刺激室旁核及加压素对大鼠胃缺血-再灌注损伤的保护作用

采用夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 1h的胃缺血 再灌注损伤 (gastricischemia reperfu sioninjury ,GI RI)模型 ,观察了电或化学刺激室旁核 (paraventricularnucleus,PVN)及外源性加压素 (arginine vasopres sion ,AVP)对GI RI的影响 ,并对PVN的调控通路进行了初步分析。结果表明 :电或化学刺激PVN后 ,GI RI显著减轻 ;损毁双侧孤束核 (nucleustractussolitarius,NTS)或一侧NTS内注射AVP V1受体阻断剂 ,均能取消电刺激PVN对GI RI的效应 ;去除脑垂体后不影响PVN的作用 ;切断膈下迷走神经或切除腹腔交感神经节 ,则能加强电刺激PVN对GI RI的影响 ;PVN内注射不同剂量的AVP同样能减轻大鼠GI RI损伤。结果提示 :PVN及AVP对大鼠GI RI具有保护作用 ;PVN的这种作用可能是因电或化学刺激后 ,激活了其中的加压素能神经元 ,经其下行投射纤维释放AVP作用于NTS神经元的AVP V1受体 ,并通过迷走和交感神经介导 ,从而影响GI RI;而似与PVN

胃缺血/再灌注损伤引起大鼠脑室旁核及孤束核c-fos表达

目的 :观察电和化学刺激下丘脑室旁核 (PVN)对大鼠胃缺血 /再灌注损伤 (GI/RI)的影响及孤束核 (NTS)在其中的作用和GI RI后PVN、NTS内c fos表达的情况。方法 :夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 1h制备GI/RI模型 ,应用Fos免疫组织化学法 (ABC法 )观察GI RI后中枢神经系统内c fos表达的情况。结果 :①电和化学刺激PVN后 ,GI/RI减轻。②损毁双侧NTS后 ,能取消电刺激PVN对GI RI的影响。③GI RI能引起PVN、NTS等核团内c fos表达增加。结论 :GI RI的伤害性刺激影响了PVN、NTS的功能。PVN、NTS参与了对GI RI的调控。

电刺激大鼠下丘脑室旁核对胃缺血-再灌注损伤的影响

采用夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 1h的胃缺血 再灌注损伤模型 ,观察了电刺激和电损毁下丘脑室旁核 (paraventricularnucleus,PVN)对大鼠胃缺血 再灌注损伤 (gastricischemia reperfusioninjury ,GI RI)的影响 ,并对其作用机制进行了初步探讨。结果表明 :电刺激PVN后GI RI显著减轻 ,且有强度 效应依赖关系 ;PVN内注射胞体兴奋剂L 谷氨酸后 ,与电刺激PVN的效应相同 ;电解损毁双侧PVN则能加重GI RI;电刺激PVN能显著降低GI RI大鼠的胃粘膜丙二醛 (MDA)含量及胃液酸度和胃蛋白酶活性 ,但对其超氧化物歧化酶 (SOD)的活性及胃液量、总酸排出量、胃壁结合粘液量无显著影响。提示PVN对GI RI具有保护作用 ,其作用机制可能与降低GI RI大鼠的胃粘膜MDA含量、胃蛋白酶活性、胃液酸度有关 ,而与胃液量、总酸排出量、胃壁结合粘液量等因素无明显关系。

下丘脑室旁核对大鼠胃缺血-再灌注损伤调控的神经机制

采用夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 1h的胃缺血 再灌注损伤模型 ,观察了电和化学刺激以及电损毁下丘脑室旁核 (paraventricularnucleus,PVN)对大鼠胃缺血 再灌注损伤 (gastricischemia reperfusioninjury ,GI RI)的影响 ,并对其调控的神经机制进行了初步探讨。结果表明 :①电刺激PVN或PVN内注射L 谷氨酸后 ,GI RI均显著减轻 ;②电解损毁双侧PVN则能加重GI RI;③损毁双侧孤束核 (nucleustractussolitarius,NTS)后 ,能取消电刺激PVN对GI RI的减轻作用 ;④去除脑垂体后不影响电刺激PVN对GI RI的作用 ;⑤分别切断膈下迷走神经和切除腹腔交感神经节后 ,电刺激PVN使GI RI较单纯电刺激PVN组明显减轻。提示 :PVN是对GI RI具有保护作用的特异性中枢部位 ,孤束核以及外周迷走神经、交感神经均参与了PVN对GI RI的调控 ,而与室旁核

电刺激大鼠室旁核减轻缺血-再灌注胃黏膜细胞凋亡

目的研究电刺激大鼠室旁核(PVN)对胃缺血-再灌注(GI-R)损伤的保护作用及细胞机制。方法电刺激大鼠PVN后,制备GI-R模型;用免疫组化方法检测胃黏膜细胞的凋亡和增殖以及凋亡相关基因BCL-2、BAX的表达。结果与单纯GI-R组相比,电刺激PVN能明显减少GI-R后30 min、1 h和3 h胃黏膜细胞的凋亡,并能加快胃黏膜细胞的增殖;同时可以明显增加抗凋亡因子BCL-2的蛋白表达,降低促凋亡因子BAX的蛋白表达。结论电刺激大鼠PVN对GI-R损伤的保护作用可能是通过上调抗凋亡因子BCL-2、下调促凋亡因子BAX的蛋白表达,从而促进了胃黏膜细胞增殖、抑制其凋亡来实现的。

缺血后处理对缺血/再灌注胃黏膜自由基损伤的影响

目的研究缺血后处理(ischemic post-conditioning,I-postC)对大鼠胃缺血/再灌注(gastric ischemia/reperfusion,GI/R)损伤的影响。方法健康SD大鼠18只,随机分为3组,即对照组、缺血/再灌注组、缺血后处理组,分别检测大鼠胃黏膜损伤指数(GMDI)及胃黏膜组织抑制羟自由基能力、黄嘌呤氧化酶(XOD)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量。结果缺血/再灌注可造成胃黏膜明显损伤;缺血后处理明显减轻GI/R损伤,并使胃黏膜组织抑制羟自由基能力、SOD含量增加,XOD、MDA明显降低。结论缺血后处理减轻大鼠胃缺血/再灌注损伤,其保护机制与减轻缺血/再灌注胃黏膜自由基损伤有关。

Akt参与室旁核内注射微量催产素减轻大鼠胃缺血-再灌注损伤

目的研究室旁核(PVN)内注射微量催产素(OT)对大鼠胃缺血再灌注(GI-R)损伤的影响及其局部的分子机制。方法用夹闭大鼠腹腔动脉30 min,再灌注1 h的GI-R损伤模型,于单侧PVN内注射微量OT。计数胃黏膜损伤指数后,用免疫组化及免疫印迹观察胃黏膜细胞p-Akt和caspase-3蛋白表达。结果PVN内注射微量OT(24、120、600和3000 ng)呈剂量依赖性减轻GI-R损伤,并明显增加胃黏膜细胞的Akt表达和减少caspase-3的表达。侧脑室给予OT特异性拮抗剂阿托西班(atosiban)后消除OT对大鼠GI-R损伤的影响。结论PVN微量注射OT后通过增加胃黏膜细胞Akt表达,抑制caspase-3的表达,减轻GI-R损伤。

外周神经参与室旁核对大鼠胃缺血-再灌注损伤的调控作用

目的探讨迷走神经、交感神经在电刺激下丘脑室旁核(paraventrieular nucleus，PVN)对大鼠胃缺血一再灌注损伤(gastricr ischemia-repeifiasion injury，GI-RI)调控中的作用。方法采用夹闭大鼠腹腔动脉30min，松开动脉夹血流复灌lh的GI-RI模型和核团内电刺激的方法，观察切断膈下迷走神经或切除腹腔交感神经节及应用受体阻断剂后对电刺激下丘脑室旁核调控大鼠胃GI-RI的影响。结果切断双侧膈下迷走神经，切除腹腔交感神经节后再电刺激PVN+GI-RI，损伤较电刺激组分别减轻69．02％、55．16％，差异具有显著性(P<0．01)；静脉给予β-受体阻断剂心得安能完全消除电刺激PVN引起的GI-RI的保护作用(P<0．01)，损伤较电刺激组加重211．7％；给予M-受体阻断剂阿托品、α-受体阻断剂酚妥拉明不影响电刺激PVN引起的GI-RI的保护作用。结论迷走神经、交感神经参与了PVN对GI-RI的保护作用。

室旁核注射apelin-13对大鼠胃缺血/再灌注损伤的影响

目的研究室旁核注射apelin-13对胃缺血/再灌注(GI/R)损伤的作用及细胞机制。方法室旁核注射apelin-13,制备GI/R模型;用Western-blot方法检测胃黏膜细胞的凋亡以及凋亡相关基因c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化水平。结果与单纯GI/R组相比,室旁核注射apelin-13能明显增加GI/R后胃黏膜细胞的损伤,同时可以升高caspase-3蛋白表达及JNK的磷酸化水平。结论室旁核注射apelin-13对大鼠GI/R损伤具有加重作用。

吡咯烷二硫氨基甲酸酯对大鼠胃缺血/再灌注损伤的影响

目的研究核因子κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)对大鼠胃缺血/再灌注(gastricischemia/reperfusion,GI/R)损伤的影响。方法采用夹闭大鼠腹腔动脉30 min,去除动脉夹再灌注1 h的GI/R损伤模型,于静脉注射PDTC后,肉眼计数胃黏膜损伤指数,并运用免疫组化及TdT介导dUTP缺口末端标记(TUNEL)实验技术,观察PDTC对大鼠GI/R后胃黏膜细胞坏死、增殖和凋亡的影响。结果夹闭大鼠腹腔动脉30 min再灌注1 h后可造成胃黏膜明显损伤,静脉注射PDTC 200 mg/kg可明显减轻GI/R损伤,并使胃黏膜细胞增殖增加、凋亡减少。结论静脉注射PDTC对GI/R损伤具有保护作用,这种保护作用是通过促进胃黏膜细胞增殖、抑制胃黏膜细胞凋亡而实现的。

下丘脑室旁核对大鼠胃缺血/再灌注损伤保护作用的细胞机制

目的研究电刺激下丘脑室旁核(PVN)对胃缺血/再灌注损伤(GI/RI)大鼠胃黏膜细胞凋亡和增殖的影响,探讨电刺激PVN对GI/RI保护作用的细胞机制。方法采用电刺激、电解损毁PVN的手段,以夹闭大鼠腹腔动脉30 min、松开动脉夹恢复血流灌注1 h制备GI/RI模型,计算胃黏膜损伤指数,检测胃黏膜细胞的凋亡和增殖情况。结果夹闭大鼠腹腔动脉30 min,再灌注1 h后可造成胃黏膜的明显损伤,电刺激PVN后GI/RI明显减轻,而且胃黏膜细胞的增殖增加,凋亡减少。结论电刺激PVN对GI/RI具有明显的保护作用。这种保护作用是通过促进胃黏膜细胞增殖、抑制胃黏膜细胞凋亡而实现的。

下丘脑外侧区胃泌素神经元对大鼠胃缺血-再灌注损伤的作用

目的 :观察下丘脑外侧区 (lateralhypothalamicarea,LHA)对胃缺血 再灌注损伤 (gastricischemia reperfu sioninjury ,GI RI)的影响 ,并对LHA的调控通路进行了初步分析。 方法 :采用夹闭大鼠腹腔动脉 30min ,松开动脉夹血流复灌 6 0min的GI RI模型 ,用电和化学刺激、电损毁和核团微量注射等方法。 结果 :(1)电或化学刺激LHA均显著加重GI RI;(2 )背侧迷走复合体 (dorsalvagalcomplex ,DVC)内微量注射五肽胃泌素后 ,对GI RI的效应与电刺激一致 ;(3)电解损毁双侧DVC或DVC内微量注射胃泌素受体阻断剂丙谷胺均可取消电刺激LHA加重GI RI的作用 ;(4)切断膈下迷走神经后电刺激LHA ,GI RI则减轻。 结论 :LHA具有加重大鼠GI RI的作用 ;LHA的这种作用可能是因电或化学刺激后 ,激活了其中的胃泌素能神经元 ,经其下行投射纤维释放胃泌素作用于DVC神经元上的胃泌素受体 ,并通过迷走神经介导 ,从而影响GI RI。

大鼠缺血-再灌注损伤时胃窦黏膜D细胞的形态学观察

目的探讨大鼠胃缺血-再灌注损伤时胃窦黏膜D细胞的形态变化。方法SD雄性大鼠随机分为正常对照组(CON)、单纯缺血组(ISC)、缺血-再灌注1h组(IR1)、6h组(IR2)和24h组(IR3),用免疫组织化学方法观察大鼠胃缺血-再灌注损伤过程中胃窦黏膜D细胞的形态变化。结果正常组大鼠胃窦黏膜中D细胞主要分布于幽门腺的中、下13处,形态多样;和正常组比较,D细胞的数目在ISC组和IR1组明显减少,细胞多为圆形,很少见有胞质突起;在IR2组和IR3组则可见D细胞的数目明显增多,形态多样,并可见D细胞也分布于幽门腺上13处。结论胃窦黏膜中D细胞的形态数量在大鼠胃缺血-再灌注过程中有变化,提示生长抑素参与了胃缺血-再灌注损伤过程。

下丘脑外侧区内注射五肽胃泌素对大鼠胃缺血-再灌注损伤的影响

目的观察大鼠下丘脑外侧区(lateral hypothalamic area，LHA)内注射五肽胃泌素(pentagastrin，G5)对大鼠胃缺血-再灌注损伤(gastric ischemia-reperfusion inimy，GI-RI)的影响。方法核团微量注射法，采用夹闭大鼠腹腔动脉30min，松开动脉夹血流复灌60min的GI-RI模型。结果①LHA内微量(0．5μl)注射G50．1、0．5、2．5ng后行胃缺血-再灌注(GI-R)，其胃粘膜损伤面积分别较溶剂对照组增加41．3％、79．11％(P<0．01)和115．59％(P<0．01)，且有剂量-效应依赖关系。②背侧迷走复合体(dorsal vagal complex，DVC)内微量(0．5μl)注射G52．5ng后GI-R，其胃粘膜损伤面积比DVC内注射等量溶剂后GI-R组增加69．15％(P<0．01)。结论LHA内注射G5对GI-RI具有加重作用，其作用机制可能是由于激活了LHA的胃泌素神经元，通过下行投射纤维作用于DVC神经元的胃泌素受体而起作用。

室旁核内血管紧张素Ⅱ对大鼠胃缺血/再灌注后胃黏膜NF-κB表达的影响

目的研究室旁核(paraventricular nucleus,PVN)内注射血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对大鼠胃缺血/再灌注(gastric ischemia/reperfusion,GI/R)后的胃黏膜核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法采用核团微量注射法以及夹闭大鼠腹腔动脉30 min后松开动脉夹血流复灌1 h的GI/R模型,计数胃黏膜损伤指数并应用免疫组化方法检测胃黏膜NF-κB p65的表达。结果①GI/R可引起胃黏膜损伤,PVN内微量注射AngⅡ(0.3μl含30 ng)后GI/R损伤显著减轻;侧脑室注射(icv)AngⅡ受体拮抗剂洛沙坦,能阻断AngⅡ对GI/R损伤的保护作用,使GI/R损伤明显加重;②正常大鼠胃黏膜可见NF-κB表达,并主要在胞质表达;GI/R后,NF-κB表达增多,尤其是胞核表达明显增加;PVN内微量注射AngⅡ后,可使胃黏膜NF-κB表达量减少;icv给予洛沙坦可阻断AngⅡ的效应,即GI/R损伤后胃黏膜NF-κB阳性细胞数表达量增加。结论PVN内微量注射AngⅡ对大鼠GI/R损伤有明显的保护作用,且该作用可被洛沙坦翻转;NF-κB在PVN内微量注射AngⅡ减轻大鼠GI/R损伤过程中可能发挥着重要作用。