环境胁迫植物富集γ-氨基丁酸的研究进展

γ-氨基丁酸(Gamma-aminobutyric acid,GABA)是一种四碳非蛋白组成氨基酸,在人体中是一种重要的神经活性抑制剂,具有降血压、缓解焦虑、安眠等功效。食用植物(如糙米、小麦、玉米、大豆等)中均含有一定量的GABA,是开发高GABA食品的良好来源。本文将对植物合成GABA两种代谢途径(GABA支路、多胺降解)进行阐述,同时介绍环境胁迫作用对两种代谢途径的影响,以期为环境胁迫在高GABA食品研发中的应用提供一定参考。

产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及初步鉴定

γ-氨基丁酸是哺乳动物体内的一种抑制性神经递质,具有许多重要的生理功能。利用MRS培养基从自然生境中分离了1000余株细菌,经纸层析和HPLC检测,发现其中一株能转化谷氨酸钠生成GABA,产量为4.84g/L;转化产物通过HPLC-MS得到了证实。通过形态特征和生化特性鉴定,初步判断该菌为乳酸菌。

牛磺酸、γ-氨基丁酸对鲫抗缺氧能力的影响

研究牛磺酸、γ-氨基丁酸对鲫抗缺氧能力的影响,结果表明质量分数5‰、7‰牛磺酸水溶液对鲫抗缺氧能力有显著(P<0.05)和极显著作用(P<0.01),质量分数3‰γ-氨基丁酸水溶液对鲫抗缺氧有显著作用(P<0.05)。实验证明,γ-氨基丁酸、牛磺酸均可提高鲫的抗缺氧能力。

富含γ-氨基丁酸发芽糙米生产工艺的研究

探索适合糙米发芽的最佳工艺条件。采用中心组合旋转试验设计,评价糙米发芽过程中的4个关键因素,即浸泡温度、浸泡时间、培养温度、培养时间及其交互作用对γ-氨基丁酸含量及发芽率的影响,确定最佳工艺条件。分别建立发芽过程4个关键因素对γ-氨基丁酸含量和发芽率的影响的数学模型。借助模型方程统计软件,分析得出最佳γ-氨基丁酸含量及发芽率下各个因素的最适水平分别为浸泡时间9.5 h、浸泡温度28℃、培养时间16.7 h和培养温度36℃。在此条件下,γ-氨基丁酸含量340 mg/kg,发芽率81.7%。

重复经颅磁刺激对焦虑症患者血清脑源性神经生长因子和γ-氨基丁酸浓度的影响

目的探讨重复经颅磁刺激(rTMS)治疗对焦虑症患者的血清脑源性神经生长因子(BDNF)和抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)的影响。方法选取28例焦虑症患者给予低频重复经颅磁刺激治疗,治疗10 d。于治疗前后,分别测定患者的BDNF浓度和GABA水平,并评定汉密尔顿焦虑量表(HAMA)。结果治疗后患者HAMA评分较治疗前降低(P <0. 05),治疗后患者血浆BDNF、GABA浓度均较治疗前升高(P <0. 05)。血浆BDNF变化与血浆GABA变化呈正相关(P <0. 05)。血浆BDNF变化与HAMA评分差值呈负相关(P <0. 05);血浆GABA变化与HAMA评分差值呈负相关(P <0. 05)。结论重复经颅磁刺激治疗改善焦虑症症状可能是通过提升脑内BDNF水平,进而促进脑内GABA释放来实现。

DABS-Cl柱前衍生-HPLC法测定豆豉中的γ-氨基丁酸含量

建立DABS-Cl柱前衍生-HPLC法测定豆豉中的γ-氨基丁酸,样品使用10%三氯乙酸超声提取,经磺酰氯二甲胺偶氮苯(DABS-Cl)衍生,默克RP C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相A(乙腈∶甲醇为75∶25),流动相B(0.04mmol/L醋酸钠,pH为7.3),检测波长430nm;该方法线性范围为1.50~24.00μg/mL,R=0.9997。重现性相对标准偏差为3.17%,加样回收率为100.83%,该方法样品前处理步骤简单、测定快速、灵敏度高,可用于对该类豆制品物质的测定。

RP-HPLC法测定人血清中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸含量

[目的]建立RP-HPLC法测定人体血清中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸含量的方法。[方法]用邻苯二甲醛（OPA）柱前衍生;氨基酸的衍生物用Nova-Pak C18（3.9 mm×150 mm,4μm）分离;流动相A为30%甲醇、2%四氢呋喃、68%磷酸缓冲液（0.1 mol/L,pH 6.8）,流动相B为100%甲醇,用二元线性梯度程序洗脱;荧光检测器检测,激发光波长280 nm,发射光波长340 nm。[结果]在（4-400）nmol/mL范围内,各组分线性关系良好,各氨基酸的平均回收率为90.0%-93.1%。[结论]本方法操作简便、准确,适用于人体血清中天门冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸和γ-氨基丁酸浓度的测定。

电针调节VBI家兔耳蜗核γ-氨基丁酸B受体表达和对耳蜗的保护

目的:对照盐酸氟桂利嗪的效应,探讨电针调节椎-基底动脉供血不足(VBI)家兔耳蜗核传出性神经递质γ-氨基丁酸B受体(GABABR)表达对耳蜗Corti器形态和功能的影响。方法:以组织硬化剂-775注射液注射致家兔左侧颈椎横突软组织建立椎动脉型颈椎病VBI模型,对照组注射生理盐水。注射后第6周开始,电针组进行"凤池""听宫""外关"穴电针刺激,氟桂利嗪组给予盐酸氟桂利嗪胃肠灌注。结果:干预2周后,模型组、电针组和氟桂利嗪组听神经复合动作电位(CAP)阈值显著高于对照组(P<0.001);电针组和氟桂利嗪组显著低于模型组(P<0.001),模型组、电针组和氟桂利嗪组高频短纯音CAP阈值高于低频短纯音阈值(P<0.05)。模型组GABABR阳性产物积分光密度显著低于对照组(P<0.001),电针组和氟桂利嗪组显著高于模型组(P<0.01),与对照组无显著差异(P>0.05)。模型组、电针组和氟桂利嗪组残存毛细胞计数显著低于对照组(P<0.001),电针组和氟桂利嗪组残存毛细胞计数显著高于模型组(P<0.001)。结论:电针可增强听觉神经系统传出性GABA的B受体表达,保护耳蜗形态,改善听觉功能。电针的效应优于氟桂利嗪。

白香丹胶囊对经前期综合征肝气逆证模型大鼠下丘脑γ-氨基丁酸和谷氨酸的影响

目的:研究白香丹胶囊对经前期综合征(PMS)肝气逆证大鼠下丘脑γ-氨基丁酸(GABA)与谷氨酸(Glu)的影响,探讨PMS肝气逆证的发病机制。方法:以情志刺激多因素法复制PMS肝气逆证大鼠模型,采用白香丹胶囊干预,用柱前衍生高效液相色谱法检测大鼠下丘脑中GABA与Glu的含量。结果:造模后大鼠下丘脑中GABA、Glu含量均显著降低,白香丹胶囊给药后GABA、Glu含量均显著升高。结论:PMS肝气逆证大鼠下丘脑中GABA、Glu含量变化与PMS肝气逆证关系密切,白香丹胶囊能显著调节下丘脑中GABA、Glu的含量变化,使两者保持相对平衡而发挥疗效。

富硒及富γ-氨基丁酸发芽糙米的研制

用不同质量浓度亚硒酸钠溶液浸泡糙米并发芽,研究其对糙米富集硒及γ-氨基丁酸效果的影响。结果表明,随着硒质量浓度的增大,发芽糙米中硒的含量呈现增加趋势;较低质量浓度的亚硒酸钠可促进发芽糙米富集γ-氨基丁酸,而高质量浓度则会产生抑制作用。综合考虑发芽率、硒含量和γ-氨基丁酸含量,确定亚硒酸钠适宜质量浓度为120 mg/L,此质量浓度浸泡后的糙米发芽后硒含量为1.06 mg/100 g,约是对照组的106倍;γ-氨基丁酸含量为54.07 mg/100 g,比对照组提高了0.68 mg/100 g。通过糙米发芽过程中自身的生物富集与转化,可以得到既富硒又富γ-氨基丁酸的功能性食品原料。

大鼠局灶性脑缺血后GABA_A受体亚基α2和α3在梗死对侧皮层表达的动态变化

目的研究大鼠大脑中动脉缺血再灌注后,梗死对侧皮层氨基丁酸A(GABAA)受体α2和α3亚基的表达变化。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,分为MCAO组(n=18)和假手术组(n=18),分别于术后7d、30d和6个月断头取脑,采用免疫组织化学技术检测各组中梗死对侧皮层GABAA受体亚基α2和α3的表达情况。结果 MCAO组大鼠与假手术组大鼠相比,在7d时梗死对侧亚基α2和α3在皮层各个脑区改变无明显差异(P>0.05);30d和6个月时,亚基α3在各个脑区均显著升高(P<0.05);30d时亚基α2在梗死对侧的Par1和Par2脑区表达增加(P<0.05);6个月时,梗死对侧亚基α2在Par1脑区表达增加而在Par2脑区表达降低(P<0.05)。结论大鼠大脑中动脉缺血再灌注后梗死塞对侧皮层GABAA受体亚基α2和α3发生了广泛而长效的变化,这种变化提示脑缺血后GABAA受体功能受损,GABAA受体的改变可能参与了缺血后突触的重塑和神经网络重建。

GABA对胆管癌细胞株QBC_(939)增殖及凋亡的影响

目的观察γ-氨基丁酸(GABA)对胆管癌细胞QBC939增殖及凋亡的影响。方法采用MTT比色法观察GABA对人系胆管癌细胞QBC939增殖的作用,流式细胞术检测GABA对胆管癌细胞QBC939凋亡及其细胞周期的影响,放射免疫分析法检测cAMP含量。结果GABA抑制胆管癌细胞的增殖,呈剂量依赖性,流式细胞仪检测结果显示,随药物浓度增加,细胞凋亡率显著增加(4.8%增至28.03%,P<0.05),同时促进胆管癌细胞内cAMP含量的增加。结论GABA抑制胆管癌细胞QBC939增殖,诱导细胞凋亡,可能机制是通过受体后信息介导的。

经前平颗粒对经前期综合征肝气逆证模型大鼠不同脑区γ-氨基丁酸A受体结合活性的影响

目的通过检测经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)肝气逆证模型大鼠大脑皮质和海马γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)结合活性变化,探讨中药经前平颗粒对PMS肝气逆证的干预作用。方法多因素综合刺激法复制PMS肝气逆证大鼠模型。放射性配体受体结合技术测定大鼠皮质和海马GABAAR的结合活性变化。结果与正常组相比,肝气逆证造模组大鼠大脑皮质和海马GABAAR结合活性均明显增加。与模型组相比,经前平颗粒组大鼠皮质和海马GABAAR活性均明显下降。结论大鼠皮质和海马GABAAR结合活性增加可能是PMS肝气逆证的重要机制之一。中药经前平颗粒可对GABAR结合活性含量异常变化起到调节作用。

γ-氨基丁酸代谢酶的研究进展

谷氨酸脱羧酶催化产生的γ-氨基丁酸具有调节血压、促进精神安定和改善脑机能等重要功效。富集高γ-氨基丁酸成为目前研究的热点。该研究对有关γ-氨基丁酸代谢的关键酶的研究概况进行了综述。通过激活或抑制酶活性,促进γ-氨基丁酸的富集,为开发新型保健产品提供参考。

不同加工方法对糙米主要活性物质的影响研究

糙米富含谷维素、γ-氨基丁酸等活性物质,不同加工方法对活性物质的含量会造成一定影响,试验采用了挤压膨化、蒸煮、米粉加工对糙米进行处理,比较了不同处理下糙米活性物质的损失率,结果显示:挤压膨化后谷维素含量增加7.4%,γ-氨基丁酸含量降低26.92%;蒸煮后谷维素含量降低59.14%,γ-氨基丁酸含量降低64.05%;米粉加工后谷维素含量降低3.43%,γ-氨基丁酸含量降低50.5%。试验还研究了糙米自然发酵过程中活性物质的变化规律,通过对发酵0、12、24、36、48、60、72、84、96 h进行取样测定,发现γ-氨基丁酸的含量在发酵过程中呈现明显增长趋势,谷维素的含量基本不发生变化。

匹罗卡品致癎大鼠海马γ-氨基丁酸能中间神经元生长抑素和微清蛋白mRNA表达研究

目的观察匹罗卡品致癎大鼠海马γ-氨基丁酸能中间神经元生长抑素(SS)mRNA和微清蛋白(PV)mRNA表达水平变化,拟从基因水平探讨其表达阳性γ-氨基丁酸能中间神经元在颞叶癫癎发生发展中的作用。方法建立匹罗卡品致癎大鼠模型,采用原位杂交法检测各观察时间点海马SS mRNA和PV mRNA表达阳性神经元数目。结果模型组大鼠海马各区γ-氨基丁酸能中间神经元SS mRNA表达水平均于出现癫癎持续状态后3 d降低最为显著(均P=0.000),随后逐渐升高;至发病后60 d,海马CA3区SS mRNA表达水平高于对照组(t=1.021,P=0.005),海马门区(t=3.211,P=0.009)和CA1区(t=1.902,P=0.048)则仍低于对照组。模型组大鼠海马门区γ-氨基丁酸能中间神经元PV mRNA表达水平于出现癫癎持续状态后6h开始降低,至发病后60 d降低最为显著(均P=0.000);海马CA1区PV mRNA表达水平于发病后3 d降低最为显著(均P=0.000),随后逐渐升高但仍低于对照组(t=2.216,P=0.048);癫癎持续状态早期,海马CA3区PV mRNA表达水平无明显变化,至发病后7 d逐渐升高且高于对照组(t=1.021,P=0.005)。结论γ-氨基丁酸能中间神经元SS mRNA和PV mRNA表达水平的下调可能在颞叶癫癎的发生中起重要作用,至慢性期γ-氨基丁酸能中间神经元SS mRNA和PV mRNA表达水平的恢复或上调可能与颞叶癫癎的发展或修复有关。γ-氨基丁酸能中间神经元数目的变化,部分是由于其标志物mRNA表达水平的调节所致,并非神经元数目变化的唯一因素。

γ-氨基丁酸和舍曲林对急性应激抑郁大鼠认知功能的作用

目的探究γ-氨基丁酸（GABA）和舍曲林对急性应激抑郁大鼠认知功能的影响。方法对经γ-迷宫筛查出认知功能无差异的雄性SD大鼠进行强迫游泳，建立急性应激抑郁大鼠模型。观察未行应激的大鼠（对照组）、应激大鼠（模型组）、采用GABA预处理的应激大鼠（GABA组）及GABA＋舍曲林预处理的应激大鼠（GABA＋舍曲林组）在强迫游泳中的不动时间及其游泳后迷宫中的潜伏期。结果随着GABA剂量的增加，在GABA≥0．5g/kg时大鼠游泳不动时间渐缩短[（432．33±187．64）s〉（332．50±217．23）s]，与舍曲林（5mg／kg）＋GABA（0．25g／kg）作用[（316．67±353．83）s]相似，与模型组[（1404．33±129．46）s]比较差异有显著性（P〈0．01；P〈0．05），而大剂量GABA＋舍曲林治疗组大鼠游泳不动时间[（1086．17±411．80）s]反而延长；模型组游泳后迷宫中潜伏期为[（179．17±8．54）s]，高于对照组[（105．00±32．18）s]，差异具有显菩性（P〈0．05），10mg／kg舍曲林及舍曲林＋GABA联合治疗，大鼠游泳后迷宫中潜伏期分别为[（100．30±21．01）s]、[（69．83±16．89）s]、[（86．83±13．11）s]，大鼠游泳后迷宫中潜伏期明显缩短，低于模型组，差异具有显著性（P〈0．05，0．01）。结论GABA有一定的抗抑郁作用；适量的GABA与舍曲林联合应用，不但可减少2种药物的使用剂量，较它们单独使用疗效更著；且可明显改善抑郁大鼠的学习记忆功能。

毒鼠强对小鼠脑组织GABA_A受体γ_2亚单位mRNA的影响

目的观察毒鼠强(TET)染毒前后及药物治疗前后小鼠脑组织GABA_A受体γ_2亚单位mRNA水平的改变以探讨其作用机制。方法小鼠随机分为生理盐水组、低剂量TET组、高剂量TET组、安定干预组、维生素B_6干预组,用药后记录小鼠首次惊厥发生时间、死亡时间及120 min内死亡数。分离大脑、小脑、脑干、海马,行RT-PCR检测GABA_A受体γ_2亚单位。结果①单用大剂量安定可延迟TET中毒小鼠惊厥潜伏期、死亡时间；单用大剂量维生素B_6则不能延迟。②TET导致GABA_A受体γ_2亚单位mRNA上调,且用量与该受体数目呈线性正相关。结论TET是通过拮抗GABA_A受体而发挥毒效应的。

乙体氯氰菊酯对小鼠大脑皮质γ-氨基丁酸水平及相关酶和受体的影响

目的探讨乙体氯氰菊酯的神经毒性,为该类农药的中毒防治提供理论依据。方法 80只健康成年昆明种小鼠按体质量随机分为4组,每组20只,雌雄各半。染毒组小鼠以一次经口灌胃方式分别给予20、40、80 mg/kg剂量的乙体氯氰菊酯,食用油稀释受试物质,对照组给予等量食用油。于灌胃后2、4 h,每组各取10只小鼠大脑皮质,HPLC法检测γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)水平(μmol/g),分光光度法检测γ-氨基丁酸转氨酶(GABA transaminase,GABAT)活力(nmol/min.mg.pro),Real time RT-PCR法检测GABA受体(GABA-A、GABA-B)mRNA水平。结果染毒后2、4 h,80 mg/kg剂量组小鼠大脑皮质GABA水平(99.77±13.80、108.29±29.67)高于对照组(72.10±20.51、72.09±20.49)(P<0.05);染毒后2 h,40、80 mg/kg剂量组小鼠大脑皮质GABA-T活力(12.45±2.20、11.48±1.33)低于对照组(14.09±1.64)(分别为P<0.05、P<0.01);染毒后4 h,80 mg/kg剂量组小鼠大脑皮质GABA-A mRNA表达(0.89±0.07)低于对照组(1.00±0.08)(P<0.05),GABA-B mRNA表达与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论乙体氯氰菊酯可降低小鼠大脑皮质GABA-T活力,使GABA增多,进而反馈性抑制GABA-A受体mRNA表达。

“以痛为腧”推拿按压法对神经痛大鼠脑内镇痛回路GABA与GABA_(AR)的影响

目的:结合动物行为学及免疫组化方法探讨中医"以痛为腧"推拿按压法对慢性坐骨神经痛(CCI)模型大鼠脑内镇痛核团的影响。方法:采用坐骨神经结扎法制作慢性坐骨神经痛模型大鼠,将模型大鼠随机分为模型组、推拿组、假手术组,每组8只。推拿组每天给予环跳穴推拿治疗,共持续4周;模型组、假手术组不做干预治疗。同时用热测痛法测量记录各组大鼠痛敏分数;于试验结束时直接取脑,免疫组化法检测中脑导水管周围灰质、延髓头端腹内侧核群核团内γ-氨基丁酸(GABA)、γ-氨基丁酸A受体(GABAAR)活性表达水平。结果:推拿组大鼠痛阈不断提高,痛敏分数高于模型组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);推拿组大鼠中脑导水管周围灰质、延髓头端腹内侧核群核团内GABA、GABAAR水平均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:环跳穴推拿按压法对CCI大鼠具有较好的镇痛作用,其作用机制可能与中枢某些核团的GABA和GABAAR含量增加及参与有关。