猪A组轮状病毒Vp4全基因的克隆与序列分析

应用RT-PCR技术,从猪A组轮状病毒总RNA中扩增了2 331 bp的Vp4全基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T中,转化至受体菌株JM109中,通过质粒提取、限制性内切酶酶切、PCR、序列测定等方法鉴定,构建出重组阳性克隆质粒pGEM-T-Vp4。经DNASTAR软件分析核苷酸和氨基酸序列,结果显示该实验株与黑龙江株和美国株的同源性最高,均达到99%以上,并具有轮状病毒Vp4全基因的抗原表位区。