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鸡传染性喉气管炎病毒中国王岗株gX基因的克隆及鉴定 被引量:4
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作者 张绍杰 宋程 +5 位作者 于力 王玫 王柳 李昌仁 童光志 卢景良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期219-221,共3页
以pUC19质粒为载体克隆鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)中国王岗株的DNA,构建了鸡传染性喉气管炎病毒DNA的KpnⅠDNA文库。参考ILTV-SA2株gX基因的核酸序列,设计并合成了分别为12bp和13bp的1对... 以pUC19质粒为载体克隆鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)中国王岗株的DNA,构建了鸡传染性喉气管炎病毒DNA的KpnⅠDNA文库。参考ILTV-SA2株gX基因的核酸序列,设计并合成了分别为12bp和13bp的1对引物。以ILTV中国王岗株DNA为模板,用PCR方法特异性地扩增出0.84kb的ILTV-gX基因片段。以地高辛标记该0.84kb的片段为探针,经Southern杂交从ILTV中国王岗株KpnⅠDNA文库中筛选出3个含5.2kb外源ILTVDNA片段的gX基因阳性重组子。经酶切分析、Southern杂交、PCR检测和该片段部分酶谱分析表明,ILTV中国王岗株DNA5.2kb的KpnⅠ片段无论是片段大小还是酶切图谱均与ILTV-SA2株完全相同,而且Southern杂交和PCR检测均为gX阳性。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 病毒 基因 聚合酶链反应 重组子
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传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析 被引量:2
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作者 陈红英 崔保安 +3 位作者 李新生 杨明凡 赵丽 方剑玉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期29-32,共4页
根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连... 根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接,转化JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选,对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序。测序结果表明,所克隆的GX基因全长为950 bp,含有一个开放阅读框,编码299个氨基酸的多肽。推导的氨基酸有4个潜在的N-糖基化位点,有11个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,克隆的ILTV-CGGX基因与GenBank中发表的ILTV-SA2株GX基因核苷酸同源性为97.2%,变异点为第124位插入1个碱基G,第136位又插入2个碱基C,从而引起该毒株GX基因推导的氨基酸序列在第33位插入1个亮氨酸,还存在多处氨基酸发生变化,氨基酸同源性为95.3%。GX基因的成功克隆为构建ILTVGX基因缺失的病毒活载体奠定基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 gx基因 聚合酶链反应 序列分析
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模拟飞船应急返回时+Gx暴露后大鼠脑细胞凋亡相关基因bcl-2、p53的表达
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作者 孙喜庆 徐志鹏 +3 位作者 刘挺松 吴斌 张舒 由广兴 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期405-409,共5页
目的探讨bcl-2、p53在模拟飞船应急返回时高+Gx作用致大鼠脑细胞凋亡中的作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为4组,即对照组、+15Gx组、7d模拟失重组、7d模拟失重后再+15Gx组,每组10只。大鼠在动物离心机上承受+Gx作用后,灌注取脑,固定包埋... 目的探讨bcl-2、p53在模拟飞船应急返回时高+Gx作用致大鼠脑细胞凋亡中的作用。方法40只雄性SD大鼠随机分为4组,即对照组、+15Gx组、7d模拟失重组、7d模拟失重后再+15Gx组,每组10只。大鼠在动物离心机上承受+Gx作用后,灌注取脑,固定包埋,做石腊切片。用免疫组化方法检测大鼠海马、顶叶皮层相关基因bcl-2和p53表达的变化。结果+15Gx暴露后1d可见bcl-2表达减少,p53表达增加,在暴露后3d改变明显;7d模拟失重组大鼠在暴露后1d可见bcl-2表达减少,p53表达增加;模拟失重后再+15Gx组在暴露后1d可见上述bcl-2、p53表达的变化,在暴露后3d改变最明显,变化比+15Gx组或模拟失重组均明显。结论+15Gx/180s暴露可引起大鼠海马和顶叶皮层细胞凋亡相关基因bcl-2和p53表达的变化;7d模拟失重可加重+Gx引起的大鼠脑组织损伤。 展开更多
关键词 失重模拟 正加速度 +gx 细胞凋亡 基因表达 免疫组化法
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Pathogenic Antigenic and Molecular Characterization of the Very Virulent Strain(Gx) of Infectious Bursal Disease Virus Isolated in China 被引量:15
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作者 WANGXiao-mei FUChao-yang +4 位作者 GAOHong-lei SONGXiou-long ZENGXiang-wei ZHANGMan-fu WallaceBLlim 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2003年第5期566-572,共7页
The very virulent infectious bursal disease virus (vvIBDV) strain Gx was isolated from a poutl-try farm in Guangxi Province, China, during 1996. The mortality in the infected flock was 80% and occurred 5 days after im... The very virulent infectious bursal disease virus (vvIBDV) strain Gx was isolated from a poutl-try farm in Guangxi Province, China, during 1996. The mortality in the infected flock was 80% and occurred 5 days after immunization with serotype I IBD vaccine. The results of antigen-capture ELISA (AC-ELISA), pathogenicity testing, cloning and sequence analysis of the VP2 gene showed that the deduced amino acid sequence of strain Gx VP2 was the same as vvIBDV UK661, which is considered as a reference strain for European vvIBDVs. The antigenicity of the Gx strain was the same as an European vvIBDV strain 849. The EID50 of Gx virus was 10-8.25/0. 2 ml, and the mortality was 64% when 4 week-old SPF chickens were challenged at dosage of 2×10~3EID50. We have demonstrated that the IBDV strain Gx isolated in China is vvIBDV according to European standards. 展开更多
关键词 Infectious bursal disease Very virulent strain(gx) PATHOGENICITY VP2 gene
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模拟失重及高+Gx对猴舌横纹肌细胞结构及HSP70表达的影响
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作者 张凯 牛忠英 +4 位作者 包博 陈宇晖 张建中 司少艳 王艳茹 《北京口腔医学》 CAS 2013年第2期78-81,共4页
目的探讨模拟失重及高+Gx对猴舌横纹肌组织结构和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响。方法 12只雄性猕猴随机分为4组,正常对照组(A)、30d模拟失重组(B),+13Gx/230s组(C)、30d模拟失重后超重组(D),其中D组根据过载峰... 目的探讨模拟失重及高+Gx对猴舌横纹肌组织结构和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)表达的影响。方法 12只雄性猕猴随机分为4组,正常对照组(A)、30d模拟失重组(B),+13Gx/230s组(C)、30d模拟失重后超重组(D),其中D组根据过载峰值又分为+11Gx/270s(D1)、+13Gx/230s(D2)和+15Gx/200s(D3)。动物放血处死后取材,采用组织病理学和免疫组化的方法,观察猴舌横纹肌组织结构及HSP70的表达情况。结果 A组可见正常的舌横纹肌结构,其他组舌横纹肌细胞结构基本正常,偶见细胞间质稀疏,细胞排列紊乱以及横纹不清或消失。A组舌横纹肌细胞HSP70呈阴性表达,细胞核与细胞浆均无明显着色;B组、C组和D组舌横纹肌细胞胞核与胞浆均着色明显,呈阳性表达,较A组变化显著。HSP70免疫组化积分显示,D组比B组和C组变化显著(P<0.05),但D1、D2、D3无明显差别(P>0.05)。结论 30d模拟失重和高+13Gx/230s均可使猴舌横纹肌细胞产生应激反应,引起HSP70的表达增强,并可能伴有损伤。模拟失重与过载超重具有协同作用,两者可能加重了对舌横纹肌的影响。 展开更多
关键词 失重模拟 +gx 舌横纹肌细胞 HSP70基因 免疫组化法
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膀胱癌组织中Fas和Bcl-2基因的表达及意义
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作者 夏庆华 许纯孝 +2 位作者 尉立京 劳平 王春霞 《山东医药》 CAS 北大核心 2000年第11期1-2,共2页
采用免疫组化 SABC法检测了 4 2例膀胱移行细胞癌患者癌组织标本中 Fas和 Bcl- 2基因的表达情况 ,并观察其与病理分级、临床分期及预后的关系。结果显示 ,Fas基因表达与膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期及是否复发有显著关系 ,Bcl- ... 采用免疫组化 SABC法检测了 4 2例膀胱移行细胞癌患者癌组织标本中 Fas和 Bcl- 2基因的表达情况 ,并观察其与病理分级、临床分期及预后的关系。结果显示 ,Fas基因表达与膀胱移行细胞癌的病理分级、临床分期及是否复发有显著关系 ,Bcl- 2基因表达与临床分期及是否复发有关。认为 Fas和Bcl- 2基因表达可以作为监测膀胱移行细胞癌恶性程度、预测复发的重要指标。在低分化和晚期膀胱移行细胞癌中 ,Fas基因介导的细胞凋亡可能被 Bcl- 2基因的过度表达所抑制。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 FAS基因 BCL-2基因 基因表达
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