Galectin-1在鼻咽癌中的表达与意义

目的探讨Galectin-1在人鼻咽癌(NPC)组织中的mRNA和蛋白表达水平,及其在鼻咽癌发病中的意义。方法 Real-time RT-PCR法检测32例鼻咽癌组织及10例正常鼻咽上皮组织中Galectin-1的mRNA表达;免疫组织化学法检测对应组织石蜡切片中Galectin-1的蛋白表达。结果 Galectin-1在鼻咽癌中mRNA和蛋白的表达明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05),Galectin-1的高表达在转录水平上受到调节。结论鼻咽癌中Galectin-1基因高表达在NPC发病机制中具有重要意义。

Galectin-1在大肠癌组织中的表达及其临床意义

目的检测Galectin-1在大肠癌组织、癌旁正常组织及淋巴结转移癌中的表达情况,初步探讨其与大肠癌发生发展,侵袭转移的关系。方法(1)用SP免疫组化法检测158例临床石蜡组织标本(癌旁正常组织30例,腺瘤组织25例,大肠癌组织65例,淋巴结转移癌38例)中的Galectin-1蛋白的表达。(2)用实时RTPCR法分析Galectin-1mRNA在32对新鲜大肠癌组织及相应癌旁正常组织中的表达情况。结果(1)Galectin-1蛋白在癌旁正常组织、腺瘤及大肠癌组织中的表达具有明显差异,其强阳性率逐渐增加;正常粘膜中的强阳性率为0,在腺瘤中的强阳性率为8%,两者之间有显著性差异(P=0.000);在大肠癌组织中的强阳性率为66%,明显高于腺瘤组织,两者之间有显著性差异(P=0.000);淋巴结转移癌中Galectin-1的强阳性率为86%,明显高于大肠癌组织,两者之间有显著性差异(P=0.022);在浸润程度深、分化程度低及发生淋巴结转移的大肠癌组织中的表达明显高于浸润程度浅、分化程度高及未发生淋巴结转移的大肠癌组织(P<0.05)。(2)在32对大肠癌组织中浸润程度深、分化程度低及发生淋巴结转移的组织中的Galectin-1mRNA表达明显高于浸润程度浅、分化程度高及未发生淋巴结转移的组织。其表达量的平均倍比关系分别为1.98、2.27、1.42倍。结论Galectin-1参与了大肠癌的发生发展过程,可能与大肠癌的浸润、分化及淋巴结转移有一定的相关性。

细胞膜表面Galectin-1抗体阻断对大肠侧向发育型肿瘤细胞与Ⅰ型胶原黏附的影响

目的观察细胞膜galectin-1抗体阻断对LST-R1细胞与Ⅰ型胶原黏附的影响。方法激光共聚焦显微镜观察galectin-1在LST-R1细胞膜表面的表达。galectin-1抗体预孵LST-R1细胞后种植于Ⅰ型胶原(20μl/孔)包被的48孔板中,观察黏附细胞形态学差异;计数黏附细胞。结果galectin-1表达于LST-R1细胞膜表面,galectin-1抗体预孵LST-R1细胞后结合率为(38·2±0·92)%。ga-lectin-1抗体阻断组可见有渐多的不规则角形黏附细胞,且大部分细胞呈单个生长状态,而对照组大部分黏附细胞为圆形或类圆形,细胞主要呈聚集生长;黏附细胞数分别为40±4和30±4(P<0·01)。结论细胞膜表面galectin-1可能为LST病变呈浅表扩散的重要蛋白质分子之一。

Galectin-1在高糖腹透液诱导人腹膜间皮细胞转分化中的作用

目的:研究人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)中galectin-1的表达和在高糖腹透液(peritoneal dialysate solution,PDS)刺激下galectin-1表达的变化及其与上皮细胞-间充质细胞转分化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)的关系。方法:以HPMCs为研究对象,实验分为:正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),含1.5%葡萄糖的PDS(1.5%PDS)组,2.5%PDS组及4.25%PDS组。培养48 h后,采用实时定量PCR和Western印迹检测galectin-1,vimentin和zo-1 mRNA和蛋白的表达水平,分析galectin-1与vimentin和zo-1表达的相关性。使用阳离子脂质体转染galectin-1 siRNA至HPMCs内,实验分为:正常对照组(5.5mmol/L葡萄糖),高糖组(4.25%PDS)和转染组(galectin-1 siRNA+4.25%PDS)。观察galectin siRNA干预后vimentin和zo-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果:不同浓度PDS刺激HPMCs 48 h后,与对照组比,galectin-1mRNA表达上调,尤以4.25%PDS组明显(P<0.05),其蛋白水平的表达均明显上调(P<0.05),且具有浓度依赖性;同时vimentin mRNA表达上调,以2.5%PDS组和4.25%PDS组更明显(P<0.05),其蛋白水平的表达均明显上调(P<0.05);而zo-1 mRNA和蛋白水平的表达均明显下调(P<0.05)。不同浓度高糖PDS刺激下galectin-1 mRNA和蛋白表达水平与vimentin mRNA和蛋白表达水平呈正相关(P<0.05);与zo-1 mRNA和蛋白表达水平呈负相关(P<0.05)。Galectin-1 siRNA干预后vimentin mRNA和蛋白水平的表达较高糖组明显下调(P<0.05),而zo-1 mRNA和蛋白水平的表达较高糖组明显上调(P<0.05)。结论:Galectin-1与高糖PDS诱导的HPMCs EMT相关,galectin-1 siRNA能够抑制高糖PDS诱导的HPMCs转分化。Galectin-1可能参与腹膜纤维化的发生环节,成为防治腹膜纤维化的新靶点。

小鼠胚泡黏附时子宫内膜Galectin-1的变化

目的:探讨小鼠胚胎黏附时子宫内膜Galectin-1的变化。方法:双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(2D-PAGE)分析妊娠d 5小鼠胚泡黏附时着床点、着床旁子宫内膜总蛋白,以同龄未交配鼠子宫内膜为对照,差异蛋白质组学显示pI约5.1、分子量约15 ku的蛋白点在着床点、着床旁子宫内膜表达上调,且在着床点更明显。对此蛋白点用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测定其胶内酶解后的肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)。结果:Mascot: PMF在SWISS-PROT数据库查询为鼠源性Galectin-1。RT-PCR结果显示d 5孕小鼠子宫内膜Galectin-1 mRNA水平也明显增加。结论:Galectin-1可能参与胚泡着床这一重要生命活动过程。

静脉替罗非班治疗对急性脑梗死患者Lp-PLA2、Galectin-1水平的影响

目的观察静脉替罗非班治疗急性脑梗死(ACI)患者血清中脂蛋白相关磷脂酶A_(2)(Lp-PLA_(2))和半乳糖凝集素-1(Galectin-1)水平的变化及临床疗效。方法选取神经内科收治的48例接受静脉替罗非班治疗的ACI患者作为观察组,选择同期健康体检者46例作为对照组。抽取对照组当日静脉血,观察组患者治疗前及经静脉替罗非班治疗第1天、第7天、第30天时抽取静脉血。比较两组间以及观察组患者治疗前后血清Lp-PLA_(2)、Galectin-1水平;观察组患者治疗前后改良Rankin量表(mRS)评分。结果观察组患者在治疗前以及治疗第1、7、30天的血清Lp-PLA_(2)水平分别为(301.16±1.24)、(264.25±0.98)、(198.36±1.02)、(251.48±1.13)ng/ml,均高于对照组的(148.25±1.47)ng/ml(P<0.05);观察组患者经替罗非班治疗后血清Lp-PLA_(2)水平较治疗前逐渐下降,但治疗后第30天血清Lp-PLA_(2)水平较治疗后第7天升高(P<0.05)。观察组患者在治疗前以及治疗第1、7、30天的血清Galectin-1水平分别为(314.00±93.62)、(203.00±85.41)、(145.00±81.34)、(198.00±83.46)pg/ml,均高于对照组的(96.00±42.33)pg/ml(P<0.05)。观察组患者经替罗非班治疗后血清Galectin-1水平较治疗前逐渐下降,但治疗后第30天的血清Galectin-1水平较治疗后第7天升高(P<0.05)。观察组治疗前mRS评分为(3.04±0.43)分,治疗90 d后mRS评分为(1.05±0.31)分,较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用静脉替罗非班治疗,可降低ACI患者中血清Lp-PLA_(2)、Galectin-1水平,促进神经功能恢复。

大肠癌细胞外基质galectin-1梯度表达的研究

目的:观察galectin-1在大肠癌组织不同侵袭部位中的表达。方法:免疫组织化学检测大肠癌组织不同侵袭部位galectin-1表达分布,以Dukes C期大肠癌为例,采用免疫印迹观察大肠癌深浅侵袭部位galec-tin-1表达差异。结果:galectin-1表达于大肠癌组织细胞外基质,且其深层侵袭部位表达高于浅层部位。结论:大肠癌细胞基质galectin-1在大肠癌侵袭转移中可能发挥重要的作用。

RNAi沉默galectin-1表达对黏附LST-R1细胞生长的影响

目的采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,构建galectin-1基因特异siRNAs真核干扰载体,检测LST-R1细胞galectin-1表达变化,观察黏附LST-R1细胞增殖和凋亡改变。方法设计2对galectin-1基因特异性siRNAs,确定相应的shRNAs,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pSUPER.puro,构建galectin-1 siRNA表达载体,与pcDNA6/TR共转染LST-R1细胞,嘌呤霉素(0.8μg/mL)进行阳性克隆筛选。四环素(4μg/mL)诱导48 h后,RT-PCR检测galectin-1 mRNA水平改变,免疫印迹和细胞免疫化学检测蛋白质水平的改变,观察黏附LST-R1细胞增殖和凋亡改变。结果成功构建发夹样galectin-1 siRNA真核表达载体p-shRNA1和p-shRNA2,建立相应稳定的p-shRNA1-LST、p-shRNA2-LST细胞系。RNAi下调galectin-1表达后,细胞生长曲线表明第3至7天黏附p-shRNA1-LST细胞增殖较p-LST和LST-R1细胞增加,而低浓度血清诱导的细胞凋亡则减少,依次为(3.77±0.34)%、(7.92±0.60)%和(7.67±0.75)%(P<0.001)。结论Galectin-1的下调表达可抑制黏附LST-R1细胞凋亡,同时促进黏附LST-R1细胞增殖,提示galectin-1可能参与了LST病变浅表性扩散特性的形成。

Galectin-1基因在人孕早期绒毛和蜕膜组织中表达的研究

目的：探讨早孕绒毛和蜕膜组织中Galectin-1mRNA及蛋白的表达与胚胎发育和胎盘形成的关系。方法：对70例非意愿妊娠的6-12周正常早孕行人工流产者,按孕周分为7组,每组10例。收集其绒毛和蜕膜组织,分别采用半定量RT-PCR及Western blot方法检测Galectin-1mRNA和蛋白的表达水平。结果：在整个孕早期绒毛组织中都有Galectin-1mRNA的表达,孕6周表达最低,随孕周增加而逐渐增高,孕12周最高,Galectin-1蛋白表达与mRNA表达趋势一致；其在蜕膜组织中的表达与绒毛组织中类似。结论：Galectin-1mRNA和蛋白在早孕绒毛和蜕膜组织中的表达均随孕周增加而增高,提示该基因在早孕期胎盘形成过程中起重要作用。

Galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响

目的观察galectin-1表达对LoVo细胞表型的影响。方法构建galectin-1真核表达载体,转染LoVo细胞,细胞免疫化学检测蛋白质水平的改变,dot-blotting检测细胞培养上清分泌性galectin-1,观察LoVo细胞表型变化。结果成功构建了galectin-1真核表达载体,并建立了稳定的真核表达载体转染LoVo细胞系。galectin-1表达可降低LoVo细胞与Ⅰ型胶原的粘附,促进细胞同质粘附,且降低细胞体内成瘤(P<0.001)。结论Galectin-1表达可降低LoVo细胞恶性相关表型。

东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建

构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,为进一步研究galectin-1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。

Galectin-1及Galectin-9在子宫内膜癌组织中的表达

目的:分别检测Galectin-1及Galectin-9在正常子宫内膜组织、子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌组织中的表达,研究两者与子宫内膜癌发生、发展的关系。方法:收集正常子宫内膜组织30例,子宫内膜不典型增生组织20例,子宫内膜腺癌组织51例,所有标本均在同一条件下,采用免疫组化法对Galectin-1及Galectin-9表达进行检测。结果:Galectin-1在正常子宫内膜组织、子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌中的阳性表达率分别为30.0%、70.0%、90.2%;Galectin-9在正常子宫内膜组织、子宫内膜不典型增生及子宫内膜腺癌中的阳性表达率分别为20.0%、75.0%、78.4%。Galectin-1及Galectin-9在子宫内膜腺癌组及子宫内膜不典型增生组中的阳性表达率明显高于正常子宫内膜组,差异有统计学意义(P<0.05),但在子宫内膜腺癌组及子宫内膜不典型增生组间差异无统计学意义(P>0.05)。Galectin-1在子宫内膜腺癌不同组织分级、病理分期、肌层浸润程度及是否伴淋巴结转移间表达强度无显著性差异(P>0.05)。Galectin-9表达强度在子宫内膜腺癌不同组织分级、病理分期、是否伴淋巴结转移与肌层浸润程度间均有统计学差异(P<0.05)。结论:Galectin-1及Galectin-9均与子宫内膜癌的发生过程相关,相对于Galectin-1,子宫内膜组织中Galectin-9的表达变化与子宫内膜病变的发生更密切,可作为对子宫内膜癌进行早期诊断和治疗效果监测的指标之一,对提高子宫内膜癌的诊治水平具有重要意义。

Galectin-1蛋白及孕激素受体与胃癌腹膜转移的关系

目的:探讨胃癌组织中半乳糖结合蛋白(Galectin-1)及孕激素受体(PR)表达与胃癌腹膜转移的关系。方法:应用即用型孕激素测定试剂盒及鼠抗人Galectin-1单克隆抗体和免疫组织化学SP染色法检测40例同期伴腹膜转移胃癌患者的癌旁正常胃黏膜、胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶中Galectin-1蛋白及PR的表达。结果:正常胃黏膜中Galectin-1及PR的表达与胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶之间差异均具统计学意义(P<0.05)。胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶三者间的Galectin-1及PR表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃癌病灶中的Galectin-1及PR表达可能成为判断胃癌患者术前是否有腹膜转移及预后的生物学指标,并可为胃癌的内分泌治疗提供依据。

Galectin-1在狼疮性肾炎患者肾脏组织中表达及其临床意义

目的:观察狼疮性肾炎(LN)患者肾组织中半乳凝素-1(Gal-1)的表达及其与临床表现的关系。方法:采用间接免疫荧光法和免疫组织化学法检测36例狼疮性肾炎患者和5例健康对照组的肾组织Gal-1的表达情况,并观察Gal-1表达水平与临床数据的相关性。结果:Gal-1在健康对照组肾组织中表达阴性,在狼疮性肾炎患者肾脏组织中表达阳性。与健康对照组比较,狼疮性肾炎患者肾脏Gal-1表达水平显著升高(P<0.05);肾脏活跃指数(activity index,AI)大于4分的肾脏的Gal-1表达水平比AI小于4分的肾脏显著升高(P<0.05),肾脏Gal-1的表达水平与狼疮性肾炎患者AI、AI+CI(慢性指数,chronic index,CI)、SLEDAI评分指数呈正相关(r=0.777、0.44、0.399,P<0.05);与病程(月)呈负相关(r=-0.392,P<0.05)。结论:Gal-1在狼疮性肾炎患者肾脏中表达阳性,其表达水平与肾脏活跃程度呈正相关,提示Gal-1可能参与狼疮性肾炎的发生发展。

双歧杆菌对肠癌细胞系Galectin-1的黏附和黏附拮抗作用

目的探索加热灭活和不加热活的双歧杆菌对Galectin-1细胞的黏附作用及其对肠道常见致病菌黏附拮抗作用。方法通过黏附试验,用光镜分析加热灭活和不加热活的双歧杆菌对Galectin-1细胞的黏附指数。通过排除试验、竞争试验和替代试验,应用平板扩散法观察了加热灭活和不加热活的双歧杆菌的代谢乏液对侵袭性大肠杆菌、伤寒沙门菌和痢疾志贺菌的黏附拮抗作用。结果加热灭活和不加热活的双歧杆菌对Galectin-1细胞均有较强的黏附作用;加热灭活和不加热活的双歧杆菌对肠道侵袭性大肠杆菌、伤寒沙门菌和痢疾志贺菌均表现了较强的黏附拮抗作用。结论灭活状态的双歧杆菌相对于活菌有更强的黏附拮抗作用,显示其作为益生菌的广泛应用情景。

靶向Galectin-1基因的siRNA真核表达载体构建及鉴定

目的:构建Galectin-1特异性siRNA真核表达载体psilencircle-G1si,转染细胞株U14,下调Galec-tin-1的表达。方法:运用生物信息学技术候选siRNA序列,合成SECs转染U14细胞,以荧光定量PCR快速筛选有效序列;siRNA序列插入siRNA真核表达质粒psilencircle,构建psilencircle-G1si并转染U14细胞,实时荧光定量PCR、Western blot检测Galectin-1表达量。结果:psilencircle-G1si酶切、测序表明与设计一致,实时定量PCR及western blot表明psilecircle-G1si能调低U14细胞Galectin-1的表达。结论:成功构建Ga-lectin-1特异性siRNA真核表达载体psilencircle-Glsi。

Galectin-1及其在肿瘤发展中的作用

近年来基因治疗逐渐成为肿瘤治疗的研究热点,其特点在于靶向药物与关键基因及位点结合后,可特异性杀死肿瘤细胞。与传统治疗方法相比,基因治疗更易控制癌细胞的转移、复发,从而提升患者的预后及生存质量。Galectin-1是一种糖蛋白,其在多种肿瘤中高表达,并且调控癌细胞的增殖、迁移、侵袭等。明确Galectin-1在多种肿瘤发展中的作用及机制,可以为临床药物挖掘更多的候选靶点,从而对肿瘤的治疗更加深入。

Galectin-1在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展

头颈部鳞状细胞癌（head and neck squamous cell carcinoma，HNSCC）是常见的头颈部疾病，其发病率居恶性肿瘤第六位。目前，手术联合放疗、化疗是HNSCC的主要治疗手段。肿瘤免疫治疗是在现代肿瘤免疫学理论的基础上。结合免疫生物学、分子生物学等诸学科的发展而形成的一种治疗手段。因为其效果明显且副作用小，成为综合治疗最主要的辅助手段并广泛应用于临床。

Galectin-1、P^(21)、P^(27)在子宫颈鳞状细胞癌和癌前病变中的表达及意义

目的分析Galectin-1、P21、P27在子宫颈癌前病变和子宫颈鳞状细胞癌(Cervical squamous cellcarcinoma,CSCC)中的表达,探讨其在宫颈癌变过程中的作用机制。方法采用免疫组织化学S-P法,检测20例正常宫颈组织、39例子宫颈上皮内瘤变(Cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅰ、40例CINⅡ、40例CINⅢ和54例CSCC组织中Galectin-1、P21、P27蛋白的表达。结果 Galectin-1和P21在CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ和CSCC组织中阳性表达率明显高于正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05)。P27在CINⅢ和CSCC组织中阳性表达率明显低于正常宫颈组织,差异有统计学意义(P<0.05)。但Galectin-1、P21、P27在CIN组间及CSCC组间差异无统计学意义(P>0.05)。Galectin-1阳性表达的41例CSCC中P21阳性表达38例,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。Galectin-1阳性表达的41例CSCC中P27阳性表达13例,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Galectin-1和P21高表达、P27低表达与宫颈癌的发病密切相关,可为宫颈癌前病变发展为浸润性鳞癌提供动态观察的参考指标。

敲低galectin-1可抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭并促进其凋亡

目的探讨半乳糖凝集素-1(galectin-1)对肺腺癌细胞的影响及其机制。方法收集并比较肺腺癌组织和癌旁正常组织galectin-1的表达水平。qRT-PCR法检测肺腺癌细胞系A549、H1299与正常支气管上皮细胞细胞BEAS-2b中galectin-1的表达差异。通过si-RNA敲低galectin-1,分为对照组和si-RNA组,对照组转染同剂量NC-siRNA片段。通过qRT-PCR和Western blot检测galectin-1mRNA和蛋白水平的表达情况。CCK8、Transwell实验、划痕实验和流式细胞术检测敲低galectin-1后对肺腺癌细胞增殖能力、侵袭和迁移能力和细胞凋亡的情况。Western blot检测敲低galectin-1后凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、Caspase3等蛋白和AKT、ERK二条通路蛋白的相对表达情况。结果galectin-1的mRNA在肺癌组织和肺腺癌细胞株中表达量明显升高(P<0.05)。抑制galectin-1表达后,细胞增殖、迁移和侵袭等下降,凋亡率明显升高(P<0.05)。在抑制galectin-1表达后,ERK信号通路磷酸化水平明显降低(P<0.05)。结论galectin-1具有抑制肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和促进其凋亡的作用,其机制可能与ERK通路的磷酸化激活水平有关。