NKG2D及NF-κB在胃腺癌组织中的表达及意义

目的探讨NKG2D和核因子-κB(NF-κB)在胃腺癌及癌旁正常组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法通过免疫组织化学的方法,检测南昌大学第一附属医院20例胃腺癌组织及癌旁正常组织中NKG2D和NF-κB的蛋白表达情况,分析组织中表达率及表达强度与临床病理参数之间的关系。结果①NKG2D在胃腺癌及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为55%和100%(P<0.01);而NF-κB在胃腺癌及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为95%和20%(P<0.01)。②NKG2D在低分化、Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移的胃腺癌组织中显著降低,而NF-κB在低分化、Ⅲ-Ⅳ期、有淋巴结转移的胃腺癌中显著升高(P<0.05)。③NKG2D和NF-κB的表达之间呈负相关(P<0.05)。结论胃腺癌组织中NKG2D表达下调而NF-κB表达上调,且二者的表达成负相关,NKG2D和NF-κB在胃癌发生发展中可能有重要作用。

肥大细胞在胃癌间质中的分布及其生物学

目的研究胃腺癌间质中肥大细胞的分布及其生物学意义，探讨肿瘤间质中肥大细胞与淋巴细胞的相互关系。方法用组织化学的方法分别对46例胃腺癌的标本进行肥大细胞染色、计数，用秩和检验进行统计学分析。结果胃腺癌癌间质中肥大细胞的数量明显少于癌旁间质（P＜0．01）。癌间质内肥大细胞的数量与病理组织学类型有关，并与癌间质内淋巴细胞浸润的程度呈正相关。结论癌间质内肥大细胞数量少是肥大细胞脱颗粒的结果，是肥大细胞功能状态改变的一种形态学表现。提示肥大细胞通过脱颗粒释放介质参与抗肿瘤反应，并与间质内淋巴细胞具有协同作用。

CD133慢病毒表达载体和SGC7901-CD133细胞株的构建

目的构建CD133慢病毒表达载体，建立稳定过表达CD133的人胃腺癌SGC7901细胞株。方法聚合酶链反应法扩增CD133基因全长序列，将序列插入pGMLV—PB1—1载体，构建pGMLV-PBI-1-CD133慢病毒表达载体，随后转入293T细胞中对慢病毒进行包装，用获得的慢病毒毒液感染人胃腺癌细胞株SGC7901。建立稳定过表达CD133的SGC7901细胞株。荧光显微镜下观察pGMLV—PB1—1-CD133慢病毒表达载体的转染效果，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblot法检测了SGC7901、pGMLV—PB1-1-SGC7901和pGMLV—PB1—1-CD133-SGC79013种细胞中CD133mRNA及蛋白的表达水平。结果经限制性内切酶鉴定及测序分析，我们成功构建了pGMLV—PB1—1-CD133慢病毒表达载体质粒。Westernblot结果显示，pGMLV—PB1—1-CD133慢病毒表达载体质粒成功转染293T工具细胞，pGMLV-PB1—1-CD133慢病毒表达载体有较好的过表达效果。pGMLV—PB1-1-SGC7901和pGMLV—PB1—1-CD133-SGC7901细胞在荧光显微镜下均发出绿色荧光，并且转染效率高。RT—PCR和Western blot检测显示，与对照组比较，转染pGMLV—PB1—1-CD133慢病毒表达载体组的细胞，CD133的表达在mRNA和蛋白两个水平均显著提高（1．160±0．051、0．835±0．077），差异有统计学意义（P〈0．01）。结论成功构建CD133慢病毒表达载体和SGC7901-CD133细胞株。