,获得最高成胚率的环境温度为21℃～23℃,T＞10℃有效积温为188℃;就平均成苗率而言,离体培养法（18.7%）高于常规杂交法（15.1%）,获得最高成苗率的环境温度为23℃,T＞10℃有效积温为188℃.并在此基础上建立了一套高效、可靠、重复性好的小麦×玉米单倍体诱导系统.实验还表明大田条件下,授粉后12～14d的培养时间不宜作为小麦×玉米单倍体剥胚的时间标准,而应以授粉后外界环境提供的T＞10℃有效积温作为剥胚的时间标准可能更准确.

提高油菜游离小孢子胚诱导频率的研究

以11个甘蓝型油菜基因型为材料,采用NLN培养基进行游离小孢子培养,对如何提高可培养的基因型范围和产胚率进行了研究。结果表明,11个油菜基因型中有10个基因型可以诱导出胚,培养成功率达90.9%,表明采用NLN培养基进行游离小孢子培养油菜基因型范围比较宽,但各基因型间小孢子胚产量差别很大,每花蕾产胚量为0.08~3.53个,TR4和TR9两个基因型每花蕾产胚可达3.23,3.53个。以TR4和TR9两个基因型为试材,进一步改进培养基和培养方法,采用NLN培养基中添加激素和活性炭方法,可大大提高产胚率,产胚量分别达到7.11和10.05个/蕾;接种后,小孢子经33℃高温预处理可显著影响产胚量。子叶形小孢子胚在光下适当培养后转入B5＋BA 0.2 mg/L＋NAA 0.02 mg/L继代培养基上,大多数胚能长成绿芽,B5＋6-BA 0.2 mg/L＋3%蔗糖＋1%琼脂培养基有利于小孢子胚长成植株。

活性炭对小白菜游离小孢子培养的影响

以24个小白菜品种为材料,通过在NLN培养基中添加不同浓度活性炭,研究其对游离小孢子培养的影响。结果表明：在NLN-13培养基中添加活性炭（0.5 g/L）,有利于小孢子胚的诱导和形成,供试材料（N4,N8）添加活性炭处理胚诱导率较未添加活性炭的处理分别提高19,66.5倍。采用添加活性炭（0.5 g/L）的NLN培养基对24份小白菜品种进行游离小孢子培养,有20份材料诱导出胚,培养成功率为83.3%。表明添加活性炭的培养基对小白菜游离小孢子培养有较好的效果。不同基因型间胚诱导率差别较大,每花蕾诱导胚数为0.4-86.7个。依据胚诱导率的高低可将其分为极易诱导、易诱导、难诱导和不能诱导出胚4类。B5＋6-BA 0.2 mg/L＋NAA 0.02 mg/L＋活性炭0.5 g/L＋3%蔗糖＋1%琼脂培养基有利于幼胚长成植株。

冬小麦×玉米远缘杂交产生小麦单倍体胚的研究

为获得高而且稳定的小麦单倍体胚得胚率,从而使小麦×玉米远缘杂交产生小麦单倍体的方法应用于小麦育种实践,采用三种不同基因型冬小麦材料在四种不同生长环境条件下与玉米进行远缘杂交,使用含四种不同体积浓度二甲基亚砜(DMSO)的100 mg/L 2,4-D溶液进行激素处理,获得小麦单倍体胚。结果表明,三种冬小麦材料与玉米杂交都能获得单倍体胚,但得胚率存在差异,以小偃22最高(9.9%);不同生长环境条件的得胚率也存在差异,以温室条件下的最高(11.2%);不同体积浓度激素处理的得胚率无差异,平均为7.8%;各处理中以温室条件下陕农757用含3%DMSO的100 mg/L 2,4-D溶液进行激素处理的平均得胚率(22.6%)最高。

籼稻巨胚种质的诱变获得及遗传研究

【目的】明确诱发产生巨胚突变的频率和巨胚基因的遗传规律。【方法】以11个籼稻品种为材料,通过60Co-γ射线辐射干种子,种植后收获自然成熟的M2代种子。将种子去壳后肉眼鉴别巨胚突变体(比原胚大至少1倍),计算水稻巨胚性状的突变频率;用通过辐射诱变获得的2个籼稻巨胚品系98-14geB和Mge86与其相应原亲本杂交配成一套F1、F2和BC1F1材料,调查种子胚的大小,研究巨胚性状的遗传。【结果】在M1代混收的M2种子中,水稻巨胚突变的出现频率平均为0.00125%,变幅为0.00029%～0.00285%。本研究以250Gy和350Gy2种剂量分别照射11个籼稻品系的干种子,在其中9个品系中获得巨胚突变体。【结论】本研究取材的2个籼稻巨胚突变体均为单隐性基因突变,且均与粳稻巨胚品种1137的巨胚基因等位,无非等位巨胚基因发现;胚的大小直接由种子基因型决定,而同为胚发育提供营养的母体基因型及细胞质均无关系。

小白菜小孢子培养胚状体的诱导

21个小白菜品种小孢子培养结果表明：适宜的花蕾长为2．5—3．5mm，花瓣与花药长度比为1／2，3／4；0．05～0．10mg·L^-1的细胞分裂素能促进小孢子胚的发生，高于此浓度的细胞分裂素对小孢子胚的产生有抑制作用，并使小孢子胚向畸形化发展；0．05mg·L^-16-BA＋0．10mg·L^-1NAA的配比可以明显提高成熟胚的比例。

龙眼体细胞胚胎的高频率萌发与植株再生

以龙眼胚性愈伤组织诱导产生子叶形胚状体为试验材料，比较了蔗糖、活性炭的质量浓度，椰乳的体积分数，光照度和成熟时间等因素对体胚“成熟”的影响以及不同成熟过程、成熟时间、胚状体形态、品种（基因型）等因素对龙眼体细胞胚胎萌发的影响．结果表明，龙眼体胚在含５０ｇＬ－１蔗糖、体积分数为０．０５的椰乳、１００ｍｇＬ－１肌醇的ＭＳ固体培养基上，在黑暗或弱光条件下，不论白色还是透明化（玻璃化）子叶形小胚状体，都可完成“成熟”过程．体胚对成熟培养的蔗糖质量浓度和成熟时间有特定的要求．经过成熟培养的体细胞胚胎。

影响大白菜游离小孢子培养若干因素的研究

以太原地区大白菜主栽品种的F1“科萌夏秋王”、“科萌78”、“德阳01”等30个品种为试验材料,采用游离小孢子培养方法,研究了基因型、蔗糖、活性炭、细胞分裂素6-BA、生长素NAA、高温热激、氨基酸对小孢子胚胎发生的影响,培养基对子叶期胚分化的影响。研究结果表明：30个品种大白菜在植物组织培养基NLN-13液体培养基中有15个诱导出胚;添加不同浓度蔗糖以NLN-13培养效果最好;合适的活性炭浓度可明显提高小孢子的出胚率;NLN液体培养基中添加NAA和6-BA对小孢子出胚率影响不大,浓度超过一定剂量时出胚率反而降低;高温热激在12-48 h范围内小孢子出胚率差异不大,在此范围以外小孢子出胚率明显降低;添加一定量的氨基酸可提高小孢子出胚率;1 L B5＋0.2 mg 6-BA＋20 g蔗糖＋12 g琼脂培养基有利于小孢子子叶期胚长成再生植株。

小麦玉米杂交中麦穗小花穗位间的成胚率差异研究

为了进一步提高小麦×玉米单倍体胚的成胚率和小麦双单倍体的产生效率,以小麦不同穗位小花对小麦×玉米单倍体胚成胚率的影响进行探讨。利用同一玉米品种给13个小麦DH株系授粉,对授粉后的麦穗进行剪穗离体培养,并镜检不同穗位小花的成胚情况。结果表明,13个DH株系下、中、上3个穗位小花的平均成胚率分别为30.71%、27.83%和11.46%,表现为下部〉中部〉上部,下部和中部小穗的成胚率差异不显著,但均极显著高于上部小穗;13个DH株系从麦穗基部到顶部21个小穗的平均成胚率仍以顶部小穗最低、下部小穗最高,变幅为2.1%-37.96%;3个穗位小穗间成胚率变异系数的大小为中部（CV=10.99%）〈下部（CV=17.45%）〈上部（CV=58.28%）,表明中部小穗单倍体胚的形成最稳定。用营养液对离体培养的9个DH系的麦穗进行3种喷穗处理,结果表明,在穗培养的前3d用穗培养液喷穗,显著提高了中部和上部小穗的成胚率,同时降低了各小穗穗位间成胚率的差异。说明剪穗离体培养中营养供给的差异是造成麦穗小花间成胚率差异的原因之一。

大白菜品种间小孢子培养胚诱导率比较

春白菜、秋白菜和夏白菜的胚诱导率依次增高;早熟、中熟和晚熟品种胚诱导率逐渐降低;包头型比直筒型大白菜的胚诱导率高。

基因型对小麦×玉米单倍体胚产生频率的影响

选用5个基因型小麦(Triticum aestivum Linn.)、4个基因型玉米(Zea mays)研究基因型对小麦×玉米单倍体胚产生频率的影响。结果表明,玉米基因型显著影响得胚率,小麦基因型与二者间的互作极显著影响得胚率。参加试验的各小麦基因型均产生了单倍体胚,不同基因型小麦与不同基因型玉米杂交平均得胚率差异极显著,最高达33.0%,最低仅为8.8%。小麦单倍体胚产生过程中,玉米基因型极显著影响小麦单倍体胚产生频率,应根据小麦材料的遗传背景选择合适的玉米基因型。针对遗传背景特别复杂的小麦材料,建议选用单倍体诱导率普遍较高的几种玉米的混合花粉授粉。

小麦×玉米单倍体植株再生体系的建立

为获得一定规模的小麦单倍体植株以构建小麦DH(Double Haploid)群体,采用小麦(Triticum aestivum,2n=42)与玉米(Zeamays,2n=20)远缘杂交诱导小麦单倍体胚,经胚拯救产生单倍体植株,研究了1/2MS培养基中幼胚取材时期、幼胚大小、4℃处理时间、暗处理时间对单倍体胚培养再生成苗的影响,结果表明:授粉后12天~16天取材的幼胚经胚拯救后成苗率无明显差异;0.5mm^1.0mm大小的幼胚成苗率显著高于0mm^0.5mm和1.0mm^1.5mm大小的幼胚成苗率;1天~3天短期4℃处理对胚萌发具有一定促进作用,但处理3天后,出愈率和成苗率降低;胚培养过程中12天左右的24h暗处理能有效提高成苗率。

体外受精-胚胎移植过程中焦虑抑郁、子宫收缩频率和妊娠结局的相关性

目的探讨体外受精-胚胎移植（IVF/ICSI）过程中移植日焦虑抑郁与妊娠结局的关系、子宫收缩频率与妊娠结局的关系、焦虑抑郁与子宫收缩频率的关系。方法选取2014-012014-07符合标准的86例行IVF/ISCI治疗的不孕症患者作为研究对象,于胚胎移植日,发放焦虑自评量表（SAS）及抑郁自评量表（SDS）的调查问卷,现场调查现场收回。同时阴道超声监测患者子宫收缩波,并记录。观察妊娠结局至胚胎移植后4周,按妊娠结局分为临床妊娠组和非妊娠组,分析焦虑抑郁、子宫收缩频率与妊娠结局的相关性。结果临床妊娠组39例,非妊娠组47例。移植日非妊娠组的SAS评分明显高于临床妊娠组（P〈0.05）,而两组SDS评分比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。移植日的SAS评分与妊娠结局进行回归分析,SAS评分与妊娠结局相关（P〈0.05）,SAS评分越低,成功妊娠可能性越大;两组不同妊娠结局间的子宫收缩频率比较,临床妊娠组子宫收缩频率≤4次/min较非妊娠组多（P〈0.05）,移植日子宫收缩频率与妊娠结局相关（P〈0.05）,子宫收缩频率过强不容易妊娠;将移植日的SAS评分与子宫收缩频率进行关联性分析,移植日的子宫收缩频率与SAS评分之间有正相关性（r=0.704,P〈0.05）。结论对于接受IVF/ICSI治疗的不孕症患者,移植日子宫收缩频率过快及明显焦虑的患者,不容易妊娠,且焦虑情绪可能导致子宫收缩频率增加,不利于妊娠。

活性炭和振荡培养对提高大白菜胚诱导率的影响

以11个大白菜品种(品系)为材料,采用NLN培养基进行游离小孢子培养,研究了活性炭和振荡培养对小孢子胚诱导和形成的影响。结果表明:11个大白菜品种有9个诱导出胚,每花蕾诱导胚数0.056～12.67个。在NLN-13培养基中添加活性炭(0.5g/L),有利于小孢子胚的诱导和形成,Y536和Y585胚诱导率分别提高了16.1和4.8倍,极难诱导出胚的材料Y516也诱导出胚;采用振荡培养方式(65r/min),Y531和Y445胚诱导率较静置培养分别提高了18.23%和30.91%,出胚时间提早2～4d。