期刊文献+
共找到134篇文章
< 1 2 7 >
每页显示 20 50 100
Amplification of the Full-Length PAMP Gene and Difference of the mRNA Expression Among Three Lean Pig Breeds
1
作者 FENG Cui-ping YAN Xiao-yan +1 位作者 GE Ya-ming WANG Jun-dong 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2008年第12期1503-1510,共8页
To understand the function of porcine adipocyte-special membrane protein (PAMP) gene and the difference of fat deposition ability among various lean pig breeds, a full-length porcine adipocyte-special membrane prote... To understand the function of porcine adipocyte-special membrane protein (PAMP) gene and the difference of fat deposition ability among various lean pig breeds, a full-length porcine adipocyte-special membrane protein (PAMP) gene was successfully amplified using reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and 5'-rapid amplification of cDNA end (5'-RACE). The open reading frame was 1 587 bp encoding 529 amino acids. The nucleotide sequence of the fulllength PAMP gene was deposited in the GenBank under the accession number EF433431. The PAMP gene mRNA expression was analyzed on three lean pig breeds by quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (QRTPCR). The PAMP gene mRNA levels in YHM (Yorkshire × Hampshire × Meishan) pig and DLY (Duroc × Landrance × Yorkshire) pig were about 0.82 and 0.38 times of that in SW (Shanxi-White) pig, respectively. 展开更多
关键词 porcine adipocyte-special membrane protein (PAMP) gene lean pigs 5'-RACE full-length cDNA
下载PDF
Cloning of Proteinase Inhibitor Gene StPI in Diploid Potato and Its Expression Analysis 被引量:3
2
作者 LI Guang-cun JINLi-ping +2 位作者 XIE Kai-yun LI Ying QU Dong-yu 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2007年第11期1315-1321,共7页
A full-length cDNA of proteinase inhibitor gene with completed open reading frame of 116 amino acids was cloned from Ralstonia solanacearum (Rs) resistant potato leaves using the rapid amplification of cDNA ends (R... A full-length cDNA of proteinase inhibitor gene with completed open reading frame of 116 amino acids was cloned from Ralstonia solanacearum (Rs) resistant potato leaves using the rapid amplification of cDNA ends (RACE) method and designated as StPI. BLAST search against NCBI showed that the StPI gene shared 89% identity with potato proteinase inhibitor I precursor in nucleotide and 74% in amino acid. Analysis of semi-quantitative RT-PCR indicated that this gene was induced by Rs as well as up-regulated by jasmonic acid (JA). The StPI gene expression reached the highest level during 6-12 h post Rs-inoculation or JA-treatment, and then leveled off. Moreover, this gene was strongly induced by JA and its mRNA accumulation increased more quickly than that of Rs-inoculation. The StPI gene may play a role in potato resistance against Rs. The induction of StPI by Rs invasion may have a similar signal transduction pathway with JA treatment. 展开更多
关键词 potato bacterial wilt RACE StPI gene full-length cDNA gene expression
下载PDF
基于全长转录组的蚕豆WRKY基因家族分析及耐盐胁迫相关候选基因挖掘
3
作者 周恩强 周瑶 +9 位作者 姚梦楠 王学军 赵娜 缪亚梅 王永强 薛冬 李波 汪凯华 顾春燕 魏利斌 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期14-30,共17页
WRKY基因是植物特有的转录因子基因,能够调控植物的生长发育和胁迫响应。为了鉴定蚕豆WRKY基因家族成员,揭示其进化关系并挖掘与盐胁迫相关的候选WRKY基因,本研究在完成蚕豆全长转录组测序(9个样品)和二代转录组测序(27个样品)的基础上... WRKY基因是植物特有的转录因子基因,能够调控植物的生长发育和胁迫响应。为了鉴定蚕豆WRKY基因家族成员,揭示其进化关系并挖掘与盐胁迫相关的候选WRKY基因,本研究在完成蚕豆全长转录组测序(9个样品)和二代转录组测序(27个样品)的基础上,利用生物信息学方法对WRKY转录因子基因进行鉴定与分析,并通过拟南芥同源基因比对挖掘盐胁迫相关的候选VfWRKY基因。结果表明,蚕豆全长转录组测序共获得53.84 Gb数据量,通过比对和校正最终获得58885条转录本序列信息;基于蚕豆全长转录组共鉴定出113个WRKY家族成员,氨基酸数目为153~737 aa,等电点为4.84~9.87,113个WRKY家族蛋白质全部定位于细胞核中;根据拟南芥WRKY家族系统发育特征,VfWRKY基因家族可分为3组,分别为group 1(38个VfWRKY)、group 2(61个VfWRKY)、group 3(14个VfWRKY);Motif 1和Motif 3是VfWRKY基因家族的特征基序,并对应WRKY保守结构域,在进化过程中较为保守;VfWRKY基因家族主要富集在植物MAPK信号通路、植物与病原菌相互作用和剪接体3个通路中;通过同源比对,在蚕豆中发现14个盐胁迫相关候选WRKY基因,且主要在根中高表达。该研究结果为蚕豆的遗传学研究提供了丰富的参考数据,也为创制耐盐蚕豆新品种提供了基因信息。 展开更多
关键词 WRKY基因 蚕豆 全长转录组 盐胁迫 进化分析
下载PDF
苏氏圆腹(鱼亡)全长转录组测序
4
作者 宦章 李东宇 +4 位作者 李伟豪 高进 王中铎 潘志 董忠典 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期44-56,共13页
为深入解析苏氏圆腹(鱼亡)的遗传信息和开展基因功能研究,本实验分别提取性成熟苏氏圆腹(鱼亡)脑、鳃、心脏、肝脏、脾脏、头肾、胃、肠、性腺和肌肉组织的总RNA,等质量混合为一个样本后,利用PacBio高通量测序平台单分子实时测序技术对... 为深入解析苏氏圆腹(鱼亡)的遗传信息和开展基因功能研究,本实验分别提取性成熟苏氏圆腹(鱼亡)脑、鳃、心脏、肝脏、脾脏、头肾、胃、肠、性腺和肌肉组织的总RNA,等质量混合为一个样本后,利用PacBio高通量测序平台单分子实时测序技术对其进行了测序分析,获得了性成熟苏氏圆腹(鱼亡)各组织的全长转录组信息。结果显示,在苏氏圆腹(鱼亡)中共获得1 487 336条高质量reads,平均长度和N50分别为83 592和162 901 bp;校正后共获得1 005 955条循环一致序列(circular consensus sequencing,CCS),过滤后共鉴定出667 973条含有polyA结构的全长非嵌合序列(full-length non-concatemer,FLNC)序列,平均长度和N50分别为2 057和2 359 bp。614 078条(91.93%) FLNC用于基因和转录本的注释,鉴定到的19 835个已知基因对应80 915个转录本,9 348个新基因对应9 954条新转录本,预测到50 311个开放阅读框、79 922个可变剪接、18个融合基因和20 215个选择性多聚腺苷酸化位点。新基因在NR、GO、KEGG、KOG和SwissProt数据库中分别有3 912、2 385、2 167、81和1 520个获得注释。另外,还预测到4 624个长链非编码RNA,调控32 283个靶mRNA。研究表明,通过全长转录组测序数据及功能注释分析,丰富了苏氏圆腹(鱼亡)的遗传资源信息。本研究可为进一步开展苏氏圆腹(鱼亡)生物学特性、基因功能研究提供基础。 展开更多
关键词 苏氏圆腹(鱼亡) 全长转录组 基因功能 可变剪切 长链非编码RNA
下载PDF
cDNA microarray in isolation of novel differentially expressed genes related to human glioma and clone of a novel full- length gene 被引量:3
5
作者 QIZhen-yu HUIGuo-zhen +4 位作者 LIYao ZHOUZong-xiang GUShao-hua YINGKang XIEYi 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2005年第10期799-805,共7页
Background This investigation was undertaken to obtain differentially expressed genes related to human glioma using cDNA microarray and the characterization of one novel full-length gene. Methods Total RNA was extract... Background This investigation was undertaken to obtain differentially expressed genes related to human glioma using cDNA microarray and the characterization of one novel full-length gene. Methods Total RNA was extracted from human glioma tissues and normal brain tissues, and mRNA was used to make probes. After hybridization and washing, the results were scanned using a computer system. The gene named 681F05 clone was an expressed gene to human glioma through four-time hybridization and scanning. Subsequently northern blot analysis was performed by northern blot, 5’RACE and bioinformatics. Results Fifteen differentially expressed genes to human glioma were obtained through four-time hybridization and scanning. Northern blot analysis confirmed that 681F05 clone was low-expressed in human brain tissues and over-expressed in human glioma tissues. The analysis of BLASTn and BLASTx showed that 681F05 clone is two cDNA clones encoding two novel proteins that are highly identified to the cyclophilin isoform 10 of C. Elgans, respectively. Sequence analysis revealed the two cDNA clones are two different splicing variants of a novel cycophilin-like gene (PPIL3a and PPIL3b).Conclusions cDNA microarray technology can be successfully used to identify differentially expressed genes. The novel full-length gene of human PPIL3 may be correlated with the formation of human glioma. 展开更多
关键词 cDNA microarray differential expression GLIOMA novel full-length gene
原文传递
南方红豆杉全长转录组测序及生物信息学分析
6
作者 徐美 高榆嘉 +3 位作者 徐田田 许云舒 陈丽华 许青松 《大连民族大学学报》 CAS 2024年第5期385-389,共5页
为了充分挖掘南方红豆杉功能基因,开发利用其生物资源。选用PacBio Sequel第三代测序技术,对贵州省梵净山地区的南方红豆杉植株进行转录组测序,开展生物信息学分析。共获得68.03 Gb原始数据,包含1001302条原始序列读取片段。经组装、拼... 为了充分挖掘南方红豆杉功能基因,开发利用其生物资源。选用PacBio Sequel第三代测序技术,对贵州省梵净山地区的南方红豆杉植株进行转录组测序,开展生物信息学分析。共获得68.03 Gb原始数据,包含1001302条原始序列读取片段。经组装、拼接、去冗余后获得65152条单基因簇(Unigene),平均长度为2591 bp。与已有数据库比对显示,南方红豆杉参与细胞和代谢活动的基因表达量较高,具有较强的代谢活动和遗传信息处理能力,转录组中与生长发育、抗逆、次生代谢和合成相关的转录因子,为全面开发南方红豆杉和遗传育种提供数据支持。 展开更多
关键词 南方红豆杉 全长转录组 基因功能注释 转录因子
下载PDF
滇山茶bHLH基因家族鉴定及花色形成相关基因筛选
7
作者 周麟 黄顺满 +2 位作者 苏文坤 姚响 屈燕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期142-151,共10页
【目的】通过生物信息学方法初步筛选与滇山茶花色相关的bHLH基因,为后续深入研究滇山茶花色提供支持。【方法】基于滇山茶全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定滇山茶bHLH基因家族成员,并对其理化性质、二级结构、系统发育关系和结... 【目的】通过生物信息学方法初步筛选与滇山茶花色相关的bHLH基因,为后续深入研究滇山茶花色提供支持。【方法】基于滇山茶全长转录组数据,通过生物信息学方法鉴定滇山茶bHLH基因家族成员,并对其理化性质、二级结构、系统发育关系和结构域等进行分析。利用二代转录组和代谢组数据挖掘与滇山茶花色相关的bHLH基因,通过实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)验证bHLH基因在滇山茶开花过程中和不同品种间的表达情况。【结果】在滇山茶全长转录组中鉴定到71个滇山茶CrbHLHs基因,蛋白分子量的范围在22994.58-102996.96 Da,等电位为4.98-9.51,均为亲水性蛋白。与拟南芥聚类分析发现,滇山茶bHLH基因家族成员可分布到14个亚族。多组学联合分析发现,CrbHLH8、CrbHLH61和CrbHLH63与矢车菊色素苷呈正相关,而CrbHLH59与其呈负相关;CrbHLH13和CrbHLH71与原花青素呈正相关,其中CrbHLH8和CrbHLH61为IIIf亚族成员。【结论】从滇山茶全长转录组中鉴定出71个CrbHLHs家族成员,其中6个CrbHLHs与滇山茶花色相关。 展开更多
关键词 滇山茶 bHLH基因家族 花色 进化树 全长转录组 生物信息学
下载PDF
蛇足石杉COBRA基因家族的分子生物信息学及表达分析
8
作者 黄玉妹 滕建北 +1 位作者 涂冬萍 梁柳观 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1105-1117,共13页
为探明蛇足石杉COBRA基因家族成员分子生物信息学特征及组织表达规律,该文基于蛇足石杉的全长转录组数据,通过生物信息学技术对该家族成员(HsCOBRAs)的理化性质、结构域、保守基序、顺式作用元件、基因表达量等进行分析。结果表明:(1)... 为探明蛇足石杉COBRA基因家族成员分子生物信息学特征及组织表达规律,该文基于蛇足石杉的全长转录组数据,通过生物信息学技术对该家族成员(HsCOBRAs)的理化性质、结构域、保守基序、顺式作用元件、基因表达量等进行分析。结果表明:(1)在蛇足石杉全长转录组中共筛选出24个HsCOBRAs家族成员,其中酸性蛋白9个,稳定蛋白11个,疏水性蛋白5个,具有跨膜结构的蛋白7个,具有信号肽的蛋白3个。(2)亚细胞定位在细胞壁、叶绿体、细胞核、细胞膜上。(3)结构分析发现HsCOBRAs有7种结构域和6种保守基序,部分成员具有高度保守的CCVS结构。(4)HsCOBRAs具有CAAT-box、TATA-box等45种顺式作用元件。(5)HsCOBRA2在叶、孢子、茎、芽胞中的表达量均最高。该研究结果可为HsCOBRAs的进一步研究及生物学功能验证等提供理论依据。 展开更多
关键词 蛇足石杉 COBRA 基因家族 生物信息学 全长转录组 表达分析
下载PDF
H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株的全基因克隆及序列分析 被引量:13
9
作者 龙进学 王曲直 +2 位作者 卢建红 刘玉良 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期690-696,共7页
应用流感病毒通用引物[4]和H5N1亚型禽流感(Avian influenza virus,AIV)的型特异性引物,成功的扩增出H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株(简称A/D/SD/04)的全基因序列(包括5′和3′端的非编码区序列).A/D/SD/04的基因组核苷... 应用流感病毒通用引物[4]和H5N1亚型禽流感(Avian influenza virus,AIV)的型特异性引物,成功的扩增出H5N1亚型禽流感病毒A/duck/Shandong/093/2004株(简称A/D/SD/04)的全基因序列(包括5′和3′端的非编码区序列).A/D/SD/04的基因组核苷酸全序列与18株网上公布的禽流感基因序列进行比较和分析,结果与4株鸭源H5N1的5~7个基因具99%以上的同源性;与14株H5N1有至少一个以上内部基因同源性在95%以上.与H9亚型AIV代表株A/Quail/Hongkong/G1/97(简称G1株)和A/Chicken/Beijing/1/94(简称BJ94)比较,除了非结构基因(Nonstructural gene,NS)与G1株的同源性为95.3%外,其余基因均在36.6%~92.1%之间.说明A/D/SD/04没有H9N2基因的直接整合,是H5N1毒株在自然界的重组株.推导的HA氨基酸序列分析,A/D/SD/04 的血凝素(Heamgglutinin,HA)裂解位点与比较的16株AIV的序列一致,是高致病性禽流感的分子特征(PQRERRRKKR/G),第226位氨基酸是对禽类和哺乳细胞均具有亲嗜性的蛋氨酸(Met).神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)在第48位氨基酸(颈部)后有20个氨基酸的缺失,但非结构蛋白(NS)没有在79~84氨基酸发生缺失.碱性聚合酶2(PB2)的627位氨基酸是亲禽类细胞的谷氨酸(Glu,E).结合生物学特性和分子特征,A/D/SD/04对小鼠的致病力是由多种因素决定,其可能是一株对鸡高度致病,并逐渐获得对哺乳动物致病能力的中间重组病毒. 展开更多
关键词 H5N1亚型禽流感病毒 通用引物 全基因组序列 序列分析
下载PDF
一株野鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005的全基因组克隆和序列分析 被引量:6
10
作者 彭宜 薛峰 +3 位作者 李彦芳 陈浩 彭大新 刘秀梵 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期548-553,共6页
应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA... 应用流感病毒通用引物对盐城珍禽自然保护区野鸭泄殖腔棉拭子分离株禽流感病毒A/mallard/Yancheng/2005(简称Mallard/YC/2005)(H4N6)进行全基因组序列扩增,结合GenBank中的相关序列进行遗传进化分析。结果表明,Mallard/YC/2005(H4N6)HA基因与A/duck/Siberia/1701/1996(H4N6)的核苷酸同源性最高(97.5%),推导的氨基酸剪切位点序列为PEKASR,为典型低致病性禽流感病毒的特征序列;神经氨酸酶(NA)、非结构蛋白(NS)均没有氨基酸缺失;基质蛋白2(M2)与宿主特异性有关的位点及碱性聚合酶2(PB2)的627位都是亲禽类细胞的氨基酸;M基因与家鸭分离株A/duck/Yangzhou/02/2005(H8N4)的核苷酸同源性为99.4%,PA基因与家鸭分离株A/duck/Jiangxi/1286/2005(H5N2)的核苷酸同源性达98.9%,说明这2个基因已经在家鸭体内存在并参与了基因重排。 展开更多
关键词 Mallard/YC/2005(H4N6) 禽流感病毒 全基因组序列 序列分析
下载PDF
保护品种云茶1号茶树全长转录组测序分析 被引量:11
11
作者 朱兴正 夏丽飞 +4 位作者 陈林波 孙云南 田易萍 宋维希 蒋会兵 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期193-201,共9页
为探讨云茶1号茶树品种优异性状的遗传基础,采用Pac Bio平台进行全长转录组测序,最终获得Polished consensus序列213 389个,预测到CDS有223 120个,检测到195 062个SSR位点。在NR数据库有170 264个同源序列比对到980个物种;有103 124个在... 为探讨云茶1号茶树品种优异性状的遗传基础,采用Pac Bio平台进行全长转录组测序,最终获得Polished consensus序列213 389个,预测到CDS有223 120个,检测到195 062个SSR位点。在NR数据库有170 264个同源序列比对到980个物种;有103 124个在KOG数据库得到注释,根据其功能各分为26类;有65 524个得到GO注释分为细胞组分、分子功能及生物学过程等三大类的55个功能组;根据KEGG数据库,105 972个得到了注释,涉及到216个代谢途径分支,包括茶叶品质、活性物质代谢以及抗逆等相关基因等;还预测到隶属于60个转录因子家族的转录因子有5 785个。这些结果为进一步开展云茶1号茶树特异性状基因的标记性引物开发、遗传研究以及品质形成和抗逆机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 云茶1号 全长转录组 基因分析 功能注释
下载PDF
油茶苯丙氨酸解氨酶基因的cDNA克隆与序列分析 被引量:9
12
作者 田晓明 谭晓风 +2 位作者 胡孝义 刘巧 罗茜 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期24-28,共5页
苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)是苯丙烷类代谢途径的关键酶之一。以油茶(Camelliaoleifera)近成熟种子cDNA文库和EST文库为材料,通过分子克隆方法鉴定了PAL全长cDNA。结果表明:油茶PAL基因的cDNA长2 118 bp,编码705... 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)是苯丙烷类代谢途径的关键酶之一。以油茶(Camelliaoleifera)近成熟种子cDNA文库和EST文库为材料,通过分子克隆方法鉴定了PAL全长cDNA。结果表明:油茶PAL基因的cDNA长2 118 bp,编码705个氨基酸,与其他物种的PAL具有较高的相似性,在进化上高度同源;油茶PAL编码的蛋白质序列包含与水稻、玉米PAL蛋白质相同的脱氨基位点和催化活性位点;PAL系统进化树表明,油茶PAL基因与灌木类植物的PAL基因聚类关系最近。 展开更多
关键词 油茶 苯丙氨酸解氨酶 全长CDNA 基因克隆 序列分析
下载PDF
一株鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006的全基因组序列测定及遗传演化分析 被引量:5
13
作者 杨德全 葛菲菲 +4 位作者 刘健 鞠厚斌 王建 刘佩红 周锦萍 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期815-822,共8页
为了解鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006(DK/SH/Y20/06)的来源、特征及其分子演化规律,进一步丰富水禽流感病毒的基因库,对该病毒8个基因片段分别进行了扩增和序列测定,利用分子生物学软件对测序结果进行序列分析,并与Ge... 为了解鸭源H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Shanghai/Y20/2006(DK/SH/Y20/06)的来源、特征及其分子演化规律,进一步丰富水禽流感病毒的基因库,对该病毒8个基因片段分别进行了扩增和序列测定,利用分子生物学软件对测序结果进行序列分析,并与GenBank登录的相关病毒进行了遗传演化分析。结果表明,DK/SH/Y20/06的HA基因切割位点附近的氨基酸序列(PEKASR↓GLF)符合低致病力AIV的特征,其分子遗传演化关系属于欧亚分支;NA基因与A/mallard/Yanchen/2005(H4N6)在同一分支内,核苷酸序列同源性为98.3%;而PB2、PB1、NP、PA基因与目前在国内流行的H6亚型禽流感病毒关系密切;M基因与A/environment/Korea/CSM05/2004(H3N1)处于同一分支;而NS基因与A/wild duck/Korea/YS44/2004(H1N2)同源性最高。且DK/SH/Y20/06的8个基因与美洲H4N6亚型AIV分离株均不处在同一遗传进化分支上,相互之间遗传关系较远。可见,DK/SH/Y20/06可能是由H4N6、H6N2、H6N5、H3N1和H1N2等不同亚型来源的基因在鸭体内经过复杂重组演变的一株重组病毒。 展开更多
关键词 鸭源禽流感病毒 H4N6亚型 全基因组序列 遗传演化分析 基因重组
下载PDF
适用于基因全长克隆的灰毡毛忍冬不同器官总RNA提取方法筛选 被引量:6
14
作者 刘湘丹 徐玉琴 +2 位作者 王珊 童巧珍 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第12期60-63,共4页
目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅... 目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取;改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳;而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、完整性较好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取;改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 基因全长克隆 总RNA 不同器官 提取方法
下载PDF
山药PAL基因全长cDNA序列的克隆、表达与分析 被引量:12
15
作者 周生茂 王玲平 +5 位作者 向珣 韦本辉 李杨瑞 方锋学 韦威旭 曹家树 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期781-788,859,共9页
为了阐明苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC4.3.1.5)基因在山药地下块茎酚类物质积累过程中的分子机理,本研究运用普通PCR、RACE和TAIL-PCR技术从大薯(Dioscorea alataL.)’Zixiao’地下块茎中克隆到同一个PAL基因的3个片段,即长度分别为1 145b... 为了阐明苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC4.3.1.5)基因在山药地下块茎酚类物质积累过程中的分子机理,本研究运用普通PCR、RACE和TAIL-PCR技术从大薯(Dioscorea alataL.)’Zixiao’地下块茎中克隆到同一个PAL基因的3个片段,即长度分别为1 145bp、1 151bp和424bp的中间片段、3’端和5’端的cDNA序列;将3段cDNA序列拼接后获得大小为2 376bp的PAL基因全长cDNA序列,该序列含有一个1986bp的最大开放阅读框(ORF),一个28bp的5’端非翻译区,一个362bp含25 nt的Poly(A+)尾的3’端非翻译区,最大ORF可推测编码一个包括PAL酶活性中心的特征序列(GTITASGDLVPLSYIA)在内的661个氨基酸的多肽,分子量为71.974kDa,等电点6.310;大薯地下块茎的PAL基因分别在核苷酸与氨基酸水平上和GenBank中所选已知其他物种的同源性为73%~77%和76%~82%,说明PAL基因在系统进化上相对保守;RT-PCR分析表明该基因仅在地下块茎中表达,而且表达丰度在收获前逐渐降低。 展开更多
关键词 大薯 苯丙氨酸解氨酶 全长CDNA 基因克隆 序列分析 时空表达
下载PDF
苎麻CCoAOMT基因全长cDNA克隆与序列分析 被引量:18
16
作者 陈建荣 郭清泉 张学文 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期1058-1063,共6页
目的试图分离和克隆苎麻内源咖啡酰辅酶A甲基转移酶基因。方法采用RACE技术克隆基因,对序列应用ClustaW1.82软件进行在线分析,将苎麻mRNA序列、mRNA编码区序列以及氨基酸序列与已报道的其它植物的相应序列进行多重序列排列比较并构建系... 目的试图分离和克隆苎麻内源咖啡酰辅酶A甲基转移酶基因。方法采用RACE技术克隆基因,对序列应用ClustaW1.82软件进行在线分析,将苎麻mRNA序列、mRNA编码区序列以及氨基酸序列与已报道的其它植物的相应序列进行多重序列排列比较并构建系统树。结果获得了苎麻CCoAOMTcDNA全长序列(GenBank注册号:AY651026);苎麻咖啡酰辅酶A甲基转移酶是氧甲基转移酶类;苎麻CCoAOMT基因mRNA序列与已报道的其他植物的相应序列不能聚为一类,其差异明显大于其它植物间的差异。苎麻CCoAOMT基因mRNA编码区序列与玉米(Zeamays:ZMA242980、ZMA242981)的同源性高于其他植物。推导的苎麻CCoAOMT酶蛋白氨基酸序列与杨树(Populusbalsamifera:AJ224894、AJ224896)、美洲山杨(Populustremuloides:PTU27116)的同源性高于其他植物。结论苎麻CCoAOMT基因cDNA与其它植物的相应序列具有同源性。 展开更多
关键词 苎麻(Boehmeria nivea) 咖啡酰辅酶A甲基转移酶 全长CDNA 基因克隆 序列分析
下载PDF
中国野葡萄新基因cDNA全长的克隆及序列分析 被引量:4
17
作者 赵伟 徐伟荣 +2 位作者 徐炎 贺明阳 王跃进 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期878-884,共7页
根据对中国野生葡萄华东葡萄株系白河-35-1在白粉病诱导下构建的cDNA文库中获得的1条EST序列设计特异引物,以总RNA逆转录产物为模板,进行SMART-RACE扩增。结合生物信息学方法对所获的序列进行开放阅读框、序列同源性分析,并预测了蛋白... 根据对中国野生葡萄华东葡萄株系白河-35-1在白粉病诱导下构建的cDNA文库中获得的1条EST序列设计特异引物,以总RNA逆转录产物为模板,进行SMART-RACE扩增。结合生物信息学方法对所获的序列进行开放阅读框、序列同源性分析,并预测了蛋白质的理化性质、信号肽、酶与非酶分析、亚细胞定位以及蛋白质二级结构。结果表明,获得的中国野生葡萄新基因的全长序列为854 bp,其开放阅读框为585 bp,5′非编码区为107 bp,3′非编码区为162 bp;同源性比对表明该新基因推导的氨基酸序列与拟南芥RNA结合蛋白和水稻推定的半乳糖基转移酶的同源性分别为55%和63%,第8-82位氨基酸序列与RNA识别基序相类似,是一个典型的结构功能域;推导该基因表达产物为相对分子质量为21 801.27、等电点为6.86的不稳定蛋白,定位于细胞核,不包含信号肽,二级结构主要是无规则卷曲。 展开更多
关键词 中国野生葡萄 CDNA全长 RACE 基因克隆 生物信息学
下载PDF
牙鲆胰岛素样生长因子结合蛋白IGFBP-1 cDNA全长的克隆及表达分析 被引量:8
18
作者 翟万营 张俊玲 +1 位作者 施志仪 李巍 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期170-179,共10页
利用RACE-PCR技术,从牙鲆肝脏组织总RNA中克隆得到胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1)基因的全长cDNA序列,该cDNA全长为1 070 bp,开放阅读框为729 bp,编码242个氨基酸。通过系统进化树... 利用RACE-PCR技术,从牙鲆肝脏组织总RNA中克隆得到胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1)基因的全长cDNA序列,该cDNA全长为1 070 bp,开放阅读框为729 bp,编码242个氨基酸。通过系统进化树分析,牙鲆IGFBP-1与鱼类IGFBP-1基因紧密聚为一支;通过同源性比对,牙鲆IGFBP-1基因的核苷酸序列与大菱鲆同源性最高,为95%,而其推导的氨基酸序列与其它鱼类如大菱鲆、五条、黄金鲈、红点鲑、鲤和斑马鱼的同源性分别为89%、89%、84%、79%、67%和67%。半定量RT-PCR显示,牙鲆IGFBP-1 mRNA在未受精卵、受精卵、胚胎、仔鱼发育各阶段及成体各组织均被检测。荧光定量RT-PCR结果表明,牙鲆IGFBP-1基因在成鱼肝脏中表达量最高,且在胚胎和仔鱼发育期间具有明显的时期特异性。 展开更多
关键词 牙鲆 胰岛素样生长因子结合蛋白-1(IGFBP-1) CDNA全长 基因 表达
下载PDF
马铃薯蛋白酶抑制子StPI基因的克隆及表达分析 被引量:2
19
作者 李广存 金黎平 +2 位作者 谢开云 李颖 屈冬玉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1877-1882,共6页
【目的】克隆马铃薯蛋白酶抑制子基因StPI的全长cDNA。【方法】以马铃薯高抗青枯病二倍体基因型ED13为材料,采用RACE方法进行StPI基因全长cDNA的克隆,利用半定量RT-PCR方法进行该基因的诱导表达分析。【结果】获得了StPI基因的全长cDNA... 【目的】克隆马铃薯蛋白酶抑制子基因StPI的全长cDNA。【方法】以马铃薯高抗青枯病二倍体基因型ED13为材料,采用RACE方法进行StPI基因全长cDNA的克隆,利用半定量RT-PCR方法进行该基因的诱导表达分析。【结果】获得了StPI基因的全长cDNA,序列分析表明:该基因具有完整的开放阅读框架,编码116个氨基酸,与马铃薯蛋白酶抑制子I前体具有较高的同源性(核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89%和74%)。该基因同时受青枯病菌的诱导和茉莉酸的调节,在6~12h内即达到最高表达水平,但二者又有明显不同。相对而言,StPI基因受青枯病菌的诱导较弱,而受茉莉酸(JA)的诱导较为强烈,在JA处理3h表达量即明显升高,6~12h迅速升至最高。【结论】本研究从马铃薯抗青枯病基因型ED13中获得了StPI基因的全长cDNA。该基因可能参与了马铃薯的抗青枯病反应,且病菌处理对该基因的诱导可能与JA刺激具有相似或相同的信号途径。 展开更多
关键词 马铃薯晚疫病 RACE StPI基因 全长CDNA 基因表达
下载PDF
鳗鲡病原性气单胞菌外膜蛋白基因全长的克隆与抗原决定簇分析 被引量:2
20
作者 郭松林 王玉 +3 位作者 关瑞章 冯建军 林鹏 杨求华 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期144-152,共9页
为寻找存在于鳗鲡病原性气单胞菌间的共同外膜蛋白保护性抗原。通过NCBI/GenBank数据库检索,找出气单胞菌多种外膜蛋白的序列信息,经比对后找到一条高度保守的基因序列片段。据相应片段从嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和杀鲑气单... 为寻找存在于鳗鲡病原性气单胞菌间的共同外膜蛋白保护性抗原。通过NCBI/GenBank数据库检索,找出气单胞菌多种外膜蛋白的序列信息,经比对后找到一条高度保守的基因序列片段。据相应片段从嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和杀鲑气单胞胞菌(A.salmonicida)的全基因组序列中钓出Ⅱ型孔蛋白基因的全长序列及该基因区域之外两端的序列。根据嗜水气单胞菌和杀鲑气单胞胞菌这两端序列的保守区域设计一对特异性引物,用该引物扩增到鳗鱼病原库30株气单胞菌中11株菌的Ⅱ型孔蛋白基因全长,经测序后获得10株菌的Ⅱ型孔蛋白基因全长序列。选择遗传距离居中菌株,对该基因推导的表达产物进行蛋白结构预测、亲水性和抗原决定簇分析后发现,这些蛋白均具有三级结构,亲水性强且具有丰富的抗原决定簇。不同菌株的多个抗原决定簇经比对分析后,寻找到存在于多株鳗鲡病原性气单胞菌间的6个保守抗原决定簇。为养殖鳗鲡病原菌外膜蛋白共同保护性抗原的基因工程疫苗研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 外膜蛋白 病原性气单胞菌 全长基因克隆 共同抗原决定簇 鳗鲡
下载PDF
上一页 1 2 7 下一页 到第
使用帮助 返回顶部