饲料氧化鱼油对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道谷胱甘肽/谷胱甘肽转移酶通路基因表达活性的影响

为了研究饲料氧化鱼油对草鱼肠道抗氧化防御能力的影响,以谷胱甘肽/谷胱甘肽转移酶(GSH/GSTs)通路为研究对象,以豆油、鱼油、氧化鱼油为饲料脂肪源分别设计豆油组(6S)、鱼油组(6F)、2%氧化鱼油(2OF)、4%氧化鱼油(4OF)及6%氧化鱼油(6OF)5组等氮、等能半纯化饲料,在池塘网箱养殖草鱼[平均体重(74.8±1)g]72 d。采用荧光定量PCR(RT-QPCR)的方法,测定了草鱼肠道组织中谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚(GCLC)、谷胱甘肽合成酶(GSS)和谷胱甘肽还原酶(GSR)以及谷胱甘肽S-转移酶的ω1(GSTω1)、PI-谷胱甘肽S-转移酶(GSTPI)和微粒体谷胱甘肽S-转移酶1(MGSt1)的表达活性,并测定了肠道中谷胱甘肽GSH的含量。结果显示,2OF、4OF和6OF组草鱼肠道中GSH/GSTs通路基因表达均上调,其中6F组中MSGT1在肠道中表达显著上调(P<0.05),4OF组中GSR和MGST1在肠道中表达显著上调(P<0.05),6OF中GCLC和MGST1在草鱼肠道中表达显著上调(P<0.05);GCLC表达活性与饲料中MDA含量呈多项式的关系,MGST1表达活性与饲料中AV和(EPA+DHA)呈多项式关系。结果表明,氧化鱼油使草鱼肠道GSH/GSTs通路基因表达活性上调,且GSH/GSTs通路基因表达活性对不同浓度氧化鱼油所引起的肠道氧化损伤具有不同的应对方式。

允饲植物源复方制剂对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的免疫增强作用研究

为筛选适合添加于草鱼(Ctenopharyngodon idellus)饲料的植物源免疫增强剂,本试验以白芍(Radix paeoniae Alba)、杜仲(Eucommia ulmoides)和知母(Rhizoma anemarrhenae)三种允饲植物配制的复方制剂A、B和C为研究对象,开展其对草鱼非特异性免疫功能的比较研究。试验将二龄草鱼随机分成6个试验组和1个对照组,试验组和对照组按鱼体重量的3%每天分别投喂添加复方制剂的饲料和空白饲料。试验第7、14、21、28天分别采集试验草鱼血液,用于检测血液细胞组分、血清溶菌酶、血清SOD;试验第29天,对各组试验草鱼进行腹腔注射嗜水气单胞菌活菌,记录攻毒后14天内各组草鱼的存活率。结果表明,与对照组相比,试验第14天时,以2%和4%剂量添加的复方制剂A分别显著提高草鱼白细胞吞噬活性128%和143%,分别提高草鱼血清溶菌酶活性69%和85%,分别提高草鱼血清SOD活性61%和55%;连用28天对草鱼的保护率分别达到49%和55%,复方制剂A对草鱼非特异性免疫增强效果优于复方制剂B和C。

氧化鱼油诱导草鱼Ctenopharyngodon idellus肝胰脏谷胱甘肽/谷胱甘肽转移酶通路的应激反应

在水温25~33℃下,将平均体质量74.8±1g的草鱼Ctenopharyngodon idellus放养在池塘网箱中,投喂以豆油、鱼油、氧化鱼油为饲料脂肪源的5组等氮等能半纯化饲料（豆油组6S、鱼油组6F、2%氧化鱼油组2OF、4%氧化鱼油组4OF,及6%氧化鱼油组6OF）,采用荧光定量PCR（q RT-PCR）方法,测定了草鱼肝胰脏中谷胱甘肽（GSH）/谷胱甘肽转移酶（GST）通路中GCLC、GSR、GSTPI、MGST1基因的表达活性及GSH的含量和超氧物歧化酶（SOD）的活性,研究了氧化鱼油对草鱼肝胰脏抗氧化防御能力的影响。72d的养殖结果显示：6F组GCLC的表达活性显著下调（P〈0.05）,其余各组间均无显著差异（P〉0.05）;各试验组GSR的表达活性均下调,6F和4OF组间显著下调（P〈0.05）;GSTPI的表达活性均显著下调（P〈0.05）,与饲料中（EPA＋DHA）含量呈线性负相关关系;除6F组外,其余各组MGST1的表达活性均较6S组显著下调（P〈0.05）,且MGST1的表达活性与饲料丙二醛（MDA）含量呈二项式关系,与6S组相比,其余各组肝胰脏中GSH含量及SOD活性均显著下调（P〈0.05）。氧化鱼油引起草鱼GSH/GST合成通路基因表达相适应,肝胰脏GSH合成相关基因和MGST1的表达活性下调,而GSTPI的表达活性增强。GSH/GSTs通路基因表达活性和GSH含量随饲料中氧化鱼油的增加呈梯度变化。

允饲植物源复方制剂对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)组织形态和生长性能的作用研究

为了进一步评估由白芍(Radix paeoniae Alba)、杜仲(Eucommia ulmoides)和知母(Rhizoma anemarrhenae)组成且具有免疫增强作用的复方制剂A、B、C对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)组织形态和生长性能方面可能存在的风险,本试验将二龄草鱼随机分成12个试验组和2个对照组,分别连续投喂含有不同复方制剂的饲料和空白饲料,在试验第7、14、21、28天分别随机从对应试验组中采集5尾草鱼肝胰脏、脾脏、肾脏和肠道进行切片制作和组织形态分析;在试验第0、29天分别随机从对应试验组中采集10尾草鱼进行肥满度、增重率、特定生长率、脏体比和肠道承重力测定。结果表明,分别以2%、4%剂量添加于草鱼饲料中的复方制剂A、B、C对试验草鱼阶段增重率、特定生长率、饵料系数、肝胰体比、肾体比和肠道承重力系列指标均无异常影响。组织形态分析方面,复方制剂A对草鱼肝胰脏、脾脏、肾脏和肠道具有良好的安全性,而复方制剂B、C经连续投喂21天起,对应剂量组草鱼肝胰脏、肾脏逐渐呈现不同程度的组织病变。本文得出结论认为,即使完全符合允饲要求的天然植物品种,缺乏基于较全面的评价维度试验证明其具有使用安全性,则容易仅关注允饲天然植物在效果表达的表象,而忽略其诱发的组织病变造成组织器官的功能衰退。

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)FGF21基因克隆及其表达分析

采用RT-PCR技术从草鱼肝脏中克隆了成纤维细胞生长21(FGF21)基因序列,并利用实时荧光定量PCR(q PCR)技术对该基因在草鱼幼鱼不同组织中表达进行了研究。结果表明,草鱼FGF21基因(Gen Bank登录号为MF_094727)c DNA序列全长615 bp,其中5'端非翻译区51 bp,开放阅读框564 bp,编码187个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,草鱼FGF21基因与斑马鱼同源性最高(78.86%),与犀角金线鲃、鲤、虹鳟、大西洋鲑、罗非鱼和日本青鱂的同源性分别为77.66%、73.94%、53.29%、52.41%、43.71%和35.96%,与人和小鼠同源性较低,分别为31.87%和30.39%。q PCR分析表明:FGF21基因在草鱼幼鱼肝脏、前肠、中肠、后肠、心脏、肌肉、肾脏和全脑中均有表达,在肌肉、前肠和中肠表达量最高,表明该基因可能在草鱼肌肉和肠道等组织发挥重要作用。

脆化草鱼(Ctenopharyngodon idellus C.et V)的病理生理生态学

分别就形态、生态和病理学性状对处于脆化终极阶段（LD50≥6．67kg／kgbw）的草鱼与普通草鱼进行比较分析。高度脆化的草鱼在生态学上出现明显变化，体长和体重的指数方程W=al^n显著不同于普通草鱼，DO阈值由平均值O．54mg／L上升到平均值1．68mg／L，CO2麻醉浓度（呼吸抑制值）由194mg／L高浓度下降到52．42～65．36mg／L，Root效应及Broh效应显著改变。解剖分析表明，草鱼脆化过程是渐进性组织病变的生理过程，包括各系统器官的功能性病变，最终使过度脆化的草鱼由于血液循环障碍直接导致死亡。草鱼脆化死亡具有明显的饲料（蚕豆）累积剂量——效应反应的毒理学规律，脆化草鱼的体长与体重的指数方程W=18．1719L^2.4360可作为华南地区商品脆肉鲩标准的参考。研究结果将为脆化草鱼规模化集约养殖和提高脆化草鱼长途运输成活率提供参考。

Electrophoretic Analysis of Isozymes and Proteins in F_1 Hybrids of Ctenopharyngodon idellus ♀ × Elopichthys bambusa ♂

[ Objective] This study aimed to investigate the biochemical and genetic characteristics of F1 hybrids of Ctenopharyngodon idellus ♀× Elopichthys bambusa ♂ - [ Method ] By using vertical polyacrylamide gel electrophoresis technology, three isozymes （LDH, EST, MDH） in nine tissues （heart, brain, eyes, liver, kidney, spleen, fin, muscle, plasma） of F1 hybrids of C. ideUus and parents were compared. [Result] Three isozymes in F1 hybrids of ♀× E. bambusa ♀ were analyzed; differences in isozyme and proteins between F1 hybrids idellus ♀× E. bambusa ♀ exhibited varying degrees of tissue-specificity; isozymes and proteins in F, hybrids were signiticandy different from the parents. [ Conclusion] These nine differences could be used as indicators to identify F1 hybrids and parents.

Cd-Zn对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的联合毒性及对肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响

以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)为实验材料,研究并比较了重金属镉(Cd)与锌(Zn)对草鱼的单一与联合毒性.在此基础上,根据水生毒理联合效应指数相加法原理,利用生物测定计数型机值分析得到毒性单位浓度LC50值进行判断.结果表明,Cd对草鱼的毒性大于Zn.Cd、Zn对草鱼96h的半致死浓度分别为26.87和33.14mg·L-1;Cd与Zn对草鱼的联合毒性在48h为拮抗作用,在96h表现为协同作用.以草鱼肝脏组织超氧化物歧化酶(SOD)活性影响为指标,Cd与Zn的联合作用与Cd、Zn的暴露剂量和暴露时间都有密切关系:草鱼肝脏SOD活性应激反应对低浓度Zn(0.4TU)暴露较敏感,对高浓度Cd(0.8TU)的暴露较敏感,SOD活性能迅速产生应激性升高;48h时Cd与Zn的联合毒性显示为拮抗作用,96h时Cd与Zn的联合毒性显示为协同作用.

月饱食度对草鱼幼鱼生长性能、体组成、免疫能力及水质的影响

为探讨月饱食度对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)幼鱼的摄食、生长、免疫能力和养殖水体水质的影响,选取初始体重(18.10±0.09)g的草鱼幼鱼为试验对象,试验期为60 d。设计4个月饱食度,分别为月饱食量的70%、80%、90%和100%。结果表明,①试验鱼的增重率和特定生长率与月饱食度呈显著性正相关,月饱食度为100%的处理组表现出最佳的特定生长率(2.02%/d),但与月饱食度90%的处理组之间无显著差异(P>0.05);试验鱼的饲料系数与月饱食度呈显著性负相关,月饱食度为90%的处理组饲料系数最低(1.16±0.04),而月饱食度为70%的处理组饲料系数最高(1.43±0.07)。②不同月饱食度对试验鱼的存活率和形态学指标有一定的影响,其中月饱食度为100%的处理组存活率最低,但其肝体比和肥满度最高。③不同月饱食度对试验鱼肌肉营养组成成分无显著影响(P>0.05),而随着月饱食度的增加,全鱼粗脂肪含量越高(P<0.05)。④养殖水体氨氮、硝态氮和磷酸盐含量与试验鱼的月饱食呈显著性正相关(P<0.05),但养殖水体的亚硝态氮和试验鱼的血清抗氧化指标不受月饱食度变化的影响而显著性变化(P>0.05)。

一株草鱼源荧光假单胞菌的分离鉴定及其耐药特性分析

为探究临沂市某草鱼养殖场发生病害的原因,从患病的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏和肾脏混合组织中分离得到一株优势致病菌G-13,通过细菌形态学观察、革兰氏染色、生理生化特征、16S rRNA基因测序,以及系统发育分析等完成菌株鉴定,并测定其耐药特性。形态特征显示G-13是一种短杆状的革兰氏阴性菌,在LB固体平板上形成乳白色、圆形、整体呈隆起状、边缘较为整齐、表面光滑湿润的菌落;16S rRNA系统发育进化分析发现G-13与荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)聚在一支,序列同源性高达100%;生理生化试验显示葡萄糖、精氨酸双水解酶、鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、氧化酶、无盐和3%NaCl胰胨水等7项指标为阳性,与假单胞菌属特征相近,确定分离株G-13为P.fluorescens。药敏试验结果显示菌株G-13对丁胺卡那、多西环素、四环素、新霉素、环丙沙星、氧氟沙星等13种抗生素敏感,对氨苄西林、头孢拉定、克林霉素、呋喃唑酮等7种抗生素耐药。

四种抗脂肪肝物质降低草鱼肝胰脏脂质积累的替代关系

采用11种添加不同水平的蛋氨酸（Met）、胆碱（Ch）、甜菜碱（Bet）和大豆卵磷脂（Lec）的饲料饲养初始体重约15g的草鱼，研究了它们降低草鱼肝胰脏脂质积累的相互替代关系。11种饲料中这四种物质的含量分别为（％）：（1）1．1Met0．08Ch，（2）1．1Met0．33Ch，（3）1．3Met0．23Ch，（4）1．5Met0．13Ch，（5）1．3Met0．13Ch，（6）1．3Met0．13Ch0．08Bet，（7）1．3Met0．13Ch0．1Bet，（8）1．3Met0．13Ch0．12Bet，（9）1．3Met0．13Ch4．0Lec，（10）1．3Met0．13Ch6．0Lec和（11）1．3Met0．13Ch8．0Lec。52d后测定草鱼的相对生长率、饲料转化率和蛋白质效率，分析肝胰脏的脂质含量、组成和脂肪酸构成，测定血清脂蛋白和脂质含量以及全鱼和肌肉的营养成份组成。实验结果表明，（1）与摄食合1．1％蛋氨酸和0．08％胆碱饲料的第1组草鱼相比，第2组—第11组这10组草鱼的相对生长率升高17—73％，并且第10组显著高于第1组。（2）草鱼肝胰脏的脂质含量以第1组最高，增加蛋氨酸含量和添加胆碱、甜菜碱或大豆卵磷脂使肝胰脏脂质含量下降26—74％。在摄食蛋氨酸、胆碱、甜菜碱和大豆卵磷脂组合不同的一些饲料组草鱼之间，肝胰脏脂质含量存在显著差异，表现出四种物质间存在相互加强和替代关系。（3）?

两株草鱼呼肠孤病毒江西株的分离与鉴定

对从江西省南昌县莲塘镇的患病草鱼鱼种池塘采集到草鱼出血病疑似病样材料分离出的两株病毒株进行了鉴定。结果显示:用除菌过滤后的患病鱼肝脏、脾脏、肾脏组织浆滤液腹腔注射感染8～10 cm健康草鱼鱼种,5 d后试验鱼发病,可复制出自然发病症状,死亡率达50%以上,对照组未有死亡。用病样滤液接种草鱼肾细胞系(CIK),可产生细胞病变效应(CPE),病毒的TCID50分别为10-8.3/0.1 mL和10-8.0/0.1 mL。理化特性研究结果显示:氯仿、乙醚处理组病毒的感染力和对照组相比变化不显著。病毒基因组RT-PCR反应可扩增出目的片段,序列测定与分析结果表明,其与GenBank中GCRV(登录号为AF403392,AF239175)相应序列的同源性达99%以上。

草鱼呼肠孤病毒湖州分离株的分离及鉴定

2008年6月从湖州某患病草鱼池塘采集草鱼出血病疑似病样,将除菌过滤后的患病鱼肝、脾、肾组织滤液,注射健康的8~10 cm的草鱼鱼种。5d后草鱼开始发病,且症状与原发病症状一样,死亡率为57%,对照组未有死亡。将无菌处理的病样滤液接种草鱼肾细胞（CIK）,连续接5代均出现明显的细胞病变（CPE）,并与草鱼呼肠孤病毒参考株所产生的CPE一致。该株病毒的TCID50为10-8/0.1ml。内脏组织经超薄切片,电子显微镜观察,发现组织内有大量的病毒颗粒,大小均一,近似球形,直径约70~75 nm。理化鉴定表明,氯仿、乙醚处理组病毒的感染力和对照组相比并没有多大变化,说明该株病毒对氯仿和乙醚有一定的抗性。经草鱼呼肠孤病毒特异性的RT-PCR检测,获得阳性的目的片段,测序的结果与草鱼呼肠孤病毒相应序列的同源性达99%以上。上述鉴定结果表明所分离的病毒为草鱼呼肠孤病毒,将其命名为HZ2008。

草鱼对葡萄糖和淀粉作为能源的利用研究

通过 1 0周生长实验和同位素示踪实验探讨草鱼对不同结构糖的利用 .生长实验结果显示 ,草鱼摄食以葡萄糖作为糖源的饲料后其相对生长率、饲料效率、蛋白质效率均显著高于摄食以淀粉作为糖源的饲料组 .同位素示踪实验结果显示 ,草鱼灌喂14 C 标记葡萄糖饲料后 2 4h内每 2小时间隔内呼出的14 CO2 放射活度比均高于灌喂14 C 标记淀粉饲料组 .说明草鱼对于葡萄糖作为能源的利用优于对淀粉作为能源的利用 .

草鱼血液的研究

本文报道了212尾池养草鱼Ctenopharyngodon idellus的血液中红细胞数、自细胞数、血红蛋白值、红细胞脆性值、比积及比重值、血细胞沉降率、白细胞分类计数和各型血细胞体的大小等正常数值和上述常数值在雌雄个体上的差异,以及鱼体年龄和繁殖季节产卵前后的差异等,为草鱼血液的常数值提供了较为系统的资料。

草鱼LDH同工酶比较酶学和免疫化学性质

本文以草鱼为材料,利用亲和层析法,从肌肉、心脏和肝脏中分离纯化了 LDH同工酶基因产物;LDH-A_4、B_4和C_4,并对其纯度,氨基酸组成以及动力学性质进行了比较分析,同时制取了A_4、B_4和C_4的相应抗体,利用抗原-抗体免疫吸附反应对一些淡水鱼类的LDH 酶谱进行了准确的鉴定。

投喂蚕豆和普通配合饲料草鱼肌肉营养成分比较分析及营养评价

对投喂蚕豆和普通配合饲料的2组草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌肉中的胶原蛋白、钙离子(Ca2+)、氨基酸和脂肪酸含量进行了比较分析,并对其营养价值与食用价值进行了评价。结果显示,投喂蚕豆草鱼肌肉中胶原蛋白和Ca2+的质量分数分别为(0.149±0.011)%和(0.036±0.011)%,比投喂普通配合饲料的草鱼分别提高了36.7%和154%。投喂蚕豆草鱼肌肉中氨基酸总量为(16.802±1.823)%,投喂普通配合饲料草鱼氨基酸总量为(18.444±0.850)%;投喂蚕豆草鱼肌肉中4种鲜味氨基酸[天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gyl)和丙氨酸(Ala)]总质量分数为(6.613±0.771)%,低于投喂普通配合饲料草鱼。投喂蚕豆草鱼和投喂普通配合饲料草鱼肌肉中不饱和脂肪酸(UFA)总量分别占脂肪酸总量的73.857%和76.334%,其中单不饱和脂肪酸(MUFA)分别占脂肪总量的(55.598±2.403)%和(33.832±2.755)%。结果表明,投喂蚕豆草鱼肌肉中胶原蛋白和Ca2+含量比投喂普通配合饲料的草鱼有显著提高,但其鲜味程度、氨基酸以及不饱和脂肪酸含量比投喂普通配合饲料草鱼低。

玉屏风多糖对草鱼生长性能、免疫器官指数和肝胰脏非特异性免疫指标的影响

本试验旨在探讨玉屏风多糖对草鱼生长性能、免疫器官指数和肝胰脏非特异性免疫指标的影响,从而为玉屏风多糖在水产养殖上的应用提供理论基础。试验选择健康、体重相近[（74.50±2.50）g]的草鱼750尾,随机分为5组,每组6个重复,每个重复25尾,其中1组为对照组（Ⅰ组）,饲喂基础饲料,其他4组为试验组（Ⅱ-Ⅴ组）,饲喂在基础饲料的基础上分别添加0.8、1.2、1.6、2.0 g/kg玉屏风多糖的试验饲料。预试期1周,正试期8周。结果表明：各试验组的增重率、特定生长率均高于对照组,其中Ⅳ和Ⅴ组显著高于对照组（P〈0.05）;各试验组饲料系数均小于对照组,其中Ⅳ和Ⅴ组显著小于对照组（P〈0.05）。各试验组的头肾指数和脾脏指数均高于对照组,其中Ⅳ组的头肾指数以及Ⅳ和Ⅴ组的脾脏指数显著高于对照组（P〈0.05）。各试验组肝胰脏中一氧化氮含量均低于对照组,但差异不显著（P〉0.05）;各试验组肝胰脏中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活力均高于对照组,其中Ⅳ组与对照组差异达显著水平（P〈0.05）;各试验组肝胰脏中丙二醛含量均低于对照组,其中Ⅳ组与对照组差异达显著水平（P〈0.05）。综合来看,玉屏风多糖在饲料中的添加量为1.6 g/kg时可以显著改善草鱼的生长性能和免疫能力,获得较好的饲喂效果。

饲料中补充晶体或微囊赖氨酸对草鱼生长和血浆总游离氨基酸的影响

为考察饲料中补充晶体或微囊赖氨酸对草鱼生长性能的影响,配制了豆粕含量为23%(高豆粕组),15%(低豆粕组)的两种实用饲料,在低豆粕饲料中补充晶体赖氨酸或微囊赖氨酸,使赖氨酸达到与高豆粕组一致的水平,共4个处理组,即高豆粕组、低豆粕组、低豆粕+晶体赖氨酸(晶体赖氨酸组)、低豆粕+微囊赖氨酸(微囊赖氨酸组),每处理设3个平行。饲养平均体重为(49.0±2.0)g的草鱼8周。结果表明,各组鱼体增重率分别为279.3%、239.7%、245.6%、277.5%,饲料系数为1.62、1.88、1.85、1.62。与低豆粕组相比,添加晶体赖氨酸对草鱼生长无改善(P>0.05),而添加微囊赖氨酸则提高草鱼增重率15.8%(P<0.05),降低饲料系数0.24(P<0.05),在增重率与饲料系数方面达到与高豆粕组基本一致的水平(P>0.05)。对草鱼摄食上述4种饲料0、1、2、3、4、5h后的血浆总游离氨基酸浓度测定结果表明,添加微囊赖氨酸血浆总游离氨基酸的变化趋势与高豆粕组、低豆粕组一致,即在饲后3h达到高峰,而添加晶体赖氨酸使血浆总游离氨基酸的吸收峰值提前。晶体赖氨酸经微囊化后,其水中溶失率显著降低(P<0.05),仅相当于晶体赖氨酸的28.37%。上述结果提示,在降低豆粕的饲料中添加晶体赖氨酸对草鱼的生长无改善作用,而添加微囊赖氨酸则显著提高增重率,降低饲料系数。

不同脂肪源饲料对草鱼稚鱼生长的影响

不同脂肪源饲料对草鱼稚鱼生长的影响刘玮，徐萍，任本根，龚纲明（江西省科学院生物资源研究所，南昌３３００２９）关键词草鱼，鱼饲料，必采脂肪酸ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＤＩＥＴＳＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＤＩＦＦＥＲＥＮＴＬＩＰＩＤＳＯＮＧＲＯＷＴＨＯＦＪＵＶＥＮＩＬ...